重组腺相关病毒携带人血管内皮细胞生长因子121制备小鼠血管瘤模型的初步探讨

作     者：许振起 王衣祥 孟娟红 张伟 赵福运 刘宇 XU Zhen-qi;WANG Yi-xiang;MENG Juan-hong;ZHANG Wei;ZHAO Fu-yun;LIU Yu

作者机构：北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科100081 

出 版 物：《中华口腔医学杂志》 (Chinese Journal of Stomatology)

年 卷 期：2009年第44卷第3期

页      面：162-164页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30471895) 

主　　题：血管瘤 动物模型 血管内皮细胞生长因子 

摘      要：目的探讨血管内皮细胞生长因子基因用重组腺相关病毒为载体移植制备血管瘤动物模型的可行性。方法构建重组腺相关病毒（recombinant adeo—associated virus，rAAV）介导的人血管内皮细胞生长因子（human vascular endothelial growth factor，hVEGF121）基因（rAAV—hVEGF121），并进行滴度测定。取10只小鼠，每只小鼠于左耳背部给以rAAV—VEGF121 1．0×10^11 VG／50μl，右耳背部给以等体积磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照；隔天观察移植处皮肤颜色变化及肿胀情况，术后2、4、6、8、12周取注射处组织，行组织学检查。结果经酶切鉴定、聚合酶链反应（PCR）及基因测序证实rAAV包装质粒pSNAV—hVEGF121构建成功，经rAAV包装后测定滴度为2×10^15 VG／L。基因移植后2周所有小鼠均可见左耳背部开始发红，之后逐渐形成红色的小包块，12周时小包块面积最大，右耳背部未见变化。病理结果显示2周后移植处组织内新牛血管内皮细胞逐渐增多，8周后内皮细胞排列成血窦样结构，内含红细胞，CD-34染色提示增生细胞主要为血管内皮细胞。结论以重组腺相关病毒为载体的血管内皮细胞生长因子基因移植裸鼠可以产生稳定有效的血管瘤模型。