检索结果-南通市图书馆

大黄鱼变形假单胞菌的遗传学和血清学聚类特征初步分析

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福建农业学报 2022年第9期37卷 1109-1116页

作者：许斌福陈秀锦池洪树徐梦婷陈佳林能锋龚晖福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省疾病预防控制中心福建福州350002 大黄鱼育种国家重点实验室福建宁德352103

【目的】内脏白点病是冬春季大黄鱼(Larimichthys crocea)最主要的细菌性疾病,变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是内脏白点病的主要病原。分析大黄鱼来源的变形假单胞菌病原聚类特征,为大黄鱼变形假单胞菌流行规律研究和科学... 详细信息

【目的】内脏白点病是冬春季大黄鱼(Larimichthys crocea)最主要的细菌性疾病,变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是内脏白点病的主要病原。分析大黄鱼来源的变形假单胞菌病原聚类特征,为大黄鱼变形假单胞菌流行规律研究和科学防控提供参考。【方法】克隆7株不同时空来源的大黄鱼变形假单胞菌16S rDNA、gyrB,测序并构建进化树;制备上述菌株的O-特异链血清(O抗原血清)与鞭毛蛋白血清(H抗原血清),进行菌体凝集试验。【结果】16S rDNA和gyrB序列分析表明,所有的变形假单胞菌聚为一簇;O抗原和H抗原凝集结果表明,7株变形假单胞菌以及变形假单胞菌标准株均会发生凝集反应,凝集效价也无明显区别,与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluoresenes)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)不发生凝集反应。【结论】本研究所用的7株不同时空来源的变形假单胞菌亲缘关系接近,可能具有共同的起源。

关键词：大黄鱼变形假单胞菌 16S rDNA gyrB 血清菌体凝集聚类分析

大黄鱼肿大细胞病毒不同毒株的细胞培养及主要衣壳蛋白基因比较

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水产学报 2023年第9期47卷 147-156页

作者：杨西西池洪树郑在予刘晓东罗潘潘许斌福陈秀霞龚晖福建省农业科学院生物技术研究所福建农林大学动物科学学院中山大学生命科学学院

为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法，明确其分类地位，用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料(FD201807和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系(mandarin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代，从病料组织匀浆液和细胞冻融... 详细信息

为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法，明确其分类地位，用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料(FD201807和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系(mandarin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代，从病料组织匀浆液和细胞冻融液中提取病毒DNA，克隆病毒主要衣壳蛋白基因(mcp)，测序后与NCBI GenBank中的虹彩病毒科肿大细胞病毒属病毒mcp以及2018—2020年所检出的15株大黄鱼肿大细胞病毒mcp进行比对分析。结果显示，病毒传至第4代才可引起MFF-1细胞病变，细胞病变的主要特征为细胞脱壁、变圆、折光度增强；感染时间越长脱壁细胞越多，同时培养液中的颗粒增加；透射电镜下可见感染细胞的细胞质散在大小为130～150 nm的六边形病毒粒子和空壳。感染细胞的病变周期随传代代次的增加而缩短，第15代次的FD201807株感染细胞80%细胞病变的时间为3 d，第15代次的SA201808株感染细胞80%细胞病变的时间为7～8 d。mcp序列比对和聚类分析发现，SA201808株与FD201807株的mcp序列存在21个碱基差异，二者的mcp序列分别与大黄鱼虹彩病毒(largeyellowcroakeriridovirus,LYCIV)LYCIVZhoushan (GenBank:MW139932.1)和花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus, LMIV)(GenBank:MH577517.1)相近。15株从大黄鱼病料检出的肿大细胞病毒中，12株的mcp序列与SA201808株聚类；3株与FD201807聚类。本研究利用MFF-1细胞系分离培养了大黄鱼肿大细胞病毒，揭示了大黄鱼肿大细胞病毒存在差异，为更好地了解大黄鱼肿大细胞病毒提供了数据参考。

关键词：大黄鱼肿大细胞病毒细胞培养主要衣壳蛋白

刺激隐核虫的分离鉴定及其幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备

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刺激隐核虫的分离鉴定及其幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备

作者：池洪树福建农林大学

学位级别：硕士

刺激隐核虫是对海水鱼养殖业危害最大的寄生虫之一,能感染大多数海水鱼品种,造成大量死亡。本研究从福建省长乐、宁德、福鼎三地分离得到寄生于牙鲆、大黄鱼、石斑鱼的三株刺激隐核虫。通过ITS序列对这三株刺激隐核虫进行分子生物学鉴定... 详细信息

刺激隐核虫是对海水鱼养殖业危害最大的寄生虫之一,能感染大多数海水鱼品种,造成大量死亡。本研究从福建省长乐、宁德、福鼎三地分离得到寄生于牙鲆、大黄鱼、石斑鱼的三株刺激隐核虫。通过ITS序列对这三株刺激隐核虫进行分子生物学鉴定,并以ITS-1序列和HSP70基因序列为分子标记对这三株刺激隐核虫做序列和系统发育分析,发现这三株刺激隐核虫的同源性很高。以褐牙鲆作为刺激隐核虫的感染模式鱼,在水温22℃-24℃下,对刺激隐核虫进行实验室传代,详细观察其生活史及各阶段的形态结构,比较不同温度处理过的包囊的孵化率和孵出幼虫感染能力,分别采集感染2周后和4周后的褐牙鲆血清做抑动试验。目前已成功进行了40个周期的传代保种,每个周期为8d～10d,表明褐牙鲆可作为刺激隐核虫的模式宿主鱼,为刺激隐核虫的研究提供稳定材料来源。刺激隐核虫滋养体存在于鳃片、体表和鳍条上,呈比针尖略大的白点状,为圆形或椭圆形,移行过程形状会改变,大小为100 μm-400μm,外覆一层纤毛,经过瑞氏染色后观察到滋养体内4叶大核。包囊前体膜壁薄,为圆形或椭圆形,在海水中2h～8h缓慢游动后附着于底壁。包囊透光度明显较包囊前体的低,大小为328.5±39.6μm×401.2±47.4μm.包囊在形成后24 h-48 h原生质开始出现不均等分裂,最后形成70～300个幼虫。在少数包囊中观察发现疑似滋养体并做旋转运动的圆形原生质体。幼虫呈一端略小的椭圆型,体表遍布纤毛,包内有4叶大核,大小为30.2士6.5μm×66.9±6.5μm.包囊经过5℃冷藏2个月后孵化率下降到7.6%,用1000个5℃冷藏组孵化的幼虫感染褐牙鲆后,未检测出滋养体。抑动试验表明,感染2周和4周的褐牙鲆血清的抑动效价可达1：320和1：1280,揭示体液免疫在褐牙鲆抵抗刺激隐核虫感染发挥了重要作用。本研究建立了刺激隐核虫幼虫膜蛋白提取方法,以提取的刺激隐核虫幼虫膜蛋白免疫Balb/C小鼠,制备刺激隐核虫膜蛋白单克隆抗体,经细胞融合、亚克隆和间接ELISA筛选,得到11株阳性单克隆抗体细胞株。将5D11AG5.5H9BG3. 6E11CE7三株单克隆抗体细胞株,制备腹水,鉴定这三株单克隆抗体的亚型,检测效价,通过Western blotting验证这三株单克隆抗体的抗原性,通过免疫荧光法对这三株单克隆抗体的作用位点进行定位,结果表明,这三株单克隆抗体亚型均为IgM,5D11AG5株的ELISA效价约为1：3200,5H9BG3的ELISA效价为1:25600,6E11CE7ELISA效价为1：51200;Western-blotting结果显示5D11AG5株和5H9BG3株能够识别变性还原的、大小约为35 kDa的刺激隐核虫幼虫膜蛋白,而6E11CE7株不能识别变性还原的刺激隐核虫幼虫膜蛋白,判断其识别的是刺激隐核虫幼虫膜蛋白空间构象位点。免疫荧光结果显示单抗5D11AG5和5H9DG3识别部位主要在虫体前端,而单抗6E11CE7识别部位为虫体周边外膜,刺激隐核虫膜蛋白单克隆抗体的制备,为刺激隐核虫功能性蛋白的筛选和功能分析奠定了基础。

关键词：刺激隐核虫褐牙鲆 HSP70 单克隆抗体

一株寄生于大黄鱼的盾纤毛虫分子鉴定与系统进化分析

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福建畜牧兽医 2023年第4期45卷 1-6页

作者：池洪树江秋欢潘滢林能锋福建省农业科学院生物技术研究所福州350003

在大黄鱼稚鱼上发现一种可侵入患鱼体表、肌肉、腹腔和脑的盾纤毛虫,为了进一步明确该盾纤毛虫的分类地位,提取患鱼样品总DNA,对该虫株SSU rDNA和线粒体cox1部分序列进行PCR扩增、测序,与GenBank中纤毛虫的SSU rDNA和线粒体cox1序列进... 详细信息

在大黄鱼稚鱼上发现一种可侵入患鱼体表、肌肉、腹腔和脑的盾纤毛虫,为了进一步明确该盾纤毛虫的分类地位,提取患鱼样品总DNA,对该虫株SSU rDNA和线粒体cox1部分序列进行PCR扩增、测序,与GenBank中纤毛虫的SSU rDNA和线粒体cox1序列进行同源性分析并构建系统发育树。结果显示,该盾纤毛虫874 bp的SSU rDNA部分序列与显赫针口虫(Porpostoma notata)同源性最高,相似性为98.97%。在基于SSU rDNA构建系统发育树中与显赫针口虫(P.notata)聚为一支,并独立于嗜污科(Philasteridae)的分支;获得该虫1 086 bp的cox1部分序列,与其SSU rDNA序列相比表现出更大的遗传变异度,在基于cox1部分序列构建系统发育树中,该虫株与嗜污科(Philasteridae)、尾丝虫科(Uronematidae)的分支也有一定距离。综上,该盾纤毛虫应是嗜污目(Philasterida)、针口虫属(Porpostoma)的显赫针口虫(P.notata)或其近缘种。

关键词：盾纤毛虫核糖体小亚基基因序列线粒体细胞色素c氧化酶第I亚基大黄鱼

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基于改进遗传算法的可重构制造系统快速配置

组合机床与自动化加工技术 2024年第3期 1-5页

作者：洪胡平张为民谢树联同济大学机械与能源工程学院上海手201800

针对可重构制造系统的快速配置提出了一种多目标优化方法,考虑3个优化目标:设备负载均衡度、产品生产时间以及产品生产成本。在第三代多目标遗传算法(NSGA-Ⅲ)的基础上结合邻域搜索构建了多目标遗传-邻域搜索算法(NSGA-NS),以从配置解... 详细信息

针对可重构制造系统的快速配置提出了一种多目标优化方法,考虑3个优化目标:设备负载均衡度、产品生产时间以及产品生产成本。在第三代多目标遗传算法(NSGA-Ⅲ)的基础上结合邻域搜索构建了多目标遗传-邻域搜索算法(NSGA-NS),以从配置解空间中寻找一系列前沿解。通过一个液压阀阀块的制造系统配置案例对算法进行验证,并与归档式多目标模拟退火算法、多目标粒子群算法以及一种改进的多目标粒子群算法进行了比较,结果表明,NSGA-NS与NSGA-Ⅲ在前沿解质量上显著优于其他算法,NSGA-NS在保持了NSGA-Ⅲ的全局寻优性能的同时显著提高了收敛速度和计算速度。

关键词：可重构制造系统配置多目标优化混合启发式算法

三七总皂苷对大黄鱼抗变形假单胞菌感染能力的影响

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大连海洋大学学报 2023年第3期38卷 380-387页

作者：陈秀霞池洪树许斌福谢岸桦徐梦婷张丽娟罗土炎龚晖福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所福建福州350003 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

为研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对大黄鱼(Larimichthys crocea)抗变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)感染能力的影响,首先通过体外试验测定PNS对变形假单胞菌的抑制效果,然后将PNS溶液腹腔注射体质量为20~30 g的大黄鱼,3 d后用浓度为1.02×10^(9)CFU/L的变形假单胞菌浸泡感染2 h,并测定感染前后全脾和后肾组织中的相对含菌量及TNF-α等免疫相关因子的表达水平。结果表明:质量浓度为50、25 mg/mL的PNS体外抑菌效果显著(P0.05);变形假单胞菌感染后第4、8天,PNS组大黄鱼脾、后肾组织中的相对含菌量略低于对照组(P>0.05);PNS组脾组织TNF-α蛋白表达水平在感染变形假单胞菌前后均显著低于对照组(P<0.05),但其mRNA转录水平在感染后显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,PNS在体外对变形假单胞菌具有抑制效果,注射PNS能在一定程度上增强大黄鱼抗变形假单胞菌感染的能力,降低感染后脾和后肾组织中的菌量,调控TNF-α等炎症因子的表达,提高感染后的存活率。

关键词：大黄鱼三七总皂苷变形假单胞菌免疫相关因子

幼儿园班级嘈杂度的构念及其与教师专业发展关系的研究

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早期儿童发展 2024年第1期 70-79页

作者：洪树赵雅男上海师范大学天华学院上海201815 上海师范大学上海200233

幼儿园班级环境是幼儿在园一日生活、幼儿教师从事保教工作的重要载体和主阵地。嘈杂的班级环境包括噪音、拥挤以及班级常规的不稳定性,会对幼儿情绪、幸福感、专注力以及意志力等产生一定的负面影响。幼儿园班级嘈杂度水平也是影响教... 详细信息

幼儿园班级环境是幼儿在园一日生活、幼儿教师从事保教工作的重要载体和主阵地。嘈杂的班级环境包括噪音、拥挤以及班级常规的不稳定性,会对幼儿情绪、幸福感、专注力以及意志力等产生一定的负面影响。幼儿园班级嘈杂度水平也是影响教师保教工作质量及专业发展的重要因素,与幼儿教师的情绪能力、自我效能感、工作满意度和教师流动性等有关。教师的某些积极特征,如教学正念、人格特质等可以减轻班级嘈杂度对个体发展的负面影响。综上,教师、幼儿园及政府各层面应重视对幼儿园班级嘈杂度的改善,关注教师个人积极特征的培养,提高教师应对班级嘈杂度的能力。

关键词：幼儿园班级嘈杂度教师专业发展教师个人特质

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供水提升下的引调水工程改造优化方案研究

水利科学与寒区工程 2024年第4期7卷 115-117页

作者：洪树星潮州市金桥中介服务有限公司广东潮州521000

为了弥补北线交水量减少和铁石临时泵站报废带来的供水缺口,本文以铁石二期泵站工程和输水管道工程新建工程为背景,进行主要问题分析并提出了改造优化方案。同时结合工程实际情况提出相应的施工管理控制要点,确保工程建设任务顺利完成... 详细信息

为了弥补北线交水量减少和铁石临时泵站报废带来的供水缺口,本文以铁石二期泵站工程和输水管道工程新建工程为背景,进行主要问题分析并提出了改造优化方案。同时结合工程实际情况提出相应的施工管理控制要点,确保工程建设任务顺利完成。工程完工后,解决了石岩水库供水片区近远期水源及配水不足、供水保障程度不高等等问题,为本片区的规划和发展提供强有力支撑,为类似项目建设提供了一定的参考意义。

关键词：供水提升引调水工程改造提升施工管理

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防洪河道拓宽工程方案对比研究

云南水力发电 2024年第3期40卷 126-129页

作者：洪树星潮州市金桥中介服务有限公司广东潮州521000

研究针对石岩河防洪河道拓宽工程进行了方案研究。通过对河道现状及问题的分析,提出了向左岸拓宽和向右岸拓宽2种方案。通过比较分析,选择了向左岸拓宽方案,并进行了具体的方案设计。同时,讨论了拆迁和征地工作、上下游衔接和迁改高压... 详细信息

研究针对石岩河防洪河道拓宽工程进行了方案研究。通过对河道现状及问题的分析,提出了向左岸拓宽和向右岸拓宽2种方案。通过比较分析,选择了向左岸拓宽方案,并进行了具体的方案设计。同时,讨论了拆迁和征地工作、上下游衔接和迁改高压线路的相关问题。最后,提出了施工计划和管理的重要性,并强调了质量控制、安全管理以及其他考虑因素。

关键词：石岩河防洪河道拓宽