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随着改革的深入推进,我国基层社会生活发生了根本性的转变,以往实施的行政全能主义的传统治理模式正面临挑战。社区自治是培育基层社会自治能力的起点,也是重构基层社会治理模式的基础,有助于形成一种"小政府、大社会"的治理结构与服务型的治理模式。为了实现治理模式的重构,社区自治要实现三个转变,即自治主体由单一向多元的转变,自治手段由简单向复合的转变,自治目标由行政管理向民主自治的转变。

关键词：社区自治基层社会治理模式重构

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共表达基因Ⅶ型NDV F蛋白和IBDV新型变异株VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

共表达基因Ⅶ型NDV F蛋白和IBDV新型变异株VP2蛋白的重组火鸡疱疹...

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作者：申可扬州大学

学位级别：硕士

新城疫(Newcastle disease,ND)属于高度接触性传染性疾病,由于传播十分迅速,感染率与死亡率高,给养禽业造成了严重的经济损失。防控新城疫的策略包括生物安全措施与疫苗接种等,疫苗主要分为灭活疫苗、弱毒疫苗与病毒载体疫苗,其中火鸡... 详细信息

新城疫(Newcastle disease,ND)属于高度接触性传染性疾病,由于传播十分迅速,感染率与死亡率高,给养禽业造成了严重的经济损失。防控新城疫的策略包括生物安全措施与疫苗接种等,疫苗主要分为灭活疫苗、弱毒疫苗与病毒载体疫苗,其中火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)载体疫苗相对于其他疫苗具有突出优势,可以十分有效地防控新城疫。传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科,主要靶器官为鸡的法氏囊。近几年我国出现IBDV新型变异株(nVarIBDV)的流行,感染后虽然不会导致鸡的直接死亡,但是可致法氏囊萎缩,引起鸡的免疫抑制,严重威胁养禽业的健康发展,并且现有疫苗对nVarIBDV无法提供保护。为了构建同时针对NDV和nVarIBDV的重组火鸡疱疹病毒(rHVT),并且避免两种rHVT疫苗的接种可能对动物造成的影响,本研究运用NHEJ-CRISPR/Cas9和Cre/LoxP系统,首先构建了只表达基因Ⅶ型NDV F蛋白的重组病毒rHVT-Fopt,同时鉴定该重组病毒的体外生物学特性并对其免疫效力进行评价。结果表明重组病毒rHVT-Fopt外源蛋白表达良好,与HVT亲本株的体外复制速率无显著差异,使用此疫苗免疫1日龄SPF鸡能够对NDV强毒株的攻击产生完全保护。之后以构建好的rHVT-Fopt为骨架,运用类似的方法将nVarIBDV/SN1905-2株的VP2基因插入rHVT-Fopt重组病毒中,成功得到两株共表达基因Ⅶ型NDV F蛋白和nVarIBDV VP2蛋白的rHVT病毒。两株rHVT病毒均有良好的遗传稳定性,具有同时防控ND和IBD的潜力,并且为之后构建多联多价rHVT疫苗奠定了一定的基础。1.表达NDV F蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建为了构建HVT-ND重组疫苗,本文构建了 CRISPR/Cas9基因编辑质粒,同时构建了野生型与密码子优化的基因Ⅶ型NDV F基因的转移载体质粒,将两个质粒分别转染CEF细胞后通过IFA和Western blot分析比较了野生型与密码子优化的F蛋白的表达水平,选择F蛋白表达水平高的转移载体质粒,在CEF细胞中与基因编辑质粒共转染,之后接种HVT病毒,通过eGFP荧光标签筛选纯化重组病毒,并对其进行PCR和IFA鉴定外源蛋白表达情况,得到共表达eGFP和F蛋白的重组病毒。接下来在CEF细胞中转染pcDNA3.1-Cre质粒后接种荧光重组病毒,对不发出荧光的重组病毒进行筛选纯化,将PCR和IFA鉴定正确的重组病毒进行体外遗传稳定性和复制动力学的测定。结果表明,成功构建表达密码子优化的基因Ⅶ型NDV F蛋白与野生型F蛋白的转移载体质粒,分别命名为 pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt 和 pT-sgA-eGFP-SV40-Fwt,其中pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt 质粒的 F 蛋白表达水平远高于 pT-sgA-eGFP-SV40-Fwt 质粒,将pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt质粒和CRISPR/Cas9基因编辑质粒于CEF细胞中共转染,利用CRISPR/Cas9系统的NHEJ修复途径将优化的基因Ⅶ型NDV F基因表达盒和eGFP表达盒插入HVTFc126疫苗株的US2区,构建了名为rHVT-eGFP-Fopt的重组病毒。对编辑成功的重组病毒进行挑斑纯化,并将纯化后的rHVT-eGFP-Fopt进行PCR和IFA鉴定,结果显示F蛋白在重组病毒中正确表达。接下来通过Cre/LoxP重组酶系统将eGFP表达盒敲除,PCR和IFA鉴定结果显示成功得到一株名为rHVT-Fopt的重组病毒。对该重组病毒进行体外遗传稳定性和复制动力学的测定,该病毒成功在CEF中连续传代15代,F蛋白稳定表达,且复制速率与野生型HVT病毒相当。2.重组病毒rHVT-Fopt的免疫效力初步评价新城疫疫苗接种需要实现三个主要目标:防止病毒感染、降低发病率和死亡率以及减少病毒在鸡群中的传播和散播。为了研究rHVT-Fopt疫苗对NDV的保护效力,将该疫苗免疫1日龄SPF鸡,通过商品化NDV ELISA抗体试剂盒检测免疫后鸡群的血清抗体水平。在免疫后28天使用NDVF48E8强毒株进行攻毒,连续观察14天后统计发病率和死亡率,并于特定时间点采集咽拭子与泄殖腔拭子检测排毒情况。综合以上实验数据评价该重组病毒是否可以作为针对鸡新城疫的候选疫苗株。结果表明rHVT-Fopt 重组病毒在鸡体内能够产生良好的体液免疫应答,所有接种疫苗的鸡在接受 NDV F48E8强毒攻毒后14天观察期内均未出现临床症状和死亡情况,也未检测到排毒,rHVT-Fopt对新城疫强毒的保护率为100%,证明rHVT-Fopt可以作为预防

关键词：火鸡疱疹病毒新城疫病毒传染性法氏囊病毒 CRISPR/Cas9

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中国男子雪车队备战2018年平昌冬奥会体能训练的研究

中国男子雪车队备战2018年平昌冬奥会体能训练的研究

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作者：申可北京体育大学

学位级别：硕士

本文通过对中国男子雪车队备战平昌冬奥会体能训练的分析,对比运动员身体运动能力在夏季体能训练前后的变化,总结其对推车成绩的影响,并分析中国男子雪车运动员身体素质训练方法手段的有效性及不足之处,为中国男子雪车队备战2022年北京... 详细信息

本文通过对中国男子雪车队备战平昌冬奥会体能训练的分析,对比运动员身体运动能力在夏季体能训练前后的变化,总结其对推车成绩的影响,并分析中国男子雪车运动员身体素质训练方法手段的有效性及不足之处,为中国男子雪车队备战2022年北京冬奥会体能训练提供科学依据。文字运用文献资料法、专家访谈法,实地观察参与整个备战阶段的体能训练,通过测试并对得到的测试数据进行统计学分析,进而对中国男子雪车队备战2018年平昌冬奥会赛季体能训练进行研究分析。中国男子雪车队备战平昌冬奥会主要分夏季体能和雪季滑行两个阶段,每个阶段随场地变换分为多个板块,不同板块体能训练的主要内容、方法和手段不尽相同。中国男子雪车运动员多来自于田径的短跑、投掷、全能以及橄榄球等爆发力为主导因素的项目。夏季体能训练后,中国男子雪车运动员的体重显著增长,但中外舵手间仍有显著差距。经过夏季体能强化训练,中国男子雪车运动员在深蹲、高翻、30米冲刺、60米冲刺以及五级蛙跳5项内容上都有显著提高,且有统计学意义;在30米途中跑以及4kg、7.26kg铅球前抛上无显著性差异;在推车成绩上有明显提升,且有统计学意义。加强中国男子雪车队体能训练专项转化效率,合理分配不同阶段各类型训练的比例,强化复合型训练团队的建立和高效运行,加快国内雪车赛道、冰屋等硬件设施建设是未来中国男子雪车队可以改进的方面。

关键词：中国男子雪车队平昌冬奥会体能训练

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西宁市健身气功开展现状的研究

西宁市健身气功开展现状的研究

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作者：申可青海师范大学

学位级别：硕士

近二十年来，随着人们经济生活水平的不断提高，人们对于健康和健身的意识日益增强，各种体育活动随之发展起来，越来越多的人自觉的投入到多种形式的体育锻炼中。健身气功是中国传统的养生功法，它的养生原理和实践符合人体健康发展的... 详细信息

近二十年来，随着人们经济生活水平的不断提高，人们对于健康和健身的意识日益增强，各种体育活动随之发展起来，越来越多的人自觉的投入到多种形式的体育锻炼中。健身气功是中国传统的养生功法，它的养生原理和实践符合人体健康发展的规律。由于法轮功邪教的影响，健身气功一度遭到人们误解，使得发展路程受到阻碍。为了能够恢复我国的气功事业，并且能朝着健康、积极向上的方向发展，2000年初，中央下发5号文件，中央办公厅和国务院下发厅字6号文件，统一部署开展打击处理对社会有害的气功组织，清理整顿健身气功工作，增强对健身气功活动的规范管理。2003年，在党和国家对气功事业的高度关注和支持下，国家体育总局健身气功管理中心遵照“取其精华、去其糟粕、博采众长、与时俱进”的精神，并且在整理了一些优秀传统气功功法的基础上，组织专家编创了四种健身气功—《五禽戏》、《六字诀》、《八段锦》、《易筋经》，并积极向全国试行推广，引导群众开展科学文明的健身气功活动，同时也进一步加强了对各地气功的管理。本研究以西宁市健身气功开展现状作为主要研究内容，通过研究能更好的了解到健身气功发展过程中所存在的问题，并针对问题提出合理建议，为健身气功更好推广提供帮助。本研究以西宁市部分健身气功练习站点的组织管理负责人、辅导员和健身气功习练者为研究对象，运用文献资料法、问卷调查法、数理统计法等方法，对西宁市健身气功的组织管理者和习练者进行了问卷调查。通过调查，获得了较为详实的资料，并对资料进行了详细的分析，其结果表明：习练者女性多于男性，年龄结构上呈现出受众群体集中在中老年人这一群体，青年人对此不热衷;目前西宁市健身气功站点中已注册的站点仅有57个，城西区12个，城中区24个，城东区14个，城北区4个，湟源县2个，大通回族土族自治县1个，健身气功习练者的月平均收入普遍偏低，但在习练健身气功方面的支出与其月平均收入不成正比。西宁市健身气功站点主要集中在社区广场和公园等公共开放性场所;西宁市健身气功各站点的负责人同时又担任辅导员的现象比较普遍，站点负责人（辅导员）平均每年参加培训3次以上，综合素质相对较好，理论、技能、组织管理、教学辅导等方面的能力基本满足习练者的需求;借助高校平台培养健身气功指导员可行性较高，习练者基本能够接受高校平台培养健身气功指导员的指导。为此，提出以下建议：1、加大宣传力度，提高群众对健身气功的科学认识，从而调动全民参与的积极性。2、充分发挥政府相关部门的宏观引导职能，建立健全的健身气功管理中心，管理要从实际出发，结合当前情况，走出符合社会发展、具有自身特点的组织管理模式。3、借助西宁市高校教育资源，结合无偿服务，加强专业健身气功指导员队伍的建设。

关键词：西宁市健身气功开展现状研究

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