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“学为中心”视域下动物解剖学教学方法的反思

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畜牧兽医杂志 2024年第3期43卷 143-145页

作者：陈敏刘容序何敏焦凤超刘涛信阳农林学院动物科技学院河南信阳464000

由于信息技术的快速发展和动物医学专业需求的变化,动物解剖学教学在内容和方法方面发生了重大变化。动物医学专业教育已从被动和以教师为中心向积极、以临床为基础和以学生为中心转变。本文在“学为中心”背景下分析各种教学模式在动... 详细信息

由于信息技术的快速发展和动物医学专业需求的变化,动物解剖学教学在内容和方法方面发生了重大变化。动物医学专业教育已从被动和以教师为中心向积极、以临床为基础和以学生为中心转变。本文在“学为中心”背景下分析各种教学模式在动物解剖学教学中的作用和有效性。

关键词：教学方法动物解剖学教学学为中心

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一株新型鹅星状病毒HNxy2111株全基因组测序分析

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中国家禽 2024年

作者：董建国麻冰洁王瑞芦一丹杨海倩杨大苗梁自怡王念念饶丹焦凤超张宁何书海信阳农林学院动物科技学院河南丰源和普农牧股份有限公司河南牧业经济学院

为分析信阳地区鹅星状病毒（GAstV）的遗传变异情况，研究从信阳某鹅场痛风病鹅采集病料，进行病原分离鉴定和全基因组扩增测序，获得GAstV基因组，随后进行遗传进化和同源性分析。结果显示：分离一株GAstV，命名为HNxy2111，基因组全长... 详细信息

为分析信阳地区鹅星状病毒（GAstV）的遗传变异情况，研究从信阳某鹅场痛风病鹅采集病料，进行病原分离鉴定和全基因组扩增测序，获得GAstV基因组，随后进行遗传进化和同源性分析。结果显示：分离一株GAstV，命名为HNxy2111，基因组全长7 175 bp;HNxy2111基因组及ORF2基因均与参考毒株G519亲缘关系最近，处于同一分支，属于GAstV-Ⅱ型；HNxy2111基因组、ORF1a、ORF1b编码氨基酸序列与GAstV-Ⅱ型中的G519同源性最高，均为99.2%。ORF1b编码的氨基酸序列与GD AHAU2同源性最高，为100%。与G519相比，HNxy2111 ORF1a、ORF1b和ORF2编码的蛋白质分别发生了8处、3处和5处突变。综上所述，HNxy2111属于GAstV-Ⅱ型，与国内经典鹅星状病毒有较近的遗传关系，ORF1a、ORF1b和ORF2编码的蛋白有一定的突变。

关键词：鹅星状病毒基因组遗传进化分析同源性分离鉴定

减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒口服DNA疫苗的免疫效力研究

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减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒口服DNA疫苗的免疫效力研究

作者：焦凤超扬州大学

学位级别：硕士

近年来,以减毒鼠伤寒沙门氏菌作为载体靶向运送DNA疫苗至抗原提呈细胞,在小鼠和鸡模型中开展了大量的研究表明,能够激发机体产生细胞免疫应答、体液免疫应答和局部黏膜免疫应答。本试验在实验室原有的重组菌X4550(asd-pVAX1-HA)基础上,... 详细信息

近年来,以减毒鼠伤寒沙门氏菌作为载体靶向运送DNA疫苗至抗原提呈细胞,在小鼠和鸡模型中开展了大量的研究表明,能够激发机体产生细胞免疫应答、体液免疫应答和局部黏膜免疫应答。本试验在实验室原有的重组菌X4550(asd-pVAX1-HA)基础上,构建了以减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207为运送载体的重组菌SL7207(pVAX1-HA)、SL7207(pVAX1-NP)、SL7207(pVAX1-HA1)和SL7207(pVAX1-HA2),通过不同的组合就其安全性和免疫效力进行评价。首先根据GenBank中已发表的A型流感NP全基因序列设计并合成了一对PCR引物,通过RT-PCR扩增了鹅源H5亚型AIV毒株A/Goose/Jiangsu/1/2000(H5N1)NP基因。以重组质粒asd-pVAX1-HA为模板,设计并合成了两对引物,通过PCR方法扩增出HA1和HA2分段基因。将上述三种PCR产物克隆入pGEM-T easy vector进行测序。序列分析结果表明,所克隆到的NP基因与部分已发表的A型流感病毒NP序列的同源性在85%-97.9%,具有型特异性;HA1和HA2基因与模板序列同源性为100%。用EcoRV和XhoI双酶切NP基因,插入pVAX1相应酶切位点,构建成pVAX1-NP;用HindⅢ和BamHI双酶切HA1和HA2基因,分别插入pVAX1的相应酶切位点构建成pVAX1-HA1和pVAX1-HA2。转染COS-7细胞后通过间接免疫荧光试验证实NP、HA1和HA2基因在该细胞中得到了表达,说明三种质粒可以用于DNA疫苗试验。最后通过电转化方法将三种质粒以及pVAX1-HA导入鼠伤寒沙门氏菌SL7207,分别命名为 SL7207(pVAX1-HA)、SL7207(pVAX1-NP)、SL7207(pVAX1-HA1)和SL7207(pVAX1-HA2),为进一步进行体内安全性和免疫效力试验奠定了基础。携带质粒的重组菌在体外培养或入侵体内后,由于抗性选择压力的逐渐降低或消失,其携带质粒的比例也会随之降低,因此有必要对其体内外携带质粒的稳定性进行评价。结果表明,重组菌在体外培养9h后,携带质粒的比例开始明显下降(<90%);SPF雏鸡口服接种10CFU重组菌后,肝、脾等处分离的携带质粒重

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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两种固定液对鸭小肠肥大细胞染色效果的比较

黑龙江畜牧兽医 2023年第10期 72-75,137页

作者：陈敏何敏王梦雪何书海焦凤超曲哲会信阳农林学院动物科技学院/河南省水禽资源开发利用与疫病防控工程技术研究中心河南信阳464000

为了探讨不同固定液对鸭小肠肥大细胞甲苯胺蓝染色效果的影响及鸭小肠内肥大细胞的数量和分布情况,试验选择5只100日龄的健康淮南麻鸭公鸭为研究对象,取鸭只十二指肠、空肠和回肠组织样品,均分为两份,分别置于10%中性福尔马林固定液和... 详细信息

为了探讨不同固定液对鸭小肠肥大细胞甲苯胺蓝染色效果的影响及鸭小肠内肥大细胞的数量和分布情况,试验选择5只100日龄的健康淮南麻鸭公鸭为研究对象,取鸭只十二指肠、空肠和回肠组织样品,均分为两份,分别置于10%中性福尔马林固定液和卡恩氏(Carnoy)固定液中固定,常规制作石蜡切片,切片经甲苯胺蓝染色后,观察小肠肥大细胞染色效果和肥大细胞形态、数量及分布,并进行统计分析。结果表明:Carnoy固定液对肥大细胞的染色效果优于10%中性福尔马林固定液,染色评分极显著高于10%中性福尔马林固定液(P<0.01);Carnoy固定液固定的十二指肠、空肠、回肠肥大细胞数量均极显著高于10%中性福尔马林固定液(P<0.01)。鸭十二指肠、空肠和回肠中肥大细胞形态和数目不同,在黏膜固有层血管、腺管周围的结缔组织中分布较多;空肠中肥大细胞数量最多,形态多样;十二指肠和回肠中肥大细胞数量递减,形态多为圆形。说明与10%中性福尔马林固定液相比,经Carnoy固定液固定的鸭小肠组织染色后,可清晰显示肥大细胞的形态分布。

关键词：鸭小肠肥大细胞福尔马林固定液 Carnoy固定液甲苯胺蓝染色

石榴皮水提物与几种抗菌药物体外联合抗菌作用观察

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黑龙江畜牧兽医 2023年第13期 116-120页

作者：陈敏宋忠龙何敏鲁绍芳焦凤超曲哲会信阳农林学院动物科技学院河南信阳464000

为评价石榴皮水提物与抗菌药物体外联合抗菌作用的效果,试验采用双层打孔法检测石榴皮水提物的抑菌能力,采用微量二倍稀释法测定石榴皮水提物的最小抑菌浓度(MIC),使用棋盘法测定石榴皮提取物与庆大霉素、阿米卡星、链霉素、多西环素和... 详细信息

为评价石榴皮水提物与抗菌药物体外联合抗菌作用的效果,试验采用双层打孔法检测石榴皮水提物的抑菌能力,采用微量二倍稀释法测定石榴皮水提物的最小抑菌浓度(MIC),使用棋盘法测定石榴皮提取物与庆大霉素、阿米卡星、链霉素、多西环素和恩诺沙星联用对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用效果。结果表明:制备的石榴皮水提物具有抑菌效果;对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为1.25 mg/mL和5 mg/mL;石榴皮水提物联合阿米卡星对大肠杆菌表现为相加作用,联合链霉素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现为相加作用,联合庆大霉素对大肠杆菌表现为颉颃作用。说明石榴皮水提物可以与阿米卡星和链霉素联用,均表现为相加作用。

关键词：石榴皮水提物抗菌药物联合抗菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌

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鸡骨髓源造血干细胞的体外培养及分化诱导

中国家禽 2023年第10期45卷 6-11页

作者：何书海张晒焦凤超位格格王旭黄守孝董建国信阳农林学院动物科技学院河南信阳464000 河南省水禽资源开发利用与疫病防控工程技术研究中心河南信阳464000

为获取鸡骨髓源造血干细胞(HSC)和建立其体外培养方法,试验从鸡长骨中获取骨髓单个核细胞,流式细胞术分选出CD34^(+)HSC后,在体外进行培养和诱导分化,进一步观察CD34^(+)HSC的形态、生长状态、集落形成能力和分化能力。结果显示:IMDM培... 详细信息

为获取鸡骨髓源造血干细胞(HSC)和建立其体外培养方法,试验从鸡长骨中获取骨髓单个核细胞,流式细胞术分选出CD34^(+)HSC后,在体外进行培养和诱导分化,进一步观察CD34^(+)HSC的形态、生长状态、集落形成能力和分化能力。结果显示:IMDM培养基中添加50 ng/mL干细胞生长因子、30 ng/mL Flt-3配体、10μg/mL白细胞介素-3、50 ng/mL白细胞介素-6以及20%鸡血清可维持鸡CD34^(+)HSC的短期体外培养,最长可存活10 d。将上述培养体系加入到甲基纤维素半固体培养基中,可使鸡CD34^(+)HSC形成典型的干细胞克隆集落;在上述培养体系中加入50 ng/mL血小板生成素和80 ng/mL的粒细胞集落刺激因子,可诱导鸡CD34^(+)HSC向粒系细胞分化。瑞氏-姬姆萨染色结果显示,鸡CD34^(+)HSC的胞核较大,呈蓝紫色,核染色质细而分散,胞浆呈浅蓝色,均匀无颗粒。研究提示:在培养体系中添加鸡造血细胞生长因子,可实现鸡骨髓源CD34+HSC的体外扩增和定向诱导分化。

关键词：鸡骨髓造血干细胞分离培养分化诱导

广东地区猪A型塞内卡病毒USA/GBI29/2015-like株的分离鉴定与进化分析

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黑龙江畜牧兽医 2022年第8期 64-68,133页

作者：董建国饶丹焦凤超陈斌易本驰黄立赵攀登何书海信阳农林学院动物科技学院河南信阳464000 河南牧业经济学院动物医学院郑州450046

为了了解广东地区猪A型塞内卡病毒(SVA)的遗传变异情况,试验采用病毒分离纯化、间接免疫荧光、增殖动态、电子显微镜观察等方法确定疑似病料感染情况,同时采用序列比对分析方法与GenBank中具有代表性的(SVA)全基因组序列进行同源性分析... 详细信息

为了了解广东地区猪A型塞内卡病毒(SVA)的遗传变异情况,试验采用病毒分离纯化、间接免疫荧光、增殖动态、电子显微镜观察等方法确定疑似病料感染情况,同时采用序列比对分析方法与GenBank中具有代表性的(SVA)全基因组序列进行同源性分析,利用MEGA6.0软件构建全基因组系统发育进化树。结果表明:分离的病毒能够和SVA多克隆抗体发生特异性反应,病毒粒子呈球形,直径25~30 nm,成功分离得到一株SVA毒株,命名为CH-GDZQ-1;CH-GDZQ-1毒株在感染PK15细胞第15小时时病毒效价达到峰值,为1×10^(8.78) TCID_(50)/m L;CH-GDZQ-1全基因组序列与USA/GBI29/2015株核苷酸相似性为98.1%,高度同源,该毒株与中国毒株CH-GDLZ01-2017(MG428680)、CH-GDLZ02-2017(MG428681)、CH-GDQC-2017(MG428682)、CH-GDYD-2017(MG428683)、CH-GDYS01-2017(MG428684)和CH-GDYS02-2017(MG428685)在同一个进化分支,同时与美国毒株USA/GBI29/2015(KT827251)处于同一个大的分支。说明成功分离一株USA/GBI29/2015-like毒株,该毒株具有较高的病毒效价,且在广东地区流行。

关键词：猪塞内卡病毒进化树遗传变异分离病毒效价同源性

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兽医外科学实验教学方法改革的探讨

畜禽业 2023年第1期34卷 49-51页

作者：饶丹麻冰洁郑全芳董建国焦凤超信阳农林学院河南信阳464000

为顺应国家、社会和行业的需求,提高兽医外科学实验教学质量,兽医外科学实验教学以新农科思想为指导,通过完善实验室建设、调整实验课程项目和实验教学方法、试行实验项目考核方法等一系列改革措施,切实提高实验教学质量,以打造高效率课... 详细信息

为顺应国家、社会和行业的需求,提高兽医外科学实验教学质量,兽医外科学实验教学以新农科思想为指导,通过完善实验室建设、调整实验课程项目和实验教学方法、试行实验项目考核方法等一系列改革措施,切实提高实验教学质量,以打造高效率课程,培养高素养和专业技术过硬的顺应时代需求的人才。

关键词：兽医外科学实验教学方式实践考核

鸭瘟病毒、鸭坦布苏病毒和鸭疫里默杆菌多重PCR检测方法的建立与初步应用

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中国兽医学报 2023年第6期43卷 1175-1180页

作者：曲哲会张喜文鲁绍芳陈敏曾超李梦莉焦凤超何书海赵瑜黄立信阳农林学院动物科技学院河南信阳464000 信阳农林学院动物科技学院河南省水禽资源开发利用与疫病防控工程技术研究中心河南信阳464000 信阳市畜禽养殖与环境控制重点实验室河南信阳464000

设计分别检测鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)、鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)和鸭疫里默杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的特异性引物,且PCR产物大小差异明显;优化多重PCR的引物浓度、退火温度,并分析特异性和敏感性;利... 详细信息

设计分别检测鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)、鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)和鸭疫里默杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的特异性引物,且PCR产物大小差异明显;优化多重PCR的引物浓度、退火温度,并分析特异性和敏感性;利用多重PCR方法和单一PCR方法对54份临床采集的鸭源病料进行检测。结果显示,该多重PCR检测方法可用于DTMUV、RA和DPV的单纯或混合感染的诊断,PCR产物大小分别为220,308,551 bp;反应体系中最佳引物终浓度组合为1.0μmol/L的引物DTMUV-S和DTMUV-A、0.5μmol/L的引物RA-S和RA-A、0.5μmol/L的引物DPV-S和DPV-A;该检测方法退火温度在46.5~63.8℃之间均可以检测到3种病原体核酸,其中最佳退火温度为57.0℃。该方法检测DTMUV、DPV和RA的核酸最低量分别为6.570,0.600,0.440μg/L。临床样品检测结果显示,本试验建立的DTMUV、DPV和RA多重PCR检测结果与单一PCR检测结果符合率为98.1%。结果表明,本试验建立的复合PCR方法可适用于3种病原体单纯或混合感染的快速诊断,为流行病学调查及快速、准确制定针对性防控措施提供了技术支持。

关键词：多重PCR 鸭坦布苏病毒鸭瘟病毒鸭疫里默杆菌诊断