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马铃薯‘华颂66号’遗传转化体系的建立

中国农业大学学报 2024年第1期29卷 21-30页

作者：武小娟吴娟王沛捷聂虎帅刘杰魏巍马艳红内蒙古农业大学农学院呼和浩特010019 内蒙古华颂农业科技有限公司内蒙古赤峰025150 内蒙古田颂现代农业有限公司呼和浩特010010

为探究马铃薯的最佳遗传转化体系,以紫色马铃薯‘华颂66号’无菌组培苗茎段为外植体,用农杆菌介导法将含有植物沉默载体质粒pBWA(V)KS-miR8019转化马铃薯外植体,测定不同预培养时间、不同激素组合及抗生素对马铃薯愈伤再生转化体系的影... 详细信息

为探究马铃薯的最佳遗传转化体系,以紫色马铃薯‘华颂66号’无菌组培苗茎段为外植体,用农杆菌介导法将含有植物沉默载体质粒pBWA(V)KS-miR8019转化马铃薯外植体,测定不同预培养时间、不同激素组合及抗生素对马铃薯愈伤再生转化体系的影响。结果表明:1)茎段预培养时间为2 d时,愈伤组织诱导率最高;2)最适的外植体愈伤组织诱导的培养基配方为:MS干粉式培养基+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,愈伤组织的诱导率为96.7%。最适愈伤组织分化的培养基为:MS干粉式培养基+4.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;3)植株再生及生根的抗生素最适筛选浓度为75 mg/L的卡那霉素;4)农杆菌抑制剂的最适浓度为300 mg/L的特美汀,且在愈伤组织诱导、分化及生根阶段都需要加入。综上,通过对农杆菌介导的愈伤再生转化过程中各个影响因素进行试验,初步建立了马铃薯‘华颂66号’的遗传转化体系。

关键词：紫色马铃薯华颂66号农杆菌介导遗传转化体系

蒙古冰草NF-Y转录因子家族基因的生物信息学分析

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分子植物育种 2024年

作者：杜晓红马艳红王沛捷范菠菠李坤白银煜刘金泉闫秀秀吴婧内蒙古农业大学农学院

为分析蒙古冰草(Agropyron mongolicum Keng)中参与干旱胁迫响应相关的NF-Y家族基因的序列特征，本研究基于转录组测序数据筛选蒙古冰草NF-Y家族基因并对其进行生物信息学分析。结果表明：共获得15个蒙古冰草NF-Y转录因子，编码的氨基... 详细信息

为分析蒙古冰草(Agropyron mongolicum Keng)中参与干旱胁迫响应相关的NF-Y家族基因的序列特征，本研究基于转录组测序数据筛选蒙古冰草NF-Y家族基因并对其进行生物信息学分析。结果表明：共获得15个蒙古冰草NF-Y转录因子，编码的氨基酸长度为107～289 aa；有3个基因定位于叶绿体，10个基因定位于细胞核，2个基因既存在于细胞核也存在于细胞质，且均不含有跨膜结构；蒙古冰草NF-Y基因家族成员中存在大量的磷酸化位点。根据系统进化树分析，将15个蒙古冰草NF-Y家族基因分为7个亚族，其中AmNFYC2、AmNFYC6-2、AmNFYC6-1和AmNFYA5-1基因与已知具有抗旱功能的NF-Y家族蛋白的亲缘关系较近，且蛋白质二、三级结构主要是以无规则卷曲和α-螺旋为主；对不同干旱处理条件下基因的表达量分析发现，有2个基因的表达量随干旱处理时间的延长呈上调趋势，有5个基因的表达量随干旱处理时间的延长呈下调趋势。本试验为蒙古冰草NF-Y家族成员后续的基因功能鉴定奠定基础。

关键词：蒙古冰草 NF-Y转录因子生物信息学干旱胁迫

紫色马铃薯bHLH转录因子家族基因的鉴定及表达分析

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基因组学与应用生物学 2022年第3期41卷 601-616页

作者：王沛捷马艳红武小娟范菠菠赵娜勤内蒙古农业大学农学院呼和浩特010019

bHLH转录因子家族是第二大转录因子家族,在植物生长发育、花青素生物合成途径的调控、逆境胁迫响应等发挥重要作用。为挖掘马铃薯(Solanum tuberosum)的紫色块茎花青素合成相关的bHLH基因,本研究基于紫色马铃薯转录组测序数据筛选bHLH基... 详细信息

bHLH转录因子家族是第二大转录因子家族,在植物生长发育、花青素生物合成途径的调控、逆境胁迫响应等发挥重要作用。为挖掘马铃薯(Solanum tuberosum)的紫色块茎花青素合成相关的bHLH基因,本研究基于紫色马铃薯转录组测序数据筛选bHLH基因,通过生物信息学方法对其进行序列分析,对bHLH基因在不同时期的表达与功能进行分析与预测,并通过RT-qPCR技术分析花青素合成相关的5个bHLH基因在不同发育时期的表达水平。结果表明:紫色马铃薯中筛选出103个bHLH基因,编码的蛋白大小在129~699 aa,等电点在4.65~9.75,均为亲水性蛋白;碱性区域由15个碱性氨基酸组成,均有高度保守的H5-E9-R12序列(His5-Glu9-Arg12),两个螺旋区内含有高度保守的亮氨酸(L)、精氨酸(R)和缬氨酸(V);基序预测得到2个保守基序,最长的基序含35个氨基酸;有36个bHLH基因在整个生育期呈下调表达、有67个bHLH基因呈上调表达,其中41个bHLH基因在3个发育时期差异表达显著;103个紫色马铃薯bHLH基因与拟南芥(Arabidopsis thaliana)bHLH基因聚类为13个亚族;GO富集分析发现103个bHLH基因广泛参与花青素生物合成、防御反应、生长发育等72项功能,其中参与花青素和类黄酮合成的bHLH基因有5个,其RT-qPCR结果与测序表达一致。

关键词：紫色马铃薯 bHLH转录因子基因序列差异表达分析 RT-qPCR

紫色马铃薯bZIP转录因子家族鉴定与表达分析

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分子植物育种 2023年

作者：武小娟吴娟王沛捷聂虎帅郑子凡刘杰马艳红内蒙古农业大学农学院内蒙古华颂农业科技有限公司

bZIP (Basic leucine zipper)转录因子家族在植物生长发育、光的形态建成和逆境胁迫响应中发挥关键作用。本研究基于不同发育时期的紫色马铃薯块茎转录组测序数据，对块茎发育过程中差异表达bZIP转录因子进行筛选，并对其保守结构域、... 详细信息

bZIP (Basic leucine zipper)转录因子家族在植物生长发育、光的形态建成和逆境胁迫响应中发挥关键作用。本研究基于不同发育时期的紫色马铃薯块茎转录组测序数据，对块茎发育过程中差异表达bZIP转录因子进行筛选，并对其保守结构域、氨基酸理化性质、亚细胞定位、家族系统发育进化分析；同时对差异表达显著的bZIP转录因子进行表达分析和启动子元件预测。结果表明，基于转录组测序数据，筛选得到11个紫色马铃薯bZIP类转录因子，编码的蛋白大小为158～414 aa，等电点为6.14～9.78，均为亲水蛋白，所有bZIP类转录因子均位于细胞核中。保守结构域分析显示，bZIP转录因子由碱性区域(N-x7-R/K)和亮氨酸拉链区域(x9-L-x6-L-x6-L)两部分组成。进化树分析结果与拟南芥bZIP基因家族分成了5个大簇、11个小簇。在不同发育时期，有2个bZIP基因在整个生育期呈下调表达、有5个bZIP基因呈上调表达。启动子顺式作用元件分析预测出与植物生长发育、非生物胁迫及光反应等相关元件20种。本研究为下一步紫色马铃薯生长发育、胁迫响应机制及花青素生物合成提供参考。

关键词：紫色马铃薯转录组测序 bZIP基因家族生物信息学分析

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紫色马铃薯SPL转录因子家族基因识别

分子植物育种 2023年

作者：李楠马艳红武小娟张志成谢锐吴娟王沛捷孟涛鲁思琪内蒙古自治区农牧业科学院乌兰察布市农林科学研究所内蒙古农业大学农学院

SPL基因是植物特有的一类转录因子，在植物生长发育、次生代谢和生物胁迫等方面都发挥着重要的调节作用。为挖掘紫色马铃薯花青素生物合成及生长发育相关的SPL基因，本研究基于紫色马铃薯不同生育时期块茎的转录组测序数据筛选SPL基因... 详细信息

SPL基因是植物特有的一类转录因子，在植物生长发育、次生代谢和生物胁迫等方面都发挥着重要的调节作用。为挖掘紫色马铃薯花青素生物合成及生长发育相关的SPL基因，本研究基于紫色马铃薯不同生育时期块茎的转录组测序数据筛选SPL基因，对其进行理化性质分析、亚细胞定位预测、保守基序分析、进化关系及启动子顺式作用元件分析，并对SPL基因进行功能预测。结果显示，紫色马铃薯中筛选出的29个SPL转录因子，编码的蛋白质大小为64 aa～1 071 aa，分子量分别为7.1 kD～119.0 kD，疏水性为负值，均为亲水蛋白，等电点(pI)介于5.27～9.39之间；25个SPL转录因子均位于细胞核；22个SPL基因具有完整的SBP-box保守结构域，并且推测motif1，motif2，motif3为保守基序；系统进化树将29个SPL转录因子分为8个亚族；启动子顺式作用元件共分析预测出植物生长发育、非生物胁迫及次生代谢等相关元件20种。本研究从基因组及转录组水平上鉴别和分析了马铃薯SPL转录因子家族，为深入研究紫色马铃薯SPL家族转录因子的功能提供参考。

关键词：紫色马铃薯转录组测序 SPL基因家族生物信息学分析

西周格(霸)姬簋中的立君争讼与“先王之刑”

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陕西师范大学学报(哲学社会科学版) 2024年第3期053卷 39-48页

作者：王沛华东政法大学法律古籍研究所

格(霸)姬簋铭文事关西周霸氏立君之争。格(霸)姬主张其子为君，晋人伸主张其甥为君。王朝贵族鬼、■叔、鼏父、师父、微史共同审讯此案，之后将相关情况陈告伯偯父，伯偯父进行裁决。宣判由史官系统之长尹氏做出，其下属史官告知格(霸)... 详细信息

格(霸)姬簋铭文事关西周霸氏立君之争。格(霸)姬主张其子为君，晋人伸主张其甥为君。王朝贵族鬼、■叔、鼏父、师父、微史共同审讯此案，之后将相关情况陈告伯偯父，伯偯父进行裁决。宣判由史官系统之长尹氏做出，其下属史官告知格(霸)姬。尹氏及其下属保子津在对格(霸)姬的嘉勉礼仪中宣布判决结果，实际是对格(霸)姬及其子合法拥有霸氏首领地位的宣示。格(霸)姬簋铭文显示在审判环节要依据“先王之刑”的做法，将金文中有关遵循“先王之刑”表述的年代提前到了周穆王、周恭王时代。不仅如此，格(霸)姬簋铭文还是目前所见在审判实践中运用“先王之刑”的唯一实例。山西大河口2002号墓地出土的格(霸)姬簋与霸姬盘、盉铭文显示了周穆王时期王朝法权全面扩张的现象，这种扩张包含有立法与司法两个方面，并与周穆王时期的法制变革相关。

关键词：格(霸)姬簋 “先王之刑” 君位继承法制变革

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彩色马铃薯花青素生物合成相关microRNAs及其靶基因表达分析

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植物遗传资源学报 2022年第6期23卷 1856-1866页

作者：武小娟谢锐吴娟王沛捷胡蒙姜超孟涛于佳乐郑子凡马艳红内蒙古农业大学农学院呼和浩特010019 内蒙古自治区农牧业科学院呼和浩特010031 呼伦贝尔学院内蒙古呼伦贝尔021008

MicroRNAs(miRNAs)是植物中具有调控功能的非编码小RNA,可调节植物生长发育、次生代谢及胁迫响应。为挖掘彩色马铃薯花青素合成相关的miRNAs,本研究基于miRNA和降解组测序数据,对筛选出和花青素相关的miRNA及靶基因进行鉴定,分析其理化... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是植物中具有调控功能的非编码小RNA,可调节植物生长发育、次生代谢及胁迫响应。为挖掘彩色马铃薯花青素合成相关的miRNAs,本研究基于miRNA和降解组测序数据,对筛选出和花青素相关的miRNA及靶基因进行鉴定,分析其理化性质、蛋白质结构、调控关系及在不同彩色马铃薯品种的表达。结果表明:stu-miR156a_R-1_StSPL9、stu-miR828_StMYB3、stu-miR858_StMYB4、stu-miR5021_StMYB在马铃薯块茎的不同发育时期存在显著的负相关关系。不同彩色马铃薯品种中,stu-miR828负调控靶基因StMYB3,抑制花青素合成;stu-miR156a_R-1负调控靶基因StSPL9,促进花青素合成。stu-miR858负调控靶基因StMYB4,在紫色马铃薯中促进花青素合成,在红色马铃薯中抑制花青素合成。stu-miR5021负调控靶基因StMYB,在紫色马铃薯中抑制花青素合成,在红色马铃薯中促进花青素合成。

关键词：彩色马铃薯 miRNAs 靶基因基因表达

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跨年夜

长江文艺 2024年第6期 146-155页

作者：王沛北京理工大学

这是一部关于青春的作品。离开学校没多久的“我”,跨年夜,孤身一人在他乡,事业不顺,爱情遇挫,种种因素叠加在一起,将“我”的世界击得粉碎。“我”因此变成了一个守着残砖断瓦的颓丧至极的精神上的流浪者,这个世界的喧闹,甚至众人对新... 详细信息

这是一部关于青春的作品。离开学校没多久的“我”,跨年夜,孤身一人在他乡,事业不顺,爱情遇挫,种种因素叠加在一起,将“我”的世界击得粉碎。“我”因此变成了一个守着残砖断瓦的颓丧至极的精神上的流浪者,这个世界的喧闹,甚至众人对新年钟声的期盼都无法抚慰“我”内心的孤独与冰冷,而一个偶然的相遇,一次全力以赴的找寻,一句发自内心的感谢,便可以穿透阴霾,助“我”重建自我的世界。

关键词：新年钟声流浪者跨年全力以赴

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乡村数字农业发展机理与优化路径研究

农业经济 2024年第5期 3-6页

作者：王沛武汉理工大学管理学院湖北武汉430070

建设数字乡村,发展数字农业,不仅是实施乡村全面振兴战略的保障,也是建设数字化国家的必经路径。我国正在走乡村数字化转型和发展道路,创新数字农业发展模式和形态已经变为主要导向,且乡村农业建设更是需要数字化技术应用。因此需要深... 详细信息

建设数字乡村,发展数字农业,不仅是实施乡村全面振兴战略的保障,也是建设数字化国家的必经路径。我国正在走乡村数字化转型和发展道路,创新数字农业发展模式和形态已经变为主要导向,且乡村农业建设更是需要数字化技术应用。因此需要深入研究乡村数字农业发展机理,明晰乡村数字农业发展的主要问题,探索能促进乡村数字农业发展的优化路径,为乡村发展注入新动力和提供重要保障。

关键词：乡村振兴数字农业发展机理优化路径