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大蒜硫醚对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的抑制作用

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中国食品学报 2022年第6期22卷 133-141页

作者：吕航可钦檀德宏周倩吴朝霞纪淑娟白冰沈阳农业大学食品学院沈阳110866 赤峰学院附属医院内蒙古赤峰024005

从大蒜中提取大蒜油,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对其进行定性分析;采用酶活实时监测技术,揭示大蒜油、二烯丙基二硫醚(DADS)和二烯丙基三硫醚(DATS)对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase,G6PD)活性的抑制作用... 详细信息

从大蒜中提取大蒜油,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对其进行定性分析;采用酶活实时监测技术,揭示大蒜油、二烯丙基二硫醚(DADS)和二烯丙基三硫醚(DATS)对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase,G6PD)活性的抑制作用。酶动力学分析表明DADS/DATS对G6PD的抑制作用属于竞争性与非竞争性的混合性抑制。分子荧光技术分析表明DADS/DATS可对G6PD蛋白产生内源荧光淬灭,且为静态淬灭,提示DADS/DATS和G6PD蛋白结合位点数近似为1。热力学分析表明DADS-G6PD体系主要通过疏水作用结合,DATS-G6PD体系主要通过氢键和范德华力结合。利用3D和2D分子对接技术展示DADS/DATS可进入G6PD分子内部,且DADS与G6PD结合性能更好。DADS可与G6PD结合位点周围Ala-377、Val-376、Phe-216、Gly-222、Phe-221、Pro-223等疏水性氨基酸残基形成疏水作用,与Arg-219、Asn-218、Lys-275、Arg-215、Trp-225等极性氨基酸残基形成静电力,且以疏水作用为主。DATS可与G6PD结合位点周围Phe-253、Gly-254、Ala-335、Ile-472、Ile-255、Leu-469、Leu-305等疏水性氨基酸残基形成疏水相互作用,与Arg-175、Lys-476、Arg-257、Thr-334、Thr-333、Glu-473等极性氨基酸残基形成静电吸引。DATS中心位置的S可与Phe235形成氢键,键长为3.2?魡。疏水作用、静电力和氢键是DADS/DATS对G6PD的主要作用方式。

关键词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶二烯丙基二硫醚二烯丙基三硫醚分子对接机制

利用电子自旋共振技术研究美拉德反应自由基变化

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农业工程学报 2013年第6期29卷 280-286页

作者：刘玲纪淑娟檀德宏蒋东华沈阳农业大学食品学院沈阳110866 丹麦哥本哈根大学科学学部食品系

为寻求简便而准确地对食品加工和贮藏过程中的美拉德反应进行鉴定的方法,该文研究加热食品中葡萄糖和乳球蛋白建立的美拉德反应体系的自由基变化,主要考察影响美拉德反应的温度和pH值变化导致的自由基改变,从而确定美拉德反应与其自由... 详细信息

为寻求简便而准确地对食品加工和贮藏过程中的美拉德反应进行鉴定的方法,该文研究加热食品中葡萄糖和乳球蛋白建立的美拉德反应体系的自由基变化,主要考察影响美拉德反应的温度和pH值变化导致的自由基改变,从而确定美拉德反应与其自由基变化之间的相互关系。在3种不同温度、有无氧气和3种不同pH值条件下,利用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)光谱检测美拉德反应自由基变化趋势,结果随温度升高,自由基数量增加,反应速度加快;随pH值由酸性向碱性移动,自由基数量增加;自由基数量在无氧条件时多于有氧条件。当自由基积累到一定浓度,由于聚合反应生成高分子聚合物使信号强度下降,最后消失。比较美拉德产物与2种底物产生的自由基发现,无论类型、数量还是生成速率都存在明显差异。研究结果表明,采用自旋捕集剂对不稳定的自由基进行捕集来分析信号能够有效表征加热食品中美拉德反应初中期阶段的自由基变化,从而有效表征和分析美拉德反应过程。与传统研究美拉德反应的分析方法比较,ESR光谱是一种简便灵敏的分析方法,可以作为研究加热食品美拉德反应的重要方法之一。

关键词：光谱测定法加热食品加工 ESR技术美拉德反应自由基

白藜芦醇减轻同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞损伤

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白藜芦醇减轻同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞损伤

中国食品科学技术学会第十八届年会

作者：姜桥檀德宏李斌沈阳农业大学食品学院

人体血浆中同型半胱氨酸浓度高于16μmol/L时称为高同型半胱氨酸血症,其对血管内皮的损伤是导致后续动脉粥样硬化等血管疾病的起始点。本研究的目的是探讨白藜芦醇对高浓度同型半胱氨酸损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的保护作用。MT... 详细信息

人体血浆中同型半胱氨酸浓度高于16μmol/L时称为高同型半胱氨酸血症,其对血管内皮的损伤是导致后续动脉粥样硬化等血管疾病的起始点。本研究的目的是探讨白藜芦醇对高浓度同型半胱氨酸损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的保护作用。MTT法和亚甲基蓝法分别确定了白藜芦醇的安全浓度和同型半胱氨酸的损伤浓度;Hoechst 33342/PI染色测定了同型半胱氨酸诱导的细胞凋亡及白藜芦醇的抑制效果;测定了细胞内ROS、MDA、SOD和CAT的表达,以及添加游离脂肪酸后细胞内TC、TG的含量;油红O染色评估了细胞中脂质沉积情况。结果显示,20μmol/L的白藜芦醇显著抑制了同型半胱氨酸（2 mmol/L）诱导的细胞凋亡,降低了细胞内ROS累积、MDA增加,抑制了SOD和CAT活力下降。此外,白藜芦醇可促进TC、TG在细胞内的代谢,减少脂质沉积。结果表明,白藜芦醇具有减轻同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞氧化应激、脂质代谢紊乱及细胞凋亡的作用,提示白藜芦醇对于动脉粥样硬化等心血管疾病的防治有益。

关键词：白藜芦醇同型半胱氨酸动脉粥样硬化氧化应激凋亡

来源： cnki会议评论

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甘露散治疗更年期综合征的药理学研究

甘露散治疗更年期综合征的药理学研究

作者：檀德宏沈阳药科大学

学位级别：硕士

本文对甘露散(GLS)治疗更年期综合征相关症状进行了试验研究，并对其机理进行了初步探讨。试验结果表明：***对潮热模型动物抑制热量的产生，抑制微循环，降低体温，具有治疗作用。***能够改善东莨菪碱所致小鼠的记忆获得障碍和乙醇所... 详细信息

本文对甘露散(GLS)治疗更年期综合征相关症状进行了试验研究，并对其机理进行了初步探讨。试验结果表明：***对潮热模型动物抑制热量的产生，抑制微循环，降低体温，具有治疗作用。***能够改善东莨菪碱所致小鼠的记忆获得障碍和乙醇所致记忆再现障碍。***能增强戊巴比妥钠催眠作用和拮抗兴奋剂戊四唑诱导的中枢兴奋惊厥作用。***可以改善悬尾小鼠与强迫游泳小鼠的绝望抑郁状态。***可以降低期待性焦虑小鼠体温，表现抗焦虑作用。***对去势雌性大鼠与高脂饮食胖肥大鼠具有很好的减肥、降血脂作用。***对去势雌性大鼠具有一定的抗骨质流失作用。***能够增加阴虚小鼠体重、增加免疫器官重量，表明具有抗阴虚，增强免疫作用。***可降低更年期小鼠血清MDA与升高SOD，提示抗氧化防衰老作用。***对性未成熟小鼠阴道上皮角化细胞与子宫没有作用，GLS没有雌激素活性。综上所述，甘露散对潮热、记忆减退、抑郁、焦虑、睡眠障碍、高血脂、肥胖等更年期综合征相关症状具有改善作用，其作用机理与雌激素作用无关，属对症治疗药物。更年期综合征也是一种衰老有关的疾病，GLS的抗氧化与增强免疫作用对防衰老有一定积极意义。

关键词：甘露散更年期综合征潮红去势大鼠抗氧化雌激素

有机磷农药长期低剂量暴露致认知功能损伤的研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2011年第4期25卷 397-401页

作者：闫长会檀德宏彭双清军事医学科学院疾病预防控制所毒理学评价研究中心北京100071 军事医学科学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价研究中心北京100850

有机磷农药在世界范围内大量使用,其残留农药势必对环境造成持续污染,这种长期、低剂量的有机磷暴露对人类健康的威胁已经引起广泛关注。有机磷致神经毒性主要与胆碱酯酶抑制有关,而流行病学调查显示,环境有机磷暴露人群胆碱酯酶没有明... 详细信息

有机磷农药在世界范围内大量使用,其残留农药势必对环境造成持续污染,这种长期、低剂量的有机磷暴露对人类健康的威胁已经引起广泛关注。有机磷致神经毒性主要与胆碱酯酶抑制有关,而流行病学调查显示,环境有机磷暴露人群胆碱酯酶没有明显抑制,但中枢神经系统出现学习记忆等认知功能损伤,其作用机制尚不明确。学习记忆功能的改变不仅受到突触可塑性和乙酰胆碱等神经递质的影响,也与学习记忆相关信号系统的激活,神经细胞骨架的降解以及神经发生等密切相关,随着非胆碱作用机制在有机磷致神经毒性中发挥越来越重要的作用,本文就有长期低剂量机磷农药暴露致认知功能损伤的表现及其可能作用机制的新进展进行简要概述。

关键词：有机磷农药神经行为学表现环境暴露

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大蒜油的抗凝血作用

食品科学 2021年第17期42卷 127-132页

作者：周丽丽朱艳雯姜晓霞张旋檀德宏刘玲白冰沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866

为研究大蒜油的抗凝血作用,本实验从大蒜中分离提取大蒜油,经气相色谱-质谱联用仪鉴定该大蒜油中主要成分为二烯丙基硫醚(allyl sulfide,DAS)、二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide,DADS)和二烯丙基三硫醚(diallyl trisulfide,DATS)。体... 详细信息

为研究大蒜油的抗凝血作用,本实验从大蒜中分离提取大蒜油,经气相色谱-质谱联用仪鉴定该大蒜油中主要成分为二烯丙基硫醚(allyl sulfide,DAS)、二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide,DADS)和二烯丙基三硫醚(diallyl trisulfide,DATS)。体外实验结果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS均具有部分抑制凝血酶活性功能,且抑制作用由强到弱依次为DATS>大蒜油>DADS>DAS。利用Lineweaver-Burk双倒数作图法进行酶动力学分析,结果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS对凝血酶的抑制作用属于混合性抑制(竞争性和非竞争性抑制)。分子荧光光谱分析结果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS能与凝血酶蛋白中的发色基团相互作用导致荧光猝灭。三维分子对接分析结果显示出DATS与凝血酶结合性能良好;二维分子对接分析结果显示出DATS与凝血酶蛋白活性位点处Asp189、Gly219和Ala190形成氢键,与酶活性位点的Gly216、Ser195、Trp215形成疏水作用力,体现竞争性抑制作用,与非活性位点Gly226、Asp221A、Tyr225、Glu217、Cys191、Val213形成疏水作用,体现非竞争性抑制作用。体内实验结果表明,大蒜油、DAS、DADS、DATS分别通过正向调控大鼠凝血四项指标而直接展现出抗凝血功能,且抗凝血能力依次为DATS>DADS>DAS>大蒜油。大鼠体内抗氧化实验结果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS均只有微弱抗氧化能力,大蒜油、DAS、DADS、DATS具有的抗凝血功能应与其抗氧化能力不相关。

关键词：大蒜油硫醚凝血酶分子对接抗凝血抗氧化

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灭多威对金鱼的毒性效应

沈阳农业大学学报 2013年第6期44卷 827-831页

作者：孙晔檀德宏纪淑娟沈阳农业大学食品学院沈阳110161

为了研究灭多威对金鱼的毒性作用,采用毒性试验的方法,通过48h得出氨基甲酸酯类农药灭多威对金鱼的半致死浓度(LC50)为1.52mg·L-1,并以此为一个毒性单位(TU)测定12h灭多威2TU、5TU以及去离子水对照组对金鱼乙酰胆碱酯酶(acetylcholines... 详细信息

为了研究灭多威对金鱼的毒性作用,采用毒性试验的方法,通过48h得出氨基甲酸酯类农药灭多威对金鱼的半致死浓度(LC50)为1.52mg·L-1,并以此为一个毒性单位(TU)测定12h灭多威2TU、5TU以及去离子水对照组对金鱼乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性的影响,结合30h鱼背肌染毒法测定5组不同剂量组0.015,0.15,1.5,15,150μg·L-1灭多威对金鱼的染色体损伤以及DNA损伤效应。结果表明:随着农药剂量和时间的不同,AChE呈现一定的浓度与时间效应,对金鱼脑的AChE活性有明显的抑制和诱导作用。在微核试验下,不同剂量的灭多威与去离子水对照组对比未引起较大的微核率。在单细胞脉冲电泳试验(SCGE)下,15,150μg·L-1的灭多威对金鱼血红细胞DNA有较明显的损伤,说明剂量变大对细胞损伤也变大。试验结果还表明:当灭多威剂量较高时,对金鱼产生一定的损伤作用,而且存在一定的导致突变的可能性,因此,当水中灭多威残留量高时可能对水生生物有一定长期的影响。

关键词：金鱼灭多威乙酰胆碱酯酶微核试验单细胞凝胶电泳

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有机磷农药的神经发育毒性研究进展

中国工业医学杂志 2010年第3期23卷 199-202页

作者：韩俊艳檀德宏王军纪明山沈阳大学生物与环境工程学院辽宁沈阳110043 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院药理系辽宁沈阳110016 沈阳农业大学植物保护学院辽宁沈阳110161

本文综述了有机磷农药神经发育毒性的研究进展,包括有机磷农药神经发育毒性的证据、毒代动力学因素以及毒理学机制等。

关键词：有机磷农药神经发育毒性研究进展

罗丹明B在金鱼(Carassius auratus)组织中的蓄积及消除规律

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食品科学 2012年第19期33卷 273-277页

作者：纪淑娟王莎李玲楠檀德宏沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866

采用水体暴露方法,研究金鱼(Carassius auratus)肝脏、肾脏、腮、肌肉和椎骨对不同质量浓度(5mg/L和15mg/L)罗丹明B的蓄积规律,采用注射染毒然后在清水中饲养的方法研究鱼体组织罗丹明B的消除规律。结果表明:罗丹明B质量浓度为5mg/L和15... 详细信息

采用水体暴露方法,研究金鱼(Carassius auratus)肝脏、肾脏、腮、肌肉和椎骨对不同质量浓度(5mg/L和15mg/L)罗丹明B的蓄积规律,采用注射染毒然后在清水中饲养的方法研究鱼体组织罗丹明B的消除规律。结果表明:罗丹明B质量浓度为5mg/L和15mg/L时,分别在第15天和12天达到吸收平衡。蓄积达到平衡时罗丹明B在高、低染毒质量浓度中的最大和最小蓄积系数分别出现在肝脏和肌肉,最大蓄积系数分别为16.14和7.37,最小蓄积系数分别为0.97和0.77。注射染毒后罗丹明B消除研究结果表明:随时间延长罗丹明组织浓度逐步下降,第9天接近平衡。不同组织中消除速度表现:肾脏>肌肉>椎骨>腮>肝脏。生物半衰期t1/2在组织中的差异表现为:肝脏>腮>椎骨>肾脏>肌肉。

关键词：罗丹明B 金鱼蓄积消除生物蓄积系数