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泌乳奶牛瘤胃内褪黑素的昼夜节律及其对瘤胃菌群结构的影响

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泌乳奶牛瘤胃内褪黑素的昼夜节律及其对瘤胃菌群结构的影响

作者：欧阳佳良扬州大学

学位级别：硕士

肠道激素不仅可以通过生物节律调控肠道的消化、吸收能力和免疫机制,还能通过影响肠道微生物从而调控宿主。但是目前有关反刍动物瘤胃内激素及其与微生物之间关系的研究鲜有报道。因此,本研究通过泌乳奶牛体内与体外瘤胃内褪黑激素与瘤... 详细信息

肠道激素不仅可以通过生物节律调控肠道的消化、吸收能力和免疫机制,还能通过影响肠道微生物从而调控宿主。但是目前有关反刍动物瘤胃内激素及其与微生物之间关系的研究鲜有报道。因此,本研究通过泌乳奶牛体内与体外瘤胃内褪黑激素与瘤胃细菌群体结构的变化以及二者的相关关系,探究瘤胃内激素的分泌规律及其对瘤胃细菌种属的影响。试验一、泌乳奶牛瘤胃液褪黑素,生长激素、促乳素的昼夜变化规律探索本部分试验主要探索了泌乳奶牛瘤胃液中褪黑素(MLT),生长激素(GH)、促乳素(PRL)等浓度的昼夜变化趋势,并分析了与血清、唾液中相应激素的变化关系。选取体重、胎次、泌乳性能等都相似的6头中期泌乳奶牛,分别在02:00、10:00、18:00(1st d)和06:00、14:00、22:00(2nd d)采集血液、唾液和瘤胃液,检测以上三种激素的浓度。结果表明,血清、唾液和瘤胃液中MLT浓度都有明显的昼夜节律,且都较符合Cosine生物钟的变化规律:无光照(Dark)时MLT浓度显著高于有光照(Light)时的MLT浓度(P0.05),但是唾液中06:00时GH浓度显著高于02:00、14:00和18:00时的GH浓度(P0.05),但不同时间点血清和瘤胃液中的PRL浓度差异显著(P<0.05),且二者呈现相反的变化趋势。本部分试验结果表明,瘤胃内含有褪黑素,而且其昼夜变化趋势符合生物钟的变化规律,受光照-黑暗周期的影响;瘤胃内同时也会有GH和PRL,但并不呈现昼夜变化趋势。试验二、泌乳奶牛瘤胃发酵参数及其菌群结构的昼夜变化相关性研究本部分试验主要在获得瘤胃MLT具有日节律变化的基础上,进一步探讨泌乳奶牛瘤胃菌群的昼夜变化规律,并筛选与MLT昼夜变化规律相关的微生物。试验方法同试验一,即选取体重、胎次、泌乳性能等都相似的6头中期泌乳奶牛,分别在02:00、10:00、18:00(1st d)和06:00、14:00、22:00(2nd d)采集瘤胃液,测定瘤胃发酵参数并进行16S扩增子测序分析菌群结构。结果表明,Dark和Light时的瘤胃菌群结构具有显著的差异,且Dark时的Shannon指数显著高于Light时的Shannon指数(P<0.05),符合Cosine生物钟节律(r2=0.933);而非参数检验JTKYCLE分析发现瘤胃菌群中4.6%可识别OTU具有显著的昼夜节律(P<0.05);瘤胃发酵pH值、NH3-N和MCP含量表现出一定的昼夜节律,且NH3-N对瘤胃菌群结构有显著贡献(P<0.05),MLT和戊酸也对瘤胃菌群结构有明显的贡献。微生物丰度差异分析发现Preteobacteria和Succinivibrionaceae在Dark时的相对丰度显著低于Light时的丰度,而Bacteroidetes和Prevotellaceae的相对丰度都在Dark时显著高于Light时(P<0.05);OTU、OTU823、OTU330(都为unidentified Succinivibrionaceae)和OTU8(Prevotellaceae科)、OTU57(undentified Prevotellaceae)对菌群结构有重要的影响,且OTU、OTU823、OTU330相对丰度的昼夜规律与瘤胃MLT昼夜规律相反,而OTU8和OTU57相对丰度昼夜变化规律与瘤胃MLT昼夜变化规律一致。本部分试验结果表明,部分瘤胃细菌及其发酵参数也具有昼夜节律,且光暗或者MLT对Prevotellaceae和Succinivibrionaceae科的相对丰度有显著影响。其中,Succinivibrionaceae科相对丰度昼夜规律与MLT昼夜规律相反,而Prevotellaceae科相对丰度昼夜规律与MLT昼夜规律一致。试验三、褪黑素对体外培养瘤胃发酵参数和菌群结构的影响本部分试验旨在通过体外模拟瘤胃发酵技术验证MLT与瘤胃菌群之间的关系。分别设置人工唾液+标准MLT溶液(CK0组)、人工唾液+瘤胃液(CK1组)以及人工唾液+瘤胃液+标准MLT溶液(MLT组),体外模拟培养24 h,分别于培养0、4、8、12、16、20、24 h采集培养液分析MLT浓度以及CK1和MLT组中的瘤胃发酵参数和瘤胃菌群结构。研究结果表明,培养的时间和处理都对培养液中的MLT浓度有极显著的影响(P<0.01),且CK1和MLT组褪黑素降解速率比CK0组的快(P<0.05);CK1组与MLT组菌群α、β多样性以及瘤胃发酵参数差异均不明显,但Shannon指数都在12 h最低,也都符合Cosine

关键词：泌乳奶牛瘤胃褪黑素菌群结构昼夜节律

不同青贮菌、纤维分解酶及碳源组合对稻秸青贮发酵品质的影响

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动物营养学报 2019年第4期31卷 1952-1960页

作者：欧阳佳良戚如鑫陈逸飞王梦芝扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

本试验旨在研究不同添加物组合对稻秸青贮发酵品质的影响,进而筛选出最适于稻秸青贮的添加物组合。采用3因素3水平正交设计,将不同种类的青贮菌、纤维分解酶和碳源添加到稻秸中,1组为地衣芽孢杆菌+黑曲霉+葡萄糖,2组为地衣芽孢杆菌+绿... 详细信息

本试验旨在研究不同添加物组合对稻秸青贮发酵品质的影响,进而筛选出最适于稻秸青贮的添加物组合。采用3因素3水平正交设计,将不同种类的青贮菌、纤维分解酶和碳源添加到稻秸中,1组为地衣芽孢杆菌+黑曲霉+葡萄糖,2组为地衣芽孢杆菌+绿色木霉+麸皮,3组为地衣芽孢杆菌+纤维素酶+淀粉,4组为植物乳杆菌+黑曲霉+麸皮,5组为植物乳杆菌+绿色木霉+淀粉,6组为植物乳杆菌+纤维素酶+葡萄糖,7组为粪肠球菌+黑曲霉+淀粉,8组为粪肠球菌+绿色木霉+葡萄糖,9组为粪肠球菌+纤维素酶+麸皮,同时设置空白对照组,共10组,每组3个重复,于青贮15、30和45 d分别采集青贮饲料样品进行青贮发酵品质分析。结果表明:1) 2、4组氨态氮(NH_3-N)/总氮(TN)平均值显著高于空白对照组(P 0.05),其他各组均显著低于空白对照组(P0.05)。4)正交分析中,青贮15、30和45 d极差值青贮菌>纤维分解酶,青贮15和45 d极差值纤维分解酶>碳源,且青贮15和30 d都以植物乳杆菌和绿色木霉水平最优,而青贮30和45 d都以麸皮水平最优。综上,对稻秸青贮品质的影响青贮菌>纤维分解酶>碳源,正交筛选最适于稻秸青贮的添加物组合为植物乳杆菌、绿色木霉和麸皮。

关键词：青贮稻秸青贮菌纤维分解酶碳源青贮品质正交设计

饲粮中不同比例桑叶粉对湖羊瘤胃上皮组织结构的影响

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动物营养学报 2017年第6期29卷 2196-2203页

作者：冯丹欧阳佳良王梦芝侯启瑞扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 中国农业科学院蚕业研究所镇江212018

本试验旨在研究饲粮中不同比例的桑叶粉对育肥湖羊瘤胃上皮组织结构的影响。选取3月龄育肥湖羊40只,随机分为5组,每组8只。各组用桑叶粉分别替代饲粮中精料的0(A组)、15%(B组)、30%(C组)、45%(D组)、60%(E组)。预试期2周,正试期8周。结... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中不同比例的桑叶粉对育肥湖羊瘤胃上皮组织结构的影响。选取3月龄育肥湖羊40只,随机分为5组,每组8只。各组用桑叶粉分别替代饲粮中精料的0(A组)、15%(B组)、30%(C组)、45%(D组)、60%(E组)。预试期2周,正试期8周。结果表明:1)B组和C组瘤胃重/复胃重显著高于A组(P0.05)。3)对于瘤胃上皮的角质层宽度,A组高于其他各组,其中显著高于C组和D组(P0.05);对于棘突层和基底层宽度,与A组相比,桑叶粉处理能提高棘突层和基底层的宽度,但是作用不显著(P>0.05),D组和B组的基底层宽度显著高于C组(P<0.05)。总之,用桑叶粉替代15%~45%的精料能在一定程度上提高湖羊复胃的重量,促进的棘突层和基底层细胞的分裂,从而促进瘤胃上皮组织发育,同时,也有效降低了瘤胃上皮角质层的宽度。

关键词：桑叶粉湖羊瘤胃组织

体外培养条件下不同长链脂肪酸对山羊瘤胃原虫群体结构和原虫吞噬细菌循环的影响

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动物营养学报 2017年第8期29卷 2707-2715页

作者：经语佳高健王梦芝欧阳佳良扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

本试验旨在研究体外培养条件下不同长链脂肪酸对山羊瘤胃原虫群体结构和原虫吞噬细菌循环的影响。试验选取6种不同不饱和度的长链脂肪酸[分别为硬脂酸(A组)、油酸(B组)、亚油酸(C组)、α-亚麻油酸(D组)、花生四烯酸(E组)、二十碳五烯酸(... 详细信息

本试验旨在研究体外培养条件下不同长链脂肪酸对山羊瘤胃原虫群体结构和原虫吞噬细菌循环的影响。试验选取6种不同不饱和度的长链脂肪酸[分别为硬脂酸(A组)、油酸(B组)、亚油酸(C组)、α-亚麻油酸(D组)、花生四烯酸(E组)、二十碳五烯酸(F组),不饱和键个数从0~5依次递增],各脂肪酸的添加水平为底物的3%,进行体外培养。在体外培养10 h后测定原虫吞噬细菌速率,在体外培养24 h后测定细菌、原虫密度以及细菌蛋白质、原虫蛋白质含量。结果表明:除F组头毛虫属(Ophryoscolecinae)比例显著高于B和D组(P0.05)。原虫密度以A组最高,并显著高于B组(P<0.05);细菌密度以D组最高,并显著高于A、B、E、F组(P<0.05)。原虫吞噬细菌速率A^F组依次为244.50、236.51、229.60、189.04、200.51、174.24 cells/(cell·h);另外,以D组的细菌周转率(0.68%)最低,且其细菌周转时间(146.92 h)最长。所估算的细菌蛋白质循环量以D[126.75 mg/(d·头)]和F组[131.63 mg/(d·头)]相对较低。因此,在本试验基础上认为,体外培养条件下α-亚麻油酸抑制山羊瘤胃原虫吞噬细菌效果较好。

关键词：脂肪酸不饱和键原虫吞噬细菌

江苏农区秸秆和尾菜混合青贮饲料化利用技术的研究进展

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中国饲料 2020年第17期 128-133页

作者：戚如鑫欧阳佳良王梦芝章世元扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009

江苏省作为南方优势农区,农作秸秆和尾菜资源丰富,其饲料资源化利用技术也相应具有一定的地区特点。本文主要综述了江苏省的秸秆资源概况与秸秆青贮饲料化利用技术,尾菜资源概况与尾菜青贮饲料化利用技术,秸秆和尾菜混合青贮饲料化技术... 详细信息

江苏省作为南方优势农区,农作秸秆和尾菜资源丰富,其饲料资源化利用技术也相应具有一定的地区特点。本文主要综述了江苏省的秸秆资源概况与秸秆青贮饲料化利用技术,尾菜资源概况与尾菜青贮饲料化利用技术,秸秆和尾菜混合青贮饲料化技术,以期为南方优势农区的农作副产的饲料资源化利用技术研发提供一些参考。

关键词：江苏秸秆尾菜饲料混合青贮

体外法研究不同青贮菌、纤维分解酶及碳源组合青贮稻秸对瘤胃发酵参数及产气量的影响

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饲料工业 2019年第15期40卷 36-40页

作者：欧阳佳良张硕戚如鑫王梦芝扬州大学动物科学与技术学院

试验旨在通过体外法研究不同添加剂组合对青贮稻秸瘤胃发酵参数及产气量的影响,从而筛选出适合稻秸青贮的添加剂组合。选取4头健康、体况相近、安装有永久性瘤胃瘘管的山羊用于瘤胃液的采集。将添加不同添加剂组合青贮45d的稻秸作为发... 详细信息

试验旨在通过体外法研究不同添加剂组合对青贮稻秸瘤胃发酵参数及产气量的影响,从而筛选出适合稻秸青贮的添加剂组合。选取4头健康、体况相近、安装有永久性瘤胃瘘管的山羊用于瘤胃液的采集。将添加不同添加剂组合青贮45d的稻秸作为发酵底物,进行连续72h的体外产气培养和体外批次培养试验。结果表明:①不同添加剂组合青贮稻秸饲料对体外发酵pH值没有显著影响(P>0.05);5、9组中氨氮(NH3-N)浓度显著高于其他组,而1组NH3-N浓度最低(P<0.05);对照组瘤胃微生物蛋白(MCP)浓度显著低于其他各组,而3和8组MCP浓度最高(P<0.05)。②对照组总挥发性脂肪酸(TVFA)含量显著低于其他各组,而3组的TVFA、丙酸和丁酸都显著高于其他组(P<0.05)。③对照组发酵累积产气量、理论最大产气量、潜在产气量和产气速率常数都显著低于其他组,而3组累积产气量、理论最大产气量和潜在产气量都显著高于其他组(P<0.05)。综上所述,添加剂能够提高青贮稻秸体外发酵参数和产气量,其中3组(地衣芽孢杆菌+纤维素酶+淀粉)效果最好。

关键词：体外培养青贮添加剂稻秸产气量饲料

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不同青贮添加剂组合对稻秸青贮品质的影响

中国畜牧杂志 2019年第9期55卷 81-85页

作者：欧阳佳良戚如鑫陈逸飞王梦芝扬州大学动物科学与技术学院

试验旨在研究不同青贮添加剂组合对稻秸青贮品质的影响。采用L9(33)的正交试验设计,将不同种类的青贮菌(A)[地衣芽孢杆菌(A1),植物乳杆菌(A2),粪肠球菌(A3)]、纤维分解酶(B)[黑曲霉(B1),绿色木霉(B2),纤维素酶(B3)]和碳源(C)[葡萄糖(C1)... 详细信息

试验旨在研究不同青贮添加剂组合对稻秸青贮品质的影响。采用L9(33)的正交试验设计,将不同种类的青贮菌(A)[地衣芽孢杆菌(A1),植物乳杆菌(A2),粪肠球菌(A3)]、纤维分解酶(B)[黑曲霉(B1),绿色木霉(B2),纤维素酶(B3)]和碳源(C)[葡萄糖(C1),麸皮(C2),淀粉(C3)]组合添加至稻秸中青贮发酵30 d后分析青贮品质。处理1为A1B1C1,处理2为A1B2C3,处理3为A1B3C2,处理4为A2B1C3,处理5为A2B2C2,处理6为A2B3C1,处理7为A3B1C2,处理8为A3B2C1,处理9为A3B3C3。参照《青贮饲料质量评定标准》将感官、实验室评分及养分含量作为分析指标,综合评定稻秸的青贮品质。结果表明:处理5的感官总得分高于其他处理,而处理1、2、3的总得分低于其他处理(PA>C,且分别以B3、A3和C2水平最优。综上,添加剂对稻秸青贮品质的影响为B>A>C,且最适合稻秸青贮的添加剂组合为B3A3C2。

关键词：正交设计青贮稻秸青贮菌纤维分解酶碳源

不同长链脂肪酸组合对体外瘤胃细菌发酵和群体结构的影响

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动物营养学报 2016年第7期28卷 2278-2285页

作者：经语佳高健王梦芝何跃楠史良峰欧阳佳良扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

本试验旨在研究不同长链脂肪酸组合对体外培养瘤胃细菌发酵和群体结构的影响。以3头瘤胃瘘管奶牛提供瘤胃液,对照(A)组底物含5%脂肪酸钙,试验组培养底物中硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的含量分别为1.5%、1.0%、0.5%和1.5%(B组),1.5%、1... 详细信息

本试验旨在研究不同长链脂肪酸组合对体外培养瘤胃细菌发酵和群体结构的影响。以3头瘤胃瘘管奶牛提供瘤胃液,对照(A)组底物含5%脂肪酸钙,试验组培养底物中硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的含量分别为1.5%、1.0%、0.5%和1.5%(B组),1.5%、1.0%、1.5%和1.0%(C组),1.0%、1.5%、1.5%和0.5%(D组)以及1.5%、0.5%、0.5%和1.0%(E组)。在培养后0、3、6、12、18、24 h采集培养液,测定p H、氨氮浓度和瘤胃细菌含量。结果表明:1)培养液p H在组间的差异不显著(P>0.05);C组的培养液氨氮浓度显著高于B、D组(P<0.05)。2)除白色瘤胃球菌,其他菌属含量在组间存在显著差异(P<0.05)。其中琥珀酸拟杆菌、生黄瘤胃球菌、蛋白溶解梭菌和嗜淀粉瘤胃杆菌含量在B组较高;C组溶纤维丁酸弧菌、埃氏巨球菌、降解淀粉瘤胃球菌以及瘤胃总细菌含量显著高于其他各组(P<0.05)。培养液埃氏巨球菌含量最高,为优势菌。综合得出,脂肪酸组合对瘤胃总细菌和大部分细菌种属含量有显著影响,这与发酵模式有关。

关键词：脂肪酸组合瘤胃细菌群体结构

胃肠道褪黑素的合成及其对消化道微生物群体影响的研究进展

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中国畜牧杂志 2021年第1期57卷 41-48页

作者：薛纯欧阳佳良陈培根王梦芝扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225000

胃肠道褪黑素主要是由肠嗜铬细胞分泌,具有一定昼夜节律性。褪黑素通过调控细胞因子或NF-κB等调控肠道微生物及其代谢,进而影响动物肠道微生物群体结构以及某些细菌的昼夜节律。本文主要对近几年胃肠道褪黑素的合成分泌及其生理功能、... 详细信息

胃肠道褪黑素主要是由肠嗜铬细胞分泌,具有一定昼夜节律性。褪黑素通过调控细胞因子或NF-κB等调控肠道微生物及其代谢,进而影响动物肠道微生物群体结构以及某些细菌的昼夜节律。本文主要对近几年胃肠道褪黑素的合成分泌及其生理功能、肠道微生物节律性以及褪黑素对肠道微生物的调控作用等研究进行综述,以期为胃肠道褪黑素与菌群之间调控关系的研究提供一定参考。

关键词：褪黑素胃肠道生物节律微生物