蛋白激酶A活化对血小板聚集功能的影响

作     者：江梦枭 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：戴克胜

授予年度：2019年

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主      题：血小板 聚集 蛋白激酶A 诱导剂 

摘      要：[目的]研究蛋白激酶A（Protein kinase A,PKA）活化对体外血小板聚集功能的影响。[方法]收集健康成年人外周血获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用血小板刺激剂U46619,胶原（Collagen）,凝血酶（Thrombin）,瑞斯托霉素（Ristocetin）和二磷酸腺苷（ADP）使得血小板发生聚集;利用聚集仪测得血小板聚集情况,利用Western blot检测血小板PKA的磷酸化底物GP Ⅰ bβ磷酸化（GP Ⅰ bβ166丝氨酸位点）表达水平,利用ELISA检测血小板总PKA活性。[结果]与对照组DMSO相比较,U46619、胶原（Collagen）、瑞斯托霉素（Ristocetin）、二磷酸腺苷（ADP）四者刺激血小板后,蛋白激酶A的活性均显著提高。而凝血酶（Thrombin）刺激血小板后,蛋白激酶A的活性显著下降（p0.05）;与对照组DMSO 相比较,5 μmol/L 的 Forskolin 可显著抑制 U46619、ADP 和 Collagen 诱导的血小板聚集（p0.001）;对Thrombin诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用（p0.05）。2.5 μmol/L 的 Forskolin 能显著抑制 U46619、胶原（Collagen）诱导的血小板聚集（p0.001）;而对ADP诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用（p0.05）,对凝血酶（Thrombin）诱导的血小板聚集无明显抑制作用（p0.05）。而2.5-10 μmol/L的Forskolin对Ristocetin诱导的血小板聚集无明显抑制作用（p0.05）。10 μmolL的 Forskolin 对 U46619、胶原（Collagen）、凝血酶（Thrombin）和二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用（p0.001）。[结论]蛋白激酶 A（ProteinkinaseA,PKA）参与诱导剂 U46619,胶原（Collagen）,凝血酶（Thrombin）,二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集过程,过度活化PKA抑制诱导剂诱导的血小板的聚集功能。