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作者：江梦枭苏州大学

学位级别：硕士

[目的]研究蛋白激酶A（Protein kinase A,PKA）活化对体外血小板聚集功能的影响。[方法]收集健康成年人外周血获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用血小板刺激剂U46619,胶原（Collagen）,凝血酶（Thrombin）,... 详细信息

[目的]研究蛋白激酶A（Protein kinase A,PKA）活化对体外血小板聚集功能的影响。[方法]收集健康成年人外周血获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用血小板刺激剂U46619,胶原（Collagen）,凝血酶（Thrombin）,瑞斯托霉素（Ristocetin）和二磷酸腺苷（ADP）使得血小板发生聚集;利用聚集仪测得血小板聚集情况,利用Western blot检测血小板PKA的磷酸化底物GP Ⅰ bβ磷酸化（GP Ⅰ bβ166丝氨酸位点）表达水平,利用ELISA检测血小板总PKA活性。[结果]与对照组DMSO相比较,U46619、胶原（Collagen）、瑞斯托霉素（Ristocetin）、二磷酸腺苷（ADP）四者刺激血小板后,蛋白激酶A的活性均显著提高。而凝血酶（Thrombin）刺激血小板后,蛋白激酶A的活性显著下降（p＜0.05）;与对照组DMSO 相比较,5 μmol/L 的 Forskolin 可显著抑制 U46619、ADP 和 Collagen 诱导的血小板聚集（p＜0.001）;对Thrombin诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用（p＜0.05）。2.5 μmol/L 的 Forskolin 能显著抑制 U46619、胶原（Collagen）诱导的血小板聚集（p＜0.001）;而对ADP诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用（p＜0.05）,对凝血酶（Thrombin）诱导的血小板聚集无明显抑制作用（p＞0.05）。而2.5-10 μmol/L的Forskolin对Ristocetin诱导的血小板聚集无明显抑制作用（p＞0.05）。10 μmolL的 Forskolin 对 U46619、胶原（Collagen）、凝血酶（Thrombin）和二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用（p＜0.001）。[结论]蛋白激酶 A（ProteinkinaseA,PKA）参与诱导剂 U46619,胶原（Collagen）,凝血酶（Thrombin）,二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集过程,过度活化PKA抑制诱导剂诱导的血小板的聚集功能。

关键词：血小板聚集蛋白激酶A 诱导剂

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蛋白激酶A活化对血小板聚集功能的影响

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中国实验血液学杂志 2020年第3期28卷 899-903页

作者：江梦枭刘俊周康熙叶红磊胡仁萍闫荣阮长耿戴克胜苏州大学医学部江苏省血液学研究所、苏州大学第一附属医院血液学协同创新中心放射医学与防护国家重点实验室卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)对体外血小板聚集功能的影响。方法:收集健康成年人外周血并获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用瑞斯托霉素(Ristocetin),凝血酶(Thrombin),胶原(Collagen),二磷酸... 详细信息

目的:研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)对体外血小板聚集功能的影响。方法:收集健康成年人外周血并获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用瑞斯托霉素(Ristocetin),凝血酶(Thrombin),胶原(Collagen),二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,利用血小板聚集仪检测血小板聚集情况。结果:与对照组相比较,5μmol/L的Forskolin可显著抑制ADP和Collagen诱导的血小板聚集(P0.05);对ADP和Collagen诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用(P<0.001)。结论:蛋白激酶A活化能抑制血小板的聚集功能。

关键词：血小板聚集蛋白激酶A 诱导剂

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