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汞胁迫对脊尾白虾肌肉组织损伤及免疫相关酶活性的影响

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水产学杂志 2022年第4期35卷 47-52页

作者：王林华欧阳乐飞高威段健诚张庆起高焕江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏省海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005 江苏省海洋资源开发研究院江苏连云港222001 江苏省农业种质资源保护与利用平台江苏南京210014 连云港赣榆佳信水产开发有限公司江苏连云港222100

在水温(25±1)℃下,将体长(4.5±0.5)cm的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)放在60 L(50 cm×40 cm×30 cm)的蓝色水箱中,不换水,不投喂,在0 g/L(对照组)、1×10^(-6)g/L、3×10^(-6)g/L和1×10^(-5)g/L浓度的汞(Hg^(2+))胁迫0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h和96 h时,每组取3尾虾和0.2 g肌肉,先用液氮速冻,再放入-80℃保存,用于测定超氧化物歧化酶(SOD)活性;另取0.5 cm^(3)肌肉用Bouin’s液固定,用于组织切片,同时记录各组试验虾的中毒症状及死亡情况,研究了汞胁迫对虾肌纤维结构及肌肉组织中SOD活力的影响。结果表明,与对照组相比,汞胁迫组虾的肌纤维结构在前48 h内变化不明显;72 h和96 h时,肌纤维变化明显:低浓度汞胁迫(1×10^(-6)g/L)72 h肌纤维没有明显变化,胁迫96 h部分肌纤维溶解;高浓度汞胁迫(1×10^(-5)g/L)72 h,部分肌纤维溶解,胁迫96 h部分肌纤维断裂。不同浓度Hg^(2+)胁迫后,肌肉组织中SOD活力呈先下降后上升的趋势,在24 h时均达到最低值,但不同浓度胁迫组之间存在差异。低浓度胁迫组(1×10^(-6)g/L)的SOD活力在96 h达到最高,为24.639 U/mg;高浓度胁迫组(3×10^(-6)g/L和1×10^(-5)g/L)的SOD活力在72 h时达到最高,分别为21.744 U/mg和25.780 U/mg。这表明,汞胁迫对脊尾白虾代谢会产生影响,导致氧化应激,对脊尾白虾肌肉组织纤维造成一定损伤。

关键词：脊尾白虾汞胁迫肌纤维超氧化物歧化酶

不同环境因素对虾肝肠胞虫感染脊尾白虾的影响研究

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水产科学 2023年第2期42卷 296-302页

作者：段健诚胡吉卉穆金鑫邓高威高威牟华张庆起高焕江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏省海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005 江苏省农业种质资源保护与利用平台江苏南京210014 连云港赣榆佳信水产开发有限公司江苏连云港222100

虾肝肠胞虫的传播与宿主体质和水环境有一定的关联性。温度、盐度、氨氮含量等环境因子是养殖过程中极为重要的影响因素。研究表明,过高或过低的温度、盐度对脊尾白虾的特定生长率和非特异性免疫会有较大的影响。本试验以脊尾白虾为对象... 详细信息

虾肝肠胞虫的传播与宿主体质和水环境有一定的关联性。温度、盐度、氨氮含量等环境因子是养殖过程中极为重要的影响因素。研究表明,过高或过低的温度、盐度对脊尾白虾的特定生长率和非特异性免疫会有较大的影响。本试验以脊尾白虾为对象,设计温度(22、24、26℃)、盐度(20、24、28)和氨氮质量浓度(2、4、6 mg/L)3因素3水平正交试验,通过为期10 d的人工感染试验,利用实时荧光定量PCR法检测不同环境因素下的虾肝肠胞虫载量,探讨温度、盐度、氨氮质量浓度3种环境因子交互作用下对虾肝肠胞虫传播的影响。试验结果表明,各试验条件下脊尾白虾体内虾肝肠胞虫载量均显著上升(P<0.05),环境因素对虾肝肠胞虫在脊尾白虾体内传播影响由大到小依次为温度、氨氮质量浓度、盐度。最适传播条件为温度24℃、氨氮质量浓度2 mg/L和盐度28,不适条件为温度26℃、氨氮4 mg/L和盐度20。笔者探明了虾肝肠胞虫传播环境条件,试验结果可为海水养殖中虾肝肠胞虫病害的防控提供数据参考。

关键词：环境因素虾肝肠胞虫脊尾白虾载量传播条件

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虾肝肠胞虫感染对脊尾白虾肠道菌群的影响

渔业科学进展 2022年第3期43卷 75-83页

作者：段健诚胡吉卉沈宇航邓高威高威牟华张庆起高焕江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏省海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005 江苏省农业种质资源保护与利用平台江苏南京210014 连云港赣榆佳信水产开发有限公司江苏连云港222100

为探究虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)感染对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)肠道菌群的影响,本研究基于16S rRNA基因的测序结果,对感染EHP的脊尾白虾肠道菌群进行了分析。结果显示,感染虾与健康虾肠道菌群差异较大,... 详细信息

为探究虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)感染对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)肠道菌群的影响,本研究基于16S rRNA基因的测序结果,对感染EHP的脊尾白虾肠道菌群进行了分析。结果显示,感染虾与健康虾肠道菌群差异较大,且其肠道菌群结构多样性显著低于健康虾。研究发现,病虾中归属于变形菌门(Proteobacteria)的脱硫弧菌科(Desulfovibrionaceae)、弧菌科(Vibrionaceae)、未分类蓝细菌科(unidentified Cyanobacteria)、支原体科(Mycoplasmataceae)和未分类α变形菌科(unidentified Alphaproteobacteria)为优势菌,而归属于厚壁菌门(Firmicutes)的乳杆菌科(Lactobacillaceae)、双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)及噬几丁质杆菌科(Chitinophagaceae)细菌在健康虾中占据优势地位。EHP侵蚀导致感染虾肠道内潜在致病菌显著增加(P<0.05),增加了其他疾病的易感性。此外,通过Tax4Fun功能预测,发现感染虾肠道菌群主要用于新陈代谢,从而抵抗EHP侵染,维持机体正常功能;健康虾肠道菌群则多用于个体生长与环境信息处理,进而保证生长与存活。本研究从虾肠道菌群结构方面入手,进一步探究了EHP感染对脊尾白虾肠道菌群的影响,以期为EHP的防治提供帮助。

关键词：虾肝肠胞虫脊尾白虾肠道菌群多样性功能预测

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亚硝态氮对虾肝肠胞虫感染脊尾白虾的影响

水产科学 2022年第4期41卷 664-669页

作者：胡吉卉段健诚高阳陈姝含张庆起牟华赖晓芳高焕江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏省海洋生物技术重点实验室江苏连云港222005 连云港赣榆佳信水产开发有限公司江苏连云港222100 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005 江苏省农业种质资源保护与利用平台江苏南京210014

亚硝态氮是诱发虾类暴发性疾病的重要因素之一。为探究亚硝态氮胁迫对脊尾白虾生长状况及体内虾肝肠胞虫携带量的影响,设置0.008、3.000、6.000、9.000、12.000mg/L5个亚硝态氮质量浓度试验组,跟踪测定3周内脊尾白虾的生长指标和虾肝肠... 详细信息

亚硝态氮是诱发虾类暴发性疾病的重要因素之一。为探究亚硝态氮胁迫对脊尾白虾生长状况及体内虾肝肠胞虫携带量的影响,设置0.008、3.000、6.000、9.000、12.000mg/L5个亚硝态氮质量浓度试验组,跟踪测定3周内脊尾白虾的生长指标和虾肝肠胞虫载量的变化。试验结果显示,脊尾白虾存活率、体长增量和体质量增加率均随着亚硝态氮质量浓度的升高呈先升后降的趋势,其中亚硝态氮6.000mg/L组达最大值,存活率、体长增量和体质量增加率平均值分别为29%、0.8cm和35.33%。脊尾白虾虾肝肠胞虫的载量随亚硝态氮质量浓度的升高呈现先降后升的趋势,在6.000mg/L组达到最低值,为4.4×103拷贝/mg。试验结果表明,6.000mg/L的亚硝态氮可抑制虾肝肠胞虫的传播,进而对脊尾白虾生长有一定的促进作用,提高感染虾肝肠胞虫的脊尾白虾的存活率和养殖产量。

关键词：脊尾白虾虾肝肠胞虫亚硝态氮生长状况载量

脊尾白虾隐花色素基因cry1的克隆及其功能分析

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水产学报 2021年第2期45卷 170-178页

作者：朱佶轩戴琴高威段健诚宋崇阳张攀阎斌伦高焕江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室江苏省海洋生物产业技术协同创新中心

为探究隐花色素基因(cry1)在甲壳类中的节律调节功能,实验根据脊尾白虾转录组序列,利用RACE技术获得了脊尾白虾cry1的cDNA序列全长并对其进行功能分析。脊尾白虾cry1全长2 190 bp,开放阅读框1 845 bp,5′端非编码区为241 bp,3′端非编... 详细信息

为探究隐花色素基因(cry1)在甲壳类中的节律调节功能,实验根据脊尾白虾转录组序列,利用RACE技术获得了脊尾白虾cry1的cDNA序列全长并对其进行功能分析。脊尾白虾cry1全长2 190 bp,开放阅读框1 845 bp,5′端非编码区为241 bp,3′端非编码区为104 bp,共翻译出614个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为70.5 ku,理论等电点为5.09。同源性分析显示,脊尾白虾cry1与凡纳滨对虾的同源性最高,为71.6%。荧光定量分析结果显示,脊尾白虾cry1在眼柄、鳃、心脏、胃、肝胰腺、性腺、肌肉、肠道和腹索神经中均有表达,其中眼柄的表达量最高,性腺和心脏次之;不同时段的表达结果发现,其表达量在日节律(24 h)中表现出先下降再上升的趋势。不同光色条件下RNA干扰(RNA interference, RNAi)结果显示,注射小干扰RNA(siRNA)后3～6 h蓝光光照下脊尾白虾cry1的表达量显著高于白光光照,9～24 h蓝色和白色光照下的表达量无显著差异,而RNA干扰组的表达量显著低于对照组,此结果表明cry1可能主要响应蓝光周期节律。目前对甲壳类生物钟的研究较少,该研究为深入探究甲壳类生物钟基因的调控机制提供帮助。

关键词：脊尾白虾隐花色素基因组织表达日节律 RNA干扰

脊尾白虾线粒体基因组SNP位点的筛选及其特征分析

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水产科学 2021年第3期40卷 387-393页

作者：朱佶轩戴琴段健诚高娜高威阎斌伦高焕江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室江苏连云港222005 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心江苏连云港222005 江苏省农业种质资源保护与利用平台江苏南京210014

基于mtDNA全序列设计109对引物,利用高分辨率溶解曲线技术,对采自江苏省连云港和南通吕四港沿海地区养殖池塘中平均体长(5.23±0.33)cm的脊尾白虾潜在的单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛查,以获得脊尾白虾线粒体基因组(mtDNA)上的SNP位点... 详细信息

基于mtDNA全序列设计109对引物,利用高分辨率溶解曲线技术,对采自江苏省连云港和南通吕四港沿海地区养殖池塘中平均体长(5.23±0.33)cm的脊尾白虾潜在的单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛查,以获得脊尾白虾线粒体基因组(mtDNA)上的SNP位点。结果显示,在109对引物中,有80对引物具有特异性扩增结果;高分辨率熔解曲线(HRM)检测分析表明,80对引物中有9对引物的扩增产物中含有SNP位点,共包含16个SNP位点。统计结果显示,脊尾白虾线粒体基因组中的SNP位点均为单倍型,分布频率为0.10/100 bp,其中转换突变(G/A和C/T)占全部SNP位点的87.5%,颠换突变(A/T)占12.5%,未出现插入、缺失等突变形式;定位分析发现,获得的16个SNP位点分布在脊尾白虾mtDNA的COX1、cob、COX2、tRNAAsp、nad1、nad4、nad57个区域,在COX1基因区域中SNP位点最多,有5个SNP位点,其次是在cob区域中有3个SNP位点;进一步比对SNP位点编码的对应氨基酸,结果显示同义SNP位点占总个数的43.7%,而非同义SNP位点相对较多,占56.3%,可能会导致蛋白质的性质和功能发生变化。本研究筛查出的SNP位点,将为进一步开展脊尾白虾的系谱鉴定和遗传多样性分析等工作提供帮助。

关键词：脊尾白虾 SNP位点筛选高分辨率熔解曲线线粒体基因组

脊尾白虾甘露糖结合凝集素(MBL)基因在抗镉胁迫中的生物学功能分析

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渔业科学进展 2020年第4期41卷 174-180页

作者：徐莞媛马杭柯孙金秋段健诚邓高威高焕阎斌伦江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室江苏省海洋生物技术重点实验室淮海工学院连云港222005 江苏省海洋生物产业技术协同创新中心连云港222005 江苏省农业种质资源保护与利用平台南京210014 江苏省海洋资源开发研究院(连云港) 连云港222005

为研究Cd^2+胁迫下脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)甘露糖集合凝集素(MBL)在肝胰腺中表达量的变化特征,本研究利用重金属镉(Cd^2+)对脊尾白虾进行96 h急性毒性实验。实验共设置5组Cd^2+浓度胁迫(0、0.01、0.0175、0.021和0.0278mmol/... 详细信息

为研究Cd^2+胁迫下脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)甘露糖集合凝集素(MBL)在肝胰腺中表达量的变化特征,本研究利用重金属镉(Cd^2+)对脊尾白虾进行96 h急性毒性实验。实验共设置5组Cd^2+浓度胁迫(0、0.01、0.0175、0.021和0.0278mmol/L),分别在Cd^2+胁迫后0、3、6、12、24、48、72和96h共8个时间点取样。实时荧光定量结果显示,高浓度Cd^2+(0.0175、0.021和0.0278 mmol/L)胁迫下,脊尾白虾MBL基因的表达量先呈上升趋势,在72 h达到峰值后随后下降,但各时间点表达量均与对照组存在显著性差异(P<0.01);Cd^2+浓度为0.01 mmol/L时,脊尾白虾MBL基因的表达量整体呈下降趋势。进一步采用RNA技术干扰该基因表达后,发现Cd^2+胁迫后的脊尾白虾个体死亡率显著增加。本研究表明,脊尾白虾MBL在应答Cd^2+胁迫过程中可对机体起到一定的保护作用。

关键词：脊尾白虾 MBL 镉 RNA干扰技术急性毒性实验

饲料中β-胡萝卜素添加量对脊尾白虾生长及抗氧化酶活性的影响

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海洋渔业 2020年第4期42卷 427-434页

作者：王玉柳森段健诚王林华邓高威张庆起阎斌伦高焕江苏海洋大学海洋科学与水产学院江苏省海洋生物技术重点实验室连云港222005 江苏省海洋资源开发研究院连云港222005 连云港赣榆佳信水产开发有限公司连云港222100 江苏省农业种质资源保护与利用平台南京210014

为研究饲料添加剂对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)生长性能的影响,设定了5种不同浓度的实验饲料:按每kg饲料添加0、0.5、1.0、1.5、2.0 gβ-胡萝卜素饲料添加剂,依次记为A、B、C、D、E组。在盐度为23.0±0.1、pH为7.8±0.2、水温为... 详细信息

为研究饲料添加剂对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)生长性能的影响,设定了5种不同浓度的实验饲料:按每kg饲料添加0、0.5、1.0、1.5、2.0 gβ-胡萝卜素饲料添加剂,依次记为A、B、C、D、E组。在盐度为23.0±0.1、pH为7.8±0.2、水温为16.0~20.0℃、自然光照的实验条件下,投喂脊尾白虾仔虾[(0.29±0.01)g]30 d后,测定脊尾白虾的生长情况以及多种相关抗氧化酶的活力。结果显示,在养殖30 d后,β-胡萝卜素添加浓度在0.5~1.5 g·kg^-1范围内,脊尾白虾的生长指标,包括特定生长率(SGR)、质量增加率(WGR)、存活率(SR)以及肌肉组织抗氧化酶活性[超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)]普遍高于对照组;其中添加量在0.5 g·kg^-1时,SGR、WGR、SR增加幅度达到最高(11.94%、89.88%、83.35%),与对照组差异达到显著性水平(P0.05),同时存活率下降16.65%;SOD、ACP和CAT与对照组无显著差异(P>0.05),而AKP出现了显著增加(P<0.05),相比对照组提高了35.61%。结果表明,添加β-胡萝卜素对提高脊尾白虾的生长和非特异免疫能力有重要作用,添加量在0.5 g·kg^-1时,对本实验规格的脊尾白虾效果最好。

关键词：脊尾白虾饲料添加剂类胡萝卜素特定生长率抗氧化酶

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海洋污损生物附着机制及防治方法

齐鲁渔业 2019年第12期36卷 38-40页

作者：王林华段健诚邓高威陈锦军高焕江苏海洋大学海洋生命与水产学院/江苏省海洋生物技术重点实验室 222005 苏州纽方兴纳米材料有限公司 215121 江苏省农业种质资源保护与利用平台 210014

海洋中任何物体表面都有可能成为海洋生物的潜在栖息地,在这些生物的栖息活动中,有一类对人类而言是有害的,这一类被称为海洋污损生物。一般而言,海洋污损生物指那些在船底、养殖网箱的网衣及各类海洋人工设施上附着和生长,并影响人类... 详细信息

海洋中任何物体表面都有可能成为海洋生物的潜在栖息地,在这些生物的栖息活动中,有一类对人类而言是有害的,这一类被称为海洋污损生物。一般而言,海洋污损生物指那些在船底、养殖网箱的网衣及各类海洋人工设施上附着和生长,并影响人类利益的一类生物[1]。

关键词：海洋污损生物人工设施防治方法一类生物海洋生物附着物体表面