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牡蛎疱疹病毒结构蛋白真核表达系统构建及多聚化特性

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水产学报 2024年第5期48卷 65-74页

作者：曹书华魏茂乐李永仁黄博闻辛鲁生白昌明王崇明天津农学院水产学院天津市水产生态及养殖重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室

牡蛎疱疹病毒(OsHV-1)在全球范围内导致牡蛎、扇贝与蚶类的大规模死亡，成为双壳贝类养殖产业的重要威胁。为了解OsHV-1的结构与致病机制。本研究利用人胚胎肾细胞(HEK293t)，构建OsHV-1主要核衣壳蛋白(ORF104和ORF33)的真核表达系统，... 详细信息

牡蛎疱疹病毒(OsHV-1)在全球范围内导致牡蛎、扇贝与蚶类的大规模死亡，成为双壳贝类养殖产业的重要威胁。为了解OsHV-1的结构与致病机制。本研究利用人胚胎肾细胞(HEK293t)，构建OsHV-1主要核衣壳蛋白(ORF104和ORF33)的真核表达系统，并对ORF104和ORF33潜在相互作用进行分析。实验首先通过特异性PCR扩增技术得到orf 104和orf 33的基因序列，根据其编码蛋白的理化性质、跨膜区与三维结构等生物信息学分析结果，选择pCDNA3.1(+)构建两种基因的重组表达质粒。重组质粒经大肠杆菌扩增、提取后，利用转染试剂Lipo8000?将pCDNA3.1(+)-orf 104与pCDNA3.1(+)-orf 33分别单独或共转染至HEK293t。然后，将转染后的细胞培养18 h后裂解收集蛋白。最后利用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)与负染电镜检测两种目的蛋白的表达情况。结果显示，实验成功构建了OsHV-1衣壳蛋白ORF104和ORF33的重组表达质粒载体，通过真核细胞表达得到大小约为135与35 ku的目的蛋白。研究表明，表达质粒可在真核表达系统中实现蛋白单独转染与共转染，共转染蛋白间可能存在相互作用的趋势并形成多聚体，其中，ORF33自身即可形成分子质量不同的多聚体。本研究首次利用真核表达系统开展OsHV-1关键结构蛋白的表达，为进一步开展该病毒结构蛋白功能与互作，以及病毒入侵机制研究奠定基础。

关键词：牡蛎疱疹病毒核衣壳蛋白真核表达系统蛋白多聚化

养殖环境及贝源溶藻弧菌MLST分型及其毒力基因、耐药性分析

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渔业科学进展 2024年第1期45卷 211-223页

作者：郑玉东张翔姚梦丽谷莉黄博闻辛鲁生白昌明王崇明唐小千中国海洋大学水产动物病害与免疫学实验室山东青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室山东青岛266071

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是近年来贝类病害中最常见的细菌性病原之一,对贝类养殖产业的健康发展构成严重威胁。本研究旨在分析不同养殖环境水体和贝类组织中,溶藻弧菌的基因变异、毒力基因、耐药性及其分布规律。对12株溶藻弧菌... 详细信息

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是近年来贝类病害中最常见的细菌性病原之一,对贝类养殖产业的健康发展构成严重威胁。本研究旨在分析不同养殖环境水体和贝类组织中,溶藻弧菌的基因变异、毒力基因、耐药性及其分布规律。对12株溶藻弧菌分离株开展多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、毒力因子以及菌株耐药性分析,结果显示,12株溶藻弧菌的序列型(sequence typing,ST)分型互不相同,7株为Pub MLST数据库已经收录的ST型,5株因管家基因的等位基因位点变化而形成新的ST型,贝类养殖环境中的溶藻弧菌具有较高的遗传多样性。12株溶藻弧菌都携带tlh、fur和collagenase三种毒力基因,但均未检测到tdh、trh、toxR和tcpA毒力基因。溶藻弧菌携带毒力因子的种类和数量受地区分布等因素的影响。不同来源的溶藻弧菌均具有多重耐药特征,对青霉素和氨苄西林产生抗性。本研究表明,贝类养殖环境中的溶藻弧菌具有种群复杂、遗传多样性高的特点;不同来源菌株在毒力基因携带和耐药性方面存在较大差异。本研究通过探究不同区域内不同来源的溶藻弧菌遗传变异及耐药性差异,对贝源溶藻弧菌的有效防控提供一定理论参考。

关键词：溶藻弧菌 MLST 毒力基因耐药性分析

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采空区勘察物探技术的应用分析

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2022年第1期 86-89页

作者：王崇明内蒙古自治区有色地质勘查局五一二队内蒙古包头014040

受科学技术进步的影响,我国工业领域获得了空前发展。矿山开采作为工业发展的重要组成部分,也受到了社会各界的广泛关注。在我国矿山开采行业中,采空区是安全事故的多发区域,许多老矿井安全防护设施并不完善,资料、图纸方面也存在严重... 详细信息

受科学技术进步的影响,我国工业领域获得了空前发展。矿山开采作为工业发展的重要组成部分,也受到了社会各界的广泛关注。在我国矿山开采行业中,采空区是安全事故的多发区域,许多老矿井安全防护设施并不完善,资料、图纸方面也存在严重漏洞。为解决这一问题,矿产开采企业管理人员在采空区开采施工中引进了勘察物探技术,以期降低采空区安全事故发生概率。在此基础上,对勘察物探技术应用现状进行分析,结合其应用要点,深入探究勘察物探应用方法,以供矿产企业与施工人员参考。

关键词：采空区勘察物探技术流程方法

多种物探方法在矿区深部地质勘探中的应用效果对比分析研究

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世界有色金属 2022年第5期47卷 106-108页

作者：王崇明内蒙古自治区有色地质勘查局五一二队内蒙古包头014040

组织开展矿区深部地质勘探作业,离不开对专业性技术手段的应用,随着近年来科技工艺创新发展的显著加快,物探技术与勘探方法得到极大丰富。本文以矿区深部地质勘探中对多种物探方法的应用为探讨主题,重点分析磁法勘探、音频大地电磁测探... 详细信息

组织开展矿区深部地质勘探作业,离不开对专业性技术手段的应用,随着近年来科技工艺创新发展的显著加快,物探技术与勘探方法得到极大丰富。本文以矿区深部地质勘探中对多种物探方法的应用为探讨主题,重点分析磁法勘探、音频大地电磁测探以及激发极化勘探三种物探技术的概念、特点与基本理论,并对比分析其在深部地质勘探工作中的应用成效,研究证实,在三种物探技术方法中,激发极化勘探法具有更明显的适用优势,在矿区深部地质勘探作业中的应用成效最佳。

关键词：物探方法矿区深部地质勘探

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HDPE装置新线粉料输送系统的技术改造

合成树脂及塑料 2007年第4期24卷 46-48页

作者：姜平王崇明王喆中国石油兰州石化分公司石油化工厂甘肃兰州730060

分析了高密度聚乙烯装置新建生产线粉料输送系统出现的袋式过滤器压差增大、输送风机进出口压差及电流较高等异常情况,其主要原因是该系统袋式过滤器过滤面积不足及粉料输送风机的进出口管线较长等。采用将袋式过滤器的滤袋换成褶皱袋,... 详细信息

分析了高密度聚乙烯装置新建生产线粉料输送系统出现的袋式过滤器压差增大、输送风机进出口压差及电流较高等异常情况,其主要原因是该系统袋式过滤器过滤面积不足及粉料输送风机的进出口管线较长等。采用将袋式过滤器的滤袋换成褶皱袋,适当改造粉料输送风机的进出口管线等措施,提高了系统的高负荷稳定运行能力。

关键词：高密度聚乙烯粉料输送系统袋式过滤器改造

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CN型活性染料不用碱剂工艺探讨

印染助剂 1997年第4期14卷 17-23页

作者：王崇明上海伊曼纺织化工有限公司

介绍了日本化药ＣＮ型活性染料的结构、特性及应用工艺。

关键词：活性染料棉混纺织物碱剂染色工艺

鲍疱疹病毒原位LAMP检测方法的建立与初步应用

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水产学报 2022年第5期46卷 885-894页

作者：谷莉郑玉东张翔白昌明刘金兰辛鲁生李晨王崇明天津农学院水产学院天津市水产生态及养殖重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室中国海洋大学水产动物病害与免疫学实验室

为精确定位鲍疱疹病毒(HaHV-1)在宿主不同组织器官中的分布，明确HaHV-1的组织亲嗜性和侵染进程，实验基于环介导等温扩增技术(LAMP)和原位杂交技术建立了HaHV-1的原位LAMP检测方法。利用该方法研究了HaHV-1人工感染实验不同时间节点，... 详细信息

为精确定位鲍疱疹病毒(HaHV-1)在宿主不同组织器官中的分布，明确HaHV-1的组织亲嗜性和侵染进程，实验基于环介导等温扩增技术(LAMP)和原位杂交技术建立了HaHV-1的原位LAMP检测方法。利用该方法研究了HaHV-1人工感染实验不同时间节点，病毒在杂色鲍主要器官的分布规律和组织亲嗜性。并对已报道的HaHV-1 LAMP扩增引物进行优化，实现对载玻片上原位固定靶组织内病毒DNA的稳定、特异扩增，筛选最佳显色时间等原位杂交反应条件，最后通过免疫酶标技术分析HaHV-1在组织样本内的分布情况。结果显示，HaHV-1原位LAMP检测方法最适显色时间为60 min。利用该方法对攻毒后24、36、48、60和72 h,HaHV-1在杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺和腹足神经节4种样本的组织分布情况进行检测和分析。病毒阳性信号最早于36 h出现在腹足神经节，48 h在部分外套膜样本中观察到病毒阳性信号，分布局限于外周神经中。在感染实验后期，病毒阳性信号出现在肝胰腺结缔组织中。病毒阳性信号出现的部位常有大量细胞渗出和浸润，渗出的细胞中可见被病毒感染的血淋巴细胞。本研究建立的HaHV-1原位LAMP检测方法，同步实现了高灵敏度和精确定位的功能。该检测方法适用于病毒感染的确诊、不同组织器官的亲嗜性、病毒侵染途径和致病机理等相关研究。

关键词：杂色鲍鲍疱疹病毒原位LAMP 检测方法

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中华人民共和国选举制度

栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式PCR检测方法的建立

丛书名：人民代表大会制度丛书

1970年

作者：王崇明袁瑞良

中华人民共和国选举制度

ISBN: (纸本)7800780201

中华人民共和国选举制度

关键词：中华人民共和国选举制度

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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水产学报 2013年第2期37卷 281-287页

作者：李晨王崇明曲朋黄倢中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室

为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及AVNV的疫情监测,选择AVNV全基因组序列中的保守区段,应用Accelrys gene 2.5软件设计一对巢式引物,用于AVNV的... 详细信息

为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及AVNV的疫情监测,选择AVNV全基因组序列中的保守区段,应用Accelrys gene 2.5软件设计一对巢式引物,用于AVNV的检测。结果显示,引物的扩增片段分别为979和548 bp。实验优化了PCR体系中Mg2+和dNTPs浓度及扩增程序中的退火温度,并建立了完善的AVNV巢式PCR检测技术。研究表明,该PCR检测技术具有较高的敏感性,可稳定检测出5 pg扇贝样品组织总核酸中5×10 copies的病毒粒子。

关键词：栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式PCR