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二膦酸盐相关颌骨骨坏死发病理论进展

中华口腔医学杂志 2014年第2期49卷 125-126页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院·口腔医院特诊科 100081 北京大学口腔医学院·口腔医院中心实验室 100081

二膦酸盐相关颌骨骨坏死（bisphosphonate—related osteoneerosis of the jaw，BRONJ）是近十年来出现的新型骨代谢相关疾病。BRONJ诊断标准为：①有二膦酸盐治疗史；②口腔内出现暴露的死骨超过8周；③头颈部区域无放射治疗史。BRONJ... 详细信息

二膦酸盐相关颌骨骨坏死（bisphosphonate—related osteoneerosis of the jaw，BRONJ）是近十年来出现的新型骨代谢相关疾病。BRONJ诊断标准为：①有二膦酸盐治疗史；②口腔内出现暴露的死骨超过8周；③头颈部区域无放射治疗史。BRONJ病变很难有效控制，常规的死骨摘除术可能导致BRONJ的进一步恶化，

关键词：颌骨骨坏死二膦酸盐发病理论代谢相关疾病治疗史口腔内头颈部摘除术

建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型并初步分析其发病原因

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北京大学学报（医学版） 2014年第6期46卷 945-949页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院.口腔医院特诊科北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院中心实验室北京100081

目的:建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死(bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw,BRONJ)模型并初步分析其发病原因。方法:用帕米磷酸二钠、地塞米松加牙槽骨创伤(拔牙)的方法在大鼠体内建立了双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型,并分... 详细信息

目的:建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死(bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw,BRONJ)模型并初步分析其发病原因。方法:用帕米磷酸二钠、地塞米松加牙槽骨创伤(拔牙)的方法在大鼠体内建立了双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型,并分析了CD4+和CD90+T淋巴细胞在双膦酸盐相关颌骨骨坏死发病过程中的变化。体外实验利用CCK-8法研究帕米磷酸二钠和地塞米松对人成骨肉瘤细胞MG-63和破骨前体细胞Raw 264.7的作用,初步分析双膦酸盐相关颌骨骨坏死的发病机制。结果:在牙槽骨创伤的前提下,成功地在帕米磷酸二钠和地塞米松联合用药组建立了大鼠BRONJ模型,流式细胞仪分析证实联合使用帕米磷酸二钠和地塞米松比单独应用这两种药物更能降低CD4+和CD90+T淋巴细胞在脾细胞中的比例。CCK-8实验证实帕米磷酸二钠能抑制MG-63及Raw264.7细胞的增殖,地塞米松能增强帕米磷酸二钠对抑制Raw 264.7细胞增殖的作用。结论:成功地建立了大鼠BRONJ模型,并证实了地塞米松可以增强双膦酸盐对破骨前体细胞抑制增殖作用;至少创伤、感染及地塞米松导致的免疫学反应等因素参与了BRONJ的发生和发展。

关键词：双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型动物帕米磷酸二钠地塞米松免疫系统

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人骨髓间质干细胞的培养及成骨功能研究

中华口腔医学杂志 2003年第6期38卷 467-469,C007页

作者：王衣祥李盛林武登诚章魁华于世凤崔胜先北京大学口腔医学院口腔颌面外科实验室 100081 北京大学口腔医学院口腔病理研究室 100081

目的　体外扩增人骨髓间质干细胞 (humanbonemarrow derivedmesonchymalstemcells,hBMMSCs) ,研究其生物学特征及体内、外成骨功能。方法　分离培养hBMMSCs,并对其形态、增殖动力学、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)表达及体内、... 详细信息

目的　体外扩增人骨髓间质干细胞 (humanbonemarrow derivedmesonchymalstemcells,hBMMSCs) ,研究其生物学特征及体内、外成骨功能。方法　分离培养hBMMSCs,并对其形态、增殖动力学、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)表达及体内、外成骨功能进行研究。结果　hBMMSCs可在体外培养扩增 ,群体倍增时间约为 3 5d。ALP检测表明 ,未经矿化诱导的hBMMSCs可表达少量ALP ,诱导后其表达量明显增高。vonkossa染色证实在矿化诱导液作用下hBMMSCs在体外可形成钙结节。体内成骨实验证实 ,1× 10 5个hBMMSCs接种到 30mm3 块状HA/TCP载体移植BALB/C裸小鼠皮下 3个月 ,可观察到层板状骨组织生成。结论　hBMMSCs是一种具有成骨潜能的前体细胞 ,经培养、扩增、诱导后 ,在体外可形成矿化结节 ,体内可在载体表面形成骨组织。

关键词：骨髓间质干细胞 hBMMSCs 成骨功能碱性磷酸酶细胞培养口腔颌面部

联合应用非特异激活的免疫细胞和化疗药物顺铂治疗血管内皮瘤

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北京大学学报（医学版） 2010年第2期42卷 211-215页

作者：王衣祥许振起刘宇李盛林北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科研究室北京100081

目的:探讨联合应用非特异激活的免疫细胞和顺铂治疗血管内皮瘤的可行性。方法:用MTT法和活细胞计数法分别检测顺铂、非特异激活的脾细胞(non-specific activated splenocytes,aSplenocytes)及二者联合应用对小鼠血管内皮瘤细胞EOMA体外... 详细信息

目的:探讨联合应用非特异激活的免疫细胞和顺铂治疗血管内皮瘤的可行性。方法:用MTT法和活细胞计数法分别检测顺铂、非特异激活的脾细胞(non-specific activated splenocytes,aSplenocytes)及二者联合应用对小鼠血管内皮瘤细胞EOMA体外增殖能力的影响。在6周龄雄性BALB/c nu/nu裸鼠背部皮下建立EOMA血管内皮瘤模型,分为对照组、aSplenocytes组、顺铂组及联合用药组,每组5只。联合用药组用1.5×106个aSplenocytes细胞(100μL)进行瘤体内注射,24 h后行顺铂腹腔注射,每周1次,按8 mg/kg体重给药,观测并记录EOMA肿瘤生长情况。结果:体外实验结果显示,EOMA细胞用100μmol/L顺铂处理24 h后,细胞存活率为47.7%±5.9%。EOMA细胞与aSplenocytes(1×105个/mL)直接接触共培养或借助于Transwell间接接触共培养48 h后,细胞存活率分别为42.8%±2.6%和45.3%±2.2%,两组之间差异无统计学意义。当联合应用aSplenocytes和顺铂时,直接接触和间接接触共培养组的EOMA细胞存活率分别为25.0%±2.7%和27.5%±3.8%,两组之间差异无统计学意义。联合用药组与单药组相比,差异均具有明显的统计学意义(P<0.05)。体内实验结果显示,EOMA肿瘤在药物处理18 d后,对照组、aSplenocytes组、顺铂组及联合用药组的肿瘤体积分别为(680.3±68.0)、(825.2±71.8)、(535.3±74.5)和(351.5±79.5)mm3。联合用药组与对照组、aSplenocytes组和顺铂组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05),提示联合应用aSplenocytes和顺铂能明显的抑制EOMA肿瘤生长。结论:aSplenocytes具有增强EOMA细胞对顺铂敏感性的作用。

关键词：血管内皮瘤淋巴细胞活化顺铂免疫疗法脾

尼古丁和牙龈卟啉单胞菌脂多糖影响单核细胞黏附血管内皮细胞的分子机制

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北京大学学报（医学版） 2015年第5期47卷 809-813页

作者：王衣祥安娜欧阳翔英北京大学口腔医学院.口腔医院中心实验室北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院综合二科北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院牙周科北京100081

目的:研究牙龈卟啉单胞菌和尼古丁影响动脉粥样硬化的初步分子机制。方法:在单核细胞U937细胞中,用CCK-8法检测尼古丁、牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)及二者联合对U937细胞增殖能力的影响... 详细信息

目的:研究牙龈卟啉单胞菌和尼古丁影响动脉粥样硬化的初步分子机制。方法:在单核细胞U937细胞中,用CCK-8法检测尼古丁、牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)及二者联合对U937细胞增殖能力的影响;实时定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测尼古丁对P.g-LPS诱导炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6能力的影响。在血管内皮细胞中,用Real-time PCR和蛋白印记杂交实验检测尼古丁、P.g-LPS及二者联合应用对单核细胞趋化因子(C-C模体)配体8[chemokine(C-C motif)ligand 8,CCL-8]和血管细胞黏附因子1(vascular cell adhesion molecule 1,Vcam-1)、非常晚期抗原4α(very late antigen 4 alpha,VLA4α)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4,OX40)和其配体(OX40 ligand,OX40L)的表达的影响。同时,在尼古丁和P.g-LPS共同作用下,用黏附实验检测单核细胞与血管内皮细胞的黏附能力。结果:P.g-LPS并不影响尼古丁促进单核细胞系U937增殖的作用,100μmol/L尼古丁能抑制P.g-LPS诱导U937细胞产生IL-6的能力。在血管内皮细胞中,与对照和单一药物处理相比,尼古丁和P.g-LPS共同作用可以促进其表达CCL-8及Vcam-1、VLA4α、OX40和OX40L。黏附实验结果显示,尼古丁和P.g-LPS共同刺激可以明显提高单核细胞黏附血管内皮细胞的能力。结论:牙龈卟啉单胞菌和尼古丁可能通过上调CCL-8表达募集单核细胞到血管内皮损伤处,并通过增强黏附分子Vcam-1/VLA4α及OX40L/OX40的相互作用,促进单核细胞与血管内皮细胞黏附,参与动脉粥样硬化病损的启动和形成。

关键词：尼古丁牙龈卟啉单胞菌动脉粥样硬化细胞黏附分子

乏氧诱导因子-1α在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用

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北京大学学报（医学版） 2018年第1期50卷 26-32页

作者：李健男冯芝恩王琳王衣祥郭传瑸北京大学口腔医学院.口腔医院综合科口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 首都医科大学附属北京口腔医院口腔颌面头颈肿瘤科北京100050 北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科北京100081

目的:探讨乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用及其在判断预后方面的意义。方法:1993年6月至2010年5月在北京大学口腔医院住院并接受手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌患者... 详细信息

目的:探讨乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用及其在判断预后方面的意义。方法:1993年6月至2010年5月在北京大学口腔医院住院并接受手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌患者125例纳入本次研究,收集所有患者的临床病理学资料,制作组织病理切片,应用免疫组织化学方法检测HIF-1α蛋白的表达情况,根据表达情况分为高表达组和低表达组,主要评估指标为颈淋巴转移率和癌相关生存率(disease-specific survival,DSS)。颈淋巴转移率与各项临床病理学参数的关系比较采用秩和检验,组间及组内癌相关生存率的差异性比较采用Kaplan-Meier分析,并应用COX多因素生存分析对DSS的独立预测因子进行统计分析。所有统计学分析均采用SPSS 17.0软件包完成。结果:随访截止日期为2013年6月1日,生存患者的中位随访时间为73个月,有75例HIF-1α高表达,48例HIF-1α低表达,2例无法评估。秩和检验分析发现,HIF-1α高表达组淋巴转移率显著高于HIF-1α低表达组(58.7%vs.37.5%,P=0.027)。Kaplan-Meier生存分析发现,HIF-1α低表达组患者无病生存率显著高于高表达组(60.4%vs.36.0%,P=0.009),癌相关生存率显著高于高表达组(70.8%vs.46.7%,P=0.005)。多因素生存分析表明,HIF-1α表达(HR=2.164,95%CI:1.150~4.074,P=0.017)和T分期(HR=1.387,95%CI:1.066~1.804,P=0.015)均是判断口腔鳞状细胞癌患者预后的独立预测因子。结论:HIF-1α蛋白表达是预测口腔鳞状细胞癌预后的独立因子,且与颈淋巴转移显著相关,能够作为口腔鳞状细胞癌潜在的分子诊断标志物和靶向治疗靶点。

关键词：乏氧诱导因子1α 癌,鳞状细胞头颈部肿瘤淋巴转移预后

腺病毒介导的P^(53)基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响

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黑龙江医学 2010年第4期34卷 244-246页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院北京100081

目的研究P53基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响。方法以人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83、SACC-LM、ACC-2、ACC-M和NACC为实验对象,将载有人野生型P53cDNA的重组腺病毒(Ad5CMV-P53)感染涎腺腺样囊性癌细胞系,观察Ad5CMV-P53对涎腺腺... 详细信息

目的研究P53基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响。方法以人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83、SACC-LM、ACC-2、ACC-M和NACC为实验对象,将载有人野生型P53cDNA的重组腺病毒(Ad5CMV-P53)感染涎腺腺样囊性癌细胞系,观察Ad5CMV-P53对涎腺腺样囊性癌细胞生长的影响。结果5种涎腺腺样囊性癌细胞系转染Ad5CMV-P53病毒后,均可以诱导其发生凋亡,使细胞系生长受到明显的抑制。结论Ad5CMV-P53介导的野生型P53基因,可能是一种有效的治疗涎腺腺样囊性癌的辅助手段。

关键词：涎腺腺样囊性癌 P53基因腺病毒

体外培养人涎腺多形性腺瘤细胞及表面标记物的初步研究

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科学技术与工程 2012年第17期20卷 4099-4102,4107页

作者：孟超高岩王衣祥李盛林北京大学口腔医学院口腔医院中心实验室北京100081 北京大学口腔医学院口腔医院口腔颌面外科北京100081 北京大学口腔医学院口腔医院口腔病理科北京100081

体外培养人涎腺多形性腺瘤细胞,观察细胞生长及形态特征,探讨体外培养的细胞与原发肿瘤组织的表面标志物表达情况。取15例原发多形性腺瘤进行体外培养,运用免疫组化法检测表面标志物CK5/6、CK7、CK8/18、CK14、CK20、α-SMA、Caplonin、... 详细信息

体外培养人涎腺多形性腺瘤细胞,观察细胞生长及形态特征,探讨体外培养的细胞与原发肿瘤组织的表面标志物表达情况。取15例原发多形性腺瘤进行体外培养,运用免疫组化法检测表面标志物CK5/6、CK7、CK8/18、CK14、CK20、α-SMA、Caplonin、P63及vimentin及肌上皮表面标记物α-SMA、calponin及p63在细胞和肿瘤组织中的表达。结果发现体外培养的多形性腺瘤细胞呈多样形,可同时表达角蛋白、肌上皮表面标记物及波形蛋白。提示体外培养的多形性腺瘤细胞可能大部分来源于肌上皮细胞及导管上皮细胞等,由闰管细胞或者闰管储备细胞分化而来,这为研究涎腺多形性腺瘤肿瘤生物学多样性提供了实验依据。

关键词：多形性腺瘤肌上皮细胞复发

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中华口腔医学杂志 2009年第3期44卷 162-164页

作者：许振起王衣祥孟娟红张伟赵福运刘宇北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科 100081

目的探讨血管内皮细胞生长因子基因用重组腺相关病毒为载体移植制备血管瘤动物模型的可行性。方法构建重组腺相关病毒（recombinant adeo—associated virus，rAAV）介导的人血管内皮细胞生长因子（human vascular endothelial growth f... 详细信息

目的探讨血管内皮细胞生长因子基因用重组腺相关病毒为载体移植制备血管瘤动物模型的可行性。方法构建重组腺相关病毒（recombinant adeo—associated virus，rAAV）介导的人血管内皮细胞生长因子（human vascular endothelial growth factor，hVEGF121）基因（rAAV—hVEGF121），并进行滴度测定。取10只小鼠，每只小鼠于左耳背部给以rAAV—VEGF121 1．0×10^11 VG／50μl，右耳背部给以等体积磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照；隔天观察移植处皮肤颜色变化及肿胀情况，术后2、4、6、8、12周取注射处组织，行组织学检查。结果经酶切鉴定、聚合酶链反应（PCR）及基因测序证实rAAV包装质粒pSNAV—hVEGF121构建成功，经rAAV包装后测定滴度为2×10^15 VG／L。基因移植后2周所有小鼠均可见左耳背部开始发红，之后逐渐形成红色的小包块，12周时小包块面积最大，右耳背部未见变化。病理结果显示2周后移植处组织内新牛血管内皮细胞逐渐增多，8周后内皮细胞排列成血窦样结构，内含红细胞，CD-34染色提示增生细胞主要为血管内皮细胞。结论以重组腺相关病毒为载体的血管内皮细胞生长因子基因移植裸鼠可以产生稳定有效的血管瘤模型。

关键词：血管瘤动物模型血管内皮细胞生长因子