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二陈汤治疗非酒精性脂肪性肝病燥湿化痰功效表征-靶点网络-物质基础整合研究

中草药 2024年第18期 6283-6297页

作者：李航李荣荣杜航生立嵩郑晖孙蓉山东大学第二医院山东中医药大学山东大学高等医学研究院山东省中医药研究院

目的通过Meta分析、网络药理学分析及体内实验验证，阐述二陈汤（Erchen Decoction,ECD）发挥燥湿化痰功效治疗非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的临床证据和潜在机制网络与物质基础和靶点验证的现代表... 详细信息

目的通过Meta分析、网络药理学分析及体内实验验证，阐述二陈汤（Erchen Decoction,ECD）发挥燥湿化痰功效治疗非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的临床证据和潜在机制网络与物质基础和靶点验证的现代表征关系。方法筛选符合纳入标准的ECD治疗NAFLD的临床随机对照研究，进行研究质量评价和数据提取，并运用Revman5.4软件进行数据分析。筛选ECD和燥湿化痰类中药的活性成分及对应靶点，运用Cytoscape 3.10.1等软件构建ECD燥湿化痰功效的“药物-活性成分-关键靶点”作用网络，并将ECD燥湿化痰功效的关键靶点与NAFLD疾病靶点取交集，通过Matescape平台对交集靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。根据网络药理学和现代物质基础研究，构建NAFLD动物模型，检测动物血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨酸转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglyceride,TG）水平；苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色和油红O染色检测肝脏组织病理变化；利用实时定量逆转录聚合酶链反应（real time fluorescence quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,q RT-PCR）技术对ECD治疗NAFLD的核心靶点进行实验验证。结果 Meta分析显示，ECD单独或联合其他方法治疗NAFLD的有效率明显高于对照组，且在改善ALT、AST、TC、TG等指标方面均优于对照组。网络药理学研究共获得ECD活性成分145种，相关靶点392个，与燥湿化痰类中药靶点取交集后，得到ECD燥湿化痰功效的关键作用靶点37个，治疗NAFLD涉及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2)、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3 beta,GSK-3β)等25个关键靶点。富集分析揭示了545个生物学过程、13个细胞组成组分、40个分子功能和136条KEGG通路。其信号通路主要涉及脂质和动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝、细胞凋亡、磷脂酰肌醇-3-羟激酶（phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K）-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase,MAPK）信号通路、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）信号通路白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路等。动物实验结果表明，ECD可以显著降低NAFLD小鼠血脂水平，改善肝功能异常，上调小鼠肝脏中PPARG和Bcl-2m RNA的表达。结论 ECD对NAFLD具有一定的治疗作用，表现为发挥燥湿化痰功效，降低ALT、AST、TC、TG水平，改善肝细胞脂肪变性和积聚，改善右胁不适或胀闷、周身困重、大便黏滞不爽等证候，其功效作用网络与PPARG、Bcl-2、PTGS2等多个关键靶点以及脂质和动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝、细胞凋亡等信号通路有关，共同发挥调节脂质代谢、改善肝细胞凋亡的作用。结合动物实验发现PPARG和Bcl-2可能是ECD发挥燥湿化痰功效治疗NAFLD的核心靶点。

关键词：二陈汤燥湿化痰非酒精性脂肪性肝病网络药理学 Meta分析

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基于临床疗效挖掘和靶点网络验证的二陈汤治疗高脂血症燥湿化痰功效研究

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中草药 2024年第8期55卷 2708-2722页

作者：李荣荣杜航李航生立嵩卢佳宝刘持年郑晖孙蓉山东中医药大学山东济南250355 山东大学第二医院山东济南250033 山东大学高等医学研究院山东济南250012 天津中医药大学天津301617

目的采用“系统评价定疗效指标-网络药理学预测靶点-交互燥湿化痰类中药定功效-体内验证疗效指标和功效靶点”的集成创新策略,解析二陈汤发挥燥湿化痰功效治疗高脂血症临床证据和作用靶点的现代表征关系。方法筛选符合纳入标准的二陈汤... 详细信息

目的采用“系统评价定疗效指标-网络药理学预测靶点-交互燥湿化痰类中药定功效-体内验证疗效指标和功效靶点”的集成创新策略,解析二陈汤发挥燥湿化痰功效治疗高脂血症临床证据和作用靶点的现代表征关系。方法筛选符合纳入标准的二陈汤治疗高脂血症临床随机对照研究,抽提与二陈汤燥湿化痰功效密切相关的临床证候,继而开展临床研究Meta分析。筛选并收集二陈汤和燥湿化痰类中药活性成分及其对应的靶点,运用Cytoscape 3.9.1等软件构建二陈汤燥湿化痰功效的“药物-活性成分-关键靶点”网络,将二陈汤燥湿化痰功效的关键靶点与高脂血症疾病靶点交集,通过Matescape平台对共同靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。基于网络药理学和现代药效物质研究,通过高脂饮食构建高脂血症模型,利用qRT-PCR技术对二陈汤燥湿化痰功效治疗高脂血症的作用靶点进行验证。结果Meta分析显示,二陈汤单独或联合其他治疗在治疗高脂血症患者的总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的疗效方面均优于对照组。网络药理学研究得到二陈汤燥湿化痰功效的关键作用靶点37个,治疗高脂血症涉及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferatoractivated receptor gamma,PPARG)、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2)、雌激素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase,AKT1)、PPARA等20个关键靶点。GO分析涉及小分子代谢过程的调节、脂质代谢过程的调节等生物过程,KEGG分析涉及脂质和动脉粥样硬化、脂肪细胞中脂肪分解的调节、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路和单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路等91条通路。体内实验结果表明,二陈汤能够有效改善高脂血症大鼠血脂水平(P<0.05、0.01、0.001),上调高脂血症大鼠肝脏中PPARα和PPARγm RNA的表达(P<0.05、0.001),下调脂肪组织中PPARγm RNA的表达(P<0.05、0.01)。结论二陈汤治疗高脂血症时燥湿化痰功效表征为TC、TG、LDL-C水平下降和HDL-C水平升高,功效作用网络与PPARG、AKT1、PPARA等多个关键靶点和VEGF信号通路、AMPK信号通路有关,共同发挥对脂质代谢、脂肪细胞中脂肪分解调节、肝脂调控等的作用。结合其功效物质基础分析和体内实验发现PPARα和PPARγ是二陈汤发挥燥湿化痰功效治疗高脂血症的核心靶点。

关键词：二陈汤燥湿化痰高脂血症网络药理学系统评价橙皮苷过氧化物酶体增殖物激活受体α 过氧化物酶体增殖物激活受体γ

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芹菜素-哌嗪共晶的制备、表征及体外抗肿瘤药效研究

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中国新药杂志 2022年第7期31卷 679-684页

作者：生立嵩任利文杨世颖王金华吕扬杜冠华山东省中医药研究院济南250014 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所药物筛选研究中心药物靶点研究和新药筛选北京市重点实验室北京100050 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所药物晶型研究中心晶型药物研究北京市重点实验室北京100050

目的:制备和表征芹菜素-哌嗪共晶,并研究其溶出度、大鼠体内血药浓度和体外抗肿瘤药效。方法:采用加液研磨法制备芹菜素-哌嗪共晶。以密度泛函理论(DFT)计算模拟结果,与实验振动光谱进行比较,探讨共晶可能的结合模式。通过不同比例下样... 详细信息

目的:制备和表征芹菜素-哌嗪共晶,并研究其溶出度、大鼠体内血药浓度和体外抗肿瘤药效。方法:采用加液研磨法制备芹菜素-哌嗪共晶。以密度泛函理论(DFT)计算模拟结果,与实验振动光谱进行比较,探讨共晶可能的结合模式。通过不同比例下样品的粉末X射线衍射图谱确证共晶组成比例。并在不同溶出介质中比较共晶和物理混合物的溶出度。比较口服灌胃大鼠后共晶和物理混合物的体内血药浓度水平,在不同肿瘤细胞系中比较体外抗肿瘤药效。结果:芹菜素与哌嗪形成摩尔比为1∶2的共晶。共晶溶出度较物理混合物显著提高(80.0%vs 8.56%),大鼠体内生物利用度提高252.9%,体外抗肿瘤48 h时IC;值5.19μmol·L^(-1),抗肿瘤效果明显改善。结论:芹菜素与哌嗪形成共晶后,成药性明显改善。

关键词：芹菜素共晶抗肿瘤

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谷维素自微乳制剂的制备研究

谷维素自微乳制剂的制备研究

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作者：生立嵩山东中医药大学

学位级别：硕士

目的:开发谷维素自微乳化固体制剂以提高谷维素的药效和生物利用度,选用中药中与谷维素有类似药理作用的皂苷成分做为乳化剂的一种,既能减少合成乳化剂的使用量,降低乳化剂的副作用,又能产生协同作用,增加药物药效。方法:对谷维素进行... 详细信息

目的:开发谷维素自微乳化固体制剂以提高谷维素的药效和生物利用度,选用中药中与谷维素有类似药理作用的皂苷成分做为乳化剂的一种,既能减少合成乳化剂的使用量,降低乳化剂的副作用,又能产生协同作用,增加药物药效。方法:对谷维素进行了处方前研究,建立了紫外分光光度法测定谷维素含量;考察了谷维素在不同油相、乳化剂、助乳化剂中的溶解度;测定了谷维素的油水分配系数;通过绘制伪三元相图选择合适的油相,乳化剂和助乳化剂;以自乳化后的成乳速率,乳滴粒径和载药量为依据,选定最优的谷维素自微乳处方;考察不同吸附剂对谷维素自乳化浓缩液的吸附作用,选定合适的吸附剂制备谷维素固体自乳化制剂;对谷维素自乳化制剂进行了初步的质量考察;在蒸馏水、0.1mol/L盐酸和磷酸盐缓冲溶液三种溶出介质中考察了其体外溶出效果;谷维素在血浆中主要以代谢产物阿魏酸钠存在,建立了高效液相色谱方法测定体内代谢产物阿魏酸钠的含量,灌胃大鼠谷维素片剂混悬液,谷维素乳化剂胶束溶液和谷维素自微乳溶液(谷维素/大鼠体重含量相同),以市售谷维素片剂为参比,考察其12个小时内各自AUC。结果:谷维素的油水分配系数为: 1.22±0.07;高效液相方法回收率在95%～107% ,大鼠药动实验中谷维素片剂混悬液组,谷维素乳化剂胶束溶液组和谷维素自微乳液组的Tmax Cmax分别为: 2.49,2.51,2.32小时,11.85,6.98,7.01μg/ml。AUC分别为55.0±4.01,20.3±2.10,25.3±4.12μg/ml*h。结论:本文结果表明,谷维素形成的自乳化制剂载药量显著提高,谷维素自乳液血药峰谷差距变小,高效液相方法线性良好,AUC与其他两种制剂相比有显著增加,长期和加速性实验表明本制剂稳定性良好。体外溶出显著提高。与市售片剂相比,自乳化制剂的相对生物利用度达270%。

关键词：谷维素自微乳给药系统伪三元相图刺五加皂苷阿魏酸钠相对生物利用度

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神经酸口服乳剂的处方及制备工艺优化

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中国药房 2022年第4期33卷 458-464页

作者：陈文静付加雷孙丹丹于蓓蓓生立嵩闫雪生山东中医药大学药学院济南250355 山东省中医药研究院济南250014

目的制备神经酸口服乳剂,对其处方及制备工艺进行优化,并考察其稳定性。方法通过机械法制备神经酸口服乳剂。在单因素实验的基础上,以乳剂外观、离心稳定性、离心稳定常数(K;)、粒径为指标,采用正交实验设计,以油酸用量、辛基苯酚聚氧... 详细信息

目的制备神经酸口服乳剂,对其处方及制备工艺进行优化,并考察其稳定性。方法通过机械法制备神经酸口服乳剂。在单因素实验的基础上,以乳剂外观、离心稳定性、离心稳定常数(K;)、粒径为指标,采用正交实验设计,以油酸用量、辛基苯酚聚氧乙烯醚-10用量、丙二醇用量为因素,对其处方进行优化;以乳化温度、剪切时间、高压均质压力、高压均质循环次数为因素,对其制备工艺进行优化;采用高效液相色谱法测定神经酸含量,采用高温试验、加速试验和长期试验考察神经酸口服乳剂的稳定性。结果最优处方及制备工艺为神经酸原料药1 g、油酸用量5%、辛基苯酚聚氧乙烯醚-10用量4%、丙二醇用量2%、乳化温度60℃、剪切时间2 min、高压均质压力40 MPa、高压均质循环2次。经3次实验验证,所得神经酸口服乳剂的平均粒径为158.05 nm(RSD=1.58%,n=3),平均K;为0.39(RSD=1.49%,n=3),外观呈均一乳白色,均无分层现象。高温试验结果显示,神经酸口服乳剂在高温环境中易出现分层现象,神经酸的含量有所增加;加速试验及长期试验结果显示,神经酸口服乳剂在室温下放置6个月的外观、神经酸含量均无明显变化。结论所得最优处方及制备工艺稳定、可行,可用于神经酸口服乳剂的制备;神经酸口服乳剂不适宜放置于高温环境中,在室温环境下放置6个月的稳定性较好。

关键词：神经酸口服乳剂处方优化制备工艺优化正交实验设计高效液相色谱法样品稳定性

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谷维素自微乳制剂的相对生物利用度研究

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中成药 2010年第4期32卷 664-665页

作者：陈智生立嵩田景振山东中医药大学山东济南250355

目的:研究谷维素自微乳在大鼠体内的药物动力学和相对生物利用度。方法:大鼠分为谷维素表面活性剂胶束溶液组,谷维素市售片剂组,谷维素自微乳胶囊组,用HPLC法测定不同时间血浆样品中阿魏酸钠的浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数及相对... 详细信息

目的:研究谷维素自微乳在大鼠体内的药物动力学和相对生物利用度。方法:大鼠分为谷维素表面活性剂胶束溶液组,谷维素市售片剂组,谷维素自微乳胶囊组,用HPLC法测定不同时间血浆样品中阿魏酸钠的浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数及相对生物利用度。结果:三个组别的药-时曲线下面积分别为(25.3±4.12),(20.3±2.10)和(55.0±4.01)h×μg/mL,血药峰浓度Cmax分别为(7.01±1.21),(6.98±1.13),(11.85±1.79)μg/mL,达峰时间T分别为(2.32±0.35),(2.51±0.13),(2.49±0.07)h,谷维素自微乳胶囊的相对生物利用度为270.9%。结论:谷维素自微乳可显著提高谷维素的生物利用度。

关键词：谷维素自微乳高效液相色谱法相对生物利用度

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木犀草素与哌嗪共晶的表征及初步药动学研究

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医药导报 2022年第5期41卷 621-625页

作者：燕柳艳生立嵩宋俊科杨德智张丽吕扬王守宝杜冠华北京协和医学院、中国医学科学院药物研究所药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室北京100050 北京协和医学院、中国医学科学院药物研究所晶型药物研究北京市重点实验室北京100050 山东省中医药研究院中药制剂研究所中药制剂研究室济南250014

目的研究木犀草素与哌嗪共晶的制备与表征,体外溶解性以及大鼠体内药动学,并与二者同比例物理混合物进行对比。方法对共晶以及物理混合物进行粉末X射线衍射(PXRD)和差示扫描量热(DSC)分析,采用高效液相色谱法检测其体外溶解性,采用高效... 详细信息

目的研究木犀草素与哌嗪共晶的制备与表征,体外溶解性以及大鼠体内药动学,并与二者同比例物理混合物进行对比。方法对共晶以及物理混合物进行粉末X射线衍射(PXRD)和差示扫描量热(DSC)分析,采用高效液相色谱法检测其体外溶解性,采用高效液相色谱-串联质谱技术测定大鼠灌胃给药的血药浓度,比较主要药动学参数的差异。结果共晶与木犀草素的PXRD、DSC等方法检测结果存在明显差异,在十二烷基硫酸钠溶液中的溶解度较物理混合物提高39%。大鼠灌胃给予共晶和物理混合物后,共晶的达峰时间和体内滞留时间明显缩短,药物浓度-时间曲线下面积增加。结论共晶改善了木犀草素溶解度和体内生物利用度,提高了木犀草素的成药性。

关键词：木犀草素哌嗪共晶药动学生物利用度

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泻白散作用靶点的生物信息学研究及活性成分解析

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山东中医药大学学报 2022年第2期46卷 234-241页

作者：徐东川刘瑾生立嵩张会敏隋在云山东中医药大学山东济南250355 山东省中医药研究院山东济南250014

目的:基于网络药理学以及高效液相色谱技术,探讨泻白散治疗哮喘的主要活性成分与药理作用机制。方法:构建大鼠哮喘病理模型,评价泻白散治疗哮喘的药理作用,借助TCMSP数据库检索泻白散活性成分及其相关作用靶点;利用Cytoscape 3.6.1软件... 详细信息

目的:基于网络药理学以及高效液相色谱技术,探讨泻白散治疗哮喘的主要活性成分与药理作用机制。方法:构建大鼠哮喘病理模型,评价泻白散治疗哮喘的药理作用,借助TCMSP数据库检索泻白散活性成分及其相关作用靶点;利用Cytoscape 3.6.1软件构建“成分-疾病-靶点”交互作用网络,并筛选得到主要活性成分;运用Metascape数据库对关键靶点基因进行基因本体论(GO)分析与京都基因和基因组数据库(KEGG)通路分析;采用AutoDock Tools 1.5.6软件进行分子对接,结合高效液相色谱技术分析泻白散治疗哮喘的核心化合物。结果:泻白散能有效改善哮喘大鼠症状,泻白散治疗哮喘的靶点125个,通路16条,主要通过槲皮素、山奈酚、柚皮素、β-谷甾醇等15个小分子发挥治疗哮喘的作用。结论:泻白散能够有效缓解哮喘大鼠病理状态,并通过多个有效活性成分参与磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白细胞介素(IL)-17等免疫、炎症信号通路,调控肿瘤坏死因子(TNF)、IL-6、丝氨酸激酶1(AKT1)、MAPK1等关键蛋白发挥泻白散抗哮喘的作用。

关键词：网络药理学分子对接泻白散哮喘作用机制活性成分高效液相色谱

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人参、银杏叶提取物对Aβ_(1-40)诱导的大鼠原代神经元凋亡的保护作用

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中国中药杂志 2011年第7期36卷 908-911页

作者：丛伟红生立嵩李杨李澎林成仁刘建勋中国中医科学院西苑医院实验中心北京100091

目的:观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)对原代神经元的损伤以及人参、银杏叶提取物(extracts of ginseng and ginkgobiloba,EGGB)的保护作用。方法:以Aβ1-40诱导大鼠原代神经元建立Aβ毒性损伤细胞模型,结合Annexin V-FITC/PI双染法流... 详细信息

目的:观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)对原代神经元的损伤以及人参、银杏叶提取物(extracts of ginseng and ginkgobiloba,EGGB)的保护作用。方法:以Aβ1-40诱导大鼠原代神经元建立Aβ毒性损伤细胞模型,结合Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术、MTT比色法、透射电镜及Western blot法,确定Aβ1-40的造模浓度与时间,检测EGGB对原代神经元细胞增殖活性、凋亡率、超微结构和细胞caspase-3蛋白表达的影响。结果:1μmol.L-1Aβ1-40作用24 h可诱导原代神经元凋亡率显著升高(P<0.01);EGGB(5,50 mg.L-1)可明显增强细胞增殖活性(P<0.05);EGGB(50 mg.L-1)可明显抑制神经元凋亡、改善细胞超微结构、抑制caspase-3的过度表达(P<0.05,P<0.01)。结论:Aβ1-40可明显诱导体外培养的原代神经元凋亡,EGGB则有较好的神经保护作用,可有效抑制神经元凋亡,这种作用可能是与其改善神经元及亚细胞器结构、提高细胞增殖活性、抑制caspase-3的过度表达等有关。

关键词：人参银杏叶提取物 β-淀粉样蛋白原代神经元凋亡

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临床常用普伐他汀钠片大鼠体内药代动力学比较研究

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中国临床药理学与治疗学 2016年第6期21卷 646-652页

作者：赵赢张娜庞晓丛生立嵩宋俊科何兰吕扬杜冠华中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京市药物靶点研究与新药筛选重点实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京市晶型药物研究重点实验室中国食品药品检定研究院北京100050

目的:研究大鼠灌胃不同企业普伐他汀钠片后体内药代动力学的一致性。方法:固体灌胃给予SD雄性大鼠普伐他汀钠15 mg/kg,采用液质联用法测定不同时间的血药浓度,绘制药时曲线,并用DAS 3.0.7数据处理系统进行主要药代动力学参数的计算和比... 详细信息

目的:研究大鼠灌胃不同企业普伐他汀钠片后体内药代动力学的一致性。方法:固体灌胃给予SD雄性大鼠普伐他汀钠15 mg/kg,采用液质联用法测定不同时间的血药浓度,绘制药时曲线,并用DAS 3.0.7数据处理系统进行主要药代动力学参数的计算和比较。结果:三个原料药生产企业的测定结果显示,3号晶F型普伐他汀钠原料药较1、2号晶A型有着更好的药物吸收和相对生物利用度,为优势药物晶型;随机抽取的临床常用7种普伐他汀钠片在大鼠体内药代动力学参数结果呈现显著性差异,Tmax,Cmax,AUC,t1/2的最大差异分别可以达到5.3,3.4,2.4和1.4倍之多。结论:不同企业的普伐他汀钠片在大鼠体内的药代动力学过程存在显著性差异,这可能与普伐他汀钠多晶型状态以及药物生产工艺、辅料成分及含量等制剂过程有关。

关键词：普伐他汀晶型药代动力学生物利用度 LC-MS

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