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洞头岛养殖区浮游植物群落特征研究

水生生物学报 2013年第3期37卷 588-594页

作者：楼哲丰孙敏关万春张鹏温州医学院生命科学学院海洋科学系温州325035 浙江省海洋水产养殖研究所温州325005

洞头位于温州瓯江口外约61km的洋面上，是全国12个海岛县之一，南103个岛屿和259座礁石组成，有“百岛县”之称。洞头属亚热带海洋性季风气候，常年平均气温17．4℃。洞头列岛海域是浙江省重要的海洋水产养殖基地，受江浙沿岸流和瓯江... 详细信息

洞头位于温州瓯江口外约61km的洋面上，是全国12个海岛县之一，南103个岛屿和259座礁石组成，有“百岛县”之称。洞头属亚热带海洋性季风气候，常年平均气温17．4℃。洞头列岛海域是浙江省重要的海洋水产养殖基地，受江浙沿岸流和瓯江等径流的影响，营养物质输入丰富。近几年随着洞头列岛海域周边地区经济的快速发展，T业、农业（含水产养殖）和生活废水排放量不断增加，对洞头列岛海域的生态环境造成了一定的影响。

关键词：洞头岛浮游植物种类多样性环境因子

线粒体呼吸功能与精子活力、核DNA损伤的相关性分析

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中国细胞生物学学报 2012年第1期34卷 34-40页

作者：郑九嘉楼哲丰郑蔚虹金建远倪吴花李平金龙金温州医学院检验医学院、生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 温州医学院附属第一医院生殖医学中心温州325000 温州大学生命与环境科学学院温州325027

为探讨线粒体呼吸功能与精子活力、核DNA损伤程度之间的相关性,按WHO标准收集34例不同活力的精液标本,采用蔗糖差速离心法或密度梯度离心法提取精子线粒体,通过铂氧电极–溶氧仪测定线粒体呼吸耗氧率并计算状态III呼吸、状态IV呼吸、呼... 详细信息

为探讨线粒体呼吸功能与精子活力、核DNA损伤程度之间的相关性,按WHO标准收集34例不同活力的精液标本,采用蔗糖差速离心法或密度梯度离心法提取精子线粒体,通过铂氧电极–溶氧仪测定线粒体呼吸耗氧率并计算状态III呼吸、状态IV呼吸、呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)及氧化磷酸化效率(OPR);应用精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion,SCD)实验检测精子DNA损伤情况。结果表明:不同活力精子线粒体状态III呼吸耗氧量之间具有显著差异(P<0.01);弱精子症组RCR和OPR与正常对照组比较,分别降低了17.03%(P<0.05)和40.74%(P<0.01);精子DNA损伤程度与精子活力、状态III呼吸及OPR均呈极显著负相关(r值分别是-0.812、-0.788和-0.696)。以上结果提示:精子线粒体呼吸耗氧和氧化磷酸化功能与精子活力之间存在着密切的联系;精子DNA(包括mtDNA)损伤可能影响精子的正常功能。

关键词：精子活力线粒体氧化磷酸化 DNA损伤

POLG1外显子1、3、4、7突变与弱精子症的相关性及其对mtDNA和4977 bp缺失的影响

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中国细胞生物学学报 2014年第4期36卷 495-501页

作者：李平洪丹缪霜郑九嘉楼哲丰黄学锋金龙金温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 温州医科大学附属第一医院生殖医学中心温州325000

为了探索POLG1外显子1、3、4、7突变与弱精子症的相关性及对mtDNA序列突变和4 977 bp缺失的影响,按WHO标准收集了120例弱精子症和101例精子活力正常的精液标本,经PCR测序分析POLG1外显子1、3、4、7突变,继而测序检测9例外显子4 c.948 G>... 详细信息

为了探索POLG1外显子1、3、4、7突变与弱精子症的相关性及对mtDNA序列突变和4 977 bp缺失的影响,按WHO标准收集了120例弱精子症和101例精子活力正常的精液标本,经PCR测序分析POLG1外显子1、3、4、7突变,继而测序检测9例外显子4 c.948 G>A突变的弱精子症标本、9例无c.948 G>A突变的弱精子症标本和9例正常对照标本的mtDNA全序列,利用巢式PCR技术分析9例c.948 G>A突变标本、9例无c.948 G>A突变的弱精子症标本和9例对照标本的4 977 bp缺失。结果显示:在120例弱精子症中发现POLG1外显子4 c.948 G>A突变9例(7.5%),显著高于对照组(0%,PA突变组mtDNA全序中突变率与对照组比无统计学差异(P>0.05)。作者关注的两组中,突变数有差异的位点累积突变频次突变组显著高于对照组(PA突变的弱精子症标本的累积突变频次比较无统计学意义;突变组mtDNA 4 977 bp缺失率(7/9,77.8%)显著高于对照组(2/9,22.2%,PA突变的弱精子症组(2/9,22.2%,PA突变有相关性,弱精子症线粒体DNA某些位点的累积突变率增高,但可能不是POLG1 c.948 G>A突变引起;c.948 G>A突变可能会增加mtDNA 4 977 bp缺失,从而影响精子线粒体功能,导致精子活动力下降。

关键词：弱精子症 POLG1 mtDNA 4 977 bp缺失

环状RNA PVT1促进结直肠癌细胞的增殖并抑制凋亡

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中国生物化学与分子生物学报 2021年第9期37卷 1241-1249页

作者：李韵金子慧张瑞瑞楼哲丰金红蕾温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江温州325035

环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型的长非编码RNA,已有研究表明circRNAs可调控肿瘤的发生发展。本研究首先通过高通量测序技术检测5对结直肠癌组织及其配对的癌旁正常组织中的circRNAs差异表达谱,鉴定出477种差异表达的circRN... 详细信息

环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型的长非编码RNA,已有研究表明circRNAs可调控肿瘤的发生发展。本研究首先通过高通量测序技术检测5对结直肠癌组织及其配对的癌旁正常组织中的circRNAs差异表达谱,鉴定出477种差异表达的circRNAs,其中252种表达上调,225种表达下调,选取表达上调最为显著的circRNA——circPVT1(circRNA plasmacytoma variant translocation 1,circPVT1),利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测150对结直肠癌组织及癌旁正常组织样本中circPVT1的表达水平,获得与高通量测序一致性结果,进一步证实circPVT1在结直肠癌中高表达。同时,在多种结直肠癌细胞系中证实circPVT1的表达较正常结直肠黏膜细胞高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在功能上,通过在结直肠癌细胞中沉默或过表达circPVT1,分析其对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,借以阐明circPVT1在结直肠癌中的生物学功能。结果表明,circPVT1在体外可显著抑制结直肠癌细胞的凋亡、加快细胞周期进程以促进结直肠癌细胞增殖。综上所述,circPVT1在结直肠癌的生长过程中发挥促癌作用,有望作为治疗结直肠癌的潜在靶点。

关键词：结直肠癌 circPVT1 增殖凋亡

甲醛对小鼠睾丸生殖细胞的DNA损伤及bcl-2、bax蛋白表达的影响

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中国工业医学杂志 2007年第2期20卷 108-109页

作者：董杰影楼哲丰赵惠玲温州医学院生物学实验教学中心温州医学院实验动物中心浙江温州325035

为探讨甲醛对小鼠睾丸生殖细胞的DNA损伤及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白在染毒小鼠睾丸细胞中的表达,分别用0.2、2、20mg/kg的甲醛小鼠腹腔注射,利用单细胞凝胶电泳检测睾丸生殖细胞的DNA损伤,同时对睾丸生殖细胞采用免疫组化法进行bax及... 详细信息

为探讨甲醛对小鼠睾丸生殖细胞的DNA损伤及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白在染毒小鼠睾丸细胞中的表达,分别用0.2、2、20mg/kg的甲醛小鼠腹腔注射,利用单细胞凝胶电泳检测睾丸生殖细胞的DNA损伤,同时对睾丸生殖细胞采用免疫组化法进行bax及bcl-2蛋白染色,并结合图像分析推测bax及bcl-2的蛋白表达变化。结果显示在甲醛0.2mg/kg的浓度时小鼠生殖细胞有最明显的DNA损伤,3种浓度甲醛处理组bax蛋白表达均明显增多,而bcl-2阳性蛋白表达明显低于阴性对照组,差异有统计学意义。说明甲醛可造成机体内生殖细胞的DNA损伤,还可通过抑制bcl-2、增加bax的表达而诱导细胞凋亡,从而影响生殖细胞。

关键词：甲醛凋亡相关基因 bel-2 bax 生殖细胞

羽扇豆醇通过抑制RhoA-ROCK1信号通路抑制结肠癌细胞增殖

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中国细胞生物学学报 2020年第2期42卷 186-194页

作者：蒋亦雯洪丹楼哲丰金龙金温州医科大学检验医学院、生命科学学院温州325000

该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细... 详细信息

该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot检测相应mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测β-Catenin蛋白细胞内分布情况。通过构建shRNA敲低两种结肠癌细胞中RhoA,进一步研究Lupeol影响细胞增殖的分子机制。结果显示,Lupeol处理后,HCT116和SW620细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力受到抑制,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞内RhoA、ROCK1、β-Catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。敲低RhoA后抑制了细胞增殖,同时使得RhoA-ROCK1-β-Catenin信号通路蛋白受到抑制,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。综上所述,Lupeol可通过抑制RhoA-ROCK1信号通路,抑制β-Catenin蛋白表达,进而抑制HCT116和SW620细胞增殖,Lupeol有望成为临床结肠癌治疗的新药物。

关键词：羽扇豆醇 RhoA-ROCK1信号通路结肠癌增殖

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分子生物学虚拟仿真实验教学模式的探索

实验技术与管理 2019年第11期36卷 99-100,104页

作者：李佩珍应俊金晶何超翔楼哲丰温州医科大学检验医学与生命科学学院

为提高分子生物学课程的教学效果,采用虚拟仿真实验教学模式,构建了"移液枪的使用""基于聚合酶链反应技术的虚拟综合实验"等基础型、综合型虚拟仿真实验项目。这些实验项目与课堂教学有机结合,可增强教学效果,为培养创新型人才、推动高... 详细信息

为提高分子生物学课程的教学效果,采用虚拟仿真实验教学模式,构建了"移液枪的使用""基于聚合酶链反应技术的虚拟综合实验"等基础型、综合型虚拟仿真实验项目。这些实验项目与课堂教学有机结合,可增强教学效果,为培养创新型人才、推动高校实验教学改革发挥作用。

关键词：分子生物学虚拟仿真实验实验教学

镉对果蝇肠道上皮细胞损伤和调控中肠干细胞增殖、分化机制的研究

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中国细胞生物学学报 2013年第5期35卷 602-608页

作者：楼哲丰曹琼洁冯钰淇蔡慧敏段银波张岩林鑫华金龙金温州医学院检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100101

重金属元素镉具有较强的生物毒性,是威胁人类健康的重要环境污染物质。为探索镉的过量摄入对生物消化系统的潜在影响,以果蝇中肠系统为实验模型,以不同浓度的氯化镉作为处理因素,探讨其对肠道细胞的损伤作用和调控中肠干细胞增殖、分化... 详细信息

重金属元素镉具有较强的生物毒性,是威胁人类健康的重要环境污染物质。为探索镉的过量摄入对生物消化系统的潜在影响,以果蝇中肠系统为实验模型,以不同浓度的氯化镉作为处理因素,探讨其对肠道细胞的损伤作用和调控中肠干细胞增殖、分化的相应机制。通过透射电镜观察,发现镉对果蝇中肠上皮细胞超微结构具有损伤作用,并且损伤程度具有显著的浓度依赖性;免疫荧光结果证实,镉的过量摄入对中肠干细胞(intestinal stem cell,ISC)、成肠细胞(enteroblast,EB)和肠上皮细胞(enterocyte,EC)的数量和比例能够产生影响,且显著促进中肠干细胞的增殖;Real-time RT-PCR检测结果表明,肠道组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor recep-tor,EGFR)和JAK/STAT信号通路配体基因的转录水平显著提高,JAK/STAT信号通路同时被大幅度活化。结果显示:高浓度镉的摄入对果蝇中肠上皮细胞核膜、线粒体和微绒毛等超微结构造成损伤,该类损伤能够诱使果蝇肠道组织上调表达相关配体蛋白,从而激活干细胞的EGFR和JAK/STAT信号通路,从而促进ISC的增殖与分化能力,继而实现对肠道损伤组织进行及时的修复。然而,中肠干细胞增殖信号通路的持续激活以及干细胞的过度增殖同样具有诱发肠道肿瘤发生的潜在可能。

关键词：镉果蝇超微结构损伤中肠干细胞

弱精子症患者精子线粒体tRNA基因突变的研究

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中华泌尿外科杂志 2013年第6期34卷 417-421页

作者：楼哲丰杨宗李平郑九嘉张李雅杨旭黄学锋金龙金温州医学院检验医学院教育部检验医学重点实验室浙江省医学遗传学重点实验室 325035 武警新疆总队驻和田第五支队卫生队温州医学院附属第一医院生殖医学中心

目的探讨tRNA基因在弱精子症患者中的突变频谱及其与弱精子症之间的相关性。方法根据1999年WHO诊断标准，收集132例弱精子症患者和98例正常人的精液标本。采用聚合酶链反应扩增，序列分析，筛查弱精子症组tRNA^is、tRNA^Ser（AGY）、tRN... 详细信息

目的探讨tRNA基因在弱精子症患者中的突变频谱及其与弱精子症之间的相关性。方法根据1999年WHO诊断标准，收集132例弱精子症患者和98例正常人的精液标本。采用聚合酶链反应扩增，序列分析，筛查弱精子症组tRNA^is、tRNA^Ser（AGY）、tRNA^Leu（CUN）基因突变，与正常对照组序列变异比较，分析核苷酸变异位点的进化保守性。结果132例弱精子症患者中19例标本检出9个突变位点，其中tRNA^His。基因突变位点2个，tRNA^Ser（AGY）基因3个，tRNA^Leu（CUN）基因4个。tRNA^Ser（AGY）基因突变在弱精子症组的发生频率（7．58％）高于正常对照组（1．02％），差异有统计学意义（P〈0．05），其中tRNA^Ser（AGY）基因m．12234A〉G突变6例，正常对照组中未检出，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论tRNA^Ser（AGY）基因m．12234A〉G突变可能是弱精子症发生的相关因素。

关键词：弱精子症线粒体精子基因突变