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基于代谢组学方法研究乌头碱和苯甲酰乌头原碱对BeWo细胞的毒性机制

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分析化学 2015年第12期43卷 1808-1813页

作者：谢辉辉谢彤徐建亚沈存思赖子娟徐牛生汪受传单进军南京中医药大学中医儿科学研究所江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室赛默飞世尔科技(中国)有限公司美国加州大学戴维斯分校基因组中心NIH西海岸代谢组学研究中心

以BeWo细胞建立体外胎盘模型,采用基于气相色谱与质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,研究乌头碱及其代谢产物苯甲酰乌头原碱的生殖毒性机制。收集不同时间点(0,6,12,24和36 h)药物干预后的BeWo细胞裂解液,通过GC-MS/MS分析获得细胞... 详细信息

以BeWo细胞建立体外胎盘模型,采用基于气相色谱与质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,研究乌头碱及其代谢产物苯甲酰乌头原碱的生殖毒性机制。收集不同时间点(0,6,12,24和36 h)药物干预后的BeWo细胞裂解液,通过GC-MS/MS分析获得细胞代谢轮廓;正交偏最小二乘法-判别分析(OPLSDA)显示,BeWo细胞内代谢物在药物干预后呈动态变化。进一步通过变量重要性投影(VIP)值和单因素方差分析筛选差异性代谢物,最终鉴定出脯氨酸、甘氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、乙酰谷氨酰胺、赖氨酸、组氨酸、葡萄糖、半乳糖、琥珀酸共11个差异性代谢物。经Metaboanalyst分析,主要涉及谷氨酰胺和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,赖氨酸降解,精氨酸和脯氨酸代谢,组氨酸代谢等6条代谢通路。实验结果表明,乌头碱和苯甲酰乌头原碱主要通过影响氨基酸代谢对BeWo细胞产生生殖毒性作用。

关键词：乌头碱苯甲酰乌头原碱气相色谱-质谱联用代谢组学 Be Wo细胞胚胎毒性

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金欣口服液对RSV肺炎尿液代谢物的影响

中医杂志 2016年第18期57卷 1587-1592页

作者：孟欣单进军谢彤徐建亚沈存思汪受传南京中医药大学中医儿科学研究所

目的探讨金欣口服液治疗呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎的可能作用机制。方法将48只BALB/c小鼠随机分为正常组、RSV肺炎模型组、金欣口服液组,每组16只。RSV肺炎模型组和金欣口服液组小鼠用RSV悬液滴鼻感染小鼠建立RSV肺炎模型。金欣口服液组... 详细信息

目的探讨金欣口服液治疗呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎的可能作用机制。方法将48只BALB/c小鼠随机分为正常组、RSV肺炎模型组、金欣口服液组,每组16只。RSV肺炎模型组和金欣口服液组小鼠用RSV悬液滴鼻感染小鼠建立RSV肺炎模型。金欣口服液组予金欣口服液27.6 g/(kg·d)灌胃,正常组和RSV肺炎模型组小鼠给予等量的生理盐水灌胃。连续灌胃至第4天每组处死5只小鼠进行病理学检查,其他小鼠于第6天分别收集尿液,运用GC-MS检测尿液中所含有的代谢物及其相对含量的变化。结果RSV肺炎模型组小鼠肺脏可见间质多灶性炎性浸润,肺泡壁轻度充血,明显增厚。金欣口服液组小鼠肺部炎症较RSV肺炎模型组小鼠肺部炎症明显减轻。RSV肺炎小鼠的尿液中共测得38种代谢产物,其中乳酸、甘氨酸、棕榈酸、硬脂酸为差异性代谢产物,RSV肺炎模型组乳酸、甘氨酸、硬脂酸、棕榈酸相对含量明显高于正常组和金欣口服液组(P<0.05)。结论金欣口服液可能通过调节体内能量代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢治疗RSV肺炎。

关键词：呼吸道合胞病毒肺炎气相色谱-质谱联用尿液代谢物

基于脑代谢组学研究羚珠散联合对乙酰基氨基酚对发热幼龄大鼠的解热作用

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南京中医药大学学报 2022年第5期38卷 409-418页

作者：孙皊沈存思廖颖钊单进军南京中医药大学中医儿科研究所江苏省儿童呼吸疾病重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学深圳中医医院儿科广东深圳518033

目的探讨中成药羚珠散(Ling-Zhu-San,LZS)和西药对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)对幼龄大鼠的解热作用及其代谢影响。方法采用气相色谱-质谱联用平台、多变量统计技术和通路分析等方法,通过系统的代谢组学分析,确认治疗前后大鼠脑组... 详细信息

目的探讨中成药羚珠散(Ling-Zhu-San,LZS)和西药对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)对幼龄大鼠的解热作用及其代谢影响。方法采用气相色谱-质谱联用平台、多变量统计技术和通路分析等方法,通过系统的代谢组学分析,确认治疗前后大鼠脑组织中代谢物水平变化;通过体温试验和酶联免疫吸附实验(ELISA)考察大鼠体温变化及白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和前列腺素E_(2)(Prostaglandin E_(2),PGE_(2))的含量。结果大鼠脑内与TCA循环、色氨酸代谢、谷氨酸代谢和花生酸代谢相关的16种显著改变的代谢物(P1.5)被认为是潜在的发热生物标志物,而联合用药后这些代谢物的浓度均基本恢复至正常水平。羚珠散和对乙酰氨基酚联用较单药解热效果最佳。结论羚珠散和对乙酰氨基酚联合用药对幼龄大鼠的解热作用可能与其改善脑内代谢紊乱相关。

关键词：羚珠散对乙酰氨基酚解热代谢组学

基于“异类相制”的雷公藤复方配伍减毒代谢组学研究

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中国中药杂志 2016年第6期41卷 1124-1129页

作者：谢彤周学平林丽丽徐建亚沈存思冯哲周玲玲单进军南京中医药大学中医儿科学研究所江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

采用基于气相色谱质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,分析雷公藤复方配伍前后对大鼠血浆中内源性代谢物的变化,以期阐明基于"异类相制"中医理论的清络通痹方对雷公藤的配伍减毒机制。通过GC-MS/MS分析获得空白对照组、雷公藤组和清... 详细信息

采用基于气相色谱质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,分析雷公藤复方配伍前后对大鼠血浆中内源性代谢物的变化,以期阐明基于"异类相制"中医理论的清络通痹方对雷公藤的配伍减毒机制。通过GC-MS/MS分析获得空白对照组、雷公藤组和清络通痹方组大鼠血浆代谢轮廓,正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)显示3组在得分图上区分明显,清络通痹方组各观测值存在着向正常组移动的趋势,提示了清络通痹方的配伍减毒功效。通过变量重要性投影(VIP)值和单因素方差分析筛选差异性代谢物,发现雷公藤组中生糖氨基酸包括丙氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、脯氨酸等水平显著升高,支链氨基酸缬氨酸和异亮氨基酸水平下降,清络通痹方则能够逆转氨基酸水平的紊乱。进一步的代谢通路分析提示清络通痹方配伍减毒机制可能与谷氨酸和谷氨酰胺代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢相关。该研究从代谢的角度,说明了雷公藤肝脏毒性的发生与氨基酸代谢,能量代谢等过程密切相关,而清络通痹方通过改善机体氨基酸水平发挥配伍减毒作用。

关键词：异类相制雷公藤代谢组学肝毒性清络通痹方

合胞病毒肺部感染对小鼠大肠黏膜组织内源性代谢物的影响

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中国当代儿科杂志 2016年第11期18卷 1166-1173页

作者：孟欣汪受传单进军谢彤徐建亚沈存思南京中医药大学中医儿科学研究所/江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室江苏南京210023

目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术检测BALB/c小鼠合胞病毒(RSV)肺部感染对大肠黏膜组织内源性代谢物的影响。方法将小鼠随机分为对照组和RSV肺炎模型组,每组16只。采用RSV(100×TCID50,50μL/只,每日1次)滴鼻感染法建立... 详细信息

目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术检测BALB/c小鼠合胞病毒(RSV)肺部感染对大肠黏膜组织内源性代谢物的影响。方法将小鼠随机分为对照组和RSV肺炎模型组,每组16只。采用RSV(100×TCID50,50μL/只,每日1次)滴鼻感染法建立小鼠RSV肺炎模型。于滴鼻7 d后处死各组小鼠,运用GC-MS检测大肠组织内源性代谢物及其相对含量的变化;使用SMCA-P12.0软件对大肠组织中内源性代谢物进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA);将大肠组织中的差异性代谢物导入代谢通路平台Metaboanalyst,以进一步分析相关代谢通路。结果 PCA和OPLS-DA分析均显示对照组和RSV肺炎模型组可显著区分。RSV肺炎小鼠的大肠黏膜组织中共测得32种代谢产物,与对照组比较,其中亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、花生四烯酸、乳酸等含量均显著增高(P<0.05),主要与缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸代谢、花生四烯酸代谢和丙酮酸代谢通路有关。结论 RSV肺炎可能引起小鼠大肠黏膜组织的代谢紊乱。

关键词：代谢组学合胞病毒肺炎大肠损伤小鼠

槐耳颗粒逆转肝癌细胞对索拉非尼耐药的初步研究

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南京中医药大学学报 2020年第1期36卷 83-87页

作者：张正光刘冰梁炜锋沈存思南京中医药大学医学院·整合医学学院江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室江苏南京210029

目的初步探讨槐耳颗粒对索拉非尼(Sorafenib)耐药肝癌细胞BEL-7402/S的作用及其相关机制。方法 CCK-8法测定槐耳颗粒对BEL-7402/S细胞的增殖-毒性作用以及对Sorafenib的耐药逆转倍数;qPCR及Western blot法检测槐耳颗粒对BEL-7402/S细胞... 详细信息

目的初步探讨槐耳颗粒对索拉非尼(Sorafenib)耐药肝癌细胞BEL-7402/S的作用及其相关机制。方法 CCK-8法测定槐耳颗粒对BEL-7402/S细胞的增殖-毒性作用以及对Sorafenib的耐药逆转倍数;qPCR及Western blot法检测槐耳颗粒对BEL-7402/S细胞的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达水平的影响。结果槐耳颗粒能够抑制BEL-7402/S细胞的活性;在无显著细胞毒性的剂量下,槐耳颗粒能够部分逆转BEL-7402/S细胞对Sorafenib的耐药,其耐药逆转倍数为2.08;qPCR结果显示槐耳颗粒可以下调BEL-7402/S细胞中HIF-1α的mRNA水平,但对VEGF的mRNA水平无显著性影响;Western blot结果显示槐耳颗粒可以降低HIF-1α、VEGF的蛋白表达水平。结论槐耳颗粒可能具有部分逆转BEL-7402/S细胞对Sorafenib耐药的作用,其机制可能与降低HIF-1α以及VEGF的表达水平有关。

关键词：槐耳颗粒索拉非尼肝癌耐药

基于UPLC/LTQ-Orbitrap-MS的黄芩中黄酮碳苷的结构表征及同分异构体的区分

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中草药 2015年第22期46卷 3318-3325页

作者：谢彤徐建亚沈存思狄留庆汪受传单进军南京中医药大学中医儿科学研究所江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心江苏南京210023

目的建立黄芩Scutellaria baicalensis的UPLC/LTQ-Orbitrap-MS分析测定方法,研究黄芩中黄酮碳苷类成分,并区分其中的同分异构体。方法采集Orbitrap全扫描的质谱图,并触发动态数据依赖分析模式采集二级、三级和四级的碎片信息,通过图谱... 详细信息

目的建立黄芩Scutellaria baicalensis的UPLC/LTQ-Orbitrap-MS分析测定方法,研究黄芩中黄酮碳苷类成分,并区分其中的同分异构体。方法采集Orbitrap全扫描的质谱图,并触发动态数据依赖分析模式采集二级、三级和四级的碎片信息,通过图谱解析确定黄酮碳苷的结果,通过比对碎片信息区分同分异构体。结果在黄芩中共鉴定表征了19个黄酮碳苷类成分,并对其中的同分异构体进行区分。结论该方法能够准确地筛选黄芩中的黄酮碳苷类成分,并对同分异构体进行区分,为其他中药的成分分析提供参考。

关键词：黄芩黄酮碳苷 UPLC/LTQ-Orbitrap-MS 同分异构体结构表征

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抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展

抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展

中华中医药学会中药实验药理分会2012年学术年会

作者：沈存思陆茵南京中医药大学药学院江苏省中药药效与安全性评价重点实验室

PTEN是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因,是双特异蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成员,同时具有脂质磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性。而在肿瘤增殖,侵袭,迁移的过程中,肿瘤血管生成作为肿瘤发生发展中一个关键因素已越来越受到人们的关注。抑癌基因P... 详细信息

PTEN是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因,是双特异蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成员,同时具有脂质磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性。而在肿瘤增殖,侵袭,迁移的过程中,肿瘤血管生成作为肿瘤发生发展中一个关键因素已越来越受到人们的关注。抑癌基因PTEN可以参与P13K/Akt信号通路,调控缺氧诱导因子1,基质金属蛋白酶,血管内皮生长因子,钠氢交换调控因子1,酪氨酸激酶受体等血管生成相关信号以及一些机体氧化产物来影响肿瘤血管生

关键词：抑癌基因 PTEN 肿瘤血管生成 PI3K Akt

来源： cnki会议评论

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抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展

抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展