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lncRNA-MSTRG.7889.1竞争性结合bta-miR-146a靶向Smad4调控牦牛颗粒细胞的凋亡

中国农业科学 2024年第4期57卷 797-809页

作者：孟朝轶王运路姚一龙席广银牛家强索朗斯珠郭敏徐业芬西藏农牧学院动物科学学院中国农业科学院深圳农业基因组研究所中国农业大学动物科学技术学院

【背景】卵泡颗粒细胞（Granulosa cells,GCs）凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ce RNA）机制已被证明参与调控GCs的凋亡过程。前期牦牛卵巢转录组测序发现lnc RNA-MSTRG.7889.1与bta-mi R-146... 详细信息

【背景】卵泡颗粒细胞（Granulosa cells,GCs）凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ce RNA）机制已被证明参与调控GCs的凋亡过程。前期牦牛卵巢转录组测序发现lnc RNA-MSTRG.7889.1与bta-mi R-146a具有结合位点，而bta-mi R-146a和Smad4存在靶向关系。【目的】通过探究影响牦牛卵泡GCs凋亡的ce RNA分子调控机制，为揭示牦牛生殖调控的奥秘奠定基础。【方法】采集和分离成年母牦牛的健康和闭锁卵泡，利用RT-q PCR法检测lnc RNA-MSTRG.7889.1、bta-mi R-146a和Smad4在卵泡中的表达。制作牦牛健康和闭锁卵泡组织切片，TUNEL检测健康卵泡和闭锁卵泡中GCs的凋亡情况；荧光原位杂交分析lnc RNA-MSTRG.7889.1、bta-mi R-146a和Smad4在卵泡中的定位。体外分离和培养牦牛GCs，分别转染Smad4过表达载体和bta-mi R-146a mimics，流式细胞术检测GCs细胞凋亡率，Western blot检测促凋亡蛋白CASPASE3和BAX，抑凋亡蛋白BCL-2的表达；GCs共转染Smad4过表达载体和bta-mi R-146a mimics后，探究bta-mi R-146a是否靶向Smad4影响牦牛GCs的凋亡。将lnc RNA-MSTRG.7889.1过表达慢病毒载体感染GCs，流式细胞术和Western blot检测lnc RNA-MSTRG.7889.1对GCs凋亡的影响；lnc RNA-MSTRG.7889.1载体和bta-mi R-146a mimics共转染GCs，进一步分析lnc RNA-MSTRG.7889.1是否竞争性结合bta-mi R-146a靶向Smad4影响牦牛GCs的凋亡。【结果】lnc RNA-MSTRG.7889.1和Smad4 m RNA在牦牛健康卵泡中的表达极显著高于闭锁卵泡（P<0.01），而bta-mi R-146a的表达则相反（P<0.01）。TUNEL检测结果显示，在闭锁卵泡中GCs的荧光强度极显著高于健康卵泡（P<0.01），说明闭锁卵泡中GCs凋亡显著高于健康卵泡。荧光原位杂交结果显示Smad4、bta-mi R-146a和lnc RNA-MSTRG.7889.1在牦牛卵泡中共表达，其在健康和闭锁卵泡中的表达与RT-q PCR结果基本一致，提示可能存在ce RNA机制参与牦牛健康卵泡发育和卵泡闭锁过程。在牦牛GCs过表达Smad4使细胞凋亡率显著降低（P<0.01),CASPASE3和BAX蛋白的表达显著降低（P<0.01),BCL-2蛋白的表达显著升高（P<0.01）；过表达bta-mi R-146a使GCs凋亡率显著升高（P<0.01),CASPASE3和BAX蛋白的表达显著升高（P<0.01),BCL-2蛋白的表达显著降低（P<0.01);bta-mi R-146a靶向抑制Smad4的表达（P<0.01);Smad4和bta-mi R-146a共转染GCs，结果显示bta-mi R-146a靶向抑制Smad4降低前者对GCs凋亡的促进作用（P<0.01）。过表达lnc RNA-MSTRG.7889.1使牦牛GCs凋亡率显著降低（P<0.01),CASPASE3和BAX蛋白的表达显著降低（P<0.01),BCL-2蛋白的表达显著升高（P<0.01);lnc RNA-MSTRG.7889.1显著抑制bta-mi R-146a的表达（P<0.01）。将lnc RNA-MSTRG.7889.1和bta-mi R-146a共转染GCs，结果表明lnc RNA-MSTRG.7889.1靶向bta-mi R-146a降低后者对GCs凋亡的促进作用（P<0.01）；而且RT-q PCR法和Western blot检测结果表明lnc RNA-MSTRG7889.1竞争性结合bta-mi R-146a促进Smad4 m RNA和蛋白水平的表达（P<0.01）。【结论】lnc RNA-MSTRG.7889.1竞争性结合bta-mi R-146a促进Smad4的表达抑制牦牛GCs的凋亡。

关键词： lncRNA bta-miR-146a 凋亡颗粒细胞牦牛开放科学(资源服务)标识码(OSID):

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牦牛bta-miR-146a对卵巢卵泡颗粒细胞自噬的影响研究

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高原农业 2024年第4期8卷 367-375页

作者：徐业芬王运路孟朝轶刘博华昝瑞隆西藏农牧学院动物科学学院西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室西藏林芝860000

自噬是细胞广泛存在的程序性死亡机制,通过对细胞内衰老细胞器、长寿命蛋白以及外源病原微生物进行吞噬、降解,以维持细胞平衡。在卵巢中,卵泡颗粒细胞自噬对卵泡发育起着关键作用,失衡会导致闭锁。为探究miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞自... 详细信息

自噬是细胞广泛存在的程序性死亡机制,通过对细胞内衰老细胞器、长寿命蛋白以及外源病原微生物进行吞噬、降解,以维持细胞平衡。在卵巢中,卵泡颗粒细胞自噬对卵泡发育起着关键作用,失衡会导致闭锁。为探究miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞自噬的影响,本试验通过体外分离培养牦牛卵泡颗粒细胞后,分别转染bta-miR-146a模拟物(bta-miR-146a mimics)和bta-miR-146a抑制剂(bta-miR-146a inhibitor),利用荧光定量RT-PCR法、Western Blot和激光共聚焦法检测细胞的自噬相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示,转染bta-miR-146a mimic组与mimic NC组相比激光共聚焦可检测到LC3B蛋白荧光强度降低(P<0.01);荧光定量RT-PCR检测发现LC3B、Atg-5和Beclin-1自噬指示基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01);bta-miR-146a inhibitor组与bta-miR-146a inhibitor NC组相比LC3B、Atg-5和Beclin-1极显著升高(P<0.01),bta-miR-146a mimic组与bta-miR-146a inhibitor组相比,LC3B、Atg-5和Beclin-1自噬指示基因m RNA表达量极显著降低(P<0.01)。Western Blot检测发现bta-miR-146a inhibitor组自噬指示蛋白LC3B、Atg-5和Beclin-1表达最高,bta-miR-146a mimic组表达最低;bta-miR-146a mimic组与bta-miR-146a mimic NC组相比,LC3B、Atg-5和Beclin-1蛋白表达极显著降低(P<0.01),bta-miR-146a inhibitor组与bta-miR-146a inhibitor NC相比LC3B、Atg-5和Beclin-1蛋白表达极显著升高(P<0.01),bta-miR-146a mimic组与bta-miR-146a inhibitor组相比,自噬指示蛋白LC3B、Atg-5和Beclin-1的表达量极显著降低(P<0.01)。上述结果表明bta-miR-146a mimic抑制牦牛卵泡颗粒细胞的自噬,而bta-miR-146a inhibitor促进牦牛卵泡颗粒细胞的自噬。

关键词：牦牛 bta-miR-146a 颗粒细胞自噬

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大型柴油发电机组进排气系统的积垢诊断

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西安交通大学学报 1995年第11期29卷 33-37页

作者：王愚王运路孙实文西安交通大学能源与动力工程学院陕西西安

定义了大型柴油发电机组进排气系统设备的积垢率，根据灰色系统动态预测模型的建模理论提出了大型柴油发电机组进排气系统积垢预测诊断模型和诊断方法，并以进排气系统中空气滤清器的积垢诊断为例，进行了运行试验和分析，用以监视设备... 详细信息

定义了大型柴油发电机组进排气系统设备的积垢率，根据灰色系统动态预测模型的建模理论提出了大型柴油发电机组进排气系统积垢预测诊断模型和诊断方法，并以进排气系统中空气滤清器的积垢诊断为例，进行了运行试验和分析，用以监视设备运行中的积垢程度、预测积垢进展以及实现设备的清洗预报警。

关键词：柴油发电机组进排气系统预测诊断积垢

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使用混合工质的新型电冷联产循环系统研究

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西安交通大学学报 2002年第5期36卷 465-468页

作者：黄锦涛刘齐寿王运路陈听宽罗毓珊西安交通大学能源与动力工程学院西安710049

利用氨水混合物低沸点的特点 ,设计了以氨水混合物为工质的电冷联产循环系统 .该循环系统可以利用 4 0 0～ 4 5 0K的低温热源 ,实现发电与制冷联合生产 ,整个循环系统的热效率比利用同样温度热源常规热力发电的热效率高出 7%左右 ,... 详细信息

利用氨水混合物低沸点的特点 ,设计了以氨水混合物为工质的电冷联产循环系统 .该循环系统可以利用 4 0 0～ 4 5 0K的低温热源 ,实现发电与制冷联合生产 ,整个循环系统的热效率比利用同样温度热源常规热力发电的热效率高出 7%左右 ,为低温太阳能、地热能、电厂废热的高效利用提供了一个新方法 .通过对整个系统的数值模拟 ,进一步分析了该联产系统中汽轮机初压、背压、热源温度、吸收器工作温度等参数之间的关系 .结果表明 ,汽轮机的初压增加及背压下降 ,会使系统的循环效率线性增加。

关键词：混合工质电冷联产循环系统氨-水混合物热经济性分析汽轮机制冷剂

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动力循环中混合工质的应用研究

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动力工程 2003年第1期23卷 2236-2239页

作者：黄锦涛刘齐寿王运路西安交通大学能源与动力工程学院西安710049

采用沸点不同的混合物 ,由于工质吸热蒸发是变温过程 ,使热源的放热过程与混合工质的吸热过程曲线更好的配合 ,最大限度地降低传热过程中的不可逆损失 ,同时热源的放热温度可以大大降低。根据混合工质的这一特点 ,设计了以氨 -水混合物... 详细信息

采用沸点不同的混合物 ,由于工质吸热蒸发是变温过程 ,使热源的放热过程与混合工质的吸热过程曲线更好的配合 ,最大限度地降低传热过程中的不可逆损失 ,同时热源的放热温度可以大大降低。根据混合工质的这一特点 ,设计了以氨 -水混合物作为工质电冷联合生产的新型热力循环。该热力循环可以利用低温热源 ,如地热、低温太阳能、电厂废热等。对这一热力循环的经济性分析证明 :该系统循环效率比单一工质效率高。图 3表 2参

关键词：动力循环混合工质热力循环氨-水混合物地热能

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牦牛lncRNA ENSBGRT00000000387.1慢病毒载体构建及其对卵泡GCs凋亡的影响

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畜牧兽医学报 2023年第3期54卷 1058-1070页

作者：孟朝轶王运路徐业芬牛家强索朗斯珠郭敏席广银西藏农牧学院动物科学学院林芝860000 中国农业大学动物科学技术学院北京100193

旨在构建牦牛lncRNA ENSBGRT00000000387.1过表达慢病毒载体,并将其感染牦牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs),了解它对细胞凋亡的影响。本研究提取牦牛卵泡RNA,以RT-PCR技术扩增lncRNA ENSBGRT00000000387.1全长序列,而后构建其重组... 详细信息

旨在构建牦牛lncRNA ENSBGRT00000000387.1过表达慢病毒载体,并将其感染牦牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs),了解它对细胞凋亡的影响。本研究提取牦牛卵泡RNA,以RT-PCR技术扩增lncRNA ENSBGRT00000000387.1全长序列,而后构建其重组质粒,并以慢病毒包装系统(pVSVG:pMDL:pRev)包装后利用qPCR法测定在293T细胞上的感染滴度,再感染分离培养的牦牛GCs,以qPCR检测GCs中lncRNA ENSBGRT00000000387.1的表达水平,并以流式细胞仪检测GCs的凋亡率,以Western blot和qPCR分别检测促凋亡基因CASPASE3、BAX和抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,由牦牛卵泡中成功扩增出lncRNA ENSBGRT00000000387.1的全长2566 bp序列,将其与LV-EF1a-EGFP-2A载体同源区的片段同源重组,经酶切鉴定及测序验证表明成功构建了重组质粒,将之经慢病毒包装系统包装和浓缩后,在293T细胞的感染效率达(75.77±0.850)%,qPCR测定结果显示该慢病毒滴度为7.32×10^(8)TU·mL^(-1),表明目的lncRNA过表达慢病毒载体成功构建;以该慢病毒感染牦牛卵泡GCs的感染效率达(52.93±1.168)%,qPCR结果显示感染GCs中目的lncRNA表达水平显著升高(P<0.01);流式细胞仪检测发现慢病毒感染组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),促凋亡基因CASPASE3和BAX在mRNA和蛋白水平的表达量显著降低(P<0.01),而抑凋亡基因BCL-2表达量显著升高(P<0.01)。本试验成功构建了lncRNA ENSBGRT00000000387.1慢病毒载体,成功感染牦牛卵泡GCs后发现其具有抑制细胞凋亡的作用,说明其可能在牦牛卵泡功能中发挥作用。

关键词： lncRNA 慢病毒载体颗粒细胞凋亡牦牛

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动力循环中混合工质的应用研究

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电站系统工程 2002年第2期18卷 37-39页

作者：黄锦涛刘齐寿王运路西安交通大学

采用沸点不同的混合物,由于工质吸热蒸发是变温过程,使热源的放热过程与混合工质的吸热过程曲线更好的配合,最大限度降低传热过程不可逆损失,同时热源的放热温度可以大大降低。根据混合工质的特点,设计了以氨-水混合物作为工质电冷联合... 详细信息

采用沸点不同的混合物,由于工质吸热蒸发是变温过程,使热源的放热过程与混合工质的吸热过程曲线更好的配合,最大限度降低传热过程不可逆损失,同时热源的放热温度可以大大降低。根据混合工质的特点,设计了以氨-水混合物作为工质电冷联合生产的新型热力循环,它可以利用低温热源。经济性分析证明,该系统循环效率比单一工质效率高。

关键词：热力循环氨-水混合物地热能混合工质动力循环热力性质地热发电

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分布式数据检测与控制系统 IMP数据转换器的原理与应用

分布式数据检测与控制系统 IMP数据转换器的原理与应用

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1991年

作者：宋又祥孙实文王运路等

介绍了数-模和模-数转换技术、数据通信技术,讨论了IMP分布式数据转换器及其通信网络的电路原理与技术特点等。

关键词：数模转换器,IMP 模数转换器,IMP

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转染miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响

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中国兽医杂志 2023年第3期59卷 46-50页

作者：孟朝轶王玉恒徐业芬王运路罗浩月郭慧李惠侠西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 西藏自治区兽医生物药品制造厂西藏拉萨850004 南京农业大学动物科技学院江苏南京210014

为探究miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞(GCs)增殖和激素分泌的影响,本试验通过体外分离培养牦牛卵泡GCs,分别转染miR-106a模拟物(miR-106a mimics)和miR-106a抑制剂(miR-106a inhibitors),利用CCK-8法检测GCs细胞增殖,ELISA法分别检测雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)激素分泌情况。结果显示,与对照组相比,24、48、72和96 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组牦牛GCs的细胞增殖受到极显著抑制(P<0.01)。与对照组相比,GCs转染48 h时,miR-106a mimics组E_2分泌量极显著升高,而miR-106a inhibitors组E_2分泌量极显著降低(P<0.01);GCs转染72 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组E_2分泌量均极显著降低(P<0.01);GCs转染48 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组P_4分泌量均极显著降低(P<0.01);而GCs转染72 h时则结果相反,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组P_4分泌量均极显著升高(P<0.01)。结果表明,miR-106a转染牦牛GCs后对细胞增殖和激素分泌具有影响,为其在卵巢卵泡中的研究提供了数据支持。

关键词： miR-106a 颗粒细胞增殖激素牦牛

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论职教本科技术资本转化

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贵州社会科学 2024年第3期 115-119页

作者：陈辉王运来南京大学江苏南京210093 常州纺织服装职业技术学院江苏常州213164

职教本科是健全我国现代职业教育体系和服务国家新发展格局的关键,它的发展定位决定其所开展的人才培养、科学研究、社会服务具有独特性。职教本科应用性、学术性的双重属性决定其具有技术资本转化的办学特质。通过辨析职教本科技术资... 详细信息

职教本科是健全我国现代职业教育体系和服务国家新发展格局的关键,它的发展定位决定其所开展的人才培养、科学研究、社会服务具有独特性。职教本科应用性、学术性的双重属性决定其具有技术资本转化的办学特质。通过辨析职教本科技术资本转化的逻辑理路和应用取向,分析职教本科技术资本转化的价值意蕴,为职教本科的建设和发展提供学理依据。面向未来,牢固树立特色办学理念、深化产教融合办学模式、健全组织激励评价机制、完善过程监督管理,是职教本科技术资本转化的实现路径,也是实现我国本科层次职业教育高质量发展的战略选择。

关键词：职教本科技术资本技术资本转化

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