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副猪嗜血杆菌tfoX基因介导自然转化功能的机制初探

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副猪嗜血杆菌tfoX基因介导自然转化功能的机制初探

作者：汤笑语四川农业大学

学位级别：硕士

自然转化(Natural transformation)作为细菌基因水平转移的主要方式之一,是指细菌主动摄取外源DNA,将其整合到自己的基因组上并稳定遗传的过程。副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,GPS)作为一种具有自然转化能力的细菌,这一特性已被... 详细信息

自然转化(Natural transformation)作为细菌基因水平转移的主要方式之一,是指细菌主动摄取外源DNA,将其整合到自己的基因组上并稳定遗传的过程。副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,GPS)作为一种具有自然转化能力的细菌,这一特性已被广泛用于构建基因缺失株和回补株,但对其自然转化的机制研究较少。本研究旨在了解GPS自然转化能力分布情况,并对tfoX的分子差异及其介导自然转化机制进行初步探究。首先在实验室条件下对84株GPS野毒株和15株标准血清型菌株进行自然转化能力进行的鉴定,并将这些菌株的自然转化能力表型与血清型比对分析。结果显示44株菌株具有转化能力,55株菌株没有自然转化能力,并且所有划分为低毒力血清型菌株都具有自然转化能力,45%中等毒力血清型菌株具有自然转化能力,而只有29%的高毒力血清型菌株中具有自然转化能力。对NCBI上公布的副猪嗜血杆菌及其他四种细菌的自然转化的核心调控因子tfoX序列进行同源性分析,发现副猪嗜血杆菌tfoX可分为两种分子类型,而这种分子差异在其他细菌中不存在。进一步通过高分辨率熔解曲线技术和测序分析对本实验室99株副猪嗜血杆菌tfoX序列进行分析,发现tfoX在所有副猪嗜血杆菌中都存在两种分子类型:44株与具有高自然转化效率的GPS菌株SC1401一致;55株与不具有自然转化能力的GPS参考菌株SH0165一致。并且这两种分子类型可导致两种截然不同的自然转化表型:所有SC1401 tfoX类型菌株都具有自然转化能力;所有SH0165 tfoX类型菌株都不具有自然转化能力。构建重组打靶质粒pK18-tfoX并通过自然转化转入SC1401构建tfoX基因缺失株,制备TfoX蛋白的多克隆抗体,通过Western Blotting鉴定缺失株是否构建成功。采用同样的方法将SC1401的tfoX基因替换为SH0165的tfoX基因。测定SC1401亲本株、tfoX基因缺失株及SH0165 tfoX基因替换株的自然转化频率,结果显示亲本株具有较高的自然转化频率,而缺失株和替换株自然转化能力丧失。采用荧光定量分别检测4株SH0165 tfoX类型GPS野毒株和4株SC1401 tfoX类型GPS野毒株的tfoX转录水平,结果显示tfoX的这种分子差异没有导致其转录呈现高、低两种水平。对SC1401亲本株和tfoX基因缺失菌株进行比较转录组学和蛋白质组学分析,结果显示差异表达基因和蛋白较多富集在与碳源代谢相关的通路上。通过在SC1401生长环境中添加碳源再检测自然转化频率,发现菌株在丰富碳源环境下自然转化频率降低7倍左右,同时再在转化过程中添加不同浓度的cAMP,发现菌株自然转化频率逐步恢复。综上,本研究结果表明GPS不同菌株的自然转化能力存在较大差异,并且自然转化与血清型(毒力)之间存在关联性。tfoX是GPS自然转化的核心调控因子,在GPS中tfoX存在两种分子类型,其分子差异可以作为判断GPS是否具有自然转化能力的分子标记。tfoX可能通过碳源的代谢来调节cAMP含量来调控自然转化功能。该研究结果可为全面明晰GPS自然转化的调控通路奠定基础。

关键词：副猪嗜血杆菌自然转化 tfoX 分子差异转化频率

非酿酒酵母在多元化啤酒酿造应用中的研究进展

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食品与发酵工业 2024年第10期50卷 362-370页

作者：王笑语陈晶瑜马长伟中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083

非酿酒酵母种类丰富、分布广泛、各具特色。研究发现,非酿酒酵母的使用可以降低啤酒的乙醇含量、改善啤酒口感、增加风味多样性、赋予啤酒多样化的地域特色,部分菌株还能代谢产生一些具有潜在功能性的成分。因此,非酿酒酵母的应用符合... 详细信息

非酿酒酵母种类丰富、分布广泛、各具特色。研究发现,非酿酒酵母的使用可以降低啤酒的乙醇含量、改善啤酒口感、增加风味多样性、赋予啤酒多样化的地域特色,部分菌株还能代谢产生一些具有潜在功能性的成分。因此,非酿酒酵母的应用符合当前啤酒酿造多元化发展的行业趋势,现已成为啤酒酿造领域的研究热点之一。该文综述了近年来非酿酒酵母在啤酒酿造中应用的研究进展,包括啤酒酿造所涉及的非酿酒酵母种类,非酿酒酵母的主要发酵方式——纯种发酵、混合发酵、固定化发酵,以及非酿酒酵母在增加啤酒香气、酿造无醇和低醇啤酒、酿造酸啤酒、酿造功能性啤酒等方面的应用,最后指出了非酿酒酵母在今后应用中可能存在的问题及主要研究方向,旨在为开发更多适用于啤酒酿造的非酿酒酵母新菌株、引领啤酒品种创新提供一些参考。

关键词：非酿酒酵母啤酒酿造多元化发酵方式应用

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柱形空泡动力学研究综述

核科学与工程 2024年第2期 428-436页

作者：席新铭边豪杰王笑语张宇宁华北电力大学电站能量传递转化与系统教育部重点实验室华北电力大学能源动力与机械工程学院

空化现象是核工程领域的重要研究内容，而柱形空泡动力学是其前沿方向。本文从理论和实验两个方面对柱形空泡的研究进展进行了综述。首先，本文从流体力学基本方程出发，对三种典型形式的柱形空泡动力学方程进行了详细的推导和系统的整... 详细信息

空化现象是核工程领域的重要研究内容，而柱形空泡动力学是其前沿方向。本文从理论和实验两个方面对柱形空泡的研究进展进行了综述。首先，本文从流体力学基本方程出发，对三种典型形式的柱形空泡动力学方程进行了详细的推导和系统的整理。然后，对这三种柱形泡动力学方程进行了比较，指出了它们在方程的形式和适用范围上的差别。此外，文章分析了方程中一些重要参数对方程预测结果的影响。实验研究方面，本文展示了柱形空泡典型的高速摄影图片以及空泡半径随时间的变化。通过将实验结果与理论结果进行对比，发现二者具有良好的一致性。

关键词：空化柱形空泡泡动力学方程高速摄影

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塔吊作业事故关联规则挖掘及贝叶斯建模分析

安全与环境学报 2024年第2期24卷 610-616页

作者：叶勇军张笑语张英朋南华大学资源环境与安全工程学院湖南衡阳421001

为探究塔吊作业安全风险,深入挖掘事故特征,明确塔吊作业事故成因机制,提出了一种基于Apriori算法关联规则挖掘的改进朴素贝叶斯网络结构,采用数据驱动的方式训练模型,提升塔吊作业事故推理的效率和精度。通过诊断推理得出,塔吊倒塌事... 详细信息

为探究塔吊作业安全风险,深入挖掘事故特征,明确塔吊作业事故成因机制,提出了一种基于Apriori算法关联规则挖掘的改进朴素贝叶斯网络结构,采用数据驱动的方式训练模型,提升塔吊作业事故推理的效率和精度。通过诊断推理得出,塔吊倒塌事故多由物因缺陷造成,高处坠落事故多由人因缺陷造成,吊物伤人事故多由物因缺陷和不良环境共同造成。通过因果推理对诊断结果进行了验证,表明该模型可在设定条件及场景下有效进行事故推理分析。

关键词：安全工程塔吊 Apriori算法数据驱动朴素贝叶斯网络事故推理

2021—2023年崇左市宁明县乙型肝炎流行病学特征研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第4期 146-149页

作者：黄笑语宁明县中医医院广西宁明532500

研究2021-2023年崇左市宁明县乙型肝炎流行病学特征。方法选取2021年1月—2023年5月崇左市宁明县中医医院收治的乙型肝炎患者共99例,采用流行病学描述方法对相关数据进行整理分析,包括患者性别、发病临床表现等。结果 2021-2023年期间... 详细信息

研究2021-2023年崇左市宁明县乙型肝炎流行病学特征。方法选取2021年1月—2023年5月崇左市宁明县中医医院收治的乙型肝炎患者共99例,采用流行病学描述方法对相关数据进行整理分析,包括患者性别、发病临床表现等。结果 2021-2023年期间,崇左市宁明县确诊的乙型肝炎患者为99例。在99例乙肝患者中,男性发病率显著高于女性(p18岁人群患病率最高,有97例患者确诊,占比97.98%,其中35-59岁人群患病率占比最高;职业分布以农民为主,有81例,占比81.82%。结论详细分析探索崇左市宁明县乙肝流行病学特征,针对性予以管理措施,包括及时接种疫苗、宣教、推广、定期监测等措施,切实控制乙肝发病。

关键词：乙型肝炎流行病学特征研究

中小学教师职业倦怠调查研究——以课后延长服务为例

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进展 2024年第6期 93-95页

作者：谈笑语苏州大学江苏苏州215000

目前,课后延长服务在各大中小学中开展,并伴随着一系列政策的实施与落地,让此前学生家长接送难、特定时间孩子无人看管的问题得以缓解。但由于支撑政策落地的执行人多为校内一线教师,此项工作又属于教务工作以外的范畴,这无疑是增重了... 详细信息

目前,课后延长服务在各大中小学中开展,并伴随着一系列政策的实施与落地,让此前学生家长接送难、特定时间孩子无人看管的问题得以缓解。但由于支撑政策落地的执行人多为校内一线教师,此项工作又属于教务工作以外的范畴,这无疑是增重了他们的工作负担,且有相当数量为其服务的教师并没有因为工作量的增加,而得到对应的薪酬补偿,导致部分教师呈现出职业倦怠。教师职业倦怠现象若不能得到有效解决,将对教学成效和学生发展产生消极影响。教师职业倦怠的影响因素可以从组织因素、认知因素、情感因素三方面探究。

关键词：课后服务职业倦怠中小学教师影响因素

基于机器学习的房颤病人左心耳血流动力学研究

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空气动力学学报 2024年

作者：刘笑语林洪涛钱姜宏蔡声泽樊红光高琪浙江大学航天航空学院浙江大学控制学院浙江大学经血管植入器械全国重点实验室杭州晟视科技有限公司中国医学科学院阜外医院

房颤是一种常见的心血管疾病，其发病率在全球范围内呈现出快速增长的趋势。房颤病人的左心房及左心耳内的血流动力学规律，比如速度场和压力场，是评估血栓形成风险的重要依据之一。目前对于心血管问题的传统研究方法是计算流体力学，... 详细信息

房颤是一种常见的心血管疾病，其发病率在全球范围内呈现出快速增长的趋势。房颤病人的左心房及左心耳内的血流动力学规律，比如速度场和压力场，是评估血栓形成风险的重要依据之一。目前对于心血管问题的传统研究方法是计算流体力学，尽管其精度被认可，但高昂的计算成本限制了其在临床快速诊断方面的应用。为了解决这个问题，机器学习方法开始被引入，提出了一种基于边卷积层和双通道的神经网络架构。经过训练，该架构可以由左心耳的点云模型，预测出内部的速度场和压力场。该架构对测试集中样本的速度场预测误差约为10%，压力场预测的误差约为5%。应用本文方法对314例房颤患者的左心房及左心耳的血流动力学特性研究，发现房颤患者的左心耳内流速和左心房平均压力分别低于、高于正常人，男性相比于女性更容易患有房颤。

关键词：血流动力学机器学习房颤左心耳神经网络

基于满足多边界条件基函数的微分求积法及其应用

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东南大学学报（自然科学版） 2024年第1期54卷 149-155页

作者：汤轶群李振岳东南大学土木工程学院南京211189

提出了一种由基函数来处理梁边界条件的改进微分求积法(MDQM).在构造挠度函数时,通过多次积分来满足梁的所有边界条件,进而利用此函数计算微分求积法中的加权系数矩阵,解决了通过多项式测试函数计算该系数矩阵时难以在同一个点运用多个... 详细信息

提出了一种由基函数来处理梁边界条件的改进微分求积法(MDQM).在构造挠度函数时,通过多次积分来满足梁的所有边界条件,进而利用此函数计算微分求积法中的加权系数矩阵,解决了通过多项式测试函数计算该系数矩阵时难以在同一个点运用多个边界条件的问题.为了研究该方法在梁的各类分析中的应用,首先构造了2类梁在各种边界条件下对应的挠度基函数,再根据Euler-Bernoulli梁振动理论和稳定性理论,基于微分求积法将计算梁的固有频率问题和临界荷载问题转化为求解矩阵特征值的问题,并将结果与精确解进行比较.此外,还根据理想弹塑性梁的平面弯曲理论,利用该方法计算了梁在各种边界条件下的弹塑性位移,并将结果与其他方法对比.结果表明,所提方法对于梁的稳定性分析、固有频率分析及弹塑性分析都具有较高的计算效率和精度.

关键词：微分求积法 Euler-Bernoulli梁固有频率临界屈曲荷载弹塑性

影视剧中的城市空间叙事、影像生产与政策扶持——以2018—2020年上海文化发展基金会资助作品为例

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中国文化产业评论 2024年第1期 278-293页

作者：马瑞青严笑语上海交通大学香港科技大学

上海是大量都市题材影视剧拍摄的取景地,且会通过各类政策鼓励来沪拍摄上海题材作品。本文对2018—2020年上海文化发展基金会资助拍摄的上海题材影视剧作品进行多维度的实证分析,从物质空间、文化空间、社会空间探讨这些作品中关乎上海... 详细信息

上海是大量都市题材影视剧拍摄的取景地,且会通过各类政策鼓励来沪拍摄上海题材作品。本文对2018—2020年上海文化发展基金会资助拍摄的上海题材影视剧作品进行多维度的实证分析,从物质空间、文化空间、社会空间探讨这些作品中关乎上海的空间叙事,以及城市空间和城市影像的生产。观众对于上海城市形象的消费符号化刻板印象、上海江南文化底蕴在影像生产中的淡化与模糊、探索现代化与城市化进程中纾解群体焦虑的“上海方案”,可以是未来上海题材影视剧创作寻求突破的重点问题。

关键词：城市形象空间叙事影像生产文化政策上海