检索结果-南通市图书馆

吡蚜酮和丙草胺单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

吡蚜酮和丙草胺单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立

作者：殷晓阳华中农业大学

学位级别：硕士

吡蚜酮(Pymetrozine,PY),三嗪酮类杀虫剂,对蚜虫科、飞虱科、粉虱科、叶蝉科害虫的防治效果优异,可用作叶面喷雾和土壤处理。丙草胺(Pretilachlor,PR),高选择性除草剂,适用于水稻防除禾本科和阔叶杂草,水稻可以分解PR。这两种药物在农... 详细信息

吡蚜酮(Pymetrozine,PY),三嗪酮类杀虫剂,对蚜虫科、飞虱科、粉虱科、叶蝉科害虫的防治效果优异,可用作叶面喷雾和土壤处理。丙草胺(Pretilachlor,PR),高选择性除草剂,适用于水稻防除禾本科和阔叶杂草,水稻可以分解PR。这两种药物在农业生产中使用广泛,会引起水体环境污染,对渔业造成重大损失,通过食物链富集作用进入人体引发癌症等危害。关于这两种药物的残留检测研究报道较少,液相色谱法为主要检测技术,该方法操作复杂、检测成本高,会产生大量有机试剂废液。基于抗原与抗体特异性结合的免疫快速分析法,尤其是酶联免疫吸附测定法(ELISA),具有操作简单、检测成本低、较少产生有机溶剂废液,灵敏度高和特异性能够到达甚至超越色谱分析方法,适合残留检测监控中的筛选分析和现场检测,是如今残留检测领域的主流技术和方法。当前有关于这两种药物的ELISA检测技术鲜有研究,建立食品中检测PY和PR的间接竞争ELISA检测方法(ic-ELISA),检测食品中相应药物残留含量,为食品安全提供保障是十分重要的。本研究通过半抗原的设计和抗原合成,最终获得两种能够分别识别PY和PR的单克隆抗体(m Ab)。基于这两种抗体,建立了相应的酶联免疫检测方法,并应用于西兰花、卷心菜、小麦、玉米、大米、鸡肉、鱼、小龙虾和湖水等样品的残留检测,主要研究结果如下:1.以氨基三嗪酮盐酸盐和5-甲酰烟酸为原料合成带有羧基的吡蚜酮半抗原(PYC);以丙草胺和3-巯基丙酸为原料合成带有羧基的丙草胺半抗原(PR-SC)。采用活化酯法将PYC和PR-SC分别与载体蛋白偶联制备免疫原PYC-BSA和PR-SC-BSA,以及包被原PYC-OVA和PR-SC-OVA,其偶联比分别为10.8、15.4、7.9、10.2。2.分别将PYC-BSA和PR-SC-BSA免疫雌性Balb/c小鼠,经过血清检测各选出3只小鼠进行细胞融合。经过细胞筛选获得了两株杂交瘤细胞株PY/2D2-D8和PR/114。3.吡蚜酮ic-ELISA方法建立:基于细胞PY/2D2-D8获得的mAb,经鉴定抗体的亚型为Ig G。Ic-ELISA方法经优化后,发现PYC-OVA最佳包被原浓度为0.25μg/m L,最佳抗体浓度2μg/m L,磷酸盐缓冲液(PBS)做为PY的稀释液时灵敏度最高;标准曲线的回归方程为Y=0.87209-0.37919X,R=0.9961,IC值为9.58±0.60μg/L,线性范围为2.5-40μg/L。该抗体对苯嗪草酮、环嗪酮、嗪草酮、啶虫脒、烯啶虫胺、吡虫啉均无交叉反应。PY在西兰花、卷心菜、小麦、玉米、大米、鸡肉、鱼、小龙虾和湖水样品中的检测限为1.56-2.72μg/L,定量限为2.95-6.57μg/L,回收率为78.2%-103.1%,变异系数小于12.3%。4.丙草胺ic-ELISA方法建立:基于细胞PR/114获得的m Ab,经鉴定抗体的亚型为Ig G。经ELISA方法优化后,发现PR-SC-OVA最佳包被原浓度为0.0625μg/m L,最佳抗体浓度1μg/m L;以含5%甲醇的PBS作为竞争药物的稀释溶液,ELISA方法的灵敏度最高。标准曲线的回归方程为Y=1.08288-0.387X,R=0.9915,IC值为31.47±2.35μg/L,线性范围为6.25-100μg/L。该抗体对甲草胺、乙草胺、甲霜灵和吡氟酰草胺均无交叉反应;对丁草胺、异丙草胺的交叉反应率小于2.0%。在检测湖水、大米、土壤样品中的PR时需要对样品进行10倍稀释,实际样品的线性范围为62.5-1000μg/L,检测限为48.3-52.3μg/L,定量限为101.3-109.8μg/L,回收率为78.3%-91.3%,变异系数小于9.5%。5.PY/2D2-D8抗体、PR/114抗体、PYC-OVA包被原和PR-SC-OVA包被原经过稳定性试验,发现都可在4℃下能够保存12个月,PY标准溶液能保存8个月,PR标准溶液在4℃能保存2个月。本研究设计与合成的吡蚜酮半抗原的为独创研究,制备的两种m Ab,能够分别识别PY和PR,基于此建立了食品中PY和PR提取方法和ic-ELISA检测方法,经液相色谱检测技术验证其可靠性。研究所得成果弥补了PY免疫检测方法的空白,为PR免疫检测领域提供了一种更加灵敏的检测方法,为食品安全提供监督手段,具有较高的应用价值和前景。

关键词：吡蚜酮丙草胺单克隆抗体酶联免疫反应残留检测

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

前列腺癌生物标志物研究进展

生物工程学报 2024年

作者：初子斌徐烨殷自强曹敬峰金成宇陈晓阳杨昭北京化工大学生命科学与技术学院分子诊断技术创新研究中心

2024年，前列腺癌新发病例占男性新发癌症病例的29%，是男性最常见的恶性肿瘤之一，对男性健康构成严重威胁。前列腺癌患者早期少有症状，2011年以来晚期前列腺癌的发病率每年增长4%至6%，出现明显症状通常意味着肿瘤已经局部扩散甚至... 详细信息

2024年，前列腺癌新发病例占男性新发癌症病例的29%，是男性最常见的恶性肿瘤之一，对男性健康构成严重威胁。前列腺癌患者早期少有症状，2011年以来晚期前列腺癌的发病率每年增长4%至6%，出现明显症状通常意味着肿瘤已经局部扩散甚至转移，此时死亡率高达87%至92%。前列腺特异性抗原(prostate specific antigen， PSA)检测、前列腺活检、磁共振成像等检测方法被广泛用于前列腺癌筛查，但特异性低、且成本和风险均较高。因此，亟需开发特异性高、成本低、易于获取且稳定可靠的生物标志物，并以此为基础建立新型前列腺癌无创筛查和诊断方法。近年来，科学家陆续鉴定了前列腺特异性抗原前体(precursor of prostate specific antigen， proPSA)等蛋白质类前列腺癌生物标志物，循环肿瘤DNA (circulating tumor DNA， ctDNA)等核酸类前列腺癌生物标志物并开发了四激肽释放酶组合(four-kallikrein panel， 4K)等多标志物联合检测方法。本文综述了前列腺癌生物标志物与联合检测方法用于前列腺癌诊断和预后评估的最新进展，并对不同的生物标志物和联合检测方法进行了深入的分析和比较。

关键词：前列腺癌生物标志物前列腺癌特异性抗原诊断预后评估

弓状韧带上腰方肌阻滞对全麻机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者术后肺功能的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华麻醉学杂志 2024年第2期44卷 160-166页

作者：殷国江魏蓬骁颜玉琴李坤黎笔熙宋晓阳中部战区总医院麻醉科武汉430070

目的评价弓状韧带上腰方肌阻滞对全麻机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者术后肺功能的影响。方法择期全麻下行机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者72例,年龄50~80岁,ASA分级Ⅰ~Ⅲ级,BMI 18.5~27.9 kg/m^(2),采用随机数字表法分为2组(n=... 详细信息

目的评价弓状韧带上腰方肌阻滞对全麻机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者术后肺功能的影响。方法择期全麻下行机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者72例,年龄50~80岁,ASA分级Ⅰ~Ⅲ级,BMI 18.5~27.9 kg/m^(2),采用随机数字表法分为2组(n=36):对照组和观察组。观察组在全麻诱导后在超声引导下行双侧弓状韧带上腰方肌阻滞,每侧给予0.375%罗哌卡因20 ml,对照组仅行单纯全凭静脉麻醉。术毕采用PCIA至术后48 h,静态VAS评分≥4分时,静脉注射地佐辛补救镇痛。分别于术前1 d和术后1~7 d时检测肺功能,记录用力肺活量(FVC)、1 s用力呼气容量(FEV1)、最大呼气中期流量(FEF 25%-75%)及其恢复至80%预计值的时间。分别于术前1 d和术后1~3 d时行动脉血气分析,记录SpO_(2)、PaO_(2)及PaCO_(2)。记录术中瑞芬太尼用量、镇痛泵有效按压次数及补救镇痛例数;记录术后7 d内肺部并发症发生情况和30 d内再次住院情况;记录术后肛门排气时间、住院时间及术后3 d内不良反应(头晕、恶心、呕吐)发生情况。结果与对照组比较,观察组术后FVC、FEV1和FEF 25%-75%升高,FVC、FEV1和FEF 25%-75%恢复至80%预计值的时间缩短,术后SpO_(2)和PaO_(2)升高,PaCO_(2)降低,术中瑞芬太尼用量、镇痛泵有效按压次数及补救镇痛例数减少,术后肛门排气时间和住院时间缩短,不良反应和肺部并发症发生率降低(P<0.05)。结论弓状韧带上腰方肌阻滞用于全麻机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术,可改善术后肺功能,减少不良反应,促进早期恢复。

关键词：神经传导阻滞腰肌韧带前列腺肿瘤机器人手术腹腔镜检查呼吸功能试验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达胡杨PePKS5提高拟南芥耐盐性

北京林业大学学报 2024年第2期46卷 62-74页

作者：温馨殷可欣马思圆张小萌赵楠周晓阳赵瑞陈少良北京林业大学生物科学与技术学院林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学实验室与设备管理处北京100083

【目的】盐胁迫是影响植物生长发育的不利环境因子。蛋白激酶PKS5作为植物盐超敏感信号转导途径的重要组分,在植物响应盐胁迫过程中具有重要调节功能。本文旨在生理水平和分子水平上,探究胡杨PePKS5基因在植物耐受盐胁迫过程中的调节作... 详细信息

【目的】盐胁迫是影响植物生长发育的不利环境因子。蛋白激酶PKS5作为植物盐超敏感信号转导途径的重要组分,在植物响应盐胁迫过程中具有重要调节功能。本文旨在生理水平和分子水平上,探究胡杨PePKS5基因在植物耐受盐胁迫过程中的调节作用。【方法】克隆胡杨PePKS5基因,并在拟南芥中过表达,获得T3代转基因拟南芥纯合体。观察盐胁迫下转基因拟南芥株系的耐盐表型,测定其过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶活性及盐胁迫响应基因的表达量。利用非损伤微测技术测定转基因拟南芥株系根尖Na^(+)、K^(+)动态离子流,利用激光共聚焦显微镜观测转基因拟南芥株系根尖Na^(+)和H_(2)O_(2)含量。测定盐处理后转基因拟南芥土培幼苗的叶绿素荧光参数、光合参数等生理指标,揭示PePKS5基因在盐胁迫下对拟南芥的生理调节作用。构建亚细胞定位载体,通过瞬时转化烟草,对PePKS5蛋白进行亚细胞定位观测。【结果】(1)PePKS5基因的CDS序列编码417个氨基酸,PePKS5氨基酸序列与毛白杨PtPKS5相似度最高,并且亲缘关系最近。(2)PePKS5定位于细胞质和细胞核中。(3)NaCl处理6 h后,胡杨叶片PePKS5基因表达量上调,72 h后逐渐恢复至正常水平。(4)盐胁迫下过表达PePKS5基因的拟南芥株系(PePKS5-OE10和PePKS5-OE15)的生存率和根长均明显高于野生型(WT)和转空载体(VC)株系。(5)与WT和VC株系相比,PePKS5-OE10和PePKS5-OE15株系的POD和CAT活性增强,APX1和CAT2基因的表达量均升高。(6)盐胁迫下PePKS5-OE10和PePKS5-OE15株系的Na^(+)外排和K^(+)的内流明显高于WT和VC株系,并且在根尖中积累的Na^(+)浓度和H_(2)O_(2)浓度明显低于WT和VC株系。(7)盐胁迫下PePKS5-OE10和PePKS5-OE15株系的叶绿素相对含量、PSⅡ最大光量子效率、实际光合量子产量和相对电子传递速率均高于WT和VC株系。(8)盐胁迫下PePKS5-OE10和PePKS5-OE15的净光合速率高于WT和VC株系,而胞间CO_(2)浓度、气孔导度和蒸腾速率均低于WT和VC株系。【结论】过表达胡杨PePKS5基因能够增强拟南芥对Na^(+)的外排能力,维持植物活性氧的平衡状态,以及保持相对稳定的光合作用能力,从而提高拟南芥的耐盐能力。

关键词：胡杨蛋白激酶盐胁迫 PKS5 离子平衡活性氧

浅析俄罗斯国际武器贸易分析中心2021—2024年全球武器进出口预测数据

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国防科技工业 2022年第1期 23-28页

作者：殷晓阳保利发展与安全研究院

俄罗斯国际武器贸易分析中心(CAWAT)在2021年12月发布了2021—2024年全球武器市场预测。根据该中心的统计数据,2021—2024年全球武器出口交付额有望超过4483亿美元,其中2021年为1083.8亿美元,2022年为955.31亿美元,2023年为1113.85亿美...

俄罗斯国际武器贸易分析中心(CAWAT)在2021年12月发布了2021—2024年全球武器市场预测。根据该中心的统计数据,2021—2024年全球武器出口交付额有望超过4483亿美元,其中2021年为1083.8亿美元,2022年为955.31亿美元,2023年为1113.85亿美元,2024年为1330.84亿美元。美国、法国、

关键词：

轻武器精彩呈现步机枪合理组合——第16届阿布扎比国际防务展见闻(上)

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

轻兵器 2023年第6期 10-15页

作者：殷晓阳不详

2023年2月20~24日,第16届阿布扎比国际防务展(IDEX-2023)在阿联酋首都阿布扎比举行。作为全球规模最大、影响力最强的国际性防务展会之一,本次防务展创举办以来场地规模之最、展商数量之最,展出了一批来自各国的军事新技术和新武器,受... 详细信息

2023年2月20~24日,第16届阿布扎比国际防务展(IDEX-2023)在阿联酋首都阿布扎比举行。作为全球规模最大、影响力最强的国际性防务展会之一,本次防务展创举办以来场地规模之最、展商数量之最,展出了一批来自各国的军事新技术和新武器,受到各界的广泛关注——。

关键词：防务展全球规模轻武器阿布扎比阿联酋合理组合

轻武器精彩呈现步机枪合理组合--第16届阿布扎比国际防务展见闻(中)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

轻兵器 2023年第7期 10-16页

作者：殷晓阳不详

第一部分介绍了比利时FN公司、奥地利斯太尔公司、格洛克公司及意大利伯莱塔防务集团的代表性产品,第二部分将呈现波兰ZMT机械厂、FB公司、捷克CZ公司、美国柯尔特公司、西格-绍尔公司、通用动力集团及土耳其萨斯利马兹公司、俄罗斯ORSI... 详细信息

第一部分介绍了比利时FN公司、奥地利斯太尔公司、格洛克公司及意大利伯莱塔防务集团的代表性产品,第二部分将呈现波兰ZMT机械厂、FB公司、捷克CZ公司、美国柯尔特公司、西格-绍尔公司、通用动力集团及土耳其萨斯利马兹公司、俄罗斯ORSIS公司的产品.

关键词：柯尔特公司通用动力轻武器阿布扎比俄罗斯合理组合土耳其

轻武器精彩呈现步机枪合理组合——第16届阿布扎比国际防务展见闻(下)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

轻兵器 2023年第8期 16-22页

作者：殷晓阳不详

本文前两部分主要介绍了比利时FN公司、奥地利斯太尔及格洛克公司、意大利伯莱塔防务集团、美国西格-绍尔公司、柯尔特公司、通用动力集团的代表性产品,最后一部分将呈现俄罗斯、新加坡、韩国、阿联酋及中国的产品——俄罗斯卡拉什尼科... 详细信息

本文前两部分主要介绍了比利时FN公司、奥地利斯太尔及格洛克公司、意大利伯莱塔防务集团、美国西格-绍尔公司、柯尔特公司、通用动力集团的代表性产品,最后一部分将呈现俄罗斯、新加坡、韩国、阿联酋及中国的产品——俄罗斯卡拉什尼科夫集团目前,5.45×39mm口径的AK-12步枪是俄罗斯新一代标准步枪,从2016年9月首次公开以来,已经经过多次改造和升级。据称,2023年将投产新一代AK-12步枪,枪托、护手等零部件都有升级。

关键词：卡拉什尼科夫柯尔特公司斯太尔通用动力俄罗斯轻武器阿联酋阿布扎比

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

沙特阿拉伯首届世界防务展轻武器景观

轻兵器 2022年第7期 10-18页

作者：殷晓阳不详

2022年3月6~9日,首届世界防务展(WDS 2022)在沙特阿拉伯首都利雅得举办。虽然轻武器并非本次防务展的重点,但仍然给我们提供一些不同的视角。各主要军工大国以及海湾国家对轻武器需求有哪些特点呢?

关键词：防务展轻武器沙特阿拉伯首届