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枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖及PLC-γ信号通路的影响

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中医杂志 2021年第21期62卷 1923-1929页

作者：夏旭婷王婷刘富林涂琴蓉滕广飞湖南中医药大学湖南省410208 湖北省襄阳市中医医院湖南师范大学附属湘东医院中国中医科学院望京医院

目的探讨枳术丸治疗慢传输型便秘的可能作用机制。方法20只SD雄性大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白组,每组10只。枳术丸汤剂组大鼠每日给予浓度为2 g/ml枳术丸汤剂5.8 g灌胃,连续7天,空白组正常饲养。末次给药后1 h腹主动脉采血离心制备... 详细信息

目的探讨枳术丸治疗慢传输型便秘的可能作用机制。方法20只SD雄性大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白组,每组10只。枳术丸汤剂组大鼠每日给予浓度为2 g/ml枳术丸汤剂5.8 g灌胃,连续7天,空白组正常饲养。末次给药后1 h腹主动脉采血离心制备含药血清。采用CCK8法观察磷脂酶C-γ(PLC-γ)特异性抑制剂U73122对大鼠结肠原代Cajal间质细胞的细胞抑制率来筛选药物浓度,观察5%、10%、15%、20%浓度的枳术丸汤剂含药血清对Cajal间质细胞的细胞增殖率筛选药物浓度,并分别培养12、24、48 h来筛选用药时间。取二或三代Cajal间质细胞接种至96孔板中,每孔1×10^(4)个细胞,每组重复3孔。实验分为正常组、模型组(正常细胞+筛选浓度的U73122)、空白血清组(模型组+10%空白血清)、枳术丸汤剂血清组(模型组+筛选浓度枳术丸含药血清)。干预时间为实验筛选出的时间。免疫组化法检测磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)、磷脂酶C-γ2(PLC-γ2)阳性表达,Western blot法检测PLC-γ1、PLC-γ2蛋白表达,RT-PCR法检测PLC-γ1、PLC-γ2基因表达。结果筛选出U73122最佳实验药物浓度为30μmol/L,枳术丸汤剂组最佳用药浓度为5%,实验最佳干预时间为24 h。与正常组比较,模型组PLC-γ1、PLC-γ2平均光密度值、蛋白及基因表达均降低(P<0.01);与模型组比较,枳术丸汤剂血清组、空白血清组PLC-γ1、PLC-γ2平均光密度值、蛋白及基因表达均升高(P<0.05或P<0.01);与空白血清组比较,枳术丸汤剂血清组PLC-γ1、PLC-γ2阳性表达、蛋白及基因表达明显增多(P<0.01)。结论枳术丸汤剂可能通过激活Cajal间质细胞PLC-γ信号通路,调控细胞增殖,从而促进胃肠运动。

关键词：慢传输型便秘枳术丸 Cajal间质细胞肠道动力细胞增殖磷脂酶C-γ1/磷脂酶C-γ2信号通路

Cajal间质细胞与消化系统疾病相关性研究进展

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湖南中医杂志 2019年第9期35卷 160-162页

作者：王婷涂琴蓉刘富林夏旭婷湖南中医药大学

Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)是一种特殊类型的间质细胞。大量研究表明,ICC在维持胃肠正常运动中起着重要的调控作用,并在一些消化系统疾病中表现为异常状态。该文就ICC及其异常变化与常见消化系统疾病的相关性进行... 详细信息

Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)是一种特殊类型的间质细胞。大量研究表明,ICC在维持胃肠正常运动中起着重要的调控作用,并在一些消化系统疾病中表现为异常状态。该文就ICC及其异常变化与常见消化系统疾病的相关性进行简要综述.

关键词： Cajal间质细胞消化系统疾病综述,学术性

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王小娟治疗反流性食管炎经验

湖南中医杂志 2019年第7期35卷 22-24页

作者：涂琴蓉王婷王小娟刘富林湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

介绍王小娟教授治疗反流性食管炎的经验。王教授认为,本病病机为胃气上逆,病位在食管,治疗以脾胃为本,兼从肝肺论治。方药以半夏厚朴汤、半夏泻心汤、肝胃百合汤运用较多,组方用药主要根据临床症状、胃镜表现等临证加减。附验案3则,以... 详细信息

介绍王小娟教授治疗反流性食管炎的经验。王教授认为,本病病机为胃气上逆,病位在食管,治疗以脾胃为本,兼从肝肺论治。方药以半夏厚朴汤、半夏泻心汤、肝胃百合汤运用较多,组方用药主要根据临床症状、胃镜表现等临证加减。附验案3则,以资佐证。

关键词：反流性食管炎胃气上逆名医经验王小娟

枳术丸水煎液及其拆方含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖和凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第19期26卷 120-126页

作者：滕广飞刘富林夏旭婷涂琴蓉王婷湖南中医药大学中医学院长沙410000 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只... 详细信息

目的:探讨枳术丸水煎液及其拆方对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖和凋亡的影响及其分子机制,并从细胞分子层面分析中医攻补兼施法治疗慢传输型便秘可能的机制。方法:将40只大鼠随机分成白术组、枳实组、枳术丸组、空白血清组,每组10只。白术组灌以17.7 g·kg^-1·d^-1白术水煎液,枳实组灌以8.9 g·kg^-1·d^-1枳实水煎液,枳术丸组灌以26.4 g·kg^-1·d^-1枳术丸水煎液,空白血清组灌以无菌蒸馏水3 mL,每日1次,连续7 d,取血制备含药血清和空白血清。将4组含药血清分别配成5%,10%,15%,20%4个体积分数,干预24 h,观察ICC的数量、形态,用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,测定各组最佳干预体积分数。将大鼠结肠ICC细胞分为正常组、空白血清组、白术组、枳实组、枳术丸组,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测各组ICC的增殖情况,流式细胞仪检测各组ICC的凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组ICC中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,空白血清组、白术组、枳实组最佳干预体积分数均为10%,枳术丸组最佳干预体积分数为5%。与正常组比较,所有实验中空白血清组对ICC增殖和凋亡的影响没有明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC增殖率有显著差异(P<0.05,P<0.01),与白术组和枳实组比较,枳术丸组对ICC增殖率明显增加(P<0.05,P<0.01);与枳实组比较,白术组对ICC增殖率变化不明显。与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组ICC的凋亡率无明显差异;与正常组及空白血清组比较,白术组、枳实组、枳术丸组内的XIAP,PCNA蛋白水平均明显上调(P<0.05,P<0.01),三组间比较差异不明显。结论:枳术丸、枳实、白术在一定浓度下均能通过增加XIAP,PCNA蛋白表达促进ICC的增殖,且对ICC的凋亡无明显影响;以攻补兼施法立法的方剂枳术丸能促进ICC的增殖,并且其增殖效果优于攻伐单药枳实和补益单药白术。

关键词：枳术丸 Cajal间质细胞细胞增殖细胞凋亡攻补兼施

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王小娟教授治疗颈胃综合征的临床经验

光明中医 2019年第3期34卷 368-370页

作者：王婷涂琴蓉王小娟刘富林湖南中医药大学研究生院湖南长沙410073 湖南中医药大学第一附属医院脾胃病科湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208

颈胃综合征为临床常见病、多发病,其症状繁多,涉及多个系统,阳性体征少,缺乏明确的诊断标准,临床上常易被忽视。由于目前对此病的认识不足,导致其治疗效果欠佳或反复发作。王小娟教授在治疗颈胃综合征的实践中总结出颈胃同治、从肝论治... 详细信息

颈胃综合征为临床常见病、多发病,其症状繁多,涉及多个系统,阳性体征少,缺乏明确的诊断标准,临床上常易被忽视。由于目前对此病的认识不足,导致其治疗效果欠佳或反复发作。王小娟教授在治疗颈胃综合征的实践中总结出颈胃同治、从肝论治的方法,且收到良好的临床疗效。文章就王小娟教授治疗颈胃综合征的临床经验作简要分析。

关键词：颈胃综合征颈胃同治从肝论治中医药疗法

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浅论中医“和”的哲学思想

中医药导报 2019年第2期25卷 16-20页

作者：王伟松刘富林夏旭婷王文风滕广飞王婷涂琴蓉湖南中医药大学研究生院湖南长沙410208

"和"的哲学思想在中华文化的各个方面均有体现,中医在养生、治法、方药等各方面也均体现出"和"的思想。医理源于易理,通过对《易经》中的河图与洛书、太极、八卦的浅要论述,阐明其尚"和"的思想,《易经》的"和"思想对其之后的中医理论有... 详细信息

"和"的哲学思想在中华文化的各个方面均有体现,中医在养生、治法、方药等各方面也均体现出"和"的思想。医理源于易理,通过对《易经》中的河图与洛书、太极、八卦的浅要论述,阐明其尚"和"的思想,《易经》的"和"思想对其之后的中医理论有深远的影响;在《黄帝内经》中,提倡治病与养生之本在阴阳,而阴阳之贵在于"和",强调扶正祛邪,调和阴阳,从而达到愈病养生的目的;张仲景在《伤寒论》中也大量使用"和"来论述疾病,如"阴阳自和""荣卫不和"等,在治法与方药上,也是顺其"自和"之势而调之,可见其鲜明的"和"思想。

关键词：中医 “和”思想《易经》《黄帝内经》张仲景

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠PI3K、AKT表达的影响

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中华中医药杂志 2020年第6期35卷 2824-2828页

作者：王文凤刘富林夏旭婷王伟松滕广飞王婷涂琴蓉湖南中医药大学长沙410208

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)表达的影响。方法:将47只SPF级小鼠随机分为正常组(15只)和造模组(32只)。造模组采用番泻叶灌胃、低纤维饮食、限食和限水的方法制备脾虚证慢传输型便... 详细信息

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)表达的影响。方法:将47只SPF级小鼠随机分为正常组(15只)和造模组(32只)。造模组采用番泻叶灌胃、低纤维饮食、限食和限水的方法制备脾虚证慢传输型便秘模型,造模完成后,两组随机各取5只小鼠,进行模型验证。模型成功后,造模组随机分为模型组、枳术丸组和莫沙必利组,每组9只;正常组10只。枳术丸组按9.0g/kg灌胃,莫沙必利组按2.5mg/kg灌胃,正常组和模型组给予等容积的蒸馏水灌胃,4组灌胃容积均为0.1mL/10g,连续治疗7d。治疗完成后,采用免疫组化、Western Blot及Real-time PCR法检测各组PI3K、AKT蛋白及mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组PI3K、AKT蛋白及mRNA表达均显著减少(P<0.01);与模型组比较,枳术丸组和莫沙必利组PI3K、AKT蛋白及mRNA表达均显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论:脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠组织中PI3K、AKT蛋白及基因表达均明显下降;枳术丸治疗脾虚证慢传输型便秘,可能与提高脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠组织中PI3K、AKT表达水平有关。

关键词：枳术丸脾虚证慢传输型便秘磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

父母及教师对学龄前儿童行为问题评估的一致性及差异研究

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中国全科医学 2022年第31期25卷 3899-3903页

作者：王丽王念蓉涂明淑陈群叶媛李代琴何欢蓉张丽重庆医科大学附属妇女儿童医院儿童保健科重庆市401147 重庆市南岸区妇幼保健院 400060 重庆市九龙坡区妇幼保健院 400051 重庆市巴南区妇幼保健计划生育服务中心 401342 重庆市沙坪坝区妇幼保健计划生育服务中心 400030 重庆市大渡口区妇幼保健院 400084 重庆市江北区妇幼保健计划生育服务中心 400020

背景儿科医生经常面临父母和教师对孩子行为问题报告不一致的情况,但既往关于父母和教师对学龄前儿童行为问题评估的研究较少。目的调查重庆市主城区学龄前儿童行为问题的现状,探讨父母及教师对学龄前儿童行为问题评估的一致性及差异。... 详细信息

背景儿科医生经常面临父母和教师对孩子行为问题报告不一致的情况,但既往关于父母和教师对学龄前儿童行为问题评估的研究较少。目的调查重庆市主城区学龄前儿童行为问题的现状,探讨父母及教师对学龄前儿童行为问题评估的一致性及差异。方法于2018年6月,采用分层整群抽样法,在重庆市主城区幼儿园抽取学龄前儿童2698例。儿童家长填写Conners父母用症状问卷(PSQ),教师填写Conners教师量表(TRS),比较基于PSQ和TRS的行为问题检出情况。结果最终纳入问卷被有效回收的学龄前儿童2660例(98.59%)。基于PSQ的儿童行为问题检出率为14.47%(385/2660),男童高于女童〔17.91%(245/1368)比10.84%(140/1292),P0.05)。结论家长反映的学龄前儿童行为问题检出率较教师高,家长及教师对学龄前儿童行为问题的评估虽然存在一定差异,但在品行问题、多动方面的评估一致性较好。

关键词：行为问题儿童,学龄前双亲教师评估一致性评估差异

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠肠道运动及PLC-γ_1/PLC-γ_2信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2019年第10期25卷 8-14页

作者：王伟松夏旭婷刘富林王文凤陈雨波滕广飞王婷涂琴蓉湖南中医药大学第一附属医院长沙410000 湖南中医药大学中医学院长沙410000 湖南中医药大学招生就业处长沙410000 湖南中医药大学第二附属医院长沙410000

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠肠道传导功能的干预作用,及对小鼠结肠组织磷脂酶C-γ_1(PLC-γ_1)/磷脂酶C-γ_2(PLC-γ_2)信号通路表达的影响。方法:将无特定病原体(SPF)健康小鼠随机分为正常组与造模组。采用番泻叶灌... 详细信息

目的:探讨枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠肠道传导功能的干预作用,及对小鼠结肠组织磷脂酶C-γ_1(PLC-γ_1)/磷脂酶C-γ_2(PLC-γ_2)信号通路表达的影响。方法:将无特定病原体(SPF)健康小鼠随机分为正常组与造模组。采用番泻叶灌胃造成脾虚状态,然后控制饮食饮水的方法造成脾虚便秘的小鼠模型,造模完成后将模型组小鼠随机分为模型组、枳术丸组、莫沙必利组,枳术丸组按9. 0 g·kg^(-1)·d^(-1)给药,莫沙必利组按2. 5 mg·kg^(-1)·d^(-1)给药,模型组和正常组给予等剂量的蒸馏水,连续给药7 d,治疗完成后用印度墨水在结肠中推进的长度计算小鼠肠道推进率;用D-木糖试剂盒测定小鼠血清D-木糖含量;用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠结肠组织病理改变;采用免疫组化法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠结肠组织PLC-γ_1,PLC-γ_2蛋白的表达水平;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测PLC-γ_1,PLC-γ_2mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠肠道推进率及血清D-木糖值均显著降低(P <0. 01),HE染色观察结肠黏膜明显充血、水肿,结肠组织PLC-γ_1,PLC-γ_2蛋白与mRNA表达水平均显著减少(P <0. 01);与模型组比较,枳术丸组和莫沙必利组小鼠肠道推进率及血清D-木糖含量均显著增加(P <0. 01),HE染色观察结肠黏膜充血、水肿及炎症细胞浸润改善,PLC-γ_1,PLC-γ_2蛋白与mRNA表达水平均显著升高(P <0. 01)。结论:枳术丸可有效促进脾虚便秘小鼠的肠道运动,改善便秘症状,其相关的作用机制可能与提高脾虚便秘小鼠结肠组织中PLC-γ_1与PLC-γ_2的表达有关。

关键词：枳术丸便秘慢传输型便秘磷脂酶C-γ1/磷脂酶C-γ2信号通路