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极化巨噬细胞的免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜促进口腔黏膜再生

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极化巨噬细胞的免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜促进口腔黏膜再生

作者：温笑苏州大学

学位级别：硕士

目的:制备免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜,并表征其理化特性、生物相容性、免疫调控能力,研究其促血管生成能力及口腔黏膜再生的能力。方法:首先通过微流控技术制备负载IL-4的磷脂(SL)复合物和构建装载SL/IL-4的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(... 详细信息

目的:制备免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜,并表征其理化特性、生物相容性、免疫调控能力,研究其促血管生成能力及口腔黏膜再生的能力。方法:首先通过微流控技术制备负载IL-4的磷脂(SL)复合物和构建装载SL/IL-4的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微流控微球,之后均匀分散在GelMA水凝胶溶液中后光交联,得到极化巨噬细胞(BMMs)的免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜。最后通过原子力学显微镜(AFM)、红外光谱分析(FTIR)、X线能谱分析仪(EDS)、水接触角仪(WCA)、扫描电镜(SEM)、ELISA等方法进行材料的形貌、理化性能表征。将大鼠成纤维细胞种植在水凝胶人工黏膜上,以CCK-8法和细胞荧光染色,通过评估细胞增殖情况以考察水凝胶的细胞相容性。将水凝胶与巨噬细胞共培养7天后,通过流式细胞技术、qRT-PCR、EILSA检测以及细胞免疫荧光染色检测极化后的巨噬细胞表型、促炎基因TNF-α、抗炎基因TGF-β的表达及细胞因子PDGF、VEGF的分泌情况,综合评估水凝胶人工黏膜的调控功能。用极化后的上清液培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),考察水凝胶成血管的能力。最后建立兔口腔黏膜缺损模型,评价水凝胶人工黏膜促进黏膜再生效果。结果:通过SEM、AFM、EDS检测装载IL-4磷脂复合物(SL/IL-4)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球和水凝胶人工黏膜表面形貌和内部结构,证明磷脂IL-4复合物成功的引入了 GelMA水凝胶,并且没有破坏GelMA水凝胶内部的三维立体结构。之后经过FTIR和Elisa试剂盒的检测更进一步证实成功构建了免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜,而且一定程度上提高了 IL-4的负载率。同时孔隙率、降解速率、释放速率、水接触角结果进一步表明该人工黏膜的材料性能得到不同程度改进,发现引入磷脂后的微球表面孔径减小,微球直径大小无明显变化,能够保护并缓释IL-4,使得免疫微球工程化水凝胶中IL-4包封率相比于纯PLGA微球增加,释放速率平缓,该结果为之后进一步的体外及体内研究提供了实验基础。细胞活死染色和CCK8结果显示成纤维细胞在水凝胶膜上生长状态良好,表明水凝胶人工黏膜对细胞的增殖没有明显的影响。α-SMA荧光染色表明复合纤维支架对细胞具有良好的黏附性能。极化BMMs流式结果显示实验组CD11b/CD206阳性细胞较空白对照组有显著增多,且与突释组无明显差异。RT-PCR结果显示实验组有效的使得促炎基因TNF-α表达量随时间逐渐下降,同时抑炎基因TGF-β表达量呈上升趋势,并与对照组具有显著性差异(P<0.05)。ELISA和免疫荧光染色结果与三组BMMs基因表达类似,进一步提示极化巨噬细胞的免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜,缓慢释放IL-4以极化BMMs极化方向,从而精准抑制炎症因子,促进抑炎因子及PDGF的分泌。HUVECs在水凝胶极化BMMs作用后的上清液培养5小时,可以分化排列成明显的网状结构。兔口腔模型缺损修复HE、MASSON切片结果提示空白对照组(blank control)、阴性对照组(GelMA/PLGA/SL)以及突释对照组(GelMA/IL-4)黏膜厚度较薄,钉突数量少,且与实验组(MSaP-aL/p)具有显著性统计学差异(P<0.05)。免疫组化CD34提示实验组创面血管生成数量最多。同时显示组织内CD206表达明显高于其余三组,同时CD86的表达低于其余三组。进一步的提示IL-4在体内可以通过极化巨噬细胞,诱导M2极化,从而调节创面微环境,促进组织快速愈合。结论:顺利构建免疫微球工程化的水凝胶人工黏膜,并且该人工黏膜具有良好的溶胀性能、亲水性和药物控释功能。具有良好生物相容性,可促进细胞黏附、增殖;并且能够极化M2型巨噬细胞分泌抑炎因子和PDGF促进血管内皮细胞生成。在兔口腔黏膜缺损处进行免疫调控,能够有效降低局部炎症反应为黏膜再生创造理想微环境,同时促进血管,并且在显著减少后期瘢痕组织形成。

关键词：口腔黏膜炎症血管化水凝胶微球

基于对比学习的滚动轴承早期故障在线检测方法

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振动与冲击 2023年第14期42卷 229-236页

作者：王岩红温笑欢揭永琴王少伟上海工程技术大学管理学院上海201620 欧姆龙(中国)有限公司上海200120

早期故障检测不仅是故障诊断与设备健康管理的难点,也是工业生产实践中亟待攻坚的技术重点。该研究在工业大数据驱动视域下,提出了一种基于对比学习的滚动轴承异常及早期故障在线检测方法。首先,建立一个基于深度可分离卷积及残差连接... 详细信息

早期故障检测不仅是故障诊断与设备健康管理的难点,也是工业生产实践中亟待攻坚的技术重点。该研究在工业大数据驱动视域下,提出了一种基于对比学习的滚动轴承异常及早期故障在线检测方法。首先,建立一个基于深度可分离卷积及残差连接的深度编码器,在能有效提取信号特征的同时进一步降低模型参数量和计算量;其次,设置特定代理任务以实现基于对比学习方法的无监督编码器训练,使编码器胜任不同采样点信号之间差异的学习任务;最后,通过训练后的编码器对信号进行特征提取,并设计一种在线检测算法,该算法能够识别并区分滚动轴承的异常及早期故障。该研究引入XJTU-SY数据集对上述方法进行验证,结果表明,与现有无监督故障检测方法相比,该方法准确性高,时效性强,丰富了不同工况下轴承全生命周期的健康管理方法。

关键词：设备健康管理预测性维护异常检测早期故障检测对比学习深度可分离卷积

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基于类型学的站域功能定位方法综述及优化

城市发展研究 2023年第3期30卷 28-31页

作者：卢源温笑然刘猛于慧北京交通大学建筑与艺术设计学院

轨道交通站域空间的综合利用规划是决定TOD模式成败的关键之一。基于类型学视角，以站域在城市结构、交通网络以及投资开发中的三种功能为线索，对现状轨道交通站域功能分类方法进行类型学的评价。同时从中心耦合、换乘需求、投资耦合... 详细信息

轨道交通站域空间的综合利用规划是决定TOD模式成败的关键之一。基于类型学视角，以站域在城市结构、交通网络以及投资开发中的三种功能为线索，对现状轨道交通站域功能分类方法进行类型学的评价。同时从中心耦合、换乘需求、投资耦合三个角度，提出建立多维一体的站域规划功能定位方法。

关键词：类型学轨道站域功能分类

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SAXS研究四臂聚氧化乙烯片晶的增厚

高分子学报 2014年第3期24卷 415-422页

作者：温笑菁王维东北大学秦皇岛分校资源与材料学院秦皇岛066004 南开大学软合成材料中心教育部功能高分子重点实验室高分子研究所天津300071

使用小角X光散射（SAXS）方法研究了每臂分子量为5000的四臂聚氧化乙烯在从熔点以上的温度淬火到室温后，在室温到熔点前的温度区域里片晶的增厚过程.采用一维相关函数分析方法分析了SAXS数据，获得了样品的长周期、线性结晶度、结晶层... 详细信息

使用小角X光散射（SAXS）方法研究了每臂分子量为5000的四臂聚氧化乙烯在从熔点以上的温度淬火到室温后，在室温到熔点前的温度区域里片晶的增厚过程.采用一维相关函数分析方法分析了SAXS数据，获得了样品的长周期、线性结晶度、结晶层和无定形层厚度随温度的变化.按照这些参数在升温过程中的演变规律，确定了3个特征区域.Ⅰ区约在26-45 ℃内，存在着3种不同厚度的片晶，最厚的片晶层厚度为9.3 nm，线性结晶度、长周期、结晶层和无定形层厚度等参数基本不变，称为不变区.Ⅱ区约在45-52 ℃之间，这些参数都发生变化，SAXS的主峰分化为两个主要的峰，长周期、结晶层和无定形层厚度开始增加，但是，线性结晶度升高后又降低，称为转变区.Ⅲ区约在52-60 ℃之间，体系中只有单一厚度的片晶，其厚度不断增厚，到60 ℃结晶层厚度达15.8 nm，称为增厚区.从分子运动和片晶亚稳定本质分析，可以解释实验上观察到的3个区域发生变化的本质：在不变区里，主要的分子运动几乎被冻结，不可能发生可检测到的片晶结构变化.在转变区里，分子运动开始起作用，未结晶的分子开始结晶.同时，薄片晶会熔融，尔后又重新结晶.在增厚区里，线性结晶度和结晶层厚度增加，也意味着熔融-重结晶过程还在继续，直至达到这个样品可能形成的最厚片晶的熔点.实验观察到的熔融-重结晶过程的本质是聚合物片晶的亚稳态特性，稳定性低的薄片晶向稳定性高的厚片晶转变，即一个典型的奥斯瓦尔德熟化（Ostwald ripening）.

关键词：聚氧化乙烯小角X光散射片晶熔融-重结晶奥斯瓦尔德熟化

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