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二膦酸盐相关颌骨骨坏死发病理论进展

中华口腔医学杂志 2014年第2期49卷 125-126页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院·口腔医院特诊科 100081 北京大学口腔医学院·口腔医院中心实验室 100081

二膦酸盐相关颌骨骨坏死（bisphosphonate—related osteoneerosis of the jaw，BRONJ）是近十年来出现的新型骨代谢相关疾病。BRONJ诊断标准为：①有二膦酸盐治疗史；②口腔内出现暴露的死骨超过8周；③头颈部区域无放射治疗史。BRONJ... 详细信息

二膦酸盐相关颌骨骨坏死（bisphosphonate—related osteoneerosis of the jaw，BRONJ）是近十年来出现的新型骨代谢相关疾病。BRONJ诊断标准为：①有二膦酸盐治疗史；②口腔内出现暴露的死骨超过8周；③头颈部区域无放射治疗史。BRONJ病变很难有效控制，常规的死骨摘除术可能导致BRONJ的进一步恶化，

关键词：颌骨骨坏死二膦酸盐发病理论代谢相关疾病治疗史口腔内头颈部摘除术

建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型并初步分析其发病原因

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北京大学学报（医学版） 2014年第6期46卷 945-949页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院.口腔医院特诊科北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院中心实验室北京100081

目的:建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死(bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw,BRONJ)模型并初步分析其发病原因。方法:用帕米磷酸二钠、地塞米松加牙槽骨创伤(拔牙)的方法在大鼠体内建立了双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型,并分... 详细信息

目的:建立大鼠双膦酸盐相关颌骨骨坏死(bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw,BRONJ)模型并初步分析其发病原因。方法:用帕米磷酸二钠、地塞米松加牙槽骨创伤(拔牙)的方法在大鼠体内建立了双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型,并分析了CD4+和CD90+T淋巴细胞在双膦酸盐相关颌骨骨坏死发病过程中的变化。体外实验利用CCK-8法研究帕米磷酸二钠和地塞米松对人成骨肉瘤细胞MG-63和破骨前体细胞Raw 264.7的作用,初步分析双膦酸盐相关颌骨骨坏死的发病机制。结果:在牙槽骨创伤的前提下,成功地在帕米磷酸二钠和地塞米松联合用药组建立了大鼠BRONJ模型,流式细胞仪分析证实联合使用帕米磷酸二钠和地塞米松比单独应用这两种药物更能降低CD4+和CD90+T淋巴细胞在脾细胞中的比例。CCK-8实验证实帕米磷酸二钠能抑制MG-63及Raw264.7细胞的增殖,地塞米松能增强帕米磷酸二钠对抑制Raw 264.7细胞增殖的作用。结论:成功地建立了大鼠BRONJ模型,并证实了地塞米松可以增强双膦酸盐对破骨前体细胞抑制增殖作用;至少创伤、感染及地塞米松导致的免疫学反应等因素参与了BRONJ的发生和发展。

关键词：双膦酸盐相关颌骨骨坏死模型动物帕米磷酸二钠地塞米松免疫系统

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富血小板血浆促进人牙髓细胞的体内矿化潜能

北京大学学报（医学版） 2011年第2期43卷 276-279页

作者：刘中宁姜婷王衣祥北京大学口腔医学院.口腔医院修复科北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科实验室北京100081

目的:检测富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)作为人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)组织工程学支架的生物相容性,并探讨PRP促进DPCs矿化的作用。方法:应用经典的两步离心法制取PRP;分离培养DPCs,并经细胞角蛋白、波形蛋白染色... 详细信息

目的:检测富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)作为人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)组织工程学支架的生物相容性,并探讨PRP促进DPCs矿化的作用。方法:应用经典的两步离心法制取PRP;分离培养DPCs,并经细胞角蛋白、波形蛋白染色鉴定细胞来源。实验分为4组,将PRP和第4代DPCs复合激活后,植入8只5周龄雌性裸鼠背部皮下作为实验组,将单独植入DPCs或PRP做为对照组,将单纯手术组做为空白对照。分别于植入术后4周、8周处死动物,将生成物制成组织学切片进行HE染色和免疫组织化学染色。结果:植入4周、8周后,DPCs复合PRP组在裸鼠皮下均可见白色生成物,单独植入DPCs或PRP组未见生成物。DPCs复合PRP组HE染色可见矿化组织形成,免疫组织化学染色显示骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OC)和Ⅰ型胶原(COLⅠ)阳性表达。结论:富血小板血浆与人牙髓细胞有良好生物相容性,并对人牙髓细胞有诱导矿化作用,提示富血小板血浆可以作为盖髓治疗的支架应用。

关键词：血小板牙髓牙再矿化核基质细胞

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人骨髓间质干细胞的培养及成骨功能研究

中华口腔医学杂志 2003年第6期38卷 467-469,C007页

作者：王衣祥李盛林武登诚章魁华于世凤崔胜先北京大学口腔医学院口腔颌面外科实验室 100081 北京大学口腔医学院口腔病理研究室 100081

目的　体外扩增人骨髓间质干细胞 (humanbonemarrow derivedmesonchymalstemcells,hBMMSCs) ,研究其生物学特征及体内、外成骨功能。方法　分离培养hBMMSCs,并对其形态、增殖动力学、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)表达及体内、... 详细信息

目的　体外扩增人骨髓间质干细胞 (humanbonemarrow derivedmesonchymalstemcells,hBMMSCs) ,研究其生物学特征及体内、外成骨功能。方法　分离培养hBMMSCs,并对其形态、增殖动力学、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)表达及体内、外成骨功能进行研究。结果　hBMMSCs可在体外培养扩增 ,群体倍增时间约为 3 5d。ALP检测表明 ,未经矿化诱导的hBMMSCs可表达少量ALP ,诱导后其表达量明显增高。vonkossa染色证实在矿化诱导液作用下hBMMSCs在体外可形成钙结节。体内成骨实验证实 ,1× 10 5个hBMMSCs接种到 30mm3 块状HA/TCP载体移植BALB/C裸小鼠皮下 3个月 ,可观察到层板状骨组织生成。结论　hBMMSCs是一种具有成骨潜能的前体细胞 ,经培养、扩增、诱导后 ,在体外可形成矿化结节 ,体内可在载体表面形成骨组织。

关键词：骨髓间质干细胞 hBMMSCs 成骨功能碱性磷酸酶细胞培养口腔颌面部

联合应用非特异激活的免疫细胞和化疗药物顺铂治疗血管内皮瘤

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北京大学学报（医学版） 2010年第2期42卷 211-215页

作者：王衣祥许振起刘宇李盛林北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科研究室北京100081

目的:探讨联合应用非特异激活的免疫细胞和顺铂治疗血管内皮瘤的可行性。方法:用MTT法和活细胞计数法分别检测顺铂、非特异激活的脾细胞(non-specific activated splenocytes,aSplenocytes)及二者联合应用对小鼠血管内皮瘤细胞EOMA体外... 详细信息

目的:探讨联合应用非特异激活的免疫细胞和顺铂治疗血管内皮瘤的可行性。方法:用MTT法和活细胞计数法分别检测顺铂、非特异激活的脾细胞(non-specific activated splenocytes,aSplenocytes)及二者联合应用对小鼠血管内皮瘤细胞EOMA体外增殖能力的影响。在6周龄雄性BALB/c nu/nu裸鼠背部皮下建立EOMA血管内皮瘤模型,分为对照组、aSplenocytes组、顺铂组及联合用药组,每组5只。联合用药组用1.5×106个aSplenocytes细胞(100μL)进行瘤体内注射,24 h后行顺铂腹腔注射,每周1次,按8 mg/kg体重给药,观测并记录EOMA肿瘤生长情况。结果:体外实验结果显示,EOMA细胞用100μmol/L顺铂处理24 h后,细胞存活率为47.7%±5.9%。EOMA细胞与aSplenocytes(1×105个/mL)直接接触共培养或借助于Transwell间接接触共培养48 h后,细胞存活率分别为42.8%±2.6%和45.3%±2.2%,两组之间差异无统计学意义。当联合应用aSplenocytes和顺铂时,直接接触和间接接触共培养组的EOMA细胞存活率分别为25.0%±2.7%和27.5%±3.8%,两组之间差异无统计学意义。联合用药组与单药组相比,差异均具有明显的统计学意义(P<0.05)。体内实验结果显示,EOMA肿瘤在药物处理18 d后,对照组、aSplenocytes组、顺铂组及联合用药组的肿瘤体积分别为(680.3±68.0)、(825.2±71.8)、(535.3±74.5)和(351.5±79.5)mm3。联合用药组与对照组、aSplenocytes组和顺铂组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05),提示联合应用aSplenocytes和顺铂能明显的抑制EOMA肿瘤生长。结论:aSplenocytes具有增强EOMA细胞对顺铂敏感性的作用。

关键词：血管内皮瘤淋巴细胞活化顺铂免疫疗法脾

尼古丁和牙龈卟啉单胞菌脂多糖影响单核细胞黏附血管内皮细胞的分子机制

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北京大学学报（医学版） 2015年第5期47卷 809-813页

作者：王衣祥安娜欧阳翔英北京大学口腔医学院.口腔医院中心实验室北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院综合二科北京100081 北京大学口腔医学院.口腔医院牙周科北京100081

目的:研究牙龈卟啉单胞菌和尼古丁影响动脉粥样硬化的初步分子机制。方法:在单核细胞U937细胞中,用CCK-8法检测尼古丁、牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)及二者联合对U937细胞增殖能力的影响... 详细信息

目的:研究牙龈卟啉单胞菌和尼古丁影响动脉粥样硬化的初步分子机制。方法:在单核细胞U937细胞中,用CCK-8法检测尼古丁、牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)及二者联合对U937细胞增殖能力的影响;实时定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测尼古丁对P.g-LPS诱导炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6能力的影响。在血管内皮细胞中,用Real-time PCR和蛋白印记杂交实验检测尼古丁、P.g-LPS及二者联合应用对单核细胞趋化因子(C-C模体)配体8[chemokine(C-C motif)ligand 8,CCL-8]和血管细胞黏附因子1(vascular cell adhesion molecule 1,Vcam-1)、非常晚期抗原4α(very late antigen 4 alpha,VLA4α)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4,OX40)和其配体(OX40 ligand,OX40L)的表达的影响。同时,在尼古丁和P.g-LPS共同作用下,用黏附实验检测单核细胞与血管内皮细胞的黏附能力。结果:P.g-LPS并不影响尼古丁促进单核细胞系U937增殖的作用,100μmol/L尼古丁能抑制P.g-LPS诱导U937细胞产生IL-6的能力。在血管内皮细胞中,与对照和单一药物处理相比,尼古丁和P.g-LPS共同作用可以促进其表达CCL-8及Vcam-1、VLA4α、OX40和OX40L。黏附实验结果显示,尼古丁和P.g-LPS共同刺激可以明显提高单核细胞黏附血管内皮细胞的能力。结论:牙龈卟啉单胞菌和尼古丁可能通过上调CCL-8表达募集单核细胞到血管内皮损伤处,并通过增强黏附分子Vcam-1/VLA4α及OX40L/OX40的相互作用,促进单核细胞与血管内皮细胞黏附,参与动脉粥样硬化病损的启动和形成。

关键词：尼古丁牙龈卟啉单胞菌动脉粥样硬化细胞黏附分子

低细胞密度状态下的人骨髓间质干细胞成骨能力研究

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现代口腔医学杂志 2005年第3期19卷 277-280页

作者：王衣祥李盛琳武登诚章魁华北京大学口腔医学院 100081

目的　研究低密度人骨髓间质干细胞(Humanbonemarrow -derivedmesenchymalstemcells,hMSCs)体内成骨能力及影响因素。方法　从人髂骨骨髓分离培养hMSCs。以不同细胞密度与块状和颗粒型磷酸钙陶瓷(HA/TCP)载体混合,移植于裸小鼠体内,分... 详细信息

目的　研究低密度人骨髓间质干细胞(Humanbonemarrow -derivedmesenchymalstemcells,hMSCs)体内成骨能力及影响因素。方法　从人髂骨骨髓分离培养hMSCs。以不同细胞密度与块状和颗粒型磷酸钙陶瓷(HA/TCP)载体混合,移植于裸小鼠体内,分别观察2和3个月,组织学评价研究hMSCs异体体内成骨的最小细胞密度。按3.3×1 0 6个细胞/cm3 载体的比例混合细胞与载体(HA/TCP和鼠尾胶原包被的HA/TCP) ,体外共培养一周后移植裸鼠皮下,3个月后,组织学评价细胞载体体系体外培养和胶原包被载体对hMSCs体内成骨能力的影响。结果　只有以3.3×1 0 6个细胞/cm3 载体在体内移植3个月后可观察到在块状和颗粒HA/TCP表面有骨组织生成。用鼠尾胶原包被的颗粒HA/TCP和细胞与载体体外共培养并无明显促进骨组织生成作用。结论　保证hMSCs异体成骨的最小细胞密度为3.3×1 0 6个细胞/cm3 载体。在低密度hMSCs状态下,鼠尾胶原和细胞与载体体外共培养并不能提高hMSCs的成骨能力。

关键词：人骨髓间质干细胞成骨能力细胞密度状态 HA/TCP hMSCs 体外共培养组织学评价鼠尾胶原 cells 磷酸钙陶瓷分离培养体内成骨混合细胞包被载体细胞载体体内移植生成作用骨组织颗粒型裸小鼠块状异体

乏氧诱导因子-1α在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用

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北京大学学报（医学版） 2018年第1期50卷 26-32页

作者：李健男冯芝恩王琳王衣祥郭传瑸北京大学口腔医学院.口腔医院综合科口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 首都医科大学附属北京口腔医院口腔颌面头颈肿瘤科北京100050 北京大学口腔医学院.口腔医院口腔颌面外科北京100081

目的:探讨乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用及其在判断预后方面的意义。方法:1993年6月至2010年5月在北京大学口腔医院住院并接受手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌患者... 详细信息

目的:探讨乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达在口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移中的作用及其在判断预后方面的意义。方法:1993年6月至2010年5月在北京大学口腔医院住院并接受手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌患者125例纳入本次研究,收集所有患者的临床病理学资料,制作组织病理切片,应用免疫组织化学方法检测HIF-1α蛋白的表达情况,根据表达情况分为高表达组和低表达组,主要评估指标为颈淋巴转移率和癌相关生存率(disease-specific survival,DSS)。颈淋巴转移率与各项临床病理学参数的关系比较采用秩和检验,组间及组内癌相关生存率的差异性比较采用Kaplan-Meier分析,并应用COX多因素生存分析对DSS的独立预测因子进行统计分析。所有统计学分析均采用SPSS 17.0软件包完成。结果:随访截止日期为2013年6月1日,生存患者的中位随访时间为73个月,有75例HIF-1α高表达,48例HIF-1α低表达,2例无法评估。秩和检验分析发现,HIF-1α高表达组淋巴转移率显著高于HIF-1α低表达组(58.7%vs.37.5%,P=0.027)。Kaplan-Meier生存分析发现,HIF-1α低表达组患者无病生存率显著高于高表达组(60.4%vs.36.0%,P=0.009),癌相关生存率显著高于高表达组(70.8%vs.46.7%,P=0.005)。多因素生存分析表明,HIF-1α表达(HR=2.164,95%CI:1.150~4.074,P=0.017)和T分期(HR=1.387,95%CI:1.066~1.804,P=0.015)均是判断口腔鳞状细胞癌患者预后的独立预测因子。结论:HIF-1α蛋白表达是预测口腔鳞状细胞癌预后的独立因子,且与颈淋巴转移显著相关,能够作为口腔鳞状细胞癌潜在的分子诊断标志物和靶向治疗靶点。

关键词：乏氧诱导因子1α 癌,鳞状细胞头颈部肿瘤淋巴转移预后

腺病毒介导的P^(53)基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响

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黑龙江医学 2010年第4期34卷 244-246页

作者：马泽云王衣祥北京大学口腔医学院北京100081

目的研究P53基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响。方法以人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83、SACC-LM、ACC-2、ACC-M和NACC为实验对象,将载有人野生型P53cDNA的重组腺病毒(Ad5CMV-P53)感染涎腺腺样囊性癌细胞系,观察Ad5CMV-P53对涎腺腺... 详细信息

目的研究P53基因对涎腺腺样囊性癌细胞系生长的影响。方法以人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83、SACC-LM、ACC-2、ACC-M和NACC为实验对象,将载有人野生型P53cDNA的重组腺病毒(Ad5CMV-P53)感染涎腺腺样囊性癌细胞系,观察Ad5CMV-P53对涎腺腺样囊性癌细胞生长的影响。结果5种涎腺腺样囊性癌细胞系转染Ad5CMV-P53病毒后,均可以诱导其发生凋亡,使细胞系生长受到明显的抑制。结论Ad5CMV-P53介导的野生型P53基因,可能是一种有效的治疗涎腺腺样囊性癌的辅助手段。

关键词：涎腺腺样囊性癌 P53基因腺病毒