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鸡LITAF基因克隆表达及抗体的制备

鸡LITAF基因克隆表达及抗体的制备

J、K亚群禽白血病病毒的分离和囊膜蛋白(gp85)基因序列分析

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：游广炬王永强曹红李晓齐郑世军中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室

引言脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LPS-induced TNF-α,LITAF),又称p53诱导基因7或溶酶体/晚期内体小膜内在蛋白。Myokai F等在1999年发现LITAF是一个能促进TNF-α基因表达的转录因子,2006年Hong YH等克隆鉴定了鸡LITAF基因序列,由于在鸡...

引言脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LPS-induced TNF-α,LITAF),又称p53诱导基因7或溶酶体/晚期内体小膜内在蛋白。Myokai F等在1999年发现LITAF是一个能促进TNF-α基因表达的转录因子,2006年Hong YH等克隆鉴定了鸡LITAF基因序列,由于在鸡上还未报道TNF-α基因序列,在研究中检测鸡TNF-α的表达大多以检测鸡LITAF的基因表达替代。LITAF与TNF-α有相关的生物学

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国兽医杂志 2024年第4期60卷 1-10页

作者：周钊灿游广炬杨金易苏晓娜高丽王永强郑世军中国农业大学动物医学院兽医公共卫生安全全国重点实验室农业部动物流行病学重点实验室北京海淀100193 华南农业大学食品学院广东广州510642 温氏食品集团股份有限公司岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心广东云浮527100

为了解现阶段我国禽白血病病毒(ALV)的流行特征和演化趋势,本试验于2021—2022年从国内某鸡场采集蛋清ALV衣壳蛋白(p27)抗原阳性的鸡血浆,接种鸡胚成纤维细胞(DF-1)分离病毒并进行亚群鉴定;采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增分离株的囊... 详细信息

为了解现阶段我国禽白血病病毒(ALV)的流行特征和演化趋势,本试验于2021—2022年从国内某鸡场采集蛋清ALV衣壳蛋白(p27)抗原阳性的鸡血浆,接种鸡胚成纤维细胞(DF-1)分离病毒并进行亚群鉴定;采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增分离株的囊膜蛋白(gp85)基因片段,并对其进行测序,将基因序列与ALV不同亚群毒株进行比对和遗传进化分析;选取氨基酸变化差异较大的分离毒株进行间接免疫荧光鉴定。结果显示,共分离到7株ALV毒株(3株J亚群,4株K亚群),ALV-J分离毒株CAU4932、CAU4860和CAU2259的gp 85基因片段长度为918 bp,编码306个氨基酸,分离毒株之间gp 85基因核苷酸同源性为90.5%~95.2%,gp85蛋白氨基酸同源性为95.1%~99.3%;ALV-K分离毒株CAU7049、CAU5006、CAU7176和CAU7168的gp 85基因片段长度为1008 bp,编码336个氨基酸,分离毒株之间gp 85基因核苷酸同源性为89.4%~92.3%,gp85蛋白氨基酸同源性为94.0%~99.7%。gp85蛋白氨基酸序列同源性比对发现,分离株gp85蛋白氨基酸序列均会发生突变,但高变区hr1和hr2所占比例较多,证实了gp85的高变性。在gp85蛋白B细胞抗原表位中存在部分位点的氨基酸突变,可能导致gp85蛋白抗原性发生变化。间接免疫荧光鉴定结果显示,5株分离毒株均可在DF-1细胞内复制并存在可被抗体识别的p27抗原表位。结果表明,本试验分离的7株ALV毒株是国内ALV-J和ALV-K流行毒株的突变株,不仅丰富了ALV基因组库资源,且为后续研究ALV的遗传变异特征和流行趋势等提供参考依据。

关键词：禽白血病病毒 J亚群 K亚群 gp 85基因序列比较

一株樱桃谷鸭源鸭腺病毒B2毒株的分离与鉴定

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微生物学通报 2024年第9期51卷 3581-3596页

作者：江丹丹郭博伦程晓霞林昶游广炬肖世峰朱小丽王劭陈少莺陈仕龙福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013

【背景】2014年以来,鸭腺病毒(duck adenovirus,DAdV)B2感染引起的番鸭“白肝病”在我国番鸭群广泛流行,其他品种肉鸭未见发病,本研究发现两起樱桃谷鸭疑似“白肝病”的病例。【目的】鉴定樱桃谷鸭“白肝病”的病原。【方法】对送检鸭... 详细信息

【背景】2014年以来,鸭腺病毒(duck adenovirus,DAdV)B2感染引起的番鸭“白肝病”在我国番鸭群广泛流行,其他品种肉鸭未见发病,本研究发现两起樱桃谷鸭疑似“白肝病”的病例。【目的】鉴定樱桃谷鸭“白肝病”的病原。【方法】对送检鸭的肝脏等内脏样品进行PCR或RT-PCR检测、病原分离鉴定、序列测定及动物回归试验。【结果】内脏组织PCR检测DAdV B2阳性,并成功分离到一株DAdV B2毒株,命名为DAdV B2/BG19。该分离株BG19感染的鸡肝癌细胞(leghorn male hepatoma cell line,LMH)变大变圆、最后崩解,形成特征性细胞病变。分离株BG19有2个fiber基因,主要功能基因如hexon、fiber 1、fiber 2及DNA polymerase基因与国内DAdV B2分离株核苷酸相似性均达98.26%以上,与DAdV B1代表株GR对应基因的核苷酸相似性分别为77.12%、30.8%、34%和99.78%;所有DAdV B1和DAdV B2分离株的DNA polymerase基因处于同一个进化分支;分离株BG19的ORF67基因从起始密码子往后的第133位碱基为T,造成提早产生终止密码子,导致ORF67基因编码蛋白比国内早前流行代表株CH-GD-12-2014少了14个氨基酸。分离株BG19人工感染2日龄樱桃谷鸭和番鸭的发病率分别为50.0%和87.5%,死亡率分别为12.5%和37.5%,病死鸭可见与自然感染病例相似的临床症状和病理变化。【结论】从樱桃谷鸭白肝病病例成功分离鉴定一株ORF67蛋白截短表达的DAdV B2强毒株,发现DAdV B2能感染樱桃谷鸭。

关键词：樱桃谷鸭白肝病鸭腺病毒B2 分离鉴定

6株K亚群禽白血病病毒分离株的全基因组测序及遗传进化分析

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中国动物传染病学报 2023年第6期31卷 116-126页

作者：游广炬阿热阿依·海依拉提李炜李晓齐高丽曹红王永强郑世军中国农业大学动物医学院公共卫生安全全国重点实验室北京100193

为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征,我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆,接种DF-1细胞进行病毒分离,分离出6株外源性ALV毒株,并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明,6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C... 详细信息

为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征,我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆,接种DF-1细胞进行病毒分离,分离出6株外源性ALV毒株,并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明,6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C型逆转录病毒,缺乏病毒致癌基因,分离株DT190901基因组全长为7473 bp;DT190902和DT190905为7467 bp;DT190903和DT190906为7481 bp;DT190904为7493 bp,分离株间基因组序列同源性较高(98.6%~99.9%)。对6个ALV分离株与其他ALV毒株进行序列比较和遗传进化分析,结果表明,分离株的LTR、gag、pol及gp37基因与内源性ALV相比具有较高同源性(>93.8%),gp85基因与ALV-K一致性较高(>95.4%),属于新型ALV亚群(K亚群)遗传分支。分离株的LTR序列与内源性ALV相似,比其他外源性ALV亚群缺少一个CAAT Box、PRE Box、Y Box及CArG Box等转录调控元件。结果表明这6个分离株属于ALV-K亚群,为ALV-K与内源性ALV的重组毒株,其LTR序列与内源性ALV接近可能导致其复制能力及致病性降低。遗传进化分析表明,ALV-K已经在我国局部流行,并出现基因重组和突变毒株,应该引起重视并改进净化防控措施控制ALV-K流行。

关键词：禽白血病病毒 K亚群重组毒株全基因组测序遗传进化分析

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基于非靶向代谢组学分析甲基化对副干酪乳酪杆菌发酵剂贮藏特性的影响

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食品科学 2025年第1期46卷 49-55页

作者：游明坤张文羿内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010018

副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)Zhang是一株具有调节免疫反应、抗氧化等益生特性的优良菌株。DNA甲基化是一种重要的表观遗传机制,在细菌的很多生理过程中发挥关键作用。为更好利用该菌株,本研究重点关注甲基化对*** Zh... 详细信息

副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)Zhang是一株具有调节免疫反应、抗氧化等益生特性的优良菌株。DNA甲基化是一种重要的表观遗传机制,在细菌的很多生理过程中发挥关键作用。为更好利用该菌株,本研究重点关注甲基化对*** Zhang发酵剂贮藏特性的影响。利用*** Zhang及其DNA甲基化突变株ΔpglX制备发酵剂并在30℃条件下贮藏90 d。结果表明:与野生型相比,甲基化突变株在贮藏90 d后活菌数极显著提高(P<0.01);利用非靶向代谢组学方法分析贮藏90 d后野生型及其甲基化突变体的代谢物差异发现,与野生型相比,突变体的差异代谢物质有269种,在负离子模式下主要富集到核苷酸代谢、嘌呤代谢、嘧啶代谢、柠檬酸循环、乙醛酸盐和二羧酸盐代谢等多条代谢通路,在正离子模式下主要富集到生物素代谢等多条代谢通路。研究结果证实DNA甲基化可以通过生成和利用碳水化合物类、脂肪酸类物质等提高*** Zhang的贮藏特性。

关键词：副干酪乳酪杆菌 DNA甲基化贮藏特性发酵剂 pglX 非靶向代谢组学

多产消者的两阶段四层主从-合作博弈鲁棒模型及求解

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电力自动化设备 2025年第01期 208-216页

作者：魏金花尚广广刘雄飞万占国汪树升银川科技学院信息工程学院中国人民解放军68006部队金开智维(宁夏)科技有限公司

针对含可再生能源和柔性负荷的产消者参与电力市场的主从-合作交易过程，提出一种多产消者两阶段四层主从-合作博弈鲁棒模型。通过引入“最大波动幅度”的概念以及定义波动比例系数，建立可再生能源不确定性集；考虑可再生能源的不确定... 详细信息

针对含可再生能源和柔性负荷的产消者参与电力市场的主从-合作交易过程，提出一种多产消者两阶段四层主从-合作博弈鲁棒模型。通过引入“最大波动幅度”的概念以及定义波动比例系数，建立可再生能源不确定性集；考虑可再生能源的不确定性和柔性负荷对交易策略的影响，建立max-max-min-max形式的两阶段四层主从-合作鲁棒模型；提出一种交替迭代的列约束生成算法，通过解耦子问题加速求解；将共识乘子交替方向法与改进的动态自适应交替优化法相结合，克服非凸的主从-合作鲁棒模型收敛困难的问题。基于某智慧能源示范项目的仿真验证了所提模型和方法的有效性。

关键词：可再生能源不确定性柔性负荷主从-合作鲁棒模型列约束生成算法自适应交替优化法

雾收集用单向导湿针织物涂层摩擦制备及性能研究

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丝绸 2025年第1期62卷 49-56页

作者：张静广靖陈诚新疆大学特色纺织品与清洁染整技术重点实验室乌鲁木齐830017 新疆智能与绿色纺织重点实验室乌鲁木齐830017

随着人口爆炸、工业和高新产业发展的持续,工厂和居民对清洁用水需求日益增加,水雾收集器件不断涌现,而现有水雾收集器件多采用飞秒激光刻蚀等方式达到符合要求的浸润性表面,对设备要求较高。本文基于简便的室温自发胶凝作用,温和构建... 详细信息

随着人口爆炸、工业和高新产业发展的持续,工厂和居民对清洁用水需求日益增加,水雾收集器件不断涌现,而现有水雾收集器件多采用飞秒激光刻蚀等方式达到符合要求的浸润性表面,对设备要求较高。本文基于简便的室温自发胶凝作用,温和构建凝胶聚合物基质,通过引入反应组分以控制胶凝成形期间的微观形貌与表面能分布,经室温修饰形成超疏水聚合物复合材料。以针织物为基底、摩擦为手段构制Janus针织物涂层,利用其润湿不对称性实现单向导湿,进而在捕雾集水的同时减缓水蒸发以提升应用效率,达到低成本且高效的雾收集。

关键词：雾收集单向导湿针织物涂层摩擦制备 Janus

中国文化情境下价值感知对农户混农林低碳增汇措施采纳的影响

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西北农林科技大学学报（社会科学版） 2025年第1期25卷 78-88页

作者：薛彩霞侯广健西北农林科技大学经济管理学院陕西杨凌712100

混农林是高效利用自然资源、减缓气候变化的生态农业模式,农户的混农林低碳增汇措施对其贡献“双碳”目标具有重要影响。基于陕南秦巴山区864份调研数据,运用多元Probit模型以及调节效应模型探讨中国文化情境下价值感知对农户混农林低... 详细信息

混农林是高效利用自然资源、减缓气候变化的生态农业模式,农户的混农林低碳增汇措施对其贡献“双碳”目标具有重要影响。基于陕南秦巴山区864份调研数据,运用多元Probit模型以及调节效应模型探讨中国文化情境下价值感知对农户混农林低碳增汇措施采纳的影响,并分析不同措施之间的关联效应以及社会权威的调节作用。结果表明:(1)农户的减少含碳要素投入与减少非合意产出、减少含碳要素投入与提高经营强度、减少含碳要素投入与加强森林保护以及提高经营强度与加强森林保护措施之间均存在互补效应;(2)功利感知对各低碳增汇措施均具有显著正向影响,合群感知对减少含碳要素投入具有显著正向影响,颜面感知对减少含碳要素投入和提高经营强度具有显著正向影响;(3)社会权威在合群感知、颜面感知与减少含碳要素投入,功利感知、颜面感知与提高经营强度,功利感知与加强森林保护的关系中起负向调节作用。建议政府从中国本土文化特征入手,激发农户响应“双碳”目标的内生力量,同时发挥不同措施与技术之间的协同效应,推动农林减排增汇的长效开展。

关键词：陕南秦巴山区价值感知中国农村社会特征混农林关联效应

“双减”背景下小学语文作业设计优化策略探析

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名师在线（中英文） 2025年第1期 33-35页

作者：游石娇福建省柘荣县实验小学

“双减”政策要求减轻学生的作业负担和校外培训负担,为学生“减负松绑”。因此,小学语文教师在进行作业设计时,也应当秉承“双减”理念,不仅要注重对作业“量”的把控,还要关注作业的“质”,创新作业形式、丰富作业内容,以便为学生提... 详细信息

“双减”政策要求减轻学生的作业负担和校外培训负担,为学生“减负松绑”。因此,小学语文教师在进行作业设计时,也应当秉承“双减”理念,不仅要注重对作业“量”的把控,还要关注作业的“质”,创新作业形式、丰富作业内容,以便为学生提供更优的作业体验,从而更好地实现教育教学目标。基于此,文章围绕“双减”背景下小学语文作业设计的优化展开了深入、全面的探析,从三个方面提出了相应的优化策略,旨在提高小学语文作业设计水平,促进学生语文学科核心素养以及综合能力的发展。

关键词：小学语文 “双减” 作业设计优化策略