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作者：温晓英河北医科大学

学位级别：硕士

目的:Bevacizumab进行玻璃体腔内注射治疗眼内各种新生血管性疾病,目前已经成为眼科领域的新热点,有关报道(1,2,3)相继发表于世,患者的视功能均有不同程度恢复和提高,然而对于其远期疗效,目前各国学者还没有进行大量的长期随访和前瞻性... 详细信息

目的:Bevacizumab进行玻璃体腔内注射治疗眼内各种新生血管性疾病,目前已经成为眼科领域的新热点,有关报道(1,2,3)相继发表于世,患者的视功能均有不同程度恢复和提高,然而对于其远期疗效,目前各国学者还没有进行大量的长期随访和前瞻性随机临床研究。当一种药物应用于局部,我们应该了解其对靶部位不同组织有无潜在毒性影响,有关Bevacizumab对体外培养的猪视网膜色素上皮细胞生长的影响,国内外临床和基础研究较少。本实验通过体外培养猪RPE细胞来观察Bevacizumab对视网膜色素上皮细胞的影响。方法:1猪视网膜色素上皮细胞培养1.1摘取猪眼球,去除眼前节和视网膜神经层,用胰酶消化法培养猪原代RPE细胞。1.2把剥离下来的视网膜神经层以1000r/min-1离心5min,加少许培养液,轻吹,吸出上层悬浮的颜色较深的液体,接种于培养瓶中。1.3细胞鉴定:免疫荧光,透射电镜两种方法对RPE细胞进行鉴定。2 Bevacizumab对体外培养的猪视网膜色素上皮细胞毒性作用2.1把培养的第3代RPE细胞接种于96孔板中,分别加入终浓度为0,0.125,0.5,1.0,1.25,2.0,2.5mg/ml的Bevacizumab,分别于12h,24h,48h,72h后,MTT比色法测定药物对RPE增生的影响。2.2根据MTT结果,将培养的第3代细胞中加入终浓度为2.0,2.5mg/ml的Bevacizumab,培养72小时后,流式细胞术检测Bevacizumab对RPE细胞凋亡和细胞周期的影响。2.3第三代RPE细胞,加入终浓度为2.0mg/ml的bevacizumab作用72h后,透射电镜观察RPE细胞形态的改变。3 Bevacizumab对猪视网膜色素上皮(RPE)细胞吞噬和移行功能的影响3.1 ROS制备和FITC荧光标记,细胞色素的制备室温下,于暗处用终浓度为10ug/ml的FITC液孵育提取的ROS1小时,然后以细胞培养液调整浓度为l×107 /ml。原代细胞培养时,在第二次换液时,吸取培养瓶下部1/2培养液,用培养液稀释,-20℃冻存备用。3.2 RPE细胞的培养及标记采用胰蛋白酶消化法。把培养的第3代RPE细胞接种于24孔板中,分别加入终浓度为0,0.25,1.0,2.0,2.5mg/ml的Bevacizumab,分别于12h,24h,48h,72h后,用含有终浓度为40ug/mlSR的生长液孵育RPE细胞36小时。3.3吞噬动力学观察向每个培养孔(24孔板)中加入l×107 /ml的FITC-ROS50ul,进行孵育24h。将孵育液吸出,以4℃的无血清DMEM冲洗二次,以终止吞噬。在荧光显微镜下观察吞噬量。3.4非特异性吞噬实验采用胰蛋白酶消化法,把培养至无色素的第7代RPE细胞接种于96孔板中,分别加入终浓度为0,0.25,1.0,2.0,2.5mg/ml的Bevacizumab ,分别于12h,24h,48h,72h后,将培养液吸出,每孔加入含色素的培养液60ul,24h后洗净,用405nm波长的酶联免疫检测仪检测RPE吞噬色素量。3.5检测对RPE细胞移行能力的影响将培养的第3代RPE细胞以5×104个每孔接种于24孔细胞培养板上,分别加入终浓度为0,0.25,1.0,2.0,2.5mg/ml的Bevacizumab,分别于12h,24h,48h,72h后,将培养液吸出,制造RPE细胞损伤模型,无血清培养48h,HE染色,计数进入刮痕区的细胞数。结果:1.体外培养的猪原代RPE细胞生长良好,有的呈集落式生长,细胞呈不规则形,接近融合时近六边形,传代稳定,透射电镜表明细胞内含大量色素,免疫荧光鉴定抗角蛋白抗原阳性;2.通过MTT法检测,2.0-2.5mg/ml浓度范围内,与对照组比较,Bevacizumab作用72h后RPE细胞生长均有明显抑制(p<0.05),且呈浓度依赖性;3.流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Bevacizumab组S期细胞较对照组减少,细胞凋亡与对照组无差异;4.透射电子显微镜观察细胞的超微结构,Bevacizuman组细胞微绒毛减少,细胞质内出现空泡和髓鞘样变性;5.与对照组相比,Bevacizumab的任何浓度和任何时间段对RPE细胞的特异性吞噬和非特异性吞噬都没有影响;6. Bevacizumab在2.0-2.5mg/ml浓度范围内,与对照组比较,Bevacizumab作用48h后可明显抑制RPE细胞移行。结

关键词：视网膜色素上皮细胞贝伐单抗增生细胞周期和凋亡形态吞噬功能移行

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缓解县乡财政困难的思路与对策

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东南学术 2006年第1期 107-112页

作者：罗妙成温晓英福建财会管理干部学院

县乡财政困难成为当前突出的问题,缓解县乡财政困难必须坚持科学发展观,按照“五个统筹”的要求,在构建和谐社会的框架内,通过大力发展县域经济,加强财源建设,按照构建公共财政要求,深化改革,完善财政体制,建立激励约束机制,加强监管,... 详细信息

县乡财政困难成为当前突出的问题,缓解县乡财政困难必须坚持科学发展观,按照“五个统筹”的要求,在构建和谐社会的框架内,通过大力发展县域经济,加强财源建设,按照构建公共财政要求,深化改革,完善财政体制,建立激励约束机制,加强监管,化解债务风险、不断提高理财水平等途径加以解决。

关键词：县乡财政困难思路对策

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Bevacizumab对体外培养猪视网膜色素上皮细胞的毒性作用

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眼科研究 2010年第12期28卷 1134-1138页

作者：温晓英郝玉华河北医科大学第二医院眼科石家庄研究生050000 保定市第一中心医院眼科 071000

目的研究bevacizumab（avastin）对猪视网膜色素上皮（RPE）细胞的毒性作用,进一步探讨该药物的安全剂量。方法 30只猪眼RPE细胞培养于含质量分数20%胎牛血清的DMEM培养基中,透射电镜下观察细胞内含大量色素,免疫荧光检测抗角蛋白抗原... 详细信息

目的研究bevacizumab（avastin）对猪视网膜色素上皮（RPE）细胞的毒性作用,进一步探讨该药物的安全剂量。方法 30只猪眼RPE细胞培养于含质量分数20%胎牛血清的DMEM培养基中,透射电镜下观察细胞内含大量色素,免疫荧光检测抗角蛋白抗原阳性。实验分为对照组（0g/L bevacizumab）和实验组（0.125、0.25、0.5、1.0、1.25、2.0、2.5g/L bevacizumab）。MTT比色法测定不同终质量浓度（0、0.125、0.25、0.5、1.0、1.25、2.0、2.5g/L）bevacizumab对RPE细胞增生的影响;流式细胞术检测bevacizumab作用72h后细胞凋亡和细胞周期的变化,倒置相差显微镜和透射电子显微镜下观察细胞形态和超微结构的改变。结果 2.0~2.5g/L bevacizumab作用72h后,与对照组比较RPE细胞的生长均有明显抑制（t=1.300,P=0.000;t=1.300,P=0.000）,且呈质量浓度依赖性;实验组S期细胞较对照组减少,细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义（χ2=1.870,P=0.240）。光学显微镜下,2.0g/L bevacizumab组细胞形态无明显变化。透射电子显微镜下,2.0g/L bevacizumab组细胞微绒毛减少,细胞质内出现空泡和髓鞘样变性。结论大剂量bevacizumab可抑制猪眼RPE细胞的有丝分裂,抑制细胞增生,明显破坏细胞的超微结构。

关键词：视网膜色素上皮 bevacizumab 药理学增生凋亡形态学

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传统文化与城市的重构及整合研究

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太原理工大学学报 2005年第1期36卷 90-92页

作者：温晓英赵建彬太原理工大学建筑与环境工程学院山西太原030024

通过对传统文化与城市的重构、整合相互关系的历史研究,从中发掘城市发展的文化脉络,指出传统文化格局的变迁,表现在意识形态领域,落后文化吸纳先进文化,促进城市形态的变更。在城市的重构、整合方面,旨在为现代的城市设计提供可鉴之路。

关键词：传统文化城市重构整合

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PCCP限制接头止推与钢管止推设计的对比分析

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中国给水排水 2013年第14期29卷 62-65页

作者：温晓英王长祥张蕾中国市政工程华北设计研究总院天津300074

介绍了埋地钢管止推计算及PCCP管道限制接头的止推计算,通过对计算数据的对比分析,反映了不同方法计算结果之间的差异,并对这种差异及其产生的原因进行了分析。

关键词： PCCP 弯头止推限制接头钢管止推

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交通噪声对临街中学的影响调查与评价

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建筑科学 2018年第2期34卷 42-48,65页

作者：温晓英陆凤华太原理工大学太原030024

随着社会的发展与经济水平的日益提高,人们对城市声环境的要求越来越高,而汽车保有量的快速提升则使得道路噪声问题突显,尤其对道路附近学校的声环境影响更为突出。本文采用现场测试和调查问卷的方法对不同层次道路附近学校的声舒适进... 详细信息

随着社会的发展与经济水平的日益提高,人们对城市声环境的要求越来越高,而汽车保有量的快速提升则使得道路噪声问题突显,尤其对道路附近学校的声环境影响更为突出。本文采用现场测试和调查问卷的方法对不同层次道路附近学校的声舒适进行研究,给出了4所学校的噪声环境测试结果与教师和学生的主观感受情况。结果发现随着道路级别的增加,噪声水平依次提高,快速主干路等效A声级(L_(eq))最大达到74.2 d B(A),毗邻快速主干路、主干路的中学,其外部和内部的声环境污染严重;主观评价城市噪声对教师和学生的声舒适度的感知,调查中发现教师和学生都认为交通噪声给他们带来很大的困扰,走访中发现随着学生年龄的增加,对声环境的烦恼度增强;相关分析表明临街教学楼噪声水平L_(eq)以及学生主观舒适概率与其相临马路机动车道数存在显著的线性相关性(R^2:0.985,-0.896;P<0.05),学生对其声环境的主观评价与临街教学楼的噪声水平L_(eq)值呈非线性相关(R^2∶0.949,P<0.05);马路噪声L_(eq)水平是影响各学校的声环境和声舒适的重要因素。

关键词：声环境临街中学声舒适道路交通现场实测问卷调查回归模型

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