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作者：梁雪丹广州中医药大学

学位级别：硕士

脾气虚动物模型的构建及优化是脾气虚证研究的重要内容,而模型的评价标准是脾气虚动物模型构建成功与否的关键环节。目前对脾气虚动物模型的外观体征评价大多以定性描述为主,缺少准确、客观定量的判断标准,易致评价模型动物外观体征时... 详细信息

脾气虚动物模型的构建及优化是脾气虚证研究的重要内容,而模型的评价标准是脾气虚动物模型构建成功与否的关键环节。目前对脾气虚动物模型的外观体征评价大多以定性描述为主,缺少准确、客观定量的判断标准,易致评价模型动物外观体征时出现偏差,因而需要构建符合科学研究要求的脾气虚动物模型评价方法。唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,sAA)酸负荷前后活性比值、尿D-木糖排泄率是被行业认可的脾虚证疗效评价客观参考指标。研究表明,sAA属于N-糖基化蛋白,其活性与N-糖基化修饰密切相关;糖基转移酶(GnT-Ⅰ和GnT-Ⅱ)和α-甘露糖苷酶Ⅱ(MG-Ⅱ)是N-糖基化修饰的关键酶,直接影响N-糖基化程度。尿D-木糖排泄率、sAA活性比值及其影响因素(如N-糖基化修饰)等指标可作为评价脾气虚大鼠模型的重要客观指标。“以方测证”是评价证候模型的常用方法,益气健脾代表方四君子汤常用于干预脾气虚模型,以此来评价脾气虚动物模型的可靠性。研究目的基于脾气虚证外观体征指标优化脾气虚大鼠模型评价标准;筛选利血平粉末致脾气虚大鼠的最佳剂量,建立优化后的脾气虚证动物模型;在此基础上,从脾气虚证客观诊断指标尿D-木糖排泄率、sAA活性改变及其影响因素来评价利血平致脾气虚大鼠模型;观察四君子汤对利血平致脾气虚大鼠模型sAA活性及其影响机制的影响;为探讨“脾气虚证微观指标”及“脾主涎”的内涵提供参考。研究方法1、优化脾气虚大鼠外观体征评价标准:选取活动度、眼裂宽度、毛色、大便构成脾气虚大鼠外观体征评分R,作为外观体征半定量评价标准;大鼠颈部皮下注射利血平不同剂量(0.8、0.4、0.2mg·kg-1)造模,初步确立外观体征评价标准的可行性;以0.8mg kg-1利血平复制模型,并增加0.6 mg kg-1利血平剂量组造模实验,以此重复验证外观体征评价标准的客观性和可靠性,以建立利血平致大鼠脾气虚模型实验方案,并为后续选取利血平合适剂量用于脾气虚大鼠造模。2、对溴苯胺法测定尿D-木糖排泄率。3、Bemfeld法测定sAA活性。4、凝集素亲和沉淀法检测sAAN-糖链构成比。5、Western blot 法检测 sAA、GnT-Ⅰ、GnT-Ⅱ 和 MG-Ⅱ 蛋白表达。6、腮腺的病理组织学观察:HE染色光镜下观察腮腺组织形态改变;透射电镜下观察腮腺组织超微结构(细胞器改变及酸刺激前后酶原分泌颗粒变化等)。7、四君子汤水提物的提取和分析:称取四君子汤药材(人参、茯苓、白术、甘草各等份),浸泡,水煎煮,浓缩冷冻干燥得四君子汤冻干粉,高效液相法检测四君子汤水提物图谱。8、四君子汤给药方法及观察:大鼠先随机分为正常对照动物和造模动物;造模动物以利血平0.6 mg·kg-1剂量颈部皮下注射造模11天,利血平注射结束后将造模大鼠随机分为四君子汤高、低剂量组(10g·kg-1、5g·kg-1),盐酸氟西汀(简称百优解,3.5 mg·kg-1)组,人参皂苷Rb1(40mg·kg-1)组,模型恢复组;四君子汤两组(10g·kg-1、5g·kg-1)、盐酸氟西汀(百优解)组大鼠灌胃给药,人参皂苷Rb1组大鼠腹腔注射给药,模型恢复组灌胃等量生理盐水,共(造模11d+给药22d)33天;实验结束后,收集大鼠唾液、尿液,选取大鼠腮腺组织用于后续实验。研究结果一、利血平致脾气虚大鼠模型的优化1、外观体征评分标准的优化:按大鼠外观体征评分标准,实验期间每天监测造模大鼠的大体状态变化过程,以体征评分R>8或R<1为标准,判断大鼠脾气虚模型复制成功或恢复至正常的节点;以外观体征评分结合体重、摄食量、饮水量、肛温和腮腺组织形态检查对模型进行评价并优化了模型评价标准;该结果以利血平0.8mg·kg-1造模9天中得到重复,也在利血平0.6 mg·kg-1造模11天中得到验证。2、脾气虚大鼠尿D-木糖排泄率:造模大鼠尿D-木糖排泄率较正常组大鼠下降(P<0.05),说明脾气虚大鼠小肠吸收功能下降。3、脾气虚大鼠sAA活性:造模后大鼠酸刺激前后sAA活性较正常组大鼠下降(P<0.01),表明脾气虚大鼠唾液分泌出现障碍。4、脾气虚大鼠sAA N-糖基化影响因素的观察(1)sAA与刀豆凝集素(ConA)和麦胚凝集素(WGA)结合率:造模大鼠与ConA结合率高于正常组大鼠(P<0.01);表明脾气虚大鼠sAA N-糖链结构发生改变。(2)脾气虚大鼠sAA N-糖基化蛋白、糖基转移酶(GnT-Ⅰ、GnT-Ⅱ)、α-甘露糖苷酶Ⅱ(MG-Ⅱ)表达:初步实验证明造模大鼠sAA N-糖基化蛋白表达缺失,GnT-Ⅰ、GnT-Ⅱ表达有下降趋势,MG-Ⅱ无明显变化;提示sAA N-糖基化表达缺失及糖链结构改变可能与GnT-Ⅰ、GnT-Ⅱ表达改变有关。5、脾气虚大鼠腮腺病理组织学观察:腮腺组织HE染色光镜下观察,透射电镜超微结构

关键词：脾气虚大鼠外观体征评价唾液淀粉酶 sAAN-糖基化四君子汤

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丹参酮ⅡA脉冲微丸的制备与体外质量评价

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北京大学学报（医学版） 2010年第5期42卷 559-564页

作者：梁雪丹郑颖范田园北京大学药学院药剂学系北京100191 澳门大学中华医药研究院

目的:制备小分子活性成分丹参酮ⅡA的脉冲微丸并进行体外质量评价。方法:采用流化床包衣,分别选用羟丙甲纤维素(HPMC)、低取代羟丙纤维素/HPMC(L-HPC/HPMC)和HPMC/乙基纤维素水分散体(HPMC/Surelease)作为溶胀层材料,Surelease作为控释... 详细信息

目的:制备小分子活性成分丹参酮ⅡA的脉冲微丸并进行体外质量评价。方法:采用流化床包衣,分别选用羟丙甲纤维素(HPMC)、低取代羟丙纤维素/HPMC(L-HPC/HPMC)和HPMC/乙基纤维素水分散体(HPMC/Surelease)作为溶胀层材料,Surelease作为控释层材料,以双层膜崩解原理制备丹参酮ⅡA的脉冲微丸。通过丹参酮ⅡA的体外释放结果来评价溶胀层材料种类、增重以及控释层增重对药物释放的影响;通过对包衣微丸横切面进行扫描电镜观察来评价包衣层的质量,并对丹参酮ⅡA的体外释放曲线进行数学模型拟合来预测释药机制。结果:使用HPMC或L-HPC/HPMC作为溶胀材料均不能实现丹参酮ⅡA的延迟释放,而以HPMC/Surelease为溶胀材料的微丸则成功地实现了3～5h的延迟释药,且药物释放时滞随溶胀控释层中Surelease比例的增加而增加。另外,控释层增重的提高也可有效地延长药物的释放时滞,其最佳增重范围为30%～40%。数学模型拟合结果显示,丹参酮ⅡA脉冲微丸的药物释放符合一级动力学方程。结论:联合HPMC和Surelease为溶胀材料,以Surelease为控释材料,可以成功制备具有3～5h药物释放时滞的丹参酮ⅡA脉冲微丸,为小分子药物的脉冲释药的制备提供参考。

关键词：丹参酮脉冲微丸药物释放系统

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苦参碱时控型结肠定位给药微丸的制备和体外释药研究

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中国药学杂志 2009年第22期44卷 1713-1718页

作者：徐树明杨明梁雪丹王一涛郑颖澳门大学中华医药研究院成都中医药大学药学院成都611730

目的用流化床包衣技术制备苦参碱时控型结肠定位给药微丸。方法使用流化床包衣设备,首先在空白丸芯上采用溶液上药法制备苦参碱载药微丸,然后以羟丙甲纤维素(HPMC)和乙基纤维素水分散体(Surelease)的混合物包衣作为溶胀控释层,以Surele... 详细信息

目的用流化床包衣技术制备苦参碱时控型结肠定位给药微丸。方法使用流化床包衣设备,首先在空白丸芯上采用溶液上药法制备苦参碱载药微丸,然后以羟丙甲纤维素(HPMC)和乙基纤维素水分散体(Surelease)的混合物包衣作为溶胀控释层,以Surelease包衣作为时控包衣层,制备时控型结肠定位给药微丸。分别用扫描电镜、溶出度测定和光学显微镜考察微丸的包衣质量、体外释药率和释放过程中微丸的变化。结果药物通过时控层破裂开始大量释放,调节该层增重和溶胀控释层的增重及此层中HPMC与Surelease比例,均可以调节释药时滞,控制药物的释放速度。优化后的包衣微丸在模拟胃肠道pH情况下延迟5h释药,之后药物近恒速释放,16h内药物释放完全。结论可通过调节时控层的增重,溶胀控释层的增重及此层中HPMC与Surelease比例来制备不同时滞的苦参碱时控型结肠定位给药微丸,为小分子水溶性药物制成时控型延迟释药微丸提供参考。

关键词：苦参碱时控结肠定位给药微丸乙基纤维素水分散体

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以丹参素为指标成分的丹参制剂及其药动学研究概述

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中国新药杂志 2008年第21期17卷 1838-1842页

作者：梁雪丹范田园郑颖澳门大学中华医药研究院澳门999078 北京大学药学院药剂学系北京100083

丹参素是中药丹参水提物中的主要活性成分之一,常被作为丹参制剂及其药动学研究的重要指标成分之一。文中对以丹参素为指标成分的丹参制剂及其药动学进行综述。

关键词：丹参素理化性质剂型药动学

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人力资源管理对品牌建设的驱动作用探究

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商业2.0 2023年第30期 83-85页

作者：梁雪丹广州市意诚房地产物业顾问有限公司

品牌的建设以及维护是一个企业终身持续的过程，需要所有参与者一点一点地积累。这要求人力资源管理人员从专业层面进行分析，通过人力资源战略和品牌战略的一致、人力资源管理体系对人力资源战略的支撑、人力资源管理活动对人力资源管... 详细信息

品牌的建设以及维护是一个企业终身持续的过程，需要所有参与者一点一点地积累。这要求人力资源管理人员从专业层面进行分析，通过人力资源战略和品牌战略的一致、人力资源管理体系对人力资源战略的支撑、人力资源管理活动对人力资源管理体系的落实，有效发挥人力资源管理的作用，保证品牌战略的正常实施。

关键词：人力资源管理品牌建设驱动作用

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试析人力资源管理助推企业品牌建设

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中国经贸 2022年第19期 190-192页

作者：梁雪丹广州市意诚房地产物业顾问有限公司

伴随经济一体化发展,品牌战略的实施逐渐成为企业经营发展的关键内容。在品牌建设过程中,企业极易忽视人力资源管理的作用。文章围绕人力资源管理助推企业品牌建设进行了分析,首先分析了人力资源管理部门的作用,探讨了品牌建设过程中人... 详细信息

伴随经济一体化发展,品牌战略的实施逐渐成为企业经营发展的关键内容。在品牌建设过程中,企业极易忽视人力资源管理的作用。文章围绕人力资源管理助推企业品牌建设进行了分析,首先分析了人力资源管理部门的作用,探讨了品牌建设过程中人力资源管理容易产生的误区,最后从对内及对外层面对企业品牌建设对策进行了讨论,以期能为相关人士提供借鉴。

关键词：人力资源管理品牌建设员工培训企业文化

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华东医药免疫抑制剂市场龙头

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证券导刊 2009年第32期 82-83页

作者：孙伟娜梁雪丹宏源证券

公司是浙江省龙头,又有公司"四年规划"的刺激,医疗器械代理走上正轨,符合GSP标准的物流基地也将于2010年建成,新医改受益明确。预计未来三年增长率为18%—20%。

关键词：免疫抑制剂物流基地医疗器械浙江省中药饮片年增长率华东医药工业器官移植糖尿病

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黄芪总皂苷对IEC-6细胞增殖及相关蛋白表达的影响

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中药新药与临床药理 2019年第1期30卷 60-65页

作者：朱易平李茹柳时玉霞王东旭梁雪丹胡玲陈蔚文广州中医药大学脾胃研究所广东广州510405

目的观察黄芪总皂苷对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移和增殖的影响,并从多胺及其调控的细胞增殖相关蛋白(转录因子c-Myc、Rho-GTP酶RhoA和细胞周期依赖激酶Cdk2)表达角度研究其作用机制。方法从黄芪中提取黄芪总皂苷(皂苷含量88.8%)作为受试药... 详细信息

目的观察黄芪总皂苷对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移和增殖的影响,并从多胺及其调控的细胞增殖相关蛋白(转录因子c-Myc、Rho-GTP酶RhoA和细胞周期依赖激酶Cdk2)表达角度研究其作用机制。方法从黄芪中提取黄芪总皂苷(皂苷含量88.8%)作为受试药,高效液相色谱仪蒸发光检测(HPLC-ELSD)获得受试药色谱图;移液器吸头划痕法检测细胞迁移率;MTT法检测细胞增殖;Western Blot法检测相关蛋白表达。结果黄芪总皂苷(25、50、100 mg·L^(-1))对细胞迁移无明显影响(与空白组比较,P>0.05)。黄芪总皂苷(50 mg·L^(-1)或100 mg·L^(-1))有促进细胞增殖作用(与空白组比较,P <0.05),且能逆转二氟甲基鸟氨酸(DFMO,多胺合成抑制剂)所致的细胞增殖抑制;可提高c-Myc、RhoA和Cdk2蛋白表达,逆转DFMO所致的c-Myc、RhoA和Cdk2蛋白表达抑制。结论黄芪总皂苷可促进IEC-6细胞增殖,其作用机制与影响多胺调控的增殖相关蛋白表达有关。

关键词：黄芪总皂苷小肠上皮细胞细胞增殖 Cdk2 RhoA c-Myc

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基于体征半定量指标评价的利血平致脾气虚大鼠模型的研究

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中药新药与临床药理 2019年第1期30卷 26-32页

作者：梁雪丹林传权曾信平朱惠彬朱易平谢海媚胡玲李茹柳广州中医药大学脾胃研究所广东广州510405

目的基于体征半定量评价标准,构建适用于利血平致脾气虚大鼠模型生理病理及药理研究的评价方法。方法以外观体征(眼神、毛色、大便和形体神)作为脾气虚造模大鼠半定量评价指标并制订其评分标准形成外观体征评分(R);以利血平(0.6、0.8 mg... 详细信息

目的基于体征半定量评价标准,构建适用于利血平致脾气虚大鼠模型生理病理及药理研究的评价方法。方法以外观体征(眼神、毛色、大便和形体神)作为脾气虚造模大鼠半定量评价指标并制订其评分标准形成外观体征评分(R);以利血平(0.6、0.8 mg·kg^(-1))皮下注射致脾气虚大鼠模型评价该方法的可行性:54只SD雄性大鼠随机分为正常对照组12只,利血平0.8 mg·kg^(-1)组22只,利血平0.6 mg·kg^(-1)组20只;测定大鼠每日外观体征评分(R)、体质量、摄食量及饮水量;测定大鼠造模前及造模5 d、9 d、25 d、32 d、39 d肛温;分别于利血平注射结束和自愈观察结束后,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠腮腺组织学形态改变。通过观察利血平2个剂量组R≥8和R≤1时大鼠脾气虚模型相关指标(体质量、摄食量、饮水量、肛温、腮腺病理)的变化以反映脾气虚大鼠造模成功及自愈情况。结果利血平0.8 mg·kg^(-1)组注射9 d或利血平0.6 mg·kg^(-1)组注射11 d,造模大鼠可达到R≥8分,与脾气虚模型评判密切相关的宏观指标(体质量、摄食量、饮水量、肛温)明显下降,腮腺组织切片也可见明显病理改变;造模结束到大鼠自愈恢复使评分降至R≤1分时,利血平0.8 mg·kg^(-1)组需时33 d[总周期(9+33)d]、利血平0.6 mg·kg^(-1)组需时31 d[总周期(11+31)d],此时宏观指标及腮腺组织形态学改变接近正常对照组;Pearson相关分析显示,大鼠外观体征评分与利血平造模组体质量(0.8 mg·kg^(-1)组,r=-0.793,P <0.01;0.6 mg·kg^(-1)组,r=-0.823,P <0.01)、肛温(0.8 mg·kg^(-1)组,r=-0.324,P <0.05;0.6 mg·kg^(-1)组,r=-0.749,P <0.01)呈负相关。结论外观体征半定量评分标准能较准确、客观、半定量地评价利血平致脾气虚大鼠的造模结果及自身恢复情况,可根据需要选择合适的利血平造模剂量和时间,本实验结果为脾气虚大鼠模型的病理生理及药理研究提供了适宜的动物模型评价方法。

关键词：脾气虚证利血平动物模型体征半定量评价

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新时代高职院校大学生就业服务指导工作现状及创新路径研究

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中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2023年第6期 190-193页

作者：吴志鹏李红梅张敏冯卫良梁雪丹江西中医药高等专科学校江西抚州344000

高职院校的大学生就业服务部门需要对就业指导工作进行统筹规划,才能促进学生全面了解就业与专业课程之间的关联性。近几年我国的就业市场比较严峻,对高职院校大学生的专业技能要求越来越高,因此高职院校就业服务部门需要从职业素养和... 详细信息

高职院校的大学生就业服务部门需要对就业指导工作进行统筹规划,才能促进学生全面了解就业与专业课程之间的关联性。近几年我国的就业市场比较严峻,对高职院校大学生的专业技能要求越来越高,因此高职院校就业服务部门需要从职业素养和专业技能等维度进行课程体系建设。本文将着重研究新时代高职院校大学生就业服务指导工作现状及创新路径。

关键词：高职院校大学生就业服务指导创新

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