检索结果-南通市图书馆

作者：欧阳佳子暨南大学

学位级别：硕士

亚瑟·韦利作为敦煌曲子词英译第一人,首译俗文学作品26篇,结集成《敦煌歌谣和故事选集》(1960),其开创性无可取代,为英语世界的读者了解敦煌曲子词和中国俗文学作出了巨大贡献。然而,国内学者很少关注韦利晚年翻译的敦煌曲子词,更没有... 详细信息

亚瑟·韦利作为敦煌曲子词英译第一人,首译俗文学作品26篇,结集成《敦煌歌谣和故事选集》(1960),其开创性无可取代,为英语世界的读者了解敦煌曲子词和中国俗文学作出了巨大贡献。然而,国内学者很少关注韦利晚年翻译的敦煌曲子词,更没有人使用变译理论来分析他的英译本。因此,本文尝试以韦利的《敦煌歌谣和故事选集》英译本为研究对象,旨在从变译理论中变译方法的视角出发,结合定性和定量分析的研究方法,比照中英文本,选取具有代表性的例子,在内容、形式等方面对韦译敦煌曲子词产生的变化进行描述性、解释性的整体分析和概括。研究结果表明,变译方法如摘译、编译、改译等七种方法均适用于韦译敦煌曲子词文本风格变化的解释及分析。本文既是对韦利翻译研究的补充,也为国内研究学者和翻译工作者提供一个新的理论视角,并对中华文化经典的外译和传播具有一定的借鉴意义。

关键词：亚瑟·韦利敦煌曲子词英译变译

基于演化博弈论的水利工程PPP项目政府监管问题研究

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基于演化博弈论的水利工程PPP项目政府监管问题研究

作者：欧阳佳慧三峡大学

学位级别：硕士

水利工程作为国家重点关注的基础设施领域,以往以政府财政资金投资为主。但随着公共基础设施建设需求不断增大,引入社会资本投资以减少政府财政压力,提高公共产品供给质量和数量成为我国水利工程发展的必然趋势。在这种背景下,PPP模式... 详细信息

水利工程作为国家重点关注的基础设施领域,以往以政府财政资金投资为主。但随着公共基础设施建设需求不断增大,引入社会资本投资以减少政府财政压力,提高公共产品供给质量和数量成为我国水利工程发展的必然趋势。在这种背景下,PPP模式应运而生。但由于水利PPP模式的快速发展,也暴露出一些问题,使得加强政府监管成为当务之急。水利行业监管能力不足是亟待解决的治水主要矛盾。水利工程关乎国计民生,在运用PPP模式时,政府必须担负好监管重任,维护社会公众利益。基于此背景,本文以PPP模式相关理论、演化博弈论和政府监管相关理论为基础,从水利工程PPP项目监管的现状出发,分析了监管主体、监管对象和监管方式,探讨了当前水利工程PPP项目中政府对社会资本监管仍存在法律法规不健全,信用体系建设不完善,社会监督体系流于形式,缺乏先进信息技术监管手段等短板。针对这些问题,本文以演化博弈论为理论基础,构建水利工程PPP项目政府对社会资本监管的演化博弈模型。在该模型中,将政府采取的策略分为“有效监管”和“无效监管”,将社会资本的策略分为“积极履约”和“消极履约”。通过对单个博弈主体分别进行演化稳定性分析,并对双方构成的博弈系统进行演化稳定性分析,讨论在参数未知的不同条件下的演化稳定状态,从而分析双方策略选择的影响因素。研究发现,影响政府和社会资本策略选择的主要因素包括法律法规的完备性,采取该策略的成本和收益,政府发现社会资本消极履约时的惩罚力度,且惩罚力度越大,越容易达到（有效监管,积极履约）的演化稳定状态。此外,博弈双方策略的选择还与上级政府对本级政府的监管考核加分、失职问责的损失,社会资本消极履约的信用损失,以及当政府无效监管时,社会监督发现社会资本消极履约的概率,先进信息技术手段在水利工程PPP项目监管中的应用等因素有关。这些参数越大,越有利于实现（有效监管,积极履约）的演化稳定状态。基于以上分析,为实现政府对水利工程PPP项目中社会资本的有效监管,维护社会公众利益,保证PPP项目的顺利实施,促进水利事业的健康可持续发展,提出以下参考性的建议,包括:健全法律法规,完善社会资本信用评级制度,健全政府监管的奖惩机制,建立完善的社会监督体系,利用先进信息技术手段实现水利行业强监管。

关键词：水利工程 PPP项目演化博弈政府监管

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德彪西音乐语言研究

德彪西音乐语言研究

作者：欧阳佳沁上海音乐学院

学位级别：硕士

在西方音乐史上,德彪西是作为印象主义音乐的鼻祖而著称。而另一方面,德彪西正处在西方音乐史上古典调性语言逐步瓦解的时期,许多作曲家都在积极探索如何摆脱传统功能和声的束缚,创造新的音乐语言。德彪西便是这一探索过程中的重要代表... 详细信息

在西方音乐史上,德彪西是作为印象主义音乐的鼻祖而著称。而另一方面,德彪西正处在西方音乐史上古典调性语言逐步瓦解的时期,许多作曲家都在积极探索如何摆脱传统功能和声的束缚,创造新的音乐语言。德彪西便是这一探索过程中的重要代表性人物之一。本文是以德彪西的音乐语言作为观察视角,首先对传统调性音乐语言的发展作简单概述,并对德彪西音乐语言发展所受到的直接影响以及他同时代作曲家的不同调性语言扩展路线进行简要阐述。论文的核心部分则是通过对其音乐语言的组织材料、音高空间、主题形态、主题发展方式等方面的阐述和分析,从而寻找蕴涵在这些丰富、复杂表象呈现下的音高组织结构逻辑。本论文的最终目的不仅在于探寻德彪西音乐语言中不同于传统的结构逻辑,也是为了阐明德彪西对后世音乐语言发展的影响,他在西方音乐从传统调性语言到后调性语言的发展中所起的承前启后的桥梁作用不容忽视。

关键词：德彪西音乐语言调性音乐结构逻辑

带波纹/褶皱类缺陷的纤维增强树脂基复合材料压缩性能研究

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带波纹/褶皱类缺陷的纤维增强树脂基复合材料压缩性能研究

作者：欧阳佳斯武汉理工大学

学位级别：硕士

纤维增强树脂基复合材料作为高性能复合材料的代表,具有比模量高、比强度大、耐腐蚀性能好等优点,广泛应用于风电、海洋工程、航空航天等高端领域。然而,在制造复合材料的过程中,由于材料本身原因或者外在环境因素,缺陷的出现无法避免... 详细信息

纤维增强树脂基复合材料作为高性能复合材料的代表,具有比模量高、比强度大、耐腐蚀性能好等优点,广泛应用于风电、海洋工程、航空航天等高端领域。然而,在制造复合材料的过程中,由于材料本身原因或者外在环境因素,缺陷的出现无法避免。波纹/皱褶类缺陷是复合材料生产过程中一种极为常见的缺陷,这种缺陷的存在从微观上会改变纤维材料的几何形状,即发生纤维的错位,产生偏转角,导致材料的刚度和压缩强度显著减低,给材料的使用带来了很大的限制。本文以单向复合材料为基础,选取均一波纹缺陷为代表,以定量、准确评估波纹缺陷给材料带来刚度和压缩强度损失为目的,采用有限元模拟方法,对单向复合材料均一波纹板的刚度和压缩强度进行预测,并进行了实验验证。首先,本文以纤维呈直线排布的单向复合材料为研究对象,选用两种材料体系(AS4/3501-6、E-glass/8084),采用ANSYS有限元的分析工具,构造了含纤维和基体材料的代表性体积元(RVE),运用均匀化理论,计算了不同纤维排布方式下复合材料的各弹性常数,并与实验值对比,选取与实验值吻合的单胞模型进行下一步研究。通过改变纤维体积分数,探究体积分数对不同材料体系刚度的影响规律。其次,选用六方排列作为纤维排布方式建立均一波纹单胞(UC)模型,建立合适的周期性边界条件,在一定的纤维体积分数下,采用同样的方法,对不同波纹比下均一波纹板的各个弹性常数进行数值模拟,对比波纹比对两种材料体系复合材料刚度的影响。同时,再次采用均匀化方法,将单胞模型分成数个子单胞,对子单胞进行应力平均,得出每个单胞的平均应力,用蔡吴宏观强度理论预测了均一波纹单向复合材料的压缩强度。再次,建立纤维波纹的二维模型,利用纤维屈曲理论,以细观力学为基础,通过对比应力分析和屈曲分析中临界应力的最小值来确定其压缩强度,并确定了材料的失效模式。结果显示,在较低的波纹比下,单层板以失稳破坏为主;在较高的波纹比下,单层板以树脂剪切破坏为主。最后,通过实验的方法构造了面外波纹模型,以面外波纹为代表来验证模拟结果。结果表明,纵向杨氏模量和主泊松比的实验结果与模拟结果差别较小,证明了采用有限元方法预测均一波纹单向复合材料刚度的合理性与准确性。纵向压缩强度在波纹比较大的情况下模拟值与实验值相近;在波纹比较小的情况下有限元预测的结果比试验值高得多。

关键词：缺陷波纹复合材料刚度压缩强度

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*ST航通主动退市的案例研究

*ST航通主动退市的案例研究

作者：欧阳佳来湘潭大学

学位级别：硕士

1993年12月29日发布的《公司法》首次对上市公司退市的标准和退市的决定权作出规定,之后的二十几年,我国的上市公司退市制度经历了数次改革,多元化的退市制度体系不断完善。但是由于我国壳资源稀缺性仍存在,依旧有上市公司不断重复“带... 详细信息

1993年12月29日发布的《公司法》首次对上市公司退市的标准和退市的决定权作出规定,之后的二十几年,我国的上市公司退市制度经历了数次改革,多元化的退市制度体系不断完善。但是由于我国壳资源稀缺性仍存在,依旧有上市公司不断重复“带帽”“摘帽”,不利于资本市场良性生态的建设。新一轮的“退市新规”在2020年12月31日由沪深交易所对外公告,标志着退市制度的改革迈上新台阶。而在此背景下,2021年1月8日晚,*ST航通对外宣布公司将选择主动退市,主动撤回在上交所交易的所有股票,退市完成后转入新三板挂牌。*ST航通成为基于2020年末退市新规背景下,第一家申请主动退市的公司。研究*ST航通缘何走向退市边缘的过程,退市路径的抉择以及抉择带来的影响,能够提供可行的经验给予其他上市公司,也能够为相关政府监管部门进一步优化退市制度提供参考。本文首先从国内外文献出发,重点介绍了关于退市以及主动退市的相关研究进展,围绕退市相关的基本概念以及本文研究所采用的理论基础进行介绍。接着是案例介绍,描述*ST航通的公司简介以及主动退市的流程步骤。之后对案例进行具体剖析,公司选择主动退市的内部动因是公司不当的并购决策导致本就经营不佳的公司财务状况进一步急剧恶化,外部动因是公司出于对宏观法律法规中,新退市制度鼓励主动退市,以及外部行业竞争的激烈性的考量。接着分析其主动退市的路径选择为通过股东大会决议方式进行主动退市,依据是基于自身股权的集中性,并且与其他主动退市的企业对于退市路径的选择进行了对比。紧接着分析了*ST航通选择主动退市给予的现金选择权给投资者权益带来了保护作用,以及给自身发展带来了积极影响。*ST航通作出主动退市的决定,展现了其作为央企的担当,也是其综合多方因素全面考虑的结果。本文结合案例分析结果得出了一定的启示:上市公司要积极提升主营业务市场竞争力,谨慎进行拓展发展,完善公司治理体系,合理选择困境中的退出方式。对监管部门而言,要进一步优化退市制度以及多元化退出机制,保护中小投资者利益。对投资者自身而言,也需合理进行判断、投资。

关键词： *ST航通主动退市退市制度投资者保护

基于改进变密度法的功能梯度材料拓扑优化设计

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基于改进变密度法的功能梯度材料拓扑优化设计

作者：欧阳佳琛华中科技大学

学位级别：硕士

拓扑优化技术解决了给定设计域内确定最佳材料分布的问题,能够在概念设计阶段确定结构最优拓扑。经过近三十年的发展,拓扑优化技术已经应用于各个领域,涵盖宏观结构设计至微观材料设计。微观材料的拓扑优化设计可以使材料的潜能得到充... 详细信息

拓扑优化技术解决了给定设计域内确定最佳材料分布的问题,能够在概念设计阶段确定结构最优拓扑。经过近三十年的发展,拓扑优化技术已经应用于各个领域,涵盖宏观结构设计至微观材料设计。微观材料的拓扑优化设计可以使材料的潜能得到充分的发挥,设计出满足各种性能要求的特殊材料。为了适应梯度变化的外界环境,功能梯度材料的概念被提出,其特征是材料的某种物理属性沿着某方向呈梯度变化。本文围绕功能梯度材料的拓扑优化设计展开研究,主要工作如下:首先,提出了一种基于移动极限自适应机制的改进变密度法,显著加快了拓扑优化问题的收敛速率。移动极限作为直接作用于迭代步长的重要参数之一,对结构收敛速率有很大的影响,将其从常量修正为基于迭代前后设计变量的改变值而进行自适应调整的变量,能够在保证结构最优拓扑不被破坏的条件下,提升拓扑优化的效率,通过结合两个连续体拓扑优化经典算例,验证了所提出改进变密度法的有效性和快速收敛性。其次,研究了微观尺度下的连续体拓扑优化设计问题,该微观连续体结构由大量周期性排列的单胞组合而成,提出了微结构单胞基于改进变密度法的设计方法,并将其应用于四个微结构设计算例中,证明了基于改进变密度法的材料微结构拓扑优化设计方法的有效性。接着,研究了具有极端性能的功能梯度材料的拓扑优化问题,利用非线性扩散的思想,保证材料结构的连续性,构建了其基于改进变密度法的求解流程。通过算例测试,得到了满足Hashin-Shtrikman-Walpole体积/剪切模量上界的功能梯度材料,验证了所提出的改进变密度法设计极端性能功能梯度材料的可行性。最后,研究了具有特定性能的功能梯度材料的拓扑优化问题,通过最小化结构整体密度梯度的能量泛函形式,保证结构的连续性,构建了其基于改进变密度法的求解流程。以负泊松比的物理属性为例,通过算例得到了具有特定负泊松比的功能梯度材料结构,验证了所提出的改进变密度法设计特定性能功能梯度材料的有效性。

关键词：拓扑优化移动极限自适应机制微结构优化功能梯度材料负泊松比

基于家庭成员特征视域下江西农村义务教育阶段家庭教育支出问题研究 ——以A县为例

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基于家庭成员特征视域下江西农村义务教育阶段家庭教育支出问题研...

作者：欧阳佳玉江西农业大学

学位级别：硕士

义务教育作为国家教育体系的基础部分,是保证高等教育向良性发展的重要因素。推进我国教育改革发展的核心目标之一是实现义务教育的优质均衡发展,其中农村教育质量的提升就显得尤为重要,它是实现教育均衡化发展的关键所在,对于推动整个... 详细信息

义务教育作为国家教育体系的基础部分,是保证高等教育向良性发展的重要因素。推进我国教育改革发展的核心目标之一是实现义务教育的优质均衡发展,其中农村教育质量的提升就显得尤为重要,它是实现教育均衡化发展的关键所在,对于推动整个教育体系的升级与发展具有举足轻重的作用。然而,在探讨农村教育的资金支持问题时,不难发现,单纯依赖国家在宏观层面上的资金投入,似乎难以满足农村家庭对优质教育资源的迫切渴望。在这一背景下,家庭层面对于教育的投入同样占据着至关重要的地位,其在弥补教育资源不足、提升教育质量方面发挥着不可忽视的作用。因此,农村义务教育的发展是一个多维度、多层次的复杂过程,它不仅需要政府的政策扶持与资金保障,以及学校层面的科学管理与教育资源优化,同时更离不开农村家庭对教育的积极投入与深度参与。家庭作为教育的重要一环,其投入与关注对于农村义务教育的整体提升具有不可替代的作用。因此,实现农村义务教育的全面发展,必须全面考量政府、学校与家庭三者之间的协同作用,形成合力,共同推动农村义务教育质量的提升与均衡发展。基于此,深入探究义务教育阶段农村家庭教育支出问题及其影响因素,能更加清晰地了解家庭的教育决策,有助于实现教育资源更高效地分配,具有重要的现实意义。本文旨在以江西省A县农村学校为例,运用文献法、问卷调查法以及统计分析法,考察农村地区在家庭教育支出方面的现状,构建农村家庭教育支出影响因素理论模型,在明确农村的家庭教育支出影响因素后,研究从政府、学校、家庭三个主体出发,提出了相应的政策建议如下:第一,政府应缩小家庭经济水平差距,减少家庭教育支出差异;加大对农村义务教育经费投入力度,促进教育公平的实现。第二,学校应深化考试制度改革,建立多元评价体系;提升教学质量,优化课后服务;丰富家校合作与交流的渠道,促进家庭学校协同共育。第三,家长应与时俱进,努力提升自身的教育素质;建立科学的家庭教育支出分配机制,倡导并践行理性的家庭教育支出观念。

关键词：义务教育阶段农村家庭家庭教育支出

基于融合模型的联合全局和感兴趣区域的肾脏病理图像质量评价

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基于融合模型的联合全局和感兴趣区域的肾脏病理图像质量评价

作者：欧阳佳子太原理工大学

学位级别：硕士

肾脏病理切片的质量不仅对临床病理诊断的可靠性具有决定性影响,其数字化图像的质量还可能影响远程诊断和计算机智能分析算法的准确性。首先,高质量的肾脏病理切片能够有效增强病理医生对诊断结果的信心,从而确保疾病诊断的准确性和后... 详细信息

肾脏病理切片的质量不仅对临床病理诊断的可靠性具有决定性影响,其数字化图像的质量还可能影响远程诊断和计算机智能分析算法的准确性。首先,高质量的肾脏病理切片能够有效增强病理医生对诊断结果的信心,从而确保疾病诊断的准确性和后续治疗方案的合理性。其次,调动高水平专家服务资源缺乏地区的远程诊断技术为保证疾病诊断的可靠性,对能够距离传输的数字化病理图像质量也提出了高要求。另外,为减轻医生工作负担而开发的肾脏病理智能辅助诊断系统也需要在图像输入计算机算法进行智能分类和分析之前检测其质量,通过高质量的可用图像训练高性能的智能模型和获得高可信度的分析结果。目前,在实际病理诊断和数字病理图像应用中,评估肾脏病理切片和数字图像质量的任务主要由病理医生通过显微镜观察完成。他们需要在光学显微镜下反复调整切片放大倍数并移动视野,根据肉眼观察结果主观地判断其质量情况。这一过程不仅费时费力,并且极易受到个体观察差异的影响,带来很强的主观性和不可重复性。而基于计算机评价肾脏病理图像质量时,由于病理图像分辨率极高、图像特征复杂,导致其无法被计算机直接读取和处理,这限制了肾脏病理图像质量自动化评价方法的开发和应用。针对以上问题,本文基于融合的深度学习模型,提出了一种联合全局和局部感兴趣区域的无参考肾脏病理图像质量评价方法。该方法结合临床切片质量检查过程预处理数据,为每张高分辨率肾脏病理图像建立子图像集,有效保留肾脏病理图像的全局和局部细粒度特征,使得质量评价结果更加符合实际诊断要求。融合的深度学习特征提取器能够有效应对图像特征的高复杂性,确保模型的良好性能。为降低质量分数标签的获取难度,本文采集了更符合人类心理学的定性质量评价标签,并通过算法实现同时预测定性和定量质量情况。本文方法包括三个模块:融合CNN分类模块、质量分数计算模块和综合质量评价模块。融合CNN分类模块实现了对子图像的定性分类;质量分数计算模块则在计算子图像质量分数的基础上,联合全局和感兴趣区域质量获得整体图像的综合质量分数,实现定量评价;综合质量评价模块基于模糊集合理论,把连续性的综合质量分数离散到不同的质量集合中,实现图像质量定性评价。本文收集了1105例患者的肾脏组织全视野数字图像用于质量评价模型的训练和测试。通过训练好的模型,能够端到端地定性评估一张病理图像的质量情况,同时给出一个具有参考性的质量分数。在测试集上,该方法与高级病理医生定性评估的一致性可达90.05%,达到了初级病理医生的水平。同时,在判断图像可用性的二分类任务中,准确性可达99.095%。这表明,本文方法能够在病理诊断、远程诊断和肾脏病理智能分析任务中较为可靠地评估肾脏病理图像的可用性,为后续的病理诊断和智能分析提供保障。此外,本文工作建立的肾脏病理图像的质量评价数据库中包含大量高质量和高分辨率的感兴趣区域图像,可用于疾病病灶识别算法的开发;制定的图像质量评价标准也可以为未来图像的标准化和修复提供指导。

关键词：图像质量评估深度学习融合模型肾脏病理图像图像分类

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基于多模态表示学习的药物相互作用预测研究

基于多模态表示学习的药物相互作用预测研究

作者：欧阳佳明上海大学

学位级别：硕士

药物-药物相互作用(Drug-Drug Interaction,DDI)是指同时或先后服用两种以上药物时,其中一种药物使另一种药物的药理效应发生改变的现象。尽管同时使用多种药物通常会提高治疗效果,但某些组合会出现不需要的DDI,从而导致意料之外的不良... 详细信息

药物-药物相互作用(Drug-Drug Interaction,DDI)是指同时或先后服用两种以上药物时,其中一种药物使另一种药物的药理效应发生改变的现象。尽管同时使用多种药物通常会提高治疗效果,但某些组合会出现不需要的DDI,从而导致意料之外的不良药物反应(Adverse Drug Reaction,ADR)。作为一种特殊类型的不良反应,ADR不仅会影响患者的健康,严重情况下甚至会导致死亡。及早地发现和识别DDI能有效防止医疗事故的产生,值得患者、临床医生和医学研究人员关注。随着数据的不断增多,如何从大量复杂多模态数据中更加精准有效地捕捉药物关键特征,以及如何建立一个适应力强、准确度高的模型,仍是一个值得研究的问题。本文针对两类药物相互作用预测展开研究,一类是小分子药物(Small Molecule Drug,SMD)相互作用预测,另一类是SMD和生物制药(Biotech Drug,Bio D)相互作用预测。传统的SMD相互作用预测仅仅是将不同的特征向量进行拼接,而没有考虑特征之间的深层次交互信息和冗余信息。针对这一问题,本文提出了一种基于特征重构和多维注意力机制的DDI预测方法FM-DDI,有效地提取不同模态之间的交互信息并去除冗余,以用于SMD相互作用预测。此外,随着Bio D的发现,由于SMD和Bio D之间的异构性,无法使用传统的DDI预测方法对SMD和Bio D两种类型药物之间的相互作用进行预测。针对这一问题,本文提出了一种基于多模态表示学习的DDI预测方法Multi-SBI,有效地融合异构数据中的复杂信息,以用于SMD和Bio D相互作用预测。论文主要的研究内容和创新点具体如下:(一)提出了一种基于特征重构和多维注意力机制的深度学习方法FM-DDI,用于小分子药物(SMD)相互作用预测。模型首先输入多种药物亚结构特征,并加以组合以减少由单一类型亚结构表示引起的信息缺失。其次,特征重构从异构数据源(药物分子指纹和关联信息)中提取维度低、信息量丰富的药物特征。最后,基于多维注意力机制的深度神经网络模型赋予关键特征维度较高注意力权重,从而有效地捕捉关键信息。与几种最先进的药物相互作用预测方法相比,FM-DDI实现了显著的性能改进。在精神类疾病药物的案例研究中,FM-DDI预测的具有最高置信度的10个DDI中有7个在最新版Drug Bank中得到了验证,进一步证明了FM-DDI提取和学习药物特征以预测SMD相互作用的有效性。(二)提出了一种基于多模态表示学习的深度学习方法Multi-SBI,用于小分子药物(SMD)和生物制药(Bio D)的相互作用预测。考虑到SMD和Bio D之间的异质结构和复杂网络关系,模型首先使用多模态特征来充分表示小分子药物和生物制药的结构信息和网络关联。其次,引入了一种基于正样本无标记学习的欠采样方法PU-sampling,从无标签数据集中获取高置信度的负样本。最后,应用深度神经网络进行药物相互作用预测。实验结果表明,多模态表示学习可以更全面地表示异构药物中的药物特征,PU-sampling可以有效去除未标记样本中的噪声,并且Multi-SBI的性能显著优于其他先进的相互作用预测方法。在对Drug Bank 5.1.0的回顾性分析中,具有最高置信度的20个预测结果中有14个在最新版本的Drug Bank中得到验证,进一步证明了Multi-SBI通过学习药物复杂多模态特征以预测SMD和Bio D相互作用的有效性。

关键词：药物-药物相互作用预测深度学习注意力机制特征重构多模态表示学习

Hsa-miR-135b-5p靶向抑制ZNRF3对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

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Hsa-miR-135b-5p靶向抑制ZNRF3对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影...

作者：欧阳佳凤南华大学

学位级别：硕士

目的:研究hsa-miR-135b-5p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,并筛选hsa-miR-135b-5p的下游基因,探讨hsa-miR-135b-5p通过调控锌指蛋白3(Zinc and ring finger 3,ZNRF3)影响胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的具体机制。方法:1.采用qRT-PCR技术检测胃癌组织、癌旁正常组织、正常胃上皮细胞株GES-1以及胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803中hsa-miR-135b-5p的表达水平。2.生物信息学分析:(1)使用miRNA靶基因在线预测网站Target Scan、miRDB和DIANA-micro T联合预测hsamiR-135b-5p靶向的m RNA;(2)通过GO注释与KEGG富集技术分析hsa-miR-135b-5p下游靶基因的生物学功能以及参与的信号通路。3.构建野生型载体ZNRF3-wt和突变型载体ZNRF3-mut,转染293T细胞,采用双荧光素酶报告实验分析ZNRF3和hsa-miR-135b-5p的靶向关系。4.在胃癌细胞株SGC-7901中分别转染hsa-miR-135b-5p mimic、hsa-miR-135b-5p inhibitor及相应的阴性对照(NC)用于上调或下调hsa-miR-135b-5p的表达,q RT-PCR技术确认hsa-miR-135b-5p上调和下调效果,并检测hsa-miR-135b-5p上调或下调时ZNRF3m RNA水平的变化。5.在SGC-7901细胞中共转染hsa-miR-135b-5p inhibitor和ZNRF3 si RNA,分组如下:hsa-miR-135b-5p inhibitor+ZNRF3 si RNA、hsa-miR-135b-5p inhibitor+si RNA NC、inhibitor NC+ZNRF3 si RNA、inhibitor NC+si RNA NC,使用CCK8和Annexin VAPC/PI实验分别检测细胞增殖和凋亡,进一步明确hsa-miR-135b-5p通过靶向调控ZNRF3对胃癌细胞的增殖和凋亡的影响。结果:1.所检测的5对胃癌临床标本中,hsa-miR-135b-5p在胃癌组织中的平均表达量明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(p<0.01);相较正常胃上皮细胞GES-1,hsa-miR-135b-5p在胃癌细胞SGC-7901与MGC-803中均呈现高表达,以SGC-7901细胞中hsa-miR-135b-5p表达水平最高,差异有统计学意义(p<0.001)。2.生物信息学分析表明hsa-miR-135b-5p与ZNRF3存在靶向结合关系,且有373个靶基因能被Target Scan、miRDB和DIANA-micro T三个在线网站同时预测;GO注释和KEGG富集分析表明hsa-miR-135b-5p的下游靶基因主要参与了细胞凋亡、蛋白磷酸化和RNA转录等生物学过程,并在Wnt、Hippo及c AMP等肿瘤相关信号通路中发挥作用。3.双荧光素酶报告实验显示在293T细胞中过表达hsa-miR-135b-5p可以抑制野生型ZNRF3报告载体(ZNRF3-wt)的荧光表达(p<0.01),而结合位点突变的突变型ZNRF3报告载体(ZNRF3-wt)荧光表达不受影响,表明hsa-miR-135b-5p与ZNRF3 3’UTR存在靶向结合关系。4.q RTPCR显示hsa-miR-135b-5p上调能抑制SGC-7901中ZNRF3 m RNA的水平,而hsa-miR-135b-5p下调能使ZNRF3的表达量增加,差异有统计学意义(p<0.01)。5.在CCK-8增殖实验中,hsa-miR-135b-5p下调可以抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,而ZNRF3低表达能削弱hsamiR-135b-5p下调产生的SGC-7901增殖抑制作用(p<0.05);凋亡实验表明hsa-miR-135b-5p下调能增加SGC-7901细胞的凋亡率,而ZNRF3受抑能“挽救”hsa-miR-135b-5p下调引起的SGC-7901凋亡增加(p<0.001)。结论:***-miR-135b-5p在胃癌组织和细胞系中高表达;***3是hsa-miR-135b-5p的下游靶基因;***-miR-135b-5p通过靶向抑制抑癌基因ZNRF3的表达,能促进胃癌细胞SGC-7901的增殖,并抑制其凋亡。

关键词：胃癌 hsa-miR-135b-5p ZNRF3 增殖凋亡