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基于IL-17F/IL-17RC信号通路及M1小胶质细胞探讨“三法三穴”推拿手法即刻镇痛作用的机制

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 116-123页

作者：陈金平刘志凤于天源王厚融张英琦官乾徐亚静杨震杰萨出拉张润龙张汉钰刘家玥孙佳伟北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京医院

目的通过观察“三法三穴”推拿手法对轻型慢性压迫性损伤(minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-17受体C(IL-17RC)、核转录因子-κB激活剂1(Act1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及M1型小胶质细胞表达... 详细信息

目的通过观察“三法三穴”推拿手法对轻型慢性压迫性损伤(minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-17受体C(IL-17RC)、核转录因子-κB激活剂1(Act1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及M1型小胶质细胞表达的影响,探讨推拿对周围神经病理性疼痛的即刻镇痛机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、推拿组,12只/组,结扎右侧坐骨神经复制minor CCI模型。推拿组使用按摩推拿手法模拟仪在大鼠患侧殷门、承山、阳陵泉依次进行点法、拨法、揉法,假手术组及模型组仅抓握束缚,干预1次。采用机械痛实验与冷板实验评价即刻干预后大鼠对机械刺激、冷刺激的反应情况;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠脊髓背角中IL-17F、TRAF6的蛋白表达情况;采用实时荧光PCR(RT-PCR)法检测各组大鼠脊髓背角中IL-17F、IL-17RC、Act1、TRAF6的mRNA表达情况;采用免疫荧光法检测各组大鼠脊髓背角中M1型小胶质细胞平均荧光强度。结果行为学结果显示,干预前,与假手术组比较,模型组、推拿组大鼠机械缩足反射阈值(PMWT)降低,冷敏阈值升高;推拿手法干预后,与模型组比较,推拿组大鼠PMWT升高,冷敏阈值降低;与干预前比较,干预后推拿组大鼠PMWT升高,冷敏阈值降低(均P<0.05)。RT-PCR结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脊髓背角中IL-17F、IL-17RC、TRAF6、Act1的mRNA表达均升高;与模型组比较,推拿组大鼠上述指标mRNA表达均降低(均P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脊髓背角中IL-17F、TRAF6蛋白表达升高;与模型组比较,推拿组大鼠IL-17F、TRAF6蛋白表达降低(均P<0.05)。免疫荧光结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脊髓背角分化簇40(CD40)平均荧光强度增强;与模型组比较,推拿组大鼠CD40平均荧光强度减弱(均P<0.05)。结论“三法三穴”推拿手法干预1次,其机制可能是通过抑制脊髓背角中IL-17F、IL-17RC、Act1、TRAF6的表达及M1型小胶质细胞的活化实现的,从而有即刻镇痛的作用。

关键词：推拿小胶质细胞殷门承山阳陵泉大鼠

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于天源教授临床调神经验总结

云南中医药大学学报 2024年第3期47卷 58-62页

作者：张英琦王厚融刘志凤孙佳伟张汉钰刘家玥于天源北京中医药大学针灸推拿学院北京102401 北京医院北京100730 北京中医药大学东直门医院北京101121 北京中医药大学名师工作坊北京100029

中医治病强调调神、治神,调神在治疗疾病、调养身体的过程中发挥重要作用。于天源教授在治疗以“神伤”为主要病机的各类疾病时强调医者、患者应遵循调神四要点“稳静中调神、守神达调神、调神不扰神、语音诱导调神”,并将此观念融入到... 详细信息

中医治病强调调神、治神,调神在治疗疾病、调养身体的过程中发挥重要作用。于天源教授在治疗以“神伤”为主要病机的各类疾病时强调医者、患者应遵循调神四要点“稳静中调神、守神达调神、调神不扰神、语音诱导调神”,并将此观念融入到针灸、推拿临床调神,既是对中医经典的继承,也是临床创新。针灸调神强调重用背俞加膈俞、头面四穴结合辨证调神,推拿调神强调依次按照放松安神、通经调神、枢机调神、温热养神顺序施用相应手法调神。本文系统总结于教授调神经验,以飨同道。

关键词：针刺调神推拿调神于天源经验

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推拿干预神经根型颈椎病镇痛机制的研究进展

环球中医药 2024年第4期17卷 752-758页

作者：张汉钰王厚融于天源刘家玥张英琦孙佳伟陈金平张润龙杨震杰萨出拉官乾徐亚静北京中医药大学针灸推拿学院 102488 北京医院

神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy, CSR)是颈椎病最常见的临床证型,严重影响了人们的日常生活。推拿作为临床上治疗颈椎病的常用中医外治法之一,疗效肯定。本文对推拿治疗CSR机制进行综述,发现:(1)通过改善颈部的受... 详细信息

神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy, CSR)是颈椎病最常见的临床证型,严重影响了人们的日常生活。推拿作为临床上治疗颈椎病的常用中医外治法之一,疗效肯定。本文对推拿治疗CSR机制进行综述,发现:(1)通过改善颈部的受力结构缓解颈椎失稳、减轻椎间关节的错位及紊乱从而缓解机械压迫,纠正病变解剖结构改善疼痛;(2)通过降低肿瘤细胞坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-1α(interleukin-1α, IL-1α)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)等促炎因子表达,上调白细胞介素-4(interleukin-4, IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)、转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β1等抗炎因子的表达,缓解炎性浸润产生镇痛作用;(3)通过调节外周及中枢β-EP等神经递质的表达,发挥镇痛效果;(4)恢复胸腺T细胞、分化抗原(cluster of differentiation, CD)4^(+)免疫细胞的平衡,以缓解疼痛反应。可见,推拿可通过“多水平—多途径—多靶点”从而发挥对CSR的镇痛作用。本文通过回顾推拿治疗CSR的相关文献,以期为日后临床应用或实验研究提供参考依据。

关键词：推拿神经根型颈椎病镇痛疼痛炎症神经递质细胞免疫

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六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠Ghrelin/GHS-R表达影响的研究

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六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠Ghrelin/GHS-R表达影响的研究

作者：王厚融云南中医药大学

学位级别：硕士

目的:我们在前期研究中发现,六味地黄膏可促进脑性瘫痪(Cerebral Palsy,CP)患儿生长发育,缩短康复疗程,但缺少分子机制的研究。本实验拟通过建立CP幼鼠模型,检测六味地黄膏摩后幼鼠外周与中枢生长激素释放肽(Ghrelin)、生长激素释放激... 详细信息

目的:我们在前期研究中发现,六味地黄膏可促进脑性瘫痪(Cerebral Palsy,CP)患儿生长发育,缩短康复疗程,但缺少分子机制的研究。本实验拟通过建立CP幼鼠模型,检测六味地黄膏摩后幼鼠外周与中枢生长激素释放肽(Ghrelin)、生长激素释放激素受体(Growth Hormone Secretagogue Receptor,GHS-R)蛋白表达的变化,探索六味地黄膏摩促进CP幼鼠生长发育的分子机制,为六味地黄膏发明专利的临床推广奠定实验基础。方法:将108只新生Sprague Dawley(SD)幼鼠按照实验标准严格筛选,剔除雌性及体重偏高或偏低的幼鼠,将符合条件的59只雄性幼鼠随机分为:模型组(n=39)、假手术对照组(n=10)、空白对照组(n=10)。模型组采用左侧颈总动脉结扎联合缺氧法制备脑瘫模型,假手术对照组仅分离左侧颈总动脉不结扎,空白对照组不予处理。将造模成功的SD幼鼠30只随机分为3个亚组:六味地黄膏摩组(n=10)、润肤油对照组(n=10)、模型对照组(n=10)。六味地黄膏摩组和润肤油对照组行推拿干预,六味地黄膏摩组采用六味地黄膏作为推拿介质,润肤油对照组采用市售强生婴儿润肤油作为推拿介质,其余三组不予推拿干预,仅在六味地黄膏摩组和润肤油对照组推拿干预同时与母鼠分笼饲养。相同时间点记录体重、身长、尾长、睁眼时间,进行步态分析、疲劳转棒实验,检测外周血液、中枢下丘脑组织Ghrelin与GHS-R的蛋白表达变化。数据采用单因素方差分析、LSD检验进行统计分析,P﹤0.05时,差异具有统计学意义;P﹤0.01时,差异具有显著统计学意义。结果:1.造模后,采用翻正实验验证造模情况,模型组12.550±5.287s,与假手术对照组(1.340±0.323s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与空白对照组(1.436±0.209s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。2.四周后,六味地黄膏摩组体重114.92±2.79g,与润肤油对照组(99.93±4.43g)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与模型对照组(85.96±3.23g)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与假手术对照组(111.71±3.17g)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。与空白对照组(111.77±3.68g)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。六味地黄膏摩组身尾长30.83±0.61cm,与润肤油对照组(28.78±0.62cm)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与模型对照组(26.50±0.79cm)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与假手术对照组(30.75±0.53cm)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。与空白对照组(30.71±0.72cm)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组睁眼时间14.2±0.42d,与润肤油对照组(15±1.05d)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。与模型对照组(16.4±1.58d)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。与假手术对照组(11.9±0.32d)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与空白对照组(11.8±0.42d)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。3.四周后,采用步态分析评定幼鼠运动功能、疲劳转棒实验评定幼鼠平衡能力。六味地黄膏摩组运动速度35.725±1.626cm/s,与润肤油对照组(30.450±1.237cm/s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与模型对照组(24.148±0.701cm/s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与假手术对照组(35.909±1.169cm/s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。与空白对照组(35.701±0.875cm/s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组支撑时长0.150±0.020s,与润肤油对照组(0.132±0.009s)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。与模型对照组(0.112±0.010s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与假手术对照组(0.153±0.015s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。与空白对照组(0.157±0.008s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组疲劳转棒292.5±14.81s,与润肤油对照组(248.1±80.15s)比较,P﹤0.05,差异具有统计学意义。与模型对照组(76.6±39.66s)比较,P﹤0.01,差异具有显著统计学意义。与假手术对照组(300±0.00s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。与空白对照组(300±0.00s)比较,P﹥0.05,差异无统计学意义。4.四周后,六味地黄膏摩组外周Ghreli

关键词：脑性瘫痪膏摩生长发育生长激素释放肽生长激素释放激素受体

circRNA、microRNA与低氧性肺动脉高压的相关性研究进展

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中国老年学杂志 2018年第3期38卷 765-767页

作者：夏世金王坚邰先桃王厚融复旦大学附属华东医院上海市老年医学研究所上海200040 复旦大学附属中山医院呼吸科云南中医学院针灸推拿康复学院

低氧性肺动脉高压（HPH）是对人的健康危害极严重、治疗难度极大、致死率和致残率极高的病理生理综合征,故有“假恶性”肿瘤之称。HPH发生机制一直是医学研究的热点和难点。

关键词：低氧性肺动脉高压 circ RNA microRNA

推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的影响

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北京中医药大学学报 2022年第11期45卷 1160-1167页

作者：张英琦刘志凤于天源王厚融焦谊刘迪徐亚静官乾北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京中医药大学东方医院

目的观察推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热作用,并探究对下丘脑环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)/E-前列腺素类激素3受体(EP3)信号通路的影响。方法采用随机数字表法,将24只新西兰兔(2月龄)随机分为对照组、模型组和推拿六法... 详细信息

目的观察推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热作用,并探究对下丘脑环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)/E-前列腺素类激素3受体(EP3)信号通路的影响。方法采用随机数字表法,将24只新西兰兔(2月龄)随机分为对照组、模型组和推拿六法组,每组8只。模型组、推拿六法组采用LPS(0.5 mg/L)耳缘静脉注射复制发热模型,注射体积1 mL/kg。LPS注射后1 h,推拿六法组采用推拿退热六法干预:开天门200次,2 min;推坎宫200次,2 min;揉太阳200次,2 min;耳后高骨揉24次掐3下,2 min;清天河水500次,5 min;推脊300次,5 min。在相同时段内模型组、对照组动物在相同部位涂抹等量的室温清水,抓握但不进行推拿手法干预。观察各组体温变化,LPS注射后每20 min记录肛温1次,连续测量180 min,计算最大体温变化值和体温反应指数(TRI)。ELISA法检测下丘脑PGE2、环磷酸腺苷(cAMP)表达水平,Western blotting检测下丘脑COX-2、EP3、cAMP蛋白表达水平,RT-PCR检测COX-2、EP3、cAMP的mRNA表达。结果与对照组比较,模型组肛温上升(P<0.01),推拿六法组推拿退热六法干预后幼兔肛温较模型组降低(P<0.01)。造模后60 min,模型组、推拿六法组最大体温变化值与TRI较对照组升高(P<0.01);造模后60 min,推拿六法组最大体温变化值与TRI较模型组差异无统计学意义;造模后180 min,模型组最大体温变化值与TRI升高(P<0.01),推拿六法组较模型组最大体温变化值与TRI降低(P<0.01)。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑PGE2、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组PGE2、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组COX-2、EP3、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。RT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达量增加(P<0.01),推拿六法组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达均较模型组减少(P<0.01)。结论推拿退热六法对LPS致热幼兔有良好的退热作用,其作用机制之一与抑制致热原对下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的激活,减少体温中枢终端的正调节介质cAMP水平有关。

关键词：推拿退热六法发热下丘脑 COX-2/PGE2/EP3信号通路 cAMP 兔

小儿推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑的代谢组学研究

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2645-2650页

作者：刘志凤张英琦于天源焦谊刘迪王厚融徐亚静官乾北京中医药大学北京100029 北京中医药大学东方医院北京100078

目的:探究小儿推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热疗效及退热机制。方法:将30只新西兰幼兔随机分为盐水组、模型组和推拿组。模型组和推拿组通过耳缘静脉注射LPS建立发热模型。推拿组在造模后1 h行退热六法(开天门、推坎宫、揉太... 详细信息

目的:探究小儿推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热疗效及退热机制。方法:将30只新西兰幼兔随机分为盐水组、模型组和推拿组。模型组和推拿组通过耳缘静脉注射LPS建立发热模型。推拿组在造模后1 h行退热六法(开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊)干预,实验过程中监测肛温。造模后3 h,取下丘脑进行液相色谱-质谱联用(LC-MS)非靶向代谢组学研究。结果:造模后2 h和3 h,推拿组肛温显著低于模型组(P<0.05)。代谢组学结果显示盐水组与模型组共有171个差异代谢物,富集到123条通路上;推拿组与模型组共有116个差异代谢物,富集到mTOR、PI3K-AKT、GABA能突触等77条通路上。结论:退热六法可降低发热幼兔体温,其退热机制可能与调节糖代谢、脂质代谢有关。

关键词：退热六法发热小儿推拿代谢组学下丘脑脂多糖糖代谢脂质代谢

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肩部摇法在历版推拿教材中的演变

辽宁中医药大学学报 2024年第2期26卷 91-94页

作者：陈金平刘志凤于天源王厚融杨震杰萨出拉张英琦官乾徐亚静张润龙张汉钰刘家玥孙佳伟北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京100007 北京医院北京100730

肩部摇法是临床常用的一种治疗肩关节疾病的推拿手法,该文通过梳理1959年至今各高校推拿学系列教材及特色教材中肩部摇法的发展脉络,对肩部摇法的概念、归类、分型、动作要领、注意事项、作用及应用进行整理。经过历版教材的不断演变,... 详细信息

肩部摇法是临床常用的一种治疗肩关节疾病的推拿手法,该文通过梳理1959年至今各高校推拿学系列教材及特色教材中肩部摇法的发展脉络,对肩部摇法的概念、归类、分型、动作要领、注意事项、作用及应用进行整理。经过历版教材的不断演变,肩部摇法内容逐渐丰富,手法操作由简入繁,种类由单一到多样,名称由繁杂到统一,操作逐渐趋于规范化。

关键词：肩部摇法推拿手法教材演变

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Minor CCI与经典CCI大鼠模型成模特点的比较研究

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中国比较医学杂志 2022年第10期32卷 1-7页

作者：王厚融刘志凤于天源张英琦焦谊刘迪徐亚静官乾北京中医药大学针灸推拿学院北京102488 北京中医药大学东方医院北京100078

目的比较研究轻度和经典方法诱导的大鼠慢性压迫性神经损伤(chronic constriction injury,CCI)模型的成模特点,为基础研究实验设计提供参考。方法将18只8周龄SD雄性大鼠随机分为假手术组、Minor CCI组和经典CCI组,每组6只。于坐骨神经... 详细信息

目的比较研究轻度和经典方法诱导的大鼠慢性压迫性神经损伤(chronic constriction injury,CCI)模型的成模特点,为基础研究实验设计提供参考。方法将18只8周龄SD雄性大鼠随机分为假手术组、Minor CCI组和经典CCI组,每组6只。于坐骨神经结扎铬制可吸收外科缝线,Minor CCI组结扎1根,经典CCI组结扎4根。3组动物于造模前和造模后7、14、21、28 d检测机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期和累积疼痛评分变化情况。透射电镜观察坐骨神经超微结构变化情况。结果Minor CCI组和经典CCI组机械缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期痛敏趋势一致,Minor CCI组累积疼痛评分较经典CCI组低。Minor CCI组造模后出现痛敏,造模后14 d进入平台期,约10 d,各症状逐渐恢复;经典CCI组造模后出现痛敏,造模后14 d进入平台期,造模后28 d痛敏依然稳定甚至出现进一步敏化。Minor CCI组和经典CCI组坐骨神经超微结构变化一致,均表现为髓鞘结构破坏、崩脱,形成髓鞘球、自噬体等。结论Minor CCI模型更稳定,痛敏症状可维持至造模后28 d,基本无自残现象,适用于短期实验设计,可最大程度减小实验动物的痛苦。经典CCI模型痛敏症状持久,造模后28 d依然处于平台期,但自残现象明显,适用于中、长期实验设计。

关键词：周围神经病理性疼痛慢性压迫性神经损伤模型 SD大鼠疼痛