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构建雄黄诱导维甲酸耐药急性早幼粒细胞白血病NB4-R1细胞凋亡的蛋白质双向电泳图谱

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中国中西医结合杂志 2011年第3期31卷 391-396页

作者：齐珺张梅贺鹏程叶世辉王鸿丽西安交通大学医学院第一附属医院血液科西安710061 陕西省血液中心西安710061 军事医学科学院国家生物医学分析中心北京100850

目的构建雄黄(四硫化四砷,tetra-arsenic tetra-sulfide,As4S4)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡前后的差异蛋白质组表达谱。方法首先应用MTT法、透射电镜、AnnexinV/PI双染法和激光共聚焦显微镜的一系... 详细信息

目的构建雄黄(四硫化四砷,tetra-arsenic tetra-sulfide,As4S4)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡前后的差异蛋白质组表达谱。方法首先应用MTT法、透射电镜、AnnexinV/PI双染法和激光共聚焦显微镜的一系列体外实验定性化和定量化雄黄诱导NB4-R1细胞凋亡的作用;然后应用高分辨二维双向电泳技术构建雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱。结果雄黄对NB4-R1细胞的生长抑制效应呈剂量和时间依赖性,雄黄作用24h半数抑制浓度(IC50)为(24.06±0.19)μmol/L,48h IC50为(9.50±0.13)μmol/L,72h IC50为(6.55±0.03)μmol/L;确定了25μmol/L雄黄作用24h和48h时分别为NB4-R1细胞凋亡主群的早期和凋亡晚期阶段;成功构建了雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱,ImageMasterTM2D Platinum图像分析软件分析显示,未处理组(R0)、处理24h组(R24)和处理48h组(R48)的蛋白质组表达图谱分别平均含1069、975和893个点;R24与R0的匹配率为79.94%,R48与R0的匹配率为69.33%,R24与R48的匹配率为71.91%。结论成功构建雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱,为今后从整体上更好地理解雄黄诱导耐药APL细胞凋亡的蛋白质组传导网络以及筛选恶性血液肿瘤新型生物标志物和药物靶标方面奠定了基础。

关键词：急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药 NB4-R1细胞雄黄(四硫化四砷) 凋亡蛋白质组

混合式教学模式下的课程思政探索--以企业审计课程为例

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天津职业院校联合学报 2022年第10期24卷 50-54页

作者：李昕一王鸿丽天津机电职业技术学院天津300350

近年来,线上线下混合式教学模式逐渐成为各高校主要推行的教学模式,混合式教学具有较强的灵活性和适应性。与此同时,课程思政内容也需要与混合式教学同步更新和发展,需要进一步丰富思政资源、扩充思政形式、加强师生互动,构建反馈体系,... 详细信息

近年来,线上线下混合式教学模式逐渐成为各高校主要推行的教学模式,混合式教学具有较强的灵活性和适应性。与此同时,课程思政内容也需要与混合式教学同步更新和发展,需要进一步丰富思政资源、扩充思政形式、加强师生互动,构建反馈体系,以提高课程思政的效果,引导学生树立正确的人生观和价值观。

关键词：线上线下混合式教学课程思政企业审计

双三元液相色谱串联ICP-MS对中国东北和西南地区的4种松茸的砷形态分析

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中国药学杂志 2022年第5期57卷 392-398页

作者：张康吴胜明王鸿丽彭静朱培红董方霆何昆王娜国家生物医学分析中心北京100039

目的松茸中砷含量很高且含有不同的砷形态,包括:砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC)、三价砷(AsⅢ)、五价砷(AsⅤ)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、三甲基氧化砷(TMAO)和砷糖。然而,有机砷化合物被认为毒性较小,甚至无毒,所以总砷含量不能提... 详细信息

目的松茸中砷含量很高且含有不同的砷形态,包括:砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC)、三价砷(AsⅢ)、五价砷(AsⅤ)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、三甲基氧化砷(TMAO)和砷糖。然而,有机砷化合物被认为毒性较小,甚至无毒,所以总砷含量不能提供关于其毒性的全部有效信息,需分析其具体的砷酸盐形态。方法我们采用了基于HPLC耦合电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)的优化分析方案来分析松茸中的As种类。使用含有5和100 mmol·L^(-1)的(NH_(4))_(2)CO_(3)的混合流动相,通过DionexIonPacTM AS7色谱柱与ICP-MS检测器进行目标As物种的分离。结果经过优化的HPLC色谱条件在15 min内实现了目标As物种的分离,并具有良好的分辨率。在松茸中检测到的主要砷形态是无毒的AsB。结论现行中国国家标准GB2762-2017以总砷含量为质量标准。结果表明,将无机砷含量作为质量标准可能更为合理。

关键词：松茸高效液相色谱法电感耦合等离子体质谱无机砷

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急性脊髓损伤及电针治疗大鼠的比较蛋白质组研究

作者：王鸿丽

来源：南通市图书馆图书评论

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急性脊髓损伤及电针治疗大鼠的比较蛋白质组研究

作者：王鸿丽中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

脊髓损伤(spinal cord injury ,SCI)源于创伤、跌落坠下和运动创伤等引起的脊髓结构、功能的改变,其引发的继发性级联损伤,即“瀑布”反应,导致继发性损害,是重要的致残和致死因素。因此早期阻断遏制继发性损害对于急性创伤性脊髓损伤... 详细信息

脊髓损伤(spinal cord injury ,SCI)源于创伤、跌落坠下和运动创伤等引起的脊髓结构、功能的改变,其引发的继发性级联损伤,即“瀑布”反应,导致继发性损害,是重要的致残和致死因素。因此早期阻断遏制继发性损害对于急性创伤性脊髓损伤的预后具有极为重要的意义。目前治疗脊髓损伤的方法很多,但大多数仍处于实验室研究阶段,这和脊髓损伤程度不同、临床脊髓损伤的复杂性等有关。如何从根本上解决脊髓损伤后功能恢复仍是一个急待解决的难题。近年来的临床实践表明,早期针灸治疗可以阻止或减轻SCI后的继发性损害,促进神经元及神经纤维的修复,并有效防止并发症的发生和减轻脊髓继发性损伤,促进神经功能的恢复或再生,但其具体作用机制尚不清楚,从蛋白质水平对脊髓损伤和针灸治疗机制进行研究具有科学意义和应用价值。本研究首先以正常大鼠为对照组,应用蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)技术,分析在急性脊髓损伤条件下大鼠脊髓蛋白质组表达的差异。30只大鼠随机分成正常对照组和急性脊髓损伤模型组,以3只大鼠脊髓合并为一个样品,各5次生物学重复。用改良的Allen’s打击法制作模型,以50g-2cm(10g×5cm)打击量撞击T10～T11脊髓,造成急性中度脊髓损伤。在1h处死大鼠并分离脊髓,提取脊髓总蛋白后进行2- DE分析,运用ImageMaster 2D Platinum 5.0凝胶图像分析软件对2-DE凝胶图像进行差异表达分析,差异明显蛋白点经胶内酶切后用基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱和纳升超高效液相色谱-电喷雾串联质谱进行分析,通过Mascot数据库检索鉴定差异蛋白质。正常对照组(假手术组)和急性脊髓损伤组分别平均识别到1170±62和1324±47个蛋白质点,图像分析匹配率约为79.5%,共找到31个有显著差异的蛋白质点,其中上调蛋白质斑点9个,下调蛋白质斑点20个,新增蛋白质斑点2个。这些差异点主要分布在pI4.0-9.2、分子量14.0kDa-100.0kDa之间,表达上调的倍数一般在3-25倍,下调最低至0.1倍。其次,以正常大鼠脊髓组织为对照组,45只急性脊髓损伤大鼠随机分成6h、24h和48h电针治疗组,选取大椎穴、命门穴针刺30min,以3只电针治疗后的大鼠脊髓合并为一个样品,各5次生物学重复。在电针6h、24h、48h治疗后的大鼠脊髓组织和急性脊髓损伤大鼠组织之间进行2D分析,进行差异蛋白质比较,电针6h、24h、48h治疗后的大鼠脊髓组织分别识别到1345±57,1293±39和1216±76个蛋白质点,与急性脊髓损伤图谱的匹配率达74.9%5%。电针治疗后与正常对照组和急性脊髓损伤组比较,选择在急性脊髓损伤组发生差异表达,在针灸治疗后仍发生变化的差异蛋白点共12个,它们的变化主要呈现4种类型:(1)“轻微下降型”,蛋白斑点1、2、5和6,它们应该是疗效或愈后的候选判断指标。(2)“急速下降型”,蛋白斑点7、8、9,它们可能是电针治疗有效性的判断指标。(3)“波动型”,蛋白斑点10、23、37,可能提示电针治疗法存在比较复杂的损伤修复机制。(4)“突然上升型”,蛋白斑点4、17,可能是疗效或愈后的候选判断指标。采用MALDI-TOF/TOF-MS的PMF和肽序列测定技术,分析了10个考染凝胶重复性好的差异蛋白质斑点,鉴定出13个有意义的差异蛋白质。Mascot检索分值10306段匹配数2-9个,序列覆盖率149%。采用纳升超高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术,分析了21个质谱兼容银染凝胶重复性好的差异蛋白质斑点,鉴定出29个有意义的蛋白质。Mascot检索分值5705,肽段匹配数22,序列覆盖率4 0%。 9个表达上调的蛋白,鉴定出13个蛋白质,分别是:NADH脱氢酶( NADH dehydrogenase)、苹果酸脱氢酶(Cytosolic malate dehydrogenase,cMDH)、二磷酸核苷激酶(Putative nucleoside diphosphate kinase,NDK )、Nm23蛋白(Nm23 protein)、髓磷脂碱性蛋白( Myelin basic protein,MBP )、泛素结合酶E2N (ubiquitin-conjugating enzyme E2N,UBE2N)、DJ-1蛋白(DJ-1 protein)、腺苷酸环化酶关联蛋白1(similar to CAP1 protein,CAP1)、磷酸丙糖异构酶1(triosephosphate isomerase 1,TPI1)、磷酸甘油酸变位酶(phosphoglycerate mutase,PGM)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、泛素羧基端水解酶(Ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1,UCH-L

关键词：蛋白质组急性脊髓损伤电针

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径向基函数插值中形状参数的选取方法研究

径向基函数插值中形状参数的选取方法研究

作者：王鸿丽华北理工大学

学位级别：硕士

径向基函数方法作为一种本质上用一元函数描述多元函数的有效工具,在逼近论、数值分析、计算几何和数据处理等领域中均有广泛应用。径向基函数的形状参数对插值精度的影响较大,因此,如何选取形状参数使得插值误差最小的问题受到国内外... 详细信息

径向基函数方法作为一种本质上用一元函数描述多元函数的有效工具,在逼近论、数值分析、计算几何和数据处理等领域中均有广泛应用。径向基函数的形状参数对插值精度的影响较大,因此,如何选取形状参数使得插值误差最小的问题受到国内外学者的广泛关注。主要针对径向基函数插值中形状参数的自适应选取方法进行研究,具体工作包括以下三部分:首先,介绍了径向基函数的基本理论。其中包括径向基函数的定义,几种常用的径向基函数及径向基函数的应用;径向基函数插值的定义及插值存在唯一解的条件;总结了径向基函数插值误差估计方法。其次,结合径向基函数插值的误差理论,分别归纳总结了常参数径向基函数和变参数径向基函数中形状参数的选取方法,并通过数值实验,对两类方法对比研究。为了提高变参数径向基函数的插值精度,利用拉格朗日法和径向基函数法相结合的方式加以改进。最后,介绍了径向基函数插值中形状参数的选取算法,并利用Gauss径向基函数进行Matlab插值数值实验,得到了三角函数的最优形状参数,分析和探讨了其与原函数以及插值误差之间的关系。结合傅里叶级数理论,研究了最优形状参数随傅里叶系数的变化,并通过分析数值实验所得数据,总结出有限项三角级数的形状参数选取规则,得出满足狄利克雷收敛条件的一类函数的最优形状参数选取范围。随机选取傅里叶系数的值,进行数值实验,验证了此结论的可行性与有效性。为径向基函数方法在实际工程领域的应用提供极大的便利,具有重要的科研价值。图31幅;表12个;参63篇。

关键词：径向基函数形状参数拉格朗日法傅里叶级数

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改性双基推进剂黏弹-黏塑性本构模型

航空学报 2017年第4期38卷 137-144页

作者：王鸿丽许进升陈雄周长省南京理工大学机械工程学院南京210094

为了表征改性双基推进剂的力学行为,推导出改性双基推进剂黏弹-黏塑性本构模型。利用一系列蠕变-回复试验,将材料的总应变分离为黏弹性应变和黏塑性应变,使用最小二乘法获得了黏弹性参数,使用Nelder-Mead单纯形优化算法,结合后向Euler... 详细信息

为了表征改性双基推进剂的力学行为,推导出改性双基推进剂黏弹-黏塑性本构模型。利用一系列蠕变-回复试验,将材料的总应变分离为黏弹性应变和黏塑性应变,使用最小二乘法获得了黏弹性参数,使用Nelder-Mead单纯形优化算法,结合后向Euler数值方法获得了黏塑性参数。通过不同应力水平和不同加载时间的蠕变-回复试验对模型进行了验证,结果表明,在应力水平较低或加载时间较短的情况下,模型预测与试验值变化趋势基本一致,模型获得的黏弹性应变与黏塑性应变在总应变中所占的比例与试验吻合。改性双基推进剂黏弹-黏塑性本构模型能够在一定范围内描述材料的力学性能。

关键词：航空航天推进系统固体力学改性双基推进剂黏弹-黏塑性模型蠕变-回复

HPLC-ICP-MS法测定中药冬虫夏草中6种砷形态化合物

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国际药学研究杂志 2019年第12期46卷 946-949页

作者：王鸿丽刘倩何昆军事科学院军事医学研究院生物医学医学分析中心北京100850

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)法测定中药冬虫夏草(简称虫草)中AsⅢ、AsⅤ、一甲基砷(MA)、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)和砷甜菜碱(AsB)6种砷形态含量的分析方法。方法样品用0.15 mol/L硝酸溶液热提取;HPLC采... 详细信息

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)法测定中药冬虫夏草(简称虫草)中AsⅢ、AsⅤ、一甲基砷(MA)、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)和砷甜菜碱(AsB)6种砷形态含量的分析方法。方法样品用0.15 mol/L硝酸溶液热提取;HPLC采用Dionex IonPacTM AS7(4 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以5mmol/L和100 mmol/L两种碳酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱分离,用ICP-MS检测,并进行定量测定。结果 6种砷形态在5~200μg/kg范围内线性关系良好,平均回收率为83.3%~115.9%,RSD<5%;在检测的3批冬虫夏草样品中,所含砷主要以无机砷AsⅢ和AsⅤ形式存在,AsⅢ+AsⅤ总含量在1 mg/kg上下浮动。结论研究建立的HPLC-ICPMS法简便、准确、可靠,可用于分析测定冬虫夏草中所含不同形态砷含量。本文对虫草中6种砷形态含量的分析测试工作及其结果可供在虫草中砷限量标准改进研究中参考和借鉴。

关键词：冬虫夏草砷形态分析高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)法

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