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补中益气汤通过Nrf2/ROS通路调控线粒体途径细胞凋亡改善A549/DDP细胞顺铂耐药的分子机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 95-102页

作者：牟琪瑞李贺刘玥彤高原刘春英辽宁中医药大学中西医结合学院沈阳110847

目的:探讨补中益气汤含药血清通过核因子E_2相关因子2(Nrf2)/活性氧(ROS)通路调控线粒体途径细胞凋亡改善人非小细胞肺癌顺铂耐药细胞(A549/DDP)顺铂耐药的机制。方法:制备补中益气汤含药血清及培养A549/DDP细胞,并进行随机分组为空白组... 详细信息

目的:探讨补中益气汤含药血清通过核因子E_2相关因子2(Nrf2)/活性氧(ROS)通路调控线粒体途径细胞凋亡改善人非小细胞肺癌顺铂耐药细胞(A549/DDP)顺铂耐药的机制。方法:制备补中益气汤含药血清及培养A549/DDP细胞,并进行随机分组为空白组(10%空白血清)、顺铂组(10%空白血清+20 mg·L^(-1)顺铂)、补中益气汤组(10%含药血清+20 mg·L^(-1)顺铂)、ML385组(10%空白血清+5μmol·L^(-1)ML385+20 mg·L^(-1)顺铂)、补中益气汤联合ML385组(10%含药血清+5μmol·L^(-1)ML385+20 mg·L^(-1)顺铂)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)组(10%空白血清+5μmol·L^(-1)TBHQ+20 mg·L^(-1)顺铂)、补中益气汤联合TBHQ组(10%含药血清+5μmol·L^(-1)TBHQ+20 mg·L^(-1)顺铂),应用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测各组顺铂半数抑制浓度(IC_(50))值并计算耐药指数(RI),流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(ROS)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组Nrf2、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、细胞色素C(CytC)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。结果:与顺铂组比较,补中益气汤组、ML385组、补中益气汤联合ML385组A549/DDP细胞顺铂的IC_(50)及RI均明显降低(P<0.05);与空白组比较,顺铂组、补中益气汤组、ML385组、补中益气汤联合ML385组A549/DDP细胞的凋亡率均明显升高(P<0.05);与空白组比较,顺铂组细胞内Nrf2表达明显升高(P<0.05),与顺铂组比较,补中益气汤组、ML385组、补中益气汤联合ML385组Nrf2表达均明显降低(P<0.05),上述各组ROS表达量均明显升高(P<0.05),cleaved Caspase-3、CytC蛋白表达均升高、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),其中以补中益气汤联合ML385组效果最为明显。与顺铂组比较,TBHQ组顺铂IC_(50)值及RI明显升高(P<0.05),A549/DDP细胞凋亡率明显降低(P<0.05),Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05),ROS表达下降(P<0.05),cleaved Caspase-3、CytC蛋白表达降低、Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05)。在补中益气汤联合TBHQ之后,与TBHQ组比较,A549/DDP细胞顺铂的IC_(50)值及RI再次明显降低(P<0.05),凋亡率再次明显升高(P<0.05),Nrf2蛋白表达再次下降(P<0.05),ROS表达再次明显升高(P<0.05),cleaved Caspase-3、CytC蛋白表达再次上调、Bcl-2蛋白表达再次下调(P<0.05)。结论:补中益气汤通过抑制Nrf2/ROS通路诱导线粒体途径细胞凋亡以改善A549/DDP细胞的顺铂耐药性。

关键词：补中益气汤非小细胞肺癌核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)/活性氧(ROS) 线粒体途径细胞凋亡顺铂耐药

补中益气汤通过Nrf2/ROS/PERK/CHOP信号通路调控内质网应激改善NSCLC顺铂耐药的分子机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：李贺刘玥彤黄婧漪牟琪瑞刘春英高原辽宁中医药大学中西医结合学院

目的：探讨补中益气汤通过核因子E2相关因子2（Nrf2）/活性氧（ROS）/双链RNA激活的蛋白激酶R（PKR）样内质网激酶（PERK）/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）信号通路调控内质网应激改善非小细胞肺癌顺铂耐药细胞（A549/DDP）的分... 详细信息

目的：探讨补中益气汤通过核因子E2相关因子2（Nrf2）/活性氧（ROS）/双链RNA激活的蛋白激酶R（PKR）样内质网激酶（PERK）/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）信号通路调控内质网应激改善非小细胞肺癌顺铂耐药细胞（A549/DDP）的分子机制。方法：利用Sprague Dawley（SD）大鼠制备空白组、补中益气汤组含药血清，将A549/DDP细胞进行传代处理，并将其随机分为9组，分别为：空白组（10%空白大鼠血清培养基）、模型组(10%空白大鼠血清培养基+20 mg·L-1顺铂)、中药组(10%中药组大鼠血清培养基+20 mg·L-1顺铂)、TBHQ组(10%空白大鼠血清培养基＋TBHQ(5 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)、TBHQ+中药组(10%中药组大鼠血清培养基＋TBHQ(5 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)、NAC组(10%空白大鼠血清培养基＋NAC(600 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)、NAC+中药组(10%中药组大鼠血清培养基＋NAC(600 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)、Salubrinal组(10%空白大鼠血清培养基＋Salubrinal(20 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)、Salubrinal+中药组(10%中药组大鼠血清培养基＋Salubrinal(20 μmol·L-1)＋20 mg·L-1顺铂)。应用细胞增殖与活性检测法（Cell Counting Kit-8， CCK-8）检测各组细胞顺铂的半抑制浓度(IC50)，流式细胞术检测ROS水平，透射电镜观察内质网超微结构，Western Blot检测Nrf2、磷酸化（p）-Nrf2、CHOP、p-PERK/PERK、磷酸化真核翻译起始因子2α（p-eIF2α）/eIF2α、活化转录因子4（ATF4），共聚焦荧光定位检测CHOP、p-PERK的荧光表达强度。结果：与模型组比较，中药组能显著降低A549/DDP细胞顺铂的IC50（P0.05）；CHOP、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、ATF4蛋白，相较于空白组，模型组表达量升高（P<0.05）；相较于模型组，中药组表达量显著升高（P<0.05）；TBHQ组、NAC组、Salubrinal组表达量均低于模型组（P<0.05）；TBHQ组、NAC组、Salubrinal组联合中药使用后，较未使用中药组表达量显著上升（P<0.01）。结论：补中益气汤通过Nrf2/ROS/PERK/CHOP信号通路调控内质网应激改善NSCLC顺铂耐药。

关键词：补中益气汤非小细胞肺癌化疗耐药内质网应激活性氧

补中益气汤协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预肺腺癌顺铂耐药性的分子机制研究

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重庆医科大学学报 2024年第2期49卷 147-152页

作者：李贺牟琪瑞王哲王莹于丹高原辽宁中医药大学中西医结合学院病理教研室沈阳110847

目的:探讨补中益气汤含药血清协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制研究。方法:采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,Western blot检测正常血清组、顺铂组、siCTNNB1-235组、siCTNNB1-510组... 详细信息

目的:探讨补中益气汤含药血清协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制研究。方法:采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,Western blot检测正常血清组、顺铂组、siCTNNB1-235组、siCTNNB1-510组、siCTNNB1-547组A549/DDP细胞的β-catenin蛋白的相对表达量;干扰β-catenin后,Western blot检测各组A549/DDP细胞β-catenin和Survivin的蛋白表达量,MTT法检测各组A549/DDP细胞对顺铂的IC50,Annexin V/PI染色法检测各组A549/DDP细胞顺铂诱导的凋亡率。结果:相较于正常血清组(1.00),siCTNNB1-235组(0.323±0.021)对β-catenin表达抑制率达67%(P=0.000)。RNAi技术沉默β-catenin后,与正常血清组(1.00)相比,补中益气汤联合顺铂组的Survivin(0.247±0.015)和β-catenin(0.257±0.015)蛋白的表达下调更为明显(P=0.000,P=0.000)。IC50和正常血清组(28.330±1.029)µmol/L相比,单独补中益气汤含药血清(20.350±1.155)µmol/L或单独瞬时转染siCTNNB1-235组(15.577±1.535)µmol/L均可降低A549/DDP细胞顺铂的IC50(P=0.000,P=0.000),2者联合(10.453±0.999)µmol/L使用可进一步降低顺铂的IC50(P=0.000)。与正常血清组(9.130±0.384)%相比,瞬时转染siCTNNB1-235联合顺铂组(64.393±0.244)%和补中益气汤联合顺铂组(70.120±0.400)%的总凋亡率均升高(P=0.000,P=0.000)。结论:补中益气汤含药血清和瞬时转染siβ-catenin在抑制Wnt/β-catenin信号通路改善肺腺癌顺铂耐药性方面具有协同效应,且补中益气汤具有siβ-catenin瞬时转染样效应。

关键词： β-catenin Survivin RNAi 肺癌耐药补中益气汤

补中益气汤对A549和A549/DDP细胞顺铂敏感性影响的差异研究

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辽宁中医药大学学报 2024年

作者：黄婧漪刘玥彤李贺牟琪瑞于丹高原，辽宁中医药大学病理教研室

目的探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性，并确定给药最佳剂量。方法培养A549、A549/DDP细胞，不同浓度顺铂作用后，应用CCK-8法检测各组生长抑制率；制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清，随机分为24组：... 详细信息

目的探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性，并确定给药最佳剂量。方法培养A549、A549/DDP细胞，不同浓度顺铂作用后，应用CCK-8法检测各组生长抑制率；制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清，随机分为24组：A549细胞（5%正常血清组、10%正常血清组、20%正常血清组、5%低剂量中药组、10%低剂量中药组、20%低剂量中药组、5%中剂量中药组、10%中剂量中药组、20%中剂量中药组、5%高剂量中药组、10%高剂量中药组、20%高剂量中药组）；A549/DDP细胞（5%正常血清组、10%正常血清组、20%正常血清组、5%低剂量中药组、10%低剂量中药组、20%低剂量中药组、5%中剂量中药组、10%中剂量中药组、20%中剂量中药组、5%高剂量中药组、10%高剂量中药组、20%高剂量中药组），应用CCK-8法检测各组A549、A549/DDP细胞生长抑制情况及生长抑制率，应用AnnexinV-FITC/PI染色法检测各组细胞凋亡率。结果顺铂对A549、A549/DDP细胞的最佳抑制浓度均为20 μg/mL；10%中剂量补中益气汤对A549细胞顺铂的凋亡率和生长抑制率最为显著，相比而言，20%高剂量补中益气汤对A549/DDP细胞的作用最为显著。结论与A549细胞相比，A549/DDP细胞需要更高浓度更高剂量的补中益气汤含药血清才能发挥最佳顺铂增敏效果，说明补中益气汤对A549细胞的顺铂增敏作用强于A549/DDP细胞。

关键词：补中益气汤顺铂 A549细胞 A549/DDP细胞非小细胞肺癌

补中益气汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞Nrf2、PRX1、SOD、GPX4的影响

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国际中医中药杂志 2024年第5期46卷 607-613页

作者：李贺于丹牟琪瑞刘玥彤高原辽宁中医药大学病理教研室沈阳110847

目的探讨补中益气汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞中核因子红系2相关因子2(Nrf2)及其下游抗氧化蛋白的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组15只。低、中、高剂量组分别灌胃3.29... 详细信息

目的探讨补中益气汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞中核因子红系2相关因子2(Nrf2)及其下游抗氧化蛋白的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组15只。低、中、高剂量组分别灌胃3.29、6.57、13.13 g/kg补中益气汤,1次/d,持续7 d。末次给药后1 h,腹主动脉取血,制备补中益气汤含药血清。将A549/DDP细胞按随机数字表法分为空白组(空白组大鼠血清)、模型组(空白组大鼠血清+顺铂)、低剂量组(低剂量含药血清+顺铂)、中剂量组(中剂量含药血清+顺铂)、高剂量组(高剂量含药血清+顺铂),相应药物干预24 h后,采用CCK-8法检测各组A549/DDP细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50);共聚焦荧光定位法检测p-Nrf2荧光表达强度;RT-qPCR法检测Nrf2 mRNA水平;Western blot法检测各组A549/DDP细胞中Nrf2、p-Nrf2、过氧化物还原酶1(PRX1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、SOD蛋白相对表达。结果与模型组比较,低、中、高剂量组A549/DDP细胞对顺铂的IC50降低(P<0.01);p-Nrf2荧光强度降低(P<0.01);Nrf2 mRNA水平降低(P<0.01);Nrf2、p-Nrf2、SOD、PRX1、GPX4蛋白表达下调(P<0.01),尤以中、高剂量组效果更显著(P<0.05)。结论补中益气汤含药血清通过抑制A549/DDP细胞中Nrf2活性表达及下调其靶基因SOD、PRX1、GPX4蛋白表达,改善肺腺癌顺铂耐药。

关键词：补中益气汤肺腺癌核因子红系2相关因子2 A549/DDP细胞顺铂耐药

补中益气汤对A549细胞荷瘤裸鼠移植瘤MRP、LRP、P-gp表达的影响

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国际中医中药杂志 2024年第9期46卷 1145-1149页

作者：刘玥彤牟琪瑞李贺黄婧漪高原辽宁中医药大学病理教研室沈阳

目的探讨补中益气汤对A549细胞荷瘤裸鼠移植瘤中多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法培养A549细胞建立荷瘤裸鼠移植瘤模型, 按随机数字表法分为空白对照组、顺铂组及顺铂联合补中益气汤低、中、高... 详细信息

目的探讨补中益气汤对A549细胞荷瘤裸鼠移植瘤中多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法培养A549细胞建立荷瘤裸鼠移植瘤模型, 按随机数字表法分为空白对照组、顺铂组及顺铂联合补中益气汤低、中、高剂量组。相应药物干预25 d后, 采用RT-qPCR测定移植瘤MRP、LRP、P-gp mRNA水平, Western Blot检测移植瘤组织MRP、LRP、P-gp蛋白表达情况。结果与空白对照组比较, 顺铂组MRP、LRP、P-gp mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与顺铂组比较, 顺铂联合补中益气汤低、中、高剂量组MRP、LRP、P-gp mRNA水平及蛋白表达降低(P<0.05)。结论补中益气汤可抑制A549细胞荷瘤裸鼠移植瘤MRP、LRP、P-gp表达, 且无剂量依赖性。

关键词：补中益气汤肺癌多药耐药相关蛋白质类肺耐药蛋白 P-糖蛋白 A549细胞

补中益气汤通过Nrf2/ROS通路调控线粒体途径细胞凋亡改善NSCLC顺铂耐药的分子机制

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补中益气汤通过Nrf2/ROS通路调控线粒体途径细胞凋亡改善NSCLC顺...

作者：牟琪瑞辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨补中益气汤含药血清通过Nrf2/ROS通路调控线粒体途径细胞凋亡改善A549/DDP细胞顺铂耐药的机制。材料与方法:制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清及培养A549/DDP细胞,并进行随机分组:空白对照组、顺铂组、低剂量补中益气汤联... 详细信息

目的:探讨补中益气汤含药血清通过Nrf2/ROS通路调控线粒体途径细胞凋亡改善A549/DDP细胞顺铂耐药的机制。材料与方法:制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清及培养A549/DDP细胞,并进行随机分组:空白对照组、顺铂组、低剂量补中益气汤联合顺铂组、中剂量补中益气汤联合顺铂组、高剂量补中益气汤联合顺铂组,应用CCK-8法检测各组顺铂IC值并计算耐药指数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组Nrf2蛋白表达量,并筛选出最佳剂量补中益气汤。随后再次进行随机分组:空白对照组、顺铂组、最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组、TBHQ组、最佳剂量补中益气汤联合TBHQ组,应用CCK-8法检测各组顺铂IC值并计算耐药指数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针法检测各组ROS含量,蛋白免疫印迹法检测各组Nrf2、Cleaved caspase-3、Cyt-c、Bcl-2蛋白表达量。结果:1.不同浓度补中益气汤组A549/DDP细胞顺铂IC值及耐药指数中、高剂量补中益气汤均可以显著降低A549/DDP细胞的顺铂的IC值及耐药指数(P<0.05),低剂量补中益气汤效果不明显;2.不同浓度补中益气汤组A549/DDP细胞凋亡率与顺铂组比较,中、高剂量补中益气汤均能进一步显著提高A549/DDP细胞的凋亡率(P<0.05),但低剂量补中益气汤的改善效果不明显;3.不同浓度补中益气汤组A549/DDP细胞Nrf2蛋白表达量及最佳剂量补中益气汤筛选与空白对照组相比,顺铂组可以上调细胞内Nrf2的表达(P<0.05),与顺铂组相比,低、中、高剂量的补中益气汤联合顺铂均可以降低Nrf2的蛋白表达量(P<0.05),其中以中、高剂量组的抑制效果最为显著;并结合含药血清对细胞的毒性筛选出中剂量补中益气汤为最佳剂量。4.各组A549/DDP细胞顺铂IC值及耐药指数在进一步的研究中,最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组均可以显著降低A549/DDP细胞顺铂的IC值及耐药指数(P<0.05),TBHQ可显著上调其顺铂的IC值及耐药指数(P<0.05),最佳剂量补中益气汤联合TBHQ后,可在此基础之上再次降低A549/DDP细胞顺铂的IC值及耐药指数(P<0.05);5.各组A549/DDP细胞凋亡率与顺铂组比较,最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组均显著上调A549/DDP细胞的凋亡率(P<0.05),其中最佳剂量补中益气汤联合ML385组上调效果最显著,TBHQ组则可以下调A549/DDP细胞的凋亡率(P<0.05),在联合最佳剂量补中益气汤后,凋亡率再次升高(P<0.05);6.各组A549/DDP细胞Nrf2蛋白表达量与空白对照组相比,顺铂组可以上调细胞内Nrf2的表达(P<0.05),与顺铂组比较,最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组均可下调Nrf2的蛋白表达量(P<0.05),而TBHQ组则明显上调Nrf2的蛋白表达量(P<0.05),联合最佳剂量补中益气汤后Nrf2的蛋白表达量再次下降(P<0.05);7.各组A549/DDP细胞ROS表达量与空白对照组相比,顺铂组、最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组ROS表达量明显增加(P<0.05),其中最佳剂量补中益气汤联合ML385组最显著,TBHQ组ROS表达量下降(P<0.05),在最佳剂量补中益气汤干预之后,ROS表达量再次升高(P<0.05);8.各组A549/DDP细胞Cleaved caspase-3、Cyt-c、Bcl-2蛋白表达量与空白对照组比较,顺铂组、最佳剂量补中益气汤组、ML385组、最佳剂量补中益气汤联合ML385组均可上调Cleaved caspase-3、Cyt-c的蛋白表达量、下调Bcl-2蛋白表达量(P<0.05),TBHQ组则下调Cleaved caspase-3、Cyt-c的蛋白表达量、上调Bcl-2蛋白表达量(P<0.05),在TBHQ联合最佳剂量补中益气汤后,Cleaved caspase-3、Cyt-c蛋白表达再次上调、Bcl-2蛋白表达再次下调(P<0.05)。结论:1.补中益气汤能够抑制Nrf2的表达以改善NSCLC的顺铂耐药性,以中剂量补中益气汤效果最佳;2.补中益气汤通过抑制Nrf2/ROS通路诱导线粒体途径细胞凋亡以改善NSCLC的顺铂耐药性。

关键词：补中益气汤非小细胞肺癌 Nrf2/ROS 线粒体途径细胞凋亡顺铂耐药

补中益气汤联合顺铂对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤连环蛋白mRNA及蛋白表达的影响

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中华中医药杂志 2022年第4期37卷 2191-2194页

作者：王莹牟琪瑞刘春英高原辽宁中医药大学病理教研室沈阳110847 辽宁中医药大学研究生学院沈阳110847

目的:通过对补中益气汤联合顺铂对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤连环蛋白(β-catenin)mRNA及蛋白表达影响的研究,探讨补中益气汤改善肺癌顺铂耐药的分子机制。方法:培养A549、A549/DDP细胞,分别接种于裸鼠腋窝皮下,并将60只裸鼠随机分为10组,即A... 详细信息

目的:通过对补中益气汤联合顺铂对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤连环蛋白(β-catenin)mRNA及蛋白表达影响的研究,探讨补中益气汤改善肺癌顺铂耐药的分子机制。方法:培养A549、A549/DDP细胞,分别接种于裸鼠腋窝皮下,并将60只裸鼠随机分为10组,即A549/DDP荷瘤对照组(A组)、A549/DDP荷瘤+顺铂组(B组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组(C组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组(D组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组(E组)、A549荷瘤对照组(a组)、A549荷瘤+顺铂组(b组)、A549荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组(c组)、A549荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组(d组)、A549荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组(e组),每组6只。接种后第8天成瘤,第9~25天给药,第25天处死,剥取移植瘤称质量,计算顺铂抑瘤率。Real-time PCR法和蛋白质印迹法分别测定荷瘤裸鼠移植瘤组织β-catenin mRNA和蛋白表达。结果:A549/DDP细胞荷瘤裸鼠各组中,C、D、E组较A、B组瘤质量显著下降(P<0.05);B组较A组移植瘤β-catenin mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),而C、D、E组较B组β-catenin mRNA和蛋白的表达下调(P<0.05)。A549细胞荷瘤裸鼠各组中,b、c、d、e组较a组移植瘤质量显著减轻(P<0.05),c、d、e组较b组瘤质量进一步减轻(P<0.05);b、c、d、e组较a组移植瘤β-catenin mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),d、e组较b组β-catenin mRNA和蛋白的表达进一步下调(P<0.05)。结论:补中益气汤改善肺癌顺铂耐药的机制可能与β-catenin的表达下调、抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：补中益气汤 A549细胞 A549/DDP细胞顺铂连环蛋白

补中益气汤含药血清调控GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路增强A549细胞对顺铂敏感性的研究

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中国免疫学杂志 2022年第16期38卷 1958-1962页

作者：王莹付权泽牟琪瑞刘春英王淳高原辽宁中医药大学沈阳110847

目的:探讨补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的机制是否与GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。方法:制备补中益气汤含药血清作用于A549细胞株,随机分为a组(对照血清组)、b组(顺铂组)、c组(补中益气汤组)、d组(补中益... 详细信息

目的:探讨补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的机制是否与GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。方法:制备补中益气汤含药血清作用于A549细胞株,随机分为a组(对照血清组)、b组(顺铂组)、c组(补中益气汤组)、d组(补中益气汤含药血清联合顺铂组)。流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测GSK-3β、p-GSK-3β^(ser9)、p-GSK-3β^(tyr216)、β-catenin、survivin蛋白表达。结果:补中益气汤含药血清联合顺铂可降低p-GSK-3β^(ser9)、β-catenin、survivin蛋白表达,提高晚期细胞凋亡率。结论:抑制GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路激活可能是补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的作用机制之一。

关键词：补中益气汤 A549细胞株顺铂 GSK-3β Wnt/β-catenin信号通路

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