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菊花磷酸盐转运蛋白CmPht1;2的功能研究

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菊花磷酸盐转运蛋白CmPht1;2的功能研究

作者：汤佳怡南京农业大学

学位级别：硕士

菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat.）是我国十大传统名花和世界四大切花之一,在我国各地广泛栽培,用途繁多,兼具观赏和经济价值。磷素是菊花生长过程中不可或缺的大量元素之一,磷素的缺乏影响菊花生长状态及次生代谢过程,影响菊花... 详细信息

菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat.）是我国十大传统名花和世界四大切花之一,在我国各地广泛栽培,用途繁多,兼具观赏和经济价值。磷素是菊花生长过程中不可或缺的大量元素之一,磷素的缺乏影响菊花生长状态及次生代谢过程,影响菊花植株侧枝及侧蕾的发育,会降低菊花的观赏价值。正确的施用磷等矿质元素可提高菊花产量,改善菊花品质。植物对土壤中磷的吸收效率是阻碍农作物产量的一个重要限制因素。因此挖掘磷高效吸收相关基因并研究其功能对培育磷高效利用作物品种具有重要意义。CmPht1;2是从耐低磷的菊花品种‘南农银山’中克隆出的磷酸盐转运蛋白基因。对CmPht1;2翻译后修饰氨基酸位点的突变子的研究发现,CmPht1;2豆蔻酰化位点G84A、G222A、N422A突变子及磷酸化位点T239A、Y242A突变子在低磷条件下不能回补酵母突变株的生长,且动力学方式发生了改变,提示这些位点可能在CmPht1;2的磷酸盐转运过程中发挥着重要的作用。这些修饰位点在植物体内对CmPht1;2的磷酸盐转运功能的影响还需要进一步验证。由于菊花是多倍体,在菊花中过表达这些突变子,由于内源正常CmPht1;2蛋白的影响,难以直接比较这些突变子对CmPht1;2的磷酸盐转运功能以及植物生长发育的效应。水稻是磷的吸收、转运和信号途径研究模式材料,并且其遗传转化相对容易。因此,我们通过农杆菌转化将CmPht1;2导入水稻材料‘武运粳7号’,创制CmPht1;2转基因植株,对转基因植物的磷素吸收能力进行了检测,调查统计了转基因植物农艺性状,鉴定CmPht1;2磷转运功能及其对植物生长发育的影响;对表达CmPht1;2翻译后修饰位点发生突变的G84A、G222A、T239A、Y242A以及N422A突变子的转基因材料进行了分析,明确了突变位点对CmPht1;2磷酸盐吸收功能的影响,探索CmPht1;2蛋白翻译后修饰调控CmPht1;2磷转运子在磷素转运的可能机制。主要研究结果如下:1.本研究利用水稻遗传转化系统,构建表达载体,将菊花磷酸盐转运蛋白基因CmPht1;2及其翻译后氨基酸修饰位点突变的基因CmPht1;2、CmPht1;2、CmPht1;2、CmPht1;2、CmPht1;2在水稻品种‘武运粳7号’中组成型表达。共获得阳性植株CmPht1;2-OE 45株,G84A 41株,G222A 36株,T239A 37株,Y242A39株,N422A 37株。2.对CmPht1;2-OE T代材料的苗期表型和成熟期表型进行的统计分析,CmPht1;2-OE材料的苗期地上部分生物量和成熟期的株高、有效穗数、枝梗数和产量较野生型材料有所提高。CmPht1;2可能促进CmPht1;2-OE材料对磷酸盐的吸收。对Cmphts-OE材料的成熟期表型进行统计,Cmphts-OE材料成熟期株高、有效穗数较CmPht1;2-OE材料有所降低。不同氨基酸修饰位点突变对CmPht1;2的功能可能有所影响。3.利用RT-PCR,对CmPht1;2-OE材料中CmPht1;2及水稻中已知的与磷吸收和利用相关的基因Os SPX2、Os IPS1、Os PT2、Os PT3、Os PT6、Os PT8和Os PT10的表达水平进行检测,低磷条件下,CmPht1;2-OE材料中磷饥饿响应基因在转录水平受到抑制,且抑制程度与CmPht1;2的表达量有一定相关性。菊花磷酸盐转运蛋白CmPht1;2能在一定程度上代替水稻自身的磷酸盐转运蛋白行使磷酸盐转运功能。CmPht1;2-OE材料与野生型相比,对低磷胁迫应答更不敏感,可能具有更好的对低磷胁迫适应性。而T239A、Y242A和N422A材料在低磷条件下磷相关基因的表达模式与CmPht1;2-OE材料有所不同,这三个位点可能对CmPht1;2的功能有重要作用。4.对CmPht1;2-OE材料的有效磷含量进行测定,CmPht1;2-OE材料的根系磷含量在正常磷和低磷条件下都高于野生型材料。CmPht1;2具有促进植物吸收磷酸盐的功能。本研究为研究CmPht1;2在磷吸收过程中的作用和可能的机制奠定了基础,也为通过转基因技术培育植物磷高效利用品种提供了可能。

关键词：菊花磷酸盐转运蛋白 CmPht1 2 转基因翻译后修饰

“大思政”格局下大学英语课程思政的建构与实践

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遵义师范学院学报 2022年第4期24卷 135-139页

作者：王雷宏汤佳怡北京语言大学语言学系北京100083 遵义医科大学外国语学院贵州遵义563003 南通大学马克思主义学院江苏南通226019

大学英语课程思政建设是“大思政”格局下全面推进课程思政建设、实现立德树人的重要组成部分。以《创新大学英语》为例,从思政目标精准化、学科知识与思政内容有机融合、语言学习支架和思政教学支架动态化三个方面探究大学英语课程思... 详细信息

大学英语课程思政建设是“大思政”格局下全面推进课程思政建设、实现立德树人的重要组成部分。以《创新大学英语》为例,从思政目标精准化、学科知识与思政内容有机融合、语言学习支架和思政教学支架动态化三个方面探究大学英语课程思政的建构与实践,旨在为大学英语课程思政建设提供可资借鉴的实践路径,与思政课程相辅相成共筑思政育人的高地。

关键词： “大思政” 大学英语课程思政教学模式教学实践

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让辅警能“辅”且不“腐”

让辅警能“辅”且不“腐”

泉州晚报

作者：黄宝阳黄文彪杨伟华汤佳怡

生活中，市民常常会与警务辅助人员（以下简称辅警）打交道，维持交通秩序、办理户籍、社区巡逻……辅警是协助民警开展打击犯罪、维护社会治安、服务群众等工作的重要辅助力量。辅警队伍能有效缓解公安机关警力不足的问题，但由于日常... 详细信息

生活中，市民常常会与警务辅助人员（以下简称辅警）打交道，维持交通秩序、办理户籍、社区巡逻……辅警是协助民警开展打击犯罪、维护社会治安、服务群众等工作的重要辅助力量。辅警队伍能有效缓解公安机关警力不足的问题，但由于日常监督管理漏洞、制度不全、责任人员不明......

关键词：公安局南安市

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高铁护航世遗泉州“穿山越海”

高铁护航世遗泉州“穿山越海”

泉州晚报

作者：许文龙汤佳怡王雯雯李翔姚逸

“设计时速350公里，福州至厦门最快55分钟就可到达。”速度更快、更便捷的福厦高铁运行近一个月，带动沿线城市人员、资金、货物的流动，密切了彼此之间的往来，正持续不断地促进沿线城市产业整合升级、经济高质量发展。泉州，作为福... 详细信息

“设计时速350公里，福州至厦门最快55分钟就可到达。”速度更快、更便捷的福厦高铁运行近一个月，带动沿线城市人员、资金、货物的流动，密切了彼此之间的往来，正持续不断地促进沿线城市产业整合升级、经济高质量发展。泉州，作为福厦高铁沿线一座重要城市，新建了泉港、泉......

关键词：高速铁路蟳埔女沿线地区旅游人数旅游收入福建省通车运营世界遗产

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人用药品中亚硝胺类杂质的监管现状及思考

中国新药杂志 2024年第3期33卷 221-228页

作者：王功富汤佳国家药品监督管理局药品审评中心北京100022 国家药品监督管理局药品审评检查大湾区分中心深圳518000

亚硝胺类杂质是一类具有潜在致突变性的化合物。近年来,多种药品中相继检出亚硝胺类杂质,此类杂质已成为监管机构、制药企业和患者关注的焦点。本文在查阅最新法规指南及相关文献基础上,总结了亚硝胺类杂质的来源、控制、限度及检测方... 详细信息

亚硝胺类杂质是一类具有潜在致突变性的化合物。近年来,多种药品中相继检出亚硝胺类杂质,此类杂质已成为监管机构、制药企业和患者关注的焦点。本文在查阅最新法规指南及相关文献基础上,总结了亚硝胺类杂质的来源、控制、限度及检测方法等方面的研究进展,并提出思考和展望,期望为药品研究和监管工作提供参考。

关键词：亚硝胺类杂质致突变性监管

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计算生物学在药学研究中的应用

药学学报 2024年第8期59卷 2192-2198页

作者：汤佳宁孙洋南京大学生命科学学院医药生物技术全国重点实验室江苏南京210023

计算生物学(computational biology)属于生物学的一个分支,是指开发和应用数据分析及理论的方法、数学建模和计算机仿真技术等,用于生物学、行为学和社会群体系统的研究的一门学科。近年来,计算生物学越来越受到重视,这主要是因为高通... 详细信息

计算生物学(computational biology)属于生物学的一个分支,是指开发和应用数据分析及理论的方法、数学建模和计算机仿真技术等,用于生物学、行为学和社会群体系统的研究的一门学科。近年来,计算生物学越来越受到重视,这主要是因为高通量技术大大提高了数据的生成能力。海量计算数据的生成带动了设备计算能力的不断增长,数据的复杂性和异质性也需要更加系统的分析方法,它们共同推动着计算生物学的发展。随着大数据时代的发展,生物学研究和实验的数据呈指数型增长,单一的观察和实验已经无法支撑高复杂性的数据,计算生物学成为药物研究的一个重要且有力的工具。目前,计算生物学已经应用于肽合成与小分子设计、虚拟筛选、蛋白质结构与蛋白质相互作用预测、数据库构建、生物活性物质预测和药物释放监测等多个领域,从而为药物靶点预测、药物设计、药物筛选及药物的临床应用等多个药物研究的过程提供帮助。计算生物学如今已成为相较于传统药物研究工具更加省时省力的“臂膀”,同时药物研发的需求也不断推动着计算生物学的发展。二者相辅相成,共同发展,计算生物学已成为药物研究不可分割的一部分。

关键词：计算生物学药学药物靶点预测药物筛选药物设计应用

基于硅酸盐中磁性矿物包裹体的长江和黄河沉积物区分

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第四纪研究 2024年第2期44卷 540-550页

作者：汤佳冰张卫国华东师范大学河口海岸学国家重点实验室上海200241

环境磁学指标已被用来区分中国近海沉积物中长江和黄河物质来源,但是该方法会受到潜在的成岩作用影响。硅酸盐中的磁性矿物包裹体不受成岩作用影响,具有可靠区分物源的潜力。本研究将盐酸(10 mol/L)处理后样品的磁性特征视作硅酸盐中磁... 详细信息

环境磁学指标已被用来区分中国近海沉积物中长江和黄河物质来源,但是该方法会受到潜在的成岩作用影响。硅酸盐中的磁性矿物包裹体不受成岩作用影响,具有可靠区分物源的潜力。本研究将盐酸(10 mol/L)处理后样品的磁性特征视作硅酸盐中磁性矿物包裹体的贡献,以提供区分长江和黄河沉积物的新指标。结果表明,盐酸处理后样品中与磁性矿物含量有关的参数(χ、 SIRM、χARM、 HIRM)不到处理前样品参数值的10%;硅酸盐中的磁性矿物包裹体以低矫顽力的亚铁磁性矿物为主,相比原样中的亚铁磁性颗粒更细;盐酸处理后长江沉积物相比黄河,具有更高的SIRM、χARM、 HIRM值,表明前者包裹体中亚铁磁性矿物和不完整反铁磁性矿物含量更高。分粒级的磁学参数显示,两个河流沉积物磁性矿物包裹体SIRM与HIRM值随着粒级的增大而增大。由于长江支流众多,岩石类型复杂,包裹体磁性参数变化较大,而黄河物质主要来自于黄土高原的黄土,黄土由源区至高原的风力搬运过程中的分选和混合,使得包裹体磁性矿物含量较低,但磁性参数相对均一。本研究表明,利用硅酸盐中磁性矿物包裹体SIRM和S-100散点图、磁性参数主成分分析和热磁曲线,可有效区分长江和黄河沉积物。

关键词：包裹体环境磁学物源粒级分离长江黄河

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从文本到图像:杜诗的马骨理论及其后世影响

安徽大学学报（哲社版） 2024年第4期48卷 51-59页

作者：诸佳怡浙江大学文学院浙江杭州310058

杜甫在马诗中引入相马术与人物相骨术的理念,不仅描绘了马的骨体,同时通过骨体突出马的精神品质,由此构成杜甫独特的马骨理论。北宋文人在马画层面对杜甫马骨理论进一步发展,形成了文人画的画骨理论。杜甫马骨理论不仅塑造了千里马形象... 详细信息

杜甫在马诗中引入相马术与人物相骨术的理念,不仅描绘了马的骨体,同时通过骨体突出马的精神品质,由此构成杜甫独特的马骨理论。北宋文人在马画层面对杜甫马骨理论进一步发展,形成了文人画的画骨理论。杜甫马骨理论不仅塑造了千里马形象,更塑造了突显骨体的瘦马意象。与骨肉兼具的千里马相比较,瘦马意象不仅具有现实层面的映射,而且展现了骨与德性精神的关联。瘦马骨体本质所反映的德性精神使其成为象征中晚唐文儒形象的典型意象。杜甫马骨理论的影响不只体现在诗歌文本中,也体现在绘画图像中。龚开等文人画家在关于瘦马的绘画中创造了“十五肋”画法,“十五肋”既突出了马的骨体特征,同时也成为文人马画中德性精神的象征,体现了杜甫马骨理论在后代文人画中的承续。

关键词：杜甫马骨理论画骨理论瘦马 “十五肋”画法

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农田土壤中含氧多环芳烃的自然衰减及共存微塑料的效应

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农田土壤中含氧多环芳烃的自然衰减及共存微塑料的效应

作者：汤佳豪齐鲁工业大学

学位级别：硕士

含氧多环芳烃(OPAHs)与多环芳烃(PAHs)同源或由其代谢衍生,其环境行为及效应不容忽视。农用塑料膜因其较大使用量和较低回收率导致土壤中微塑料(MPs)的积累。MPs的存在会影响土壤中OPAHs的自然衰减行为及土壤细菌群落的特征,有必要对其... 详细信息

含氧多环芳烃(OPAHs)与多环芳烃(PAHs)同源或由其代谢衍生,其环境行为及效应不容忽视。农用塑料膜因其较大使用量和较低回收率导致土壤中微塑料(MPs)的积累。MPs的存在会影响土壤中OPAHs的自然衰减行为及土壤细菌群落的特征,有必要对其进行研究。本研究以低密度聚乙烯(LDPE)、聚乳酸(PLA)和聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)为MPs代表,选取3类OPAHs作为目标物,研究了不同结构和性质OPAHs的自然衰减规律及MPs的效应,揭示MPs在OPAHs自然衰减过程中对土壤微生物群落特征的影响,为农田土壤MPs-OPAHs复合污染生态风险评估和治理修复提供理论依据。具体研究成果如下:(1)对于第1类目标物——土壤中丰度较高的OPAHs 9,10-蒽醌和9-芴酮,自然衰减28 d后土壤中残留量较初始污染水平降低了84.4%,其中前14 d降低了69.1%,后14 d为15.3%。3种MPs在前14 d均抑制了OPAHs的自然衰减,且PBAT抑制效果最显著。随着自然衰减的进行,MPs抑制效应消失。OPAHs污染土壤细菌群落相对丰度第一的菌门为变形菌门(Proteobacteria),相对丰度第一的菌科为鞘氨醇单胞菌科(Sphingomonadaceae),亦为耐受物种。3种MPs在14 d时均使变形菌门占比下降,群落均匀度和多样性增加;28 d时,LDPE和PBAT使变形菌门占比上升,而PLA则使其下降,且PLA使群落α多样性降低,另2种MPs则无显著变化。MPs改变了OPAHs土壤中细菌群落β多样性,其中PLA的影响最大,但MPs的效应低于衰减时间引发的β多样性的变化。细菌群落功能预测显示,芳烃降解相关基因在14 d时组间无显著差异,28 d时MPs组中降解同源基因(KOs)丰度下降,表明芳烃降解菌的生长受到抑制,与MPs对OPAHs自然衰减抑制效应相对应,但是个稍滞后的过程。(2)对于第2类目标物——相同苯环数不同含氧官能团的OPAHs(羰基OPAHs 1,4-萘醌、羟基OPAHs 1-萘酚和羧基OPAHs 1-萘甲酸,分别记作A、B和C),其中A和C在28 d时自然衰减率达76.7%和97.9%,B在14 d时其土壤中残留量已低于检出限(0.1 mg/kg)。OPAHs含氧官能团的差异导致其在土壤中自然衰减率的差异,衰减率排序为羟基取代>羧基取代>羰基取代。3种MPs对A的自然衰减无显著影响,对C均有抑制效应,表明MPs的效应会受OPAHs含氧官能团影响,且影响程度因MPs材质而异。不同含氧官能团OPAHs污染土壤细菌群落特征存在差异,主要体现在优势物种的相对丰度、可观测物种数以及群落结构和功能上。3种污染土壤细菌群落间可观测物种数存在差异,而另2种α多样性指数在3种污染土壤间无显著差异。A土壤细菌群落结构和功能与B、C差异较大,B与C之间较为相似。MPs对不同含氧官能团OPAHs污染土壤细菌群落优势物种、α和β多样性及功能的影响不同。MPs在14 d时使得放线菌门(Actinobacteriota)在A土壤中丰度降低,B土壤中丰度增高,C土壤中则因MPs不同而变化不一;28 d时,使得3种土壤中丰度均增加。LDPE对3种污染土壤细菌群落α多样性的影响程度大于另2种MPs,显著降低了A土壤在28 d时及B土壤14 d时的α多样性指数并显著增加了C土壤14 d时的多样性指数。A土壤细菌群落结构和功能对3种MPs均较敏感,B群落结构和功能对LDPE更敏感,C群落结构和功能对PLA更敏感,表明羰基OPAHs污染土壤细菌群落结构和功能相较于羟基和羧基OPAHs更易受MPs影响发生变化。(3)对于第3类目标物——相同含氧官能团不同苯环数的OPAHs(1个苯环的1,4-萘醌、2个苯环的9,10-蒽醌和3个苯环的5,12-萘并萘醌,分别记作A、D和E),A、D和E在28 d时自然衰减率分别达76.7%、68.3%和67.2%,表明苯环数越多,OPAHs自然衰减率越低。3种MPs均未影响A和D的自然衰减,但不同程度地影响了E,表明MPs的效应会受到OPAHs苯环数影响。不同苯环数OPAHs污染土壤细菌群落特征存在差异,主要体现在优势物种的相对丰度、可观测物种数以及群落结构和功能上。3种土壤细菌群落间可观测物种数存在差异,而另2种α多样性指数无显著差异。A土壤细菌群落结构和功能与D、E差异较大,D与E之间较相似。MPs对不同苯环数OPAHs污染土壤细菌群落优势物种、α和β多样性及功能的影响不同。MPs在14 d时使放线菌门在A土壤中丰度降低,E土壤中增高,D土壤中则因MPs不同而变化不一;28 d时,使其在A和D土壤中丰度均增加,E土壤中则因MPs材质而效应不同。LDPE对3种土壤细菌群落α多样性的影响程

关键词：微塑料含氧多环芳烃自然衰减细菌群落