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大白桩菇多糖结构表征及其抗肿瘤活性研究

大白桩菇多糖结构表征及其抗肿瘤活性研究

作者：牛露露天津科技大学

学位级别：硕士

肝细胞癌(肝癌,HCC)作为一种常见的恶性肿瘤之一,目前临床主要的治疗方法是手术兼化疗,但缺点是术后极易复发,且毒副作用明显,因此从天然产物中寻找安全有效且低毒的抗癌活性成分迫在眉睫。大白桩菇(Leucopaxillus giganteus)作为一种... 详细信息

肝细胞癌(肝癌,HCC)作为一种常见的恶性肿瘤之一,目前临床主要的治疗方法是手术兼化疗,但缺点是术后极易复发,且毒副作用明显,因此从天然产物中寻找安全有效且低毒的抗癌活性成分迫在眉睫。大白桩菇(Leucopaxillus giganteus)作为一种药食同源的真菌,味道鲜美、口感细嫩。研究表明其具有多种活性,如抗氧化、抗肿瘤、抗菌等。多糖作为其主要活性成分之一,已成为学者研究热点内容之一。目前关于大白桩菇多糖抗肿瘤活性的研究鲜有报道,本研究以大白桩菇为原料,采用冷水提取法(4℃)提取纯化出一种均一性多糖(LGP),并对其基本结构和体内抗肿瘤活性进行了研究。本研究通过单因素和响应面优化试验确定大白桩菇粗多糖最佳提取工艺条件为料液比1:22,提取时间25 h,提取次数3次,醇沉浓度70%,在此条件下大白桩菇粗多糖得率为4.45±0.23%。粗多糖经过Sevage法脱蛋白,透析,Sephadex G-200分离纯化得到大白桩菇纯多糖,命名为LGP。实验测得的可溶性总糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为92.76±0.98%、3.36±0.65%和2.80±0.73%,还原糖未检出。通过高效液相色谱仪测得其分子量为1.78×10 Da。通过离子色谱分析可知LGP由岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为0.853:0.438:2.568:1:1.209:0.135:0.030。其中,岩藻糖、半乳糖、葡萄糖和木糖含量相对较高。红外光谱和核磁共振结果表明LGP的主链中含有α-D-Glu、α-D-Xyl、α-D-Gal、α-L-Fuc。通过扫描电子显微镜可知LGP表面粗糙疏松,呈现片层堆叠。X-衍射和热重分析结果表明LGP结晶度较低且热解过程主要经历三个阶段。刚果红实验和圆二色光谱分析表明LGP含有螺旋结构。通过建立H22荷瘤小鼠模型,研究大白桩菇多糖体内抗肿瘤活性,结果表明:大白桩菇多糖能有效保护免疫器官的正常功能,以剂量依赖性的方式抑制H22实体肿瘤的生长,使荷瘤小鼠细胞周期阻滞在S期,且可能通过线粒体凋亡通路诱导H22荷瘤小鼠细胞的凋亡,从而抑制肿瘤的恶性增殖。综上所述,本研究为大白桩菇多糖作为一种潜在的抗癌药物以及在食品领域的应用提供理论基础。

关键词：大白桩菇多糖结构表征抗肿瘤活性

2019年世界锦标赛女子跆拳道67公斤级运动员技术运用特征分析

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2019年世界锦标赛女子跆拳道67公斤级运动员技术运用特征分析

作者：牛露露天津体育学院

学位级别：硕士

跆拳道世界锦标赛是水平最高的跆拳道赛事之一,每两年举行一次,通过跆拳道世锦赛可以看到世界主流技术和世界优秀跆拳道运动员的先进打法。2019年世界跆拳道锦标赛是中国跆拳道队的丰收年,女子跆拳道道队获得了1金2银2铜的佳绩。取得了... 详细信息

跆拳道世界锦标赛是水平最高的跆拳道赛事之一,每两年举行一次,通过跆拳道世锦赛可以看到世界主流技术和世界优秀跆拳道运动员的先进打法。2019年世界跆拳道锦标赛是中国跆拳道队的丰收年,女子跆拳道道队获得了1金2银2铜的佳绩。取得了如此优秀的成绩,值得我们去吸取其中宝贵的经验,同时取其精华去其糟粕,为2020年东京奥运会以及2021年世界锦标赛做好准备。本文主要以2019年世界锦标赛女子跆拳道67公斤级运动员技术运用特征为研究对象,采用文献法、录像观察法数理统计法等研究总结得出:1.女子跆拳道67公斤级运动员比赛中主要运用的是横踢技术,其次是双飞踢技术和推踢技术,而且大部分是在进攻中运用,具有较好的得分效果。可见整体特征为以进攻居多,以简单、实用的腿法技术为主。2.组合技术的运用中多以两连击为主,对于大级别跆拳道运动员来说在比赛中抓住时机运用威胁更大的单一技术是进攻中主要选择的方式,组合技术多是在没有合适进攻机会时才会使用。3.比赛中运动员以中位技术为主,高位技术运用较为谨慎,得分次数更多,获得的分值更高,是提高得分效率的主要手段。4.比赛中运动员以前腿技术运用为主,通过前腿技术控制比赛节奏,寻找进攻机会,然后利用后腿技术提高打击力度。5.比赛中运动员以击打躯干技术为主,击打头部技术使用率较低,但是得分率更高。击投技术中运用较多的是相对简单的横踢技术和双飞技术,可见难度较大、动作幅度较大的击头技术在大级别女子跆拳道比赛的得分效率低于动作简单的击头技术。6.比赛中防守战术的运用相对较少,主要还是依靠的进攻和反击战术,可见进攻和反击战术是女子跆拳道67kg级比赛的战术核心。

关键词：世界锦标赛女子跆拳道 67公斤级特征

APEC-OMV内化宿主细胞的方式及其体内感染示踪的方法建立

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APEC-OMV内化宿主细胞的方式及其体内感染示踪的方法建立

作者：牛露露安徽农业大学

学位级别：硕士

禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)可以引起鸡、鸭、鹅等禽类发生严重的呼吸系统疾病,造成世界范围内家禽的高死亡率,从而为养禽业带来巨大经济损失。研究发现APEC具有复杂的致病机制,其在感染过程中可以释放... 详细信息

禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)可以引起鸡、鸭、鹅等禽类发生严重的呼吸系统疾病,造成世界范围内家禽的高死亡率,从而为养禽业带来巨大经济损失。研究发现APEC具有复杂的致病机制,其在感染过程中可以释放包裹有蛋白质、核酸、脂质及各种其他毒力因子的外膜囊泡(Outer Membrane Vesicles,OMVs)促进其致病力。现阶段研究发现,其他革兰氏阴性菌分泌产生的OMVs不仅可以通过内化方式进入宿主细胞引起炎症反应,而且能够突破机体防御屏障结构引起宿主感染,增强源细菌的致病力。本文作者所在团队前期研究发现禽致病性大肠杆菌外膜囊泡(APEC-OMVs)能够诱导宿主细胞鸡气管黏膜上皮细胞(Chicken Tracheal Epithelial Cells,CTECs)凋亡且具有体内致病功能,但是其进入CTECs的内吞方式不清楚、同时APEC-OMVs在宿主体内的运动轨迹及致细胞病理变化有待进一步研究。针对上述问题,本研究拟先荧光标记APEC-OMVs,在应用不同的细胞内吞抑制剂提前处理CTECs,通过该方法探究APEC-OMVs进入CTECs的内吞方式;建立核素标记APEC-OMVs示踪的方法,监测其在SPF雏鸡体内的运行轨迹,探究APEC-OMVs在宿主体内的运行轨迹和组织分布及其致细胞病理变化。主要研究方法和结果分析如下:(1)APEC-OMVs的提取纯化鉴定及方法改良使用超高速离心法粗提APEC-OMVs后利用密度梯度离心法对粗提物进一步纯化,结合免疫印迹法(Western blotting,WB)分析密度梯度离心后APEC-OMVs富集于Opti Prep?密度梯度培养基的浓度区间。采用透射电镜对纯化后APEC-OMVs进行鉴定,并用BCA法测定其浓度。结果显示:粗提的APEC-OMVs经密度梯度梯度离心后主要位于30-40%Opti Prep?密度梯度培养基层;APEC-OMVs大多呈球囊状,具有双层囊状结构;按照本研究改良的提取纯化方法提取的APEC-OMVs浓度约为300μg/m L,较之前文献的传统提取方法提取的APEC-OMVs浓度和纯度有了明显的提升。(2)APEC-OMVs进入CTECs的内化方式本试验DIO标记APEC-OMVs,分别使用氯丙嗪(Chlorpromazine,CPZ)、PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate)、dynasore、甲基-β-环糊精(Methyl-β-cyclodextrin,MβCD)、细胞松弛素D(cytochalasin D,Cyt D)以及盐酸阿米洛利(Amiloride HCl dihydrate,EIPA)对CTECs的各种内吞途径进行抑制,同时结合CCK8试剂盒研究各类内吞途径抑制剂的最高抑制浓度。然后使用DIO染料标记APEC-OMVs后与最高抑制浓度的内吞途径抑制剂处理的CTECs共培养24 h,荧光显微镜观察不同内吞途径抑制剂处理的CTECs摄取APEC-OMVs的情况。结果显示:经CPZ、PMA、dynasore和MβCD处理后的CTECs摄取APEC-OMVs的含量较没有药物处理的CTECs摄取的含量差异不显著,而EIPA和Cyt D处理后的CTECs摄取APEC-OMVs含量显著降低。上述实验结果表明APEC-OMVs主要通过巨胞饮内吞方式进入CTECs。(3)APEC-OMVs感染SPF雏鸡的体内运行轨迹和组织分布本试验采用Zr对APEC-OMVs标记,结合Radio-i TLC对Zr的标记效率、放化纯度和体外稳定性进行检测,确定Zr成功标记APEC-OMVs。将标记成功的APEC-OMVs记为Zr-DFO-APEC-OMVs。Zr-DFO-APEC-OMVs气管注射SPF雏鸡后使用micro-PET显像仪实时观察其在雏鸡体内的运行轨迹和组织分布。显像完成后收集雏鸡主要器官(肺、胃、肠等),制作病理组织学切片观察感染器官的病理变化。Radio-i TLC实验结果显示Zr-DFO-APEC-OMVs的标记效率为90.23±3.88%,放化纯度>98%,在120 h内稳定性良好,将稳定的Zr-DFO-APEC-OMVs用于体内失踪实验。Micro-PET显像结果显示Zr-DFO-APEC-OMVs被雏鸡摄取后在肺、胃和肠中摄取较高,且在36 h后可从雏鸡体内代谢完毕。病理切片结果显示肺、胃和肠发生了严重的病理变化,伴有炎性细胞浸润,其中以巨噬细胞为主,含有少数淋巴细胞和浆细胞。同时脑的病理切片呈现的袖套现象说明APEC-OMVs不具有突破血脑屏障的能力。上述实验表明APEC-OMVs感染雏鸡后呈全身性分布且主要分布于肺、胃和肠。综上所述,本研究成功对APEC-O

关键词：禽致病性大肠杆菌外膜囊泡鸡气管黏膜上皮细胞 SPF雏鸡细胞内吞方式体内示踪

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《甘肃镇战守图略》整理与研究

《甘肃镇战守图略》整理与研究

作者：牛露露宁夏大学

学位级别：硕士

《甘肃镇战守图略》,现藏台北故宫博物院,是明代彩绘边防图代表之一。嘉靖二十三年（1544）,甘肃镇腹背受敌,成为陕西三边的防御重点。为捍卫西北藩篱,由兵部职方司统一规定,在陕西右军都督府的协调组织下,甘肃镇边臣以军镇防御为主旨... 详细信息

《甘肃镇战守图略》,现藏台北故宫博物院,是明代彩绘边防图代表之一。嘉靖二十三年（1544）,甘肃镇腹背受敌,成为陕西三边的防御重点。为捍卫西北藩篱,由兵部职方司统一规定,在陕西右军都督府的协调组织下,甘肃镇边臣以军镇防御为主旨上呈《甘肃镇战守图略》。在以守为主的防御策略下,作者通过选择性的图注绘制与图说叙述,重点展现以长城为中心的军事防御工事,并且有意识地将番族与吐鲁番纳入甘肃镇防御体系之中。嘉靖中期,甘肃镇分为庄浪路、凉州路、甘州路、肃州路四路防区。在分守防区的视角下,十三幅独立的图说彼此关联,打破了地理空间上的孤立,实现了军事空间上的融合。作为明代九边重镇之一,甘肃镇的军事战守既是明中期边防政策的个案缩影,又体现出西北锁钥专有的防御特色。《甘肃镇战守图略》同时收录有《西域土地人物图》与《西域土地人物略》。《西域土地人物图》与《西域土地人物略》是以展现明时西域土地人物图景为主题的图说作品,对于明时丝绸之路的研究具有文献价值。该图说未有单行本传世,多见于明清西北边防图籍中。嘉靖中期,嘉峪关外已成异域,明朝士人通过征引与抄录的方式,对汉唐治理西域的经验进行反思与总结。《甘肃镇战守图略》将其收录其中,则蕴含着捍卫西北藩篱的美好愿景。

关键词：甘肃镇边防图分路防区明代

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论刑法理论与实务的紧张关系

中国刑事法杂志 2012年第2期 112-120页

作者：汉斯.约阿希姆.赫尔希牛露露科隆大学法学院波恩大学法学院

刑事法学科学研究和司法判决之间的联系在德国是非常紧密的。尽管如此,刑法理论与实务之间仍然存在着紧张对立的关系。通过对静坐示威、谋杀罪与安乐死案例的分析,可以清楚印证理论界与联邦最高法院刑事判决之间的紧张关系。这种紧张关... 详细信息

刑事法学科学研究和司法判决之间的联系在德国是非常紧密的。尽管如此,刑法理论与实务之间仍然存在着紧张对立的关系。通过对静坐示威、谋杀罪与安乐死案例的分析,可以清楚印证理论界与联邦最高法院刑事判决之间的紧张关系。这种紧张关系的形成原因是多方面的,但主要原因在于实务界和理论界思考问题的角度不同,同时立法者和学者的权威也在不断丧失,导致实务界面对如此众多的观点,往往无所适从。二者之间的紧张关系可以缓解,但不可能消除。

关键词：刑法理论刑事判决紧张关系静坐示威谋杀罪安乐死

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跆拳道训练方法以及对身体素质的影响研究

武当 2024年第4期 82-84页

作者：牛露露河南大学

跆拳道作为一种集健身性和竞技性为一体的体育项目，其技法简单，注重速度和腿法应用，尤其是运动过程中动静转换与高度协调，能有效锻炼身体神经系统，提升反应灵敏度。锻炼身体，强化身体素质，跆拳道训练方法是关键因素。对此，在分... 详细信息

跆拳道作为一种集健身性和竞技性为一体的体育项目，其技法简单，注重速度和腿法应用，尤其是运动过程中动静转换与高度协调，能有效锻炼身体神经系统，提升反应灵敏度。锻炼身体，强化身体素质，跆拳道训练方法是关键因素。对此，在分析跆拳道运动特征的基础上，重点从技术、体能、战术、协调性等方面对具体训练方法进行了分析，并探讨了跆拳道训练对身体力量、耐力、速度、柔韧性、协调性等素质建设带来的影响。

关键词：跆拳道训练身体素质体能训练

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《甘肃镇战守图略》绘制时间考证

档案 2019年第11期 40-43页

作者：牛露露宁夏大学人文学院

台湾故宫博物院庋藏的《甘肃镇战守图略》是研究明代西北边防的重要文献,根据图册封背文字的落款日期、墩台城堡的建置情况以及地方官员的设置变化等内容,可以推断该图册的绘制时间应在嘉靖二十三年。通过对封背文书内容与作者的考查,... 详细信息

台湾故宫博物院庋藏的《甘肃镇战守图略》是研究明代西北边防的重要文献,根据图册封背文字的落款日期、墩台城堡的建置情况以及地方官员的设置变化等内容,可以推断该图册的绘制时间应在嘉靖二十三年。通过对封背文书内容与作者的考查,进一步得出陕西行都司掌印都司是该图册的绘制机构,时任镇守陕西地方官员的杨守礼与王缙参与了图册的绘制工作。

关键词：甘肃镇战守图略嘉靖二十三年明代

近二十年(1999—2018)辑佚学研究综述

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宁夏师范学院学报 2020年第2期41卷 108-112页

作者：牛露露宁夏大学人文学院宁夏银川750021

1998年是辑佚学在学科发展史上的重要节点,国内第一部辑佚学专著《中国古籍辑佚学论稿》问世,辑佚学真正成为一门独立的学科。此后,辑佚学的研究视角集中体现在个案研究、横向断代研究、纵向过程研究、社会背景研究上。目前,辑佚学理论... 详细信息

1998年是辑佚学在学科发展史上的重要节点,国内第一部辑佚学专著《中国古籍辑佚学论稿》问世,辑佚学真正成为一门独立的学科。此后,辑佚学的研究视角集中体现在个案研究、横向断代研究、纵向过程研究、社会背景研究上。目前,辑佚学理论形态的研究仍显薄弱,辑佚与校勘、辨伪的相辅互动可进一步密切。本文就近二十年辑佚学研究成果进行阶段性爬梳,以期为日后的辑佚学研究方向和研究思路提供借鉴。

关键词：辑佚学研究视角研究综述展望

中药多糖类成分干预糖尿病肾病作用机制的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第15期28卷 240-247页

作者：刘婷婷牛露露张具斌王旭刘静吴修红黑龙江中医药大学药学院哈尔滨150000

糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症之一,是导致终末期肾病的主要原因,也是糖尿病死亡率增加的原因之一,且糖尿病肾病发病机制复杂,早期不易被发现,在临床治疗上容易错过最佳干预时期,严重危害了患者的生命健康。作为中药有效成分... 详细信息

糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症之一,是导致终末期肾病的主要原因,也是糖尿病死亡率增加的原因之一,且糖尿病肾病发病机制复杂,早期不易被发现,在临床治疗上容易错过最佳干预时期,严重危害了患者的生命健康。作为中药有效成分的多糖类成分,具有抗肿瘤、降血糖、免疫调节、抗氧化、抗病毒等生物活性。近年来,众多研究表明中药中的多糖成分可有效干预糖尿病肾病。中药多糖干预糖尿病肾病多靶点、多途径的特点和显著效果,在干预糖尿病肾病上表现出巨大的潜力。虽然中药多糖干预糖尿病肾病作用机制的研究众多,但缺乏对中药多糖干预糖尿病肾病作用机制系统的、细致的综述,故该文参考近几年关于中药多糖干预糖尿病肾病的动物实验,进行分析、归纳,阐述中药多糖干预糖尿病肾病的作用机制,通过改善胰岛素抵抗、改善氧化应激、降低炎症反应、保护肾脏和改善肠道菌群5个途径方面进行阐述,并总结作用机制涉及的信号通路及指标,对比中药多糖干预效果及多糖结构解析,以期为中药多糖干预糖尿病肾病的基础研究、新药研发与临床应用提供理论依据。

关键词：中药多糖糖尿病肾病作用机制信号通路

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