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Th1/Th2型细胞因子对人乳腺癌细胞系MCF-7的生物学行为及ER表达的影响

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Th1/Th2型细胞因子对人乳腺癌细胞系MCF-7的生物学行为及ER表达的...

作者：段红洁天津医科大学

学位级别：硕士

目的:以人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,探讨Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4对MCF-7的生物学行为的影响及机制以及其对雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的影响。方法:*** IFN-γ和rh IL-4对MCF-7细胞生长特性的影响。... 详细信息

目的:以人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,探讨Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4对MCF-7的生物学行为的影响及机制以及其对雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的影响。方法:*** IFN-γ和rh IL-4对MCF-7细胞生长特性的影响。MCF-7细胞进行常规体外培养,以不同浓度rh IFN-γ(0.1、1、10、50、100、250ng/m L)或rh IL-4(0.1、1、5、10、25ng/m L)分别处理细胞24、48、72、96h,MTT法检测细胞的增殖状况以确定最佳的工作浓度和工作时间。以此为基础,细胞分组如下:空白对照(无rh IFN-γ或rh IL-4处理)、M/IFN-γ(100ng/m L rh IFN-γ处理细胞96h)及M/IL-4(10ng/m L rh IL-4处理细胞96h)三组。采用流式细胞术分析各组的细胞周期分布情况;RT-PCR检测各组的凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl和XIAP的m RNA表达情况。*** IFN-γ和rh IL-4对MCF-7细胞成瘤、侵袭和转移能力的影响。采用双层软琼脂集落形成实验检测各组细胞的体外成瘤能力;细胞黏附实验检测各组细胞的黏附能力;采用RT-PCR和Western blot检测各组促血管生成因子VEGF及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的表达情况;再利用Western blot检测各组的PI3K/Akt、Ras/Raf/MEK/ERK信号通路中Akt和Erk的磷酸化水平。*** IFN-γ和rh IL-4对MCF-7细胞ER表达水平的影响。采用Western blot检测各组ERα和ERβ的蛋白表达水平;采用ELISA检测MCF-7细胞分泌的IFN-γ和IL-4的水平;以相当于自分泌水平的rh IFN-γ或rh IL-4处理MCF-7细胞96h后,RT-PCR和Western blot检测细胞ERα和ERβ的表达水平。结果:***结果表明,与空白对照组相比,以100ng/m L rh IFN-γ处理MCF-7细胞96h后,可明显抑制细胞的增殖(1.07±0.05 vs 0.87±0.05,P<0.01);M/IFN-γ组G01期细胞比例增多[(55.42±2.28)%vs(66.98±0.88)%,P<0.01],S期比例明显减少[(27.61±3.11)%vs(15.36±0.94)%,P<0.01],G2期所占比例无显著变化;M/IFN-γ组各凋亡抑制基因的表达水平无显著差异。与空白对照组相比,以10ng/m L rh IL-4处理MCF-7细胞96h后,可明显促进细胞的增殖(1.07±0.05 vs 1.38±0.06,P<0.01);M/IL-4组G01期细胞比例减少[(55.42±2.28)%vs(37.77±5.93)%,P<0.01],S期比例明显增多[(27.61±3.11)%vs(45.45±4.15)%,P<0.01],G2期所占比例无显著变化;M/IL-4组凋亡抑制基因Bcl-2(1.35±0.02 vs 2.25±0.03,P<0.01)、Bcl-xl(1.33±0.01 vs 2.27±0.02,P<0.01)及XIAP(0.35±0.01 vs 0.60±0.03,P<0.01)的表达水平均升高。2.与空白对照组相比,M/IFN-γ组的集落形成数目减少(112.00±3.95 vs74.12±1.11,P<0.01);M/IFN-γ细胞黏附能力无显著差异;M/IFN-γ组的VEGF的m RNA(0.71±0.03 vs 0.45±0.02,P<0.01)和蛋白(1.12±0.08 vs 0.78±0.03,P<0.01)表达水平均明显下降;MMP-9的m RNA(0.29±0.03 vs 0.09±0.00,P<0.01)和蛋白(1.00±0.10 vs 0.81±0.03,P<0.01)表达水平显著下降,而MMP-2的表达水平无明显变化;M/IFN-γ组的Akt的磷酸化水平无显著变化,但Erk的磷酸化水平明显下降(1.33±0.01 vs 0.88±0.02,P<0.01)。与空白对照组相比,M/IL-4组的集落形成数目显著增多(112.00±3.95 vs144.23±4.89,P<0.05);M/IL-4细胞黏附Matrigel的能力显著增强[100.00%vs(128.57±5.97)%,P<0.05];M/IL-4组的VEGF的m RNA(0.71±0.03 vs1.11±0.07,P<0.01)和蛋白(1.12±0.08 vs 1.36±0.11,P<0.01)表达水平显著升高;MMP-2的m RNA(0.11±0.00 vs 0.52±0.12,P<0

关键词：乳腺癌 MCF-7 Th1/Th2平衡 IFN-γ IL-4 ERα ERβ

雌激素受体β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第1期22卷 52-56页

作者：魏丽段红洁牛秀珑刘文星邓为民天津医科大学基础医学院免疫学教研室天津300070 武警后勤学院附属医院感染科天津300162

目的:探讨雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)的表达与乳腺癌他莫昔芬(tamoxifen,TAM)内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法:以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌MCF-7细胞株[M/HK(阴性对照)、M/siα(ERαlow/ERβhigh)、M/s... 详细信息

目的:探讨雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)的表达与乳腺癌他莫昔芬(tamoxifen,TAM)内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法:以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌MCF-7细胞株[M/HK(阴性对照)、M/siα(ERαlow/ERβhigh)、M/siβ(ERαhigh/ERβlow)细胞]为研究对象,MTT法评估乳腺癌细胞对TAM的耐药性;用半定量RT-PCR法检测细胞中耐药相关基因MDR1、TOPOⅡ、LRP和GST-π的mRNA表达水平,用Western blotting法检测细胞中耐药相关信号通路MAPK、PI3K/Akt的p-ERK、p-Akt蛋白表达水平。结果:与对照组MCF-7细胞相比,MCF-7细胞中的ERβ高表达可促进高浓度TAM(1、5、10μmol/L)对MCF-7细胞增殖的抑制作用[(45.788±1.641)%vs(24.288±1.170)%,(57.899±1.583)%vs(31.499±1.978)%,(59.853±1.648)%vs(38.039±1.482)%;均P<0.05)],该抑制作用与TAM浓度呈剂量依赖性。ERβ高表达可显著抑制MCF-7细胞耐药基因MDR1、TOPOⅡ、LRP的mRNA表达水平(0.431±0.032 vs 0.932±0.083,0.234±0.008 vs 0.391±0.002,0.47±0.028 vs 0.586±0.036;均P<0.05);可显著下调Akt和ERK蛋白的磷酸化水平(0.224±0.006 vs 0.437±0.007,0.367±0.015 vs 0.756±0.039;均P<0.05)。结论:ERβ表达水平可影响乳腺癌细胞MCF-7对TAM的耐药性,该作用机制可能与耐药基因的表达及PI3K/AKT、MAPK信号通路激活有关。

关键词：乳腺癌 MCF-7细胞 ERα/ERβ 他莫昔芬耐药基因 Akt ERK

IFN-γ和IL-4对人乳腺癌细胞系MCF-7成瘤性、黏附能力的影响及其机制

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第5期22卷 597-602页

作者：段红洁张爱民牛秀珑李宏钊刘文星张宏健邓为民天津医科大学基础医学院免疫学系天津300070 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院检验科天津300162

目的:探讨Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4对MCF-7细胞的成瘤、黏附能力的调节作用及其相关机制。方法:常规体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7。以前期工作中筛选出的以有效剂量rh IFN-γ(100 ng/ml)或rh IL-4(10ng/ml)或细胞因子稀... 详细信息

目的:探讨Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4对MCF-7细胞的成瘤、黏附能力的调节作用及其相关机制。方法:常规体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7。以前期工作中筛选出的以有效剂量rh IFN-γ(100 ng/ml)或rh IL-4(10ng/ml)或细胞因子稀释液分别处理细胞96 h后,应用半定量RT-PCR法、Western blotting技术、双层软琼脂集落形成实验、细胞体外黏附实验等观察IFN-γ和IL-4对细胞VEGF表达、致瘤性和黏附侵袭特性的影响,并对其相关信号通路机制进行分析。结果:IFN-γ或IL-4可分别抑制或促进人乳腺癌细胞MCF-7的成瘤和黏附能力。分子机制研究表明,与对照组相比,rh IFN-γ可抑制MCF-7细胞VEGF、MMP-9的基因转录和蛋白表达水平,抑制Raf/MEK/ERK信号通路;rh IL-4可促进MCF-7细胞的VEGF、MMP-2和MMP-9的基因转录和蛋白表达水平,促进PI3K/AKT、Raf/MEK/ERK信号通路激活。结论:肿瘤微环境中,IFN-γ和IL-4可分别抑制和促进人乳腺癌细胞系MCF-7的VEGF表达和体外成瘤、黏附能力,其机制可能与PI3K/AKT、Raf/MEK/ERK信号通路相关。

关键词： IFN-γ IL-4 乳腺癌 MCF-7细胞成瘤性细胞黏附

ER β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用

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ER β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用

中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：魏丽牛秀珑段红洁刘文星邓为民天津医科大学基础医学院免疫教研室中国人民武装警察部队后勤学院附属医院感染科

目的探讨雌激素受体(ER)亚型与乳腺癌内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,MTT法检测细胞对他莫昔芬(TAM)的耐药性;RT-PCR法检测耐药相关基因(MDR1,TOPOII,LRP,GST-π)...

目的探讨雌激素受体(ER)亚型与乳腺癌内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,MTT法检测细胞对他莫昔芬(TAM)的耐药性;RT-PCR法检测耐药相关基因(MDR1,TOPOII,LRP,GST-π)的mRNA表达;Western Blot法检测耐药相关信号通路MAPK、PI3K/AKT的p-ERK、p-Akt的蛋白表达水平。结果 ERβ高表达可促进MCF-7对TAM的敏感性,抑制耐药基因MDR1、TOPOII、LRP的mRNA

关键词：

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哺乳动物食性进化的研究状况与展望

中国科学:生命科学 2024年

作者：段红祥李艳云南大学生态与环境学院省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室

食性选择是动物行为的一个基本方面,是动物对影响因子响应的结果,具有重要的生态和进化意义.食性差异是动物适应性进化过程中的重要性状之一,也是决定动物多样性的关键因素之一.哺乳动物经历丰富的食性变化,不同食性的哺乳动物在适应性... 详细信息

食性选择是动物行为的一个基本方面,是动物对影响因子响应的结果,具有重要的生态和进化意义.食性差异是动物适应性进化过程中的重要性状之一,也是决定动物多样性的关键因素之一.哺乳动物经历丰富的食性变化,不同食性的哺乳动物在适应性进化过程中必然发生与食性相适应的改变,故哺乳动物一直是研究动物食性进化机制的理想模型之一.通过基因组序列分析, DNA宏条形码技术,稳定同位素技术以及宏基因组技术等方法来追踪哺乳动物食性的转变机制,已揭示部分因素与哺乳动物食性转变之间复杂的相互作用,为深入了解食性变化如何影响物种的适应和多样化奠定基础.本文将从环境变化、基因调控以及肠道微生物三方面整合前人研究成果,系统阐明影响哺乳动物食性进化历程的关键因素,以期为深入理解动物多样性进化驱动力,合理制定多样性保护策略提供一定的参考.

关键词：哺乳动物食性进化环境因子基因调控微生物

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IgG型抗-E伴抗-Wr^a1例报道

检验医学与临床 2020年第10期17卷 1467-1469页

作者：段红洁赵国生张宏健黄海涛杜春红天津医科大学总医院输血科天津300000

输血前不规则抗体筛查十分必要,尤其是针对有输血史、妊娠史以及长期反复输血的患者,本室遇到1例反复输血的患者,抗体筛查阳性,抗体鉴定为较少见的抗-E和抗-Wra,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料患者男,81岁,汉族,于2018年11月14日... 详细信息

输血前不规则抗体筛查十分必要,尤其是针对有输血史、妊娠史以及长期反复输血的患者,本室遇到1例反复输血的患者,抗体筛查阳性,抗体鉴定为较少见的抗-E和抗-Wra,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料患者男,81岁,汉族,于2018年11月14日来本院急诊就诊,诊断为消化道出血,黑便,血红蛋白(Hb)70 g/L,临床医生申请2 U的悬浮红细胞,不规则抗体筛查阴性,输注配血相合的悬浮红细胞2 U,11月16日不规则抗体筛查阴性,再次输入配血相合的悬浮红细胞2 U,症状缓解后出院。2019年5月18日患者再次出现黑便,来本院急诊输血,不规则抗体筛查阳性,抗体鉴定发现患者血清中存在IgG抗-E合并IgG抗-Wra,抗-E和抗-Wra的效价均为4。

关键词：抗-E 抗-Wr^a 抗体鉴定交叉配血

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IL-17A与卵巢癌的网膜转移正相关

IL-17A与卵巢癌的网膜转移正相关

2021-2022年江苏省母血清学产前筛查室内质控数据的室间比对结果分析

第十一届全国免疫学学术大会

作者：牛秀珑段红洁刘文星张宏健徐灵灵姚智邓为民天津医科大学免疫学系天津市细胞与分子免疫学重点实验室教育部疾病与微环境重点实验室

目的:探讨IL-17A与卵巢癌网膜转移的相关性。方法:收集不同FIGO分期的卵巢癌临床标本,分析IL-17A、MMP2、FABP4表达与FIGO分期、转移、预后的相关性。利用C57 BL/6遗传背景的野生型(WT)和同基因IL-17小鼠,建立小鼠腹腔种植瘤和卵巢原位... 详细信息

目的:探讨IL-17A与卵巢癌网膜转移的相关性。方法:收集不同FIGO分期的卵巢癌临床标本,分析IL-17A、MMP2、FABP4表达与FIGO分期、转移、预后的相关性。利用C57 BL/6遗传背景的野生型(WT)和同基因IL-17小鼠,建立小鼠腹腔种植瘤和卵巢原位种植瘤两种卵巢癌动物模型,观察内源性IL-17对腹腔内成瘤、原位成瘤和转移的影响;应用免疫组化技术检测小鼠瘤组织中IL-17A、MMP-2和FABP4的表达。结果:卵巢癌临床标本分析表明,IL-17A、FABP4、MMP-2的表达强弱与卵巢癌FIGO分期、淋巴结转移、腹水转移等呈正相关;IL-17A与FABP4、MMP-2的表达水平具有正相关性。动物实验显示内源性IL-17A可显著减少腹腔种植瘤小鼠的生存时间,促进卵巢癌腹腔内成瘤和原位成瘤。WT小鼠肿瘤组织中MMP-2和FABP4均呈强阳性表达,IL-17小鼠肿瘤组织中MMP-2和FABP4呈弱阳性表达。结论:通过卵巢癌临床标本分析和动物实验,本研究揭示IL-17A与网膜转移相关分子FABP4的表达、卵巢癌的网膜转移正相关。

关键词：卵巢癌网膜转移 IL-17A FABP4

来源： cnki会议评论

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中华预防医学杂志 2024年第3期58卷 358-363页

作者：张颖段红蕾李洁贾支俊南京大学医学院附属鼓楼医院产前诊断中心南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院核医学科南京210008

本研究分析2021-2022年江苏省开展母血清学产前筛查的实验室上报的相关数据,通过各实验室室内质控数据的比对,进行江苏省内产前血清学筛查的质量评价。采用江苏省产前筛查质控分析平台收集2021-2022年江苏省参加产前筛查质控的各实验室... 详细信息

本研究分析2021-2022年江苏省开展母血清学产前筛查的实验室上报的相关数据,通过各实验室室内质控数据的比对,进行江苏省内产前血清学筛查的质量评价。采用江苏省产前筛查质控分析平台收集2021-2022年江苏省参加产前筛查质控的各实验室早孕期和中孕期母血清学筛查质控的测定方法、3个浓度的质控数据结果、仪器平台和试剂等相关信息。首先对各实验室检测结果进行统计分析,通过室内质控的变异系数对各实验室的精密度进行评价;其次对使用不同实验平台的实验室进行室间比对,评价其一致性。结果显示,2021年和2022年妊娠相关蛋白-A(PAPP-A)检测变异系数满足行业要求的实验室比例分别为87.5%(7/8)和92.3%(12/13);2021年和2022年游离人绒毛膜促性腺激素(Free β-hCG)(早孕)检测变异系数满足行业要求的实验室比例为97.5%(39/40)和95.5%(42/44),2021年和2022年甲胎蛋白(AFP)检测变异系数满足行业要求的实验室比例分别为100%(40/40)和90.9%(40/44),2021年和2022年游离 β-hCG(中孕)检测变异系数满足行业要求的实验室比例分别为100%(40/40)和95.5%(42/44);各指标的室间比对一致性为100%。综上,江苏省母血清学产前筛查具有较高一致性,对于少部分稳定性较差的实验室需根据数据分析结果做出周期性的评估及整改,完善母血清学产前筛查质量控制管理。

关键词：血清学筛查质量控制室间比对分析

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木质纤维素气凝胶制备及阻燃改性

化学进展 2024年第4期36卷 586-600页

作者：王爽张鑫孙苗段红娟张海军李少平武汉科技大学省部共建耐火材料与冶金国家重点实验室湖北三峡实验室

木质纤维素气凝胶具有密度低、孔隙率高、导热系数低等优异性能，被广泛应用于保温隔热、吸附、催化、电磁屏蔽和生物医学等领域。同时木质纤维素也是一种生物基材料，具有绿色、无污染、可再生和可持续的特点。本文首先综述了木材基纤... 详细信息

木质纤维素气凝胶具有密度低、孔隙率高、导热系数低等优异性能，被广泛应用于保温隔热、吸附、催化、电磁屏蔽和生物医学等领域。同时木质纤维素也是一种生物基材料，具有绿色、无污染、可再生和可持续的特点。本文首先综述了木材基纤维素和农作物废弃物基纤维素气凝胶的最新研究进展，然后综述了冷冻干燥、超临界干燥和常压干燥制备木质纤维素气凝胶的研究现状。其次，针对木质纤维素气凝胶普遍存在的易燃问题，详述了提高木质纤维素气凝胶阻燃性能的常用方法。最后，提出了木质纤维素气凝胶制备及性能方面存在的主要问题，并对该领域未来的发展方向进行了展望。

关键词：气凝胶木质纤维素干燥技术阻燃性能