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产气荚膜梭菌Alpha毒素突变体的表达及单克隆抗体制备

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中国畜牧兽医 2025年 442-450页

作者：韩凤烨刘莹潘晨帆张乾义陈小云朱真印春生温永俊王凤雪杜吉革内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室中国兽医药品监察所

【目的】获得产气荚膜梭菌Alpha毒素（Clostridium perfringens alpha-toxin,CPA）的重组突变体,评价其毒力和抗原性,进而制备针对CPA的单克隆抗体,并评价单克隆抗体特性。【方法】通过人工合成含6个氨基酸突变（第56和130位的天冬氨酸... 详细信息

【目的】获得产气荚膜梭菌Alpha毒素（Clostridium perfringens alpha-toxin,CPA）的重组突变体,评价其毒力和抗原性,进而制备针对CPA的单克隆抗体,并评价单克隆抗体特性。【方法】通过人工合成含6个氨基酸突变（第56和130位的天冬氨酸突变为甘氨酸、第275、307和331位的酪氨酸突变为苯丙氨酸、第336位的天冬氨酸突变为天冬酰胺）的CPA基因片段,并将其克隆至pET-30a（+）载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞进行诱导表达与纯化,获得重组蛋白rCPAm6,并检测其毒力与免疫原性。将rCPAm6作为包被抗原建立CPA抗体的间接ELISA检测方法,并用灭活的天然CPA作为免疫原按照常规方法免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,对其功能进行鉴定。【结果】重组蛋白rCPAm6在大肠杆菌BL21（DE3）感受态中能够以可溶性和包涵体两种形式表达。毒力测定结果显示,100μg/只rCPAm6攻毒后,小鼠全部存活。免疫原性分析结果显示,1×最小致死量（MLD）的天然CPA攻毒后,对照组小鼠全部死亡,10和20μg/只rCPAm6免疫组小鼠存活率为100%。利用rCPAm6成功建立了CPA抗体的间接ELISA检测方法,并筛选获得4株分泌抗CPA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6E3、6B8、10A11、13D10,且4种细胞上清抗体效价均≥1∶3 200,其中单克隆抗体6B8细胞上清能中和天然CPA,且能与rCPAm6发生反应。【结论】试验成功获得具有良好的安全性和免疫原性的重组蛋白rCPAm6,制备的CPA单克隆抗体6B8具有一定的中和活性及较高的特异性和敏感性。研究结果为CPA亚单位疫苗的研制提供了候选抗原,同时为CPA中毒症的治疗以及抗原/抗体检测方法的建立提供了物质基础。

关键词：产气荚膜梭菌Alpha毒素(CPA) 突变体原核表达单克隆抗体

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微波远程等离子源腔壁仿真与实验研究

真空科学与技术学报 2025年

作者：安丽黄星星杨振怀赵迎宾胡琅侯少毅王凤双季华实验室

微波远程等离子源在远离工艺腔的谐振腔内利用微波能量激发等离子体，展现出无电极污染、减轻其他活性粒子对材料表面轰击等独特优势，因此在半导体行业、薄膜沉积等工业领域得到了广泛应用。对微波远程等离子源的仿真模拟以及参数优化... 详细信息

微波远程等离子源在远离工艺腔的谐振腔内利用微波能量激发等离子体，展现出无电极污染、减轻其他活性粒子对材料表面轰击等独特优势，因此在半导体行业、薄膜沉积等工业领域得到了广泛应用。对微波远程等离子源的仿真模拟以及参数优化通常是基于等离子体生成前的电场。本文以放电管厚度参数为例，提出了一种基于点火和工作状态下微波远程等离子源腔壁电场仿真的参数优化方法，为了量化电场分布合理性，我们采用了多种性能指标，包括关键部件的电场模极值、电场模平均值，以及这些值与激发等离子体区域电场模平均值的比值，最终确定5mm为该结构放电管的最优厚度。为进一步验证仿真结果的准确性，我们开展了不同厚度放电管的等离子体生成实验，结果显示等离子体发光区的个数和分布与仿真预测高度一致，从而充分证明了本文所采用仿真方法的可靠性与准确性。本文使用的仿真方法和性能评估方法可推广至微波远程等离子源其他参数的设计优化中。

关键词：远程等离子源微波等离子体数值模拟实验验证

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中部槽弯板组件点装装置

煤矿机械 2025年第1期46卷 115-117页

作者：郭子超王凤鲜山西煤矿机械制造股份有限公司太原030031

传统刮板输送机中部槽弯板组件采用人工点装,人为因素多、点装误差大且一致性差,很难精准保证点装尺寸及质量,又因为中部槽自身结构限制、检测量具局限,检测困难。因此,设计了一种使用简单、定位精准的辅助装置,能够辅助操作人员准确点... 详细信息

传统刮板输送机中部槽弯板组件采用人工点装,人为因素多、点装误差大且一致性差,很难精准保证点装尺寸及质量,又因为中部槽自身结构限制、检测量具局限,检测困难。因此,设计了一种使用简单、定位精准的辅助装置,能够辅助操作人员准确点装中部槽弯板组件。该装置不仅保证点装尺寸与精度,提高了弯板组件点装效率,而且对点装尺寸具有辅助检测功能。

关键词：刮板输送机中部槽弯板组件点装装置

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围岩大变形控制的让压锚杆支护研究进展

煤炭技术 2025年第1期44卷 22-26页

作者：唐民军王凤云安徽建筑大学智能地下探测安徽省重点实验室合肥230601 安徽建筑大学安徽省智能地下探测技术研究院合肥230601 安徽建筑大学土木工程学院合肥230601

让压锚杆支护是一种能有效控制围岩大变形的方法,允许受控的岩石变形,以降低围岩的压力,从而避免衬砌应力过大。对现阶段让压型锚杆支护研究进展进行了概括性的总结,研究成果展现了不同类型的让压锚杆,揭示了普通锚杆延伸率不足、承载... 详细信息

让压锚杆支护是一种能有效控制围岩大变形的方法,允许受控的岩石变形,以降低围岩的压力,从而避免衬砌应力过大。对现阶段让压型锚杆支护研究进展进行了概括性的总结,研究成果展现了不同类型的让压锚杆,揭示了普通锚杆延伸率不足、承载性能较低的问题;阐明了让压锚杆的让压机理,体现了让压锚杆控制围岩大变形的优越性。

关键词：让压锚杆让压锚杆类型让压机理

超声心动图参数及血清hs-CRP水平与慢性心力衰竭患者近期预后的相关性分析及临床价值

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黑龙江医药科学 2025年第1期 27-30页

作者：王凤靳潇曼杨艳芳济源市第三人民医院彩超室济源市人民医院检验科济源市人民医院重症医学科

目的：分析超声心动图参数左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter, LVEDD)、左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume, LVEDV)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter, LVESD)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)及血清超敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)水平与慢性心力衰竭患者近期预后的相关性及临床价值。方法：选取2021年7月至2023年9月济源市第三人民医院收治的115例慢性心力衰竭患者为研究组及同期115例健康体检者为对照组；另根据患者近期不同预后分为预后良好及预后不良患者。对比两组及不同预后患者入院时超声心动图参数及血清hs-CRP水平，偏回归分析超声心动图参数及血清hs-CRP与慢性心力衰竭患者预后的关联性，并分析其对慢性心力衰竭患者预后不良的预测价值。结果：研究组入院时超声心动图参数LVEF、LVEDV[(46.28±5.41)%、(46.36±3.19)mm]均低于对照组[(67.94±6.62)%、(82.49±4.52)mm]、研究组参数LVEDD、LVESD及血清hs-CRP[(55.67±4.33)mm、(46.04±3.77)mm、(10.57±2.11)mg/L]表达均高于对照组[(47.39±5.3)mm、(37.84±2.49)mm、(5.11±1.24)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05);预后不良患者参数LVEF、LVEDV[(40.16±3.41)%、(44.16±2.170)mm]均低于预后良好患者[(49.67±4.16)%、(50.33±2.55)mm]、参数LVEDD、LVESD及血清hsCRP表达[(61.51±2.24)mm、(50.16±3.49)mm、(19.84±2.37)mg/L]均高于预后良好患者[(52.44±2.77)mm、(43.76±3.31)mm、(5.44±3.34)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05);入院时超声心动图参数LVEDD、LVESD及血清hsCRP水平为慢性心力衰竭预后不良的危险因素、参数LVEF、LVEDV为患者预后不良的保护因素，差异有统计学意义(P<0.05);参数各指标及血清hs-CRP水平单独及联合预测患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.675、0.661、0.673、0.629、0.691、0.793,均高于各指标单独诊断。结论：慢性心力衰竭患者通过超声心动图联合hs-CRP水平，能够有效评估患者慢性心力衰竭预后情况，具有良好的诊断及预后价值，为判断患者预后提供有效指标。

关键词：超声心动图参数 hsCRP 慢性心力衰竭近期预后

基于AHP-QFD的导航装备任务需求满足度评估方法

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电光与控制 2025年第1期32卷 106-111页

作者：吴北苹何晶王凤兰王彦璎王晓薇空军工程大学信息与导航学院西安710000 空军通信士官学校辽宁大连116000

针对导航装备评估以往多受主观因素影响造成结果不准确的问题,提出了将层次分析法(AHP)与质量功能展开(QFD)结合使用,以任务需求满足度作为导航装备能力评估指标的评估方法。该方法通过定性分析与定量分析相结合的方式,基于导航装备保... 详细信息

针对导航装备评估以往多受主观因素影响造成结果不准确的问题,提出了将层次分析法(AHP)与质量功能展开(QFD)结合使用,以任务需求满足度作为导航装备能力评估指标的评估方法。该方法通过定性分析与定量分析相结合的方式,基于导航装备保障任务-能力要求-战技指标的映射过程,提出确定映射域指标、计算作战保障能力重要度、确定关系矩阵、计算任务需求满足度的评估步骤,并给出需求满足度的计算方法;最后分析了陆上某方向北斗导航装备保障实例,结果表明了该方法的可行性,这对导航装备的性能优化和实际使用具有重要意义。

关键词：导航装备质量功能展开能力需求满足度层次分析法

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不同加工方式对石斛品质的影响研究进展

现代食品科技 2025年

作者：董婧婧宋亚范蓓李能波徐欣丁婷婷卢聪刘佳萌王凤忠孙晶中国农业科学院农产品加工研究所山西农业大学食品科学与工程学院龙陵县石斛研究所

石斛是我国名贵的传统中药，始载于《神农本草经》，至今已有2000多年的历史，其因益胃生津、滋阴清热的药理作用备受青睐。目前，石斛不仅用于医药行业，还广泛用于保健品和化妆品中。然而，由于石斛鲜品容易腐坏，如未及时进行加工处... 详细信息

石斛是我国名贵的传统中药，始载于《神农本草经》，至今已有2000多年的历史，其因益胃生津、滋阴清热的药理作用备受青睐。目前，石斛不仅用于医药行业，还广泛用于保健品和化妆品中。然而，由于石斛鲜品容易腐坏，如未及时进行加工处理，极易造成主要活性成分损失，选用合理的干燥及炮制方法能够有效的保障石斛品质。近年来，国内外许多学者对石斛加工技术进行了研究，石斛的加工方法主要包括干燥和炮制，干燥方式主要为自然晾干、热风干燥、真空干燥、真空冷冻干燥、微波干燥等，炮制方法主要包括清炒、酒炙、盐炙等，这些方式对石斛的化学成分均有影响。为此，本文梳理了不同的加工方式对石斛中所含的多糖、黄酮、酚类、生物碱、氨基酸等成分、色泽及抗氧化活性的影响，以期为石斛品质提升及产品开发利用起到一定的借鉴作用。

关键词：石斛属加工化学成分色泽抗氧化

青海、西藏主栽青稞品种营养品质及其淀粉糊化特性

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食品工业科技 2025年第1期46卷 333-342页

作者：王倩童亚男王丽丽党斌吴昆仑杨希娟王凤忠刘丽娅中国农业科学院农产品加工研究所农业农村部农产品加工综合性重点实验室北京100193 青海省农林科学院青海西宁810016

青稞是开发营养健康食品的优质原料,为研究品种、产地等因素对青稞营养品质和加工特性的影响,本文收集我国青稞主产区青海和西藏的30个主栽品种,比较主要营养成分及其淀粉糊化特性差异。结果表明:不同青稞营养成分差异较大,重要功能因子... 详细信息

青稞是开发营养健康食品的优质原料,为研究品种、产地等因素对青稞营养品质和加工特性的影响,本文收集我国青稞主产区青海和西藏的30个主栽品种,比较主要营养成分及其淀粉糊化特性差异。结果表明:不同青稞营养成分差异较大,重要功能因子β-葡聚糖、阿拉伯木聚糖(arabinoxylan,AX)、总酚介于3.74%~6.54%、5.63%~11.51%和1.90~4.24 mg/g;同时发现青稞β-葡聚糖含量与总酚含量呈极显著负相关(P<0.01)。品种亦显著影响淀粉糊化特性(P<0.05),样品间淀粉峰值黏度介于468.67~4844.67 cP,糊化温度介于66.30~86.85℃。主成分分析将营养成分、糊化性质共15个指标降维得到5个主成分,发现糊化性质及非淀粉多糖、AX、淀粉、β-葡聚糖含量在青稞品质评价中具有重要作用。经聚类分析,筛选出12个高β-葡聚糖(5.62%~6.54%)、11个高AX(10.37%~11.51%)、1个高总酚(4.24 mg/g)、10个高糊化温度(81.05~86.85℃)青稞品种。西宁柴青1号兼具高β-葡聚糖、高AX、高糊化温度的特点,同时总酚含量适中,可能在高活性、低升糖指数(GI)青稞功能食品开发领域具有优势。

关键词：青稞营养品质糊化特性主成分分析聚类分析

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食品中贝类过敏原的质谱定量分析方法研究

核农学报 2025年第2期39卷 329-338页

作者：杨沛洁孟俊宏赵晗林浩鹏关文强王凤玲杨术鹏李熠天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室天津300134 中国农业科学院农产品加工研究所北京100193

鉴于贝类是重要的过敏食物,为健全食品中贝类过敏原的定量分析方法、精准识别与检测食品中的贝类过敏原,本研究基于靶向蛋白质谱定量分析技术,开发了预制食品中蛤蜊过敏原的定量分析方法:样品经蛋白质的提取和酶解后,通过液相串联高分... 详细信息

鉴于贝类是重要的过敏食物,为健全食品中贝类过敏原的定量分析方法、精准识别与检测食品中的贝类过敏原,本研究基于靶向蛋白质谱定量分析技术,开发了预制食品中蛤蜊过敏原的定量分析方法:样品经蛋白质的提取和酶解后,通过液相串联高分辨质谱和Peaks软件进行数据采集与分析;针对蛤蜊中的原肌球蛋白,经系统考察其酶解后肽段的特异性、质谱信号丰度、热稳定性等,筛选出ITELSEELAVVGNNCK作为最佳定量肽段;针对筛选出的肽段,采用液相串联三重四极杆质谱构建蛤蜊过敏原的定量分析方法,并进行系统的方法验证。结果表明,该方法具有良好的特异性、灵敏度[定量限(LOQ)为10 mg·kg^(-1)]、准确度(回收率为78%~105.3%)和精密度(日内和日间变异系数均<13.0%)。用该法检测分析实际样品发现,部分预制食品中存在蛤蜊过敏原的污染,但未进行明确标识。本研究开发的方法可为食品中贝类过敏原的风险监测提供技术和方法支撑。

关键词：过敏原贝类蛤蜊定量分析质谱分析

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