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健康 2023年第4期 32-33页

作者：梁明丽首都医科大学附属北京妇产医院北京妇幼保健院

孩子充满好奇心,自主地探索周围环境,通过感官体验“做”来认识世界,对建立自信心非常有帮助,应该充分鼓励。但如果孩子要做危险的事情,或做出不合时宜的行为,就需要家长及时管教,使孩子逐渐建立良好的行为规范和规则意识。

关键词：周围环境感官体验规则意识建立自信心婴幼儿不合时宜好奇心鼓励

浅谈国有企业财务人员如何在业财融合背景下转型

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财讯 2023年第18期 65-67页

作者：梁明丽广西农垦西江农场有限公司

在业财融合的背景下，国有企业财务人员的业务模式确实需要转型，随着企业经营环境的变化和技术的进步，传统的财务职能已经远远不能满足企业的需求，财务人员需要适应新的业务模式，并需要深入了解企业的核心业务，与业务部门建立紧密... 详细信息

在业财融合的背景下，国有企业财务人员的业务模式确实需要转型，随着企业经营环境的变化和技术的进步，传统的财务职能已经远远不能满足企业的需求，财务人员需要适应新的业务模式，并需要深入了解企业的核心业务，与业务部门建立紧密联系，从而更好地为企业提供关键财务数据和决策支持。此外，财务人员还需不断更新和学习专业知识，不断提升自己的专业能力。

关键词：业财融合国有企业财务人员转型之路

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电视娱乐节目的脱“俗”问题

新闻爱好者 2011年第9期 103-104页

作者：梁明丽驻马店电视台

我国的电视娱乐节目从20世纪90年代初，从无到有，从单调到多元。从模仿到创新，已经走过了20个春秋，不仅给电视观众带来了视觉享受．而且丰富了节目形式，满足了广大观众的娱乐需求，对繁荣电视文艺起到了一定的作用，但是有的电视娱... 详细信息

我国的电视娱乐节目从20世纪90年代初，从无到有，从单调到多元。从模仿到创新，已经走过了20个春秋，不仅给电视观众带来了视觉享受．而且丰富了节目形式，满足了广大观众的娱乐需求，对繁荣电视文艺起到了一定的作用，但是有的电视娱乐节目从形式到内容依然存在着不同程度的“俗”，而电视娱乐节目的脱“俗”成为广大电视观众的迫切要求。

关键词：电视娱乐节目 “俗” 20世纪90年代初电视观众节目形式电视文艺

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毕赤酵母鼠李糖诱导型启动子PLRA3特征解析及改良

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毕赤酵母鼠李糖诱导型启动子PLRA3特征解析及改良

作者：梁明丽中国农业科学院

学位级别：硕士

毕赤酵母表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一,组成型启动子P和甲醇诱导型启动子P均能实现大多数外源蛋白的高效表达。然而,这两个启动子在调控重组蛋白表达时存在明显缺陷,如应用P时发酵过程不能精准调节,无法适用于毒性蛋白... 详细信息

毕赤酵母表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一,组成型启动子P和甲醇诱导型启动子P均能实现大多数外源蛋白的高效表达。然而,这两个启动子在调控重组蛋白表达时存在明显缺陷,如应用P时发酵过程不能精准调节,无法适用于毒性蛋白的表达;应用P时需要以有毒易燃的甲醇为诱导剂,不适于医药食品相关重组蛋白的表达。因而,亟待开发新型启动子应用于毕赤酵母表达系统。实验室前期研究了Pichia pastoris鼠李糖代谢途径相关基因LRA1-LRA4及调控基因rhaR,发现LRA3基因的启动子P可实现重组蛋白在毕赤酵母中的高效表达,有望将其应用于毕赤酵母表达的工业生产中,但对P尚未进行深入研究。本文首先通过基因敲除和回补实验证实了rhaR参与毕赤酵母鼠李糖代谢;EMSA实验结果表明rhaR编码的蛋白RhaR可结合于P,并揭示了其结合位点;通过CRRT-PCR方法揭示了P的转录起始位点,应用生物信息学分析预测了P关键的顺式元件;通过随机突变筛选到转录活性显著提高的P突变体。主要研究内容及结果如下:1.应用毕赤酵母基因无痕删除系统构建了rhaR无痕删除菌株*** GS115/ΔrhaR,回补rhaR构建了回补菌株*** GS115/rhaRC。实验结果表明,*** GS115/ΔrhaR不能在以鼠李糖为唯一碳源的培养基正常生长,*** GS115/rhaRC则恢复生长,证实了rhaR参与了毕赤酵母鼠李糖代谢。2.分析RhaR保守功能域,发现其含有Zn(II)Cys结构域,将此结构域与GST标签在大肠杆菌中融合表达并纯化。凝胶阻滞实验(EMSA)确认RhaR可与P结合,足迹试验(DNaseⅠfootprinting)揭示结合位点为5′-TAAACTGAAA-3′。以上结果表明RhaR通过结合P特定位点进而调控LRA3表达。3.通过CR-RT-PCR方法确定了P转录起始位点位于翻译起始位点上游22bp位置,为序列5′-TACCCCAGA-3′的第2个A。同时预测了其核心启动子、基础转录作用元件TATA盒及可能的顺式作用元件揭示了P的序列特征。4.通过易错PCR构建P随机突变体库,以乳糖酶LacB为报告基因进行高通量筛选,获得两个转录活性提高25%的突变体。

关键词：毕赤酵母鼠李糖诱导型启动子PLRA3 转录调控顺式作用元件启动子改良

肌球蛋白轻链激酶非激酶活性调节磷酸化肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动

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生物化学与生物物理进展 2008年第1期35卷 91-96页

作者：梁明丽崔颖吕广艳高颖大连医科大学生物化学与分子生物学教研室大连医科大学辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室大连医科大学辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室大连116027

肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收缩过程中起着关键酶调控的作用.为进一步阐明MLCK非激酶活性在平滑肌收缩过程中的调节作用,利用已删除部分激酶区域的MLCK重组体(pGEX-F6.5)在大肠杆... 详细信息

肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收缩过程中起着关键酶调控的作用.为进一步阐明MLCK非激酶活性在平滑肌收缩过程中的调节作用,利用已删除部分激酶区域的MLCK重组体(pGEX-F6.5)在大肠杆菌中进行表达,采用亲和层析技术纯化表达的MLCK片段,应用EnzChek磷分析试剂盒检测MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、水解重酶解肌球蛋白(heavy meromyosin,HMM)及肌球蛋白亚片段1(subfragment1,S1)ATP酶活性的影响,体外检测MLCK片段对肌动蛋白肌丝运动的调节.研究结果显示,pGEX-F6.5重组表达载体在大肠杆菌中以可溶性GST融合蛋白的形式表达.该融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B纯化、SDS-PAGE鉴定得到较纯的单一表达条带.纯化的MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明显激活作用.MLCK片段激活磷酸化肌球蛋白ATP酶活性为:Vmax=(19.426±1.669)倍;Km=(0.486±0.106)μmol/L,MLCK片段对磷酸化HMM和S1的ATP酶活性也有相似的刺激作用.体外肌丝运动研究表明,随着MLCK片段浓度的增加,磷酸化肌球蛋白与肌动蛋白结合的数量不断增加,肌丝运动的速度也随之增加.上述结果表明,MLCK的C端非激酶活性具有调节磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动的作用.

关键词：平滑肌收缩肌球蛋白肌球蛋白轻链激酶(MLCK) 肌球蛋白Mg2+-ATP酶活性体外肌丝运动

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MLCK对磷酸化肌球蛋白ATP酶活性及体外肌丝运动的影响

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MLCK对磷酸化肌球蛋白ATP酶活性及体外肌丝运动的影响

作者：梁明丽大连医科大学

学位级别：硕士

目的:肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)是平滑肌细胞收缩的关键的调节蛋白,具有多种功能。它的结构组成包括N末端肌动蛋白结合区、中心激酶区催化区、钙调蛋白(calmodulin, CaM)结合区、C末端的肌球蛋白结合区。其中C... 详细信息

目的:肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)是平滑肌细胞收缩的关键的调节蛋白,具有多种功能。它的结构组成包括N末端肌动蛋白结合区、中心激酶区催化区、钙调蛋白(calmodulin, CaM)结合区、C末端的肌球蛋白结合区。其中C末端是不依赖于MLCK而独立表达基因产物的,被称为端蛋白(telokin)。端蛋白与肌球蛋白结合组装成粗肌丝。MLCK激酶调节平滑肌收缩的机制已广为接受。然而生理条件下,平滑肌细胞在Ca2+浓度下降后仍维持一定程度张力,这用MLCK激酶调节机制难以解释。以往的研究显示MLCK860/1176(F6.5)可通过与肌球蛋白的头部相互作用而激活非磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性。证明MLCK除了具有激酶活性外,还具有非激酶活性。本研究是在以往研究的基础上,进一步验证MLCK的非激酶调节作用,为阐明平滑肌收缩的非激酶调节机制提供有力的实验依据。方法:利用本实验室构建的MLCK表达载体(pGEX-F6.5)在大肠杆菌中进行表达;利用SDS-PAGE鉴定表达的MLCK;运用亲和层析技术纯化表达的MLCK。应用EnzChek磷分析试剂盒检测MLCK对磷酸化肌球蛋白及其水解重酶解肌球蛋白(heavy meromyosin,HMM)和肌球蛋白亚片段1(subfragment1, S1)Mg-ATP酶(简称ATP酶)活性的影响。体外检测MLCK对肌动蛋白肌丝运动的影响。结果:实验结果显示pGEX-F6.5可以在大肠杆菌中表达。SDS-PAGE显示表达的蛋白以可溶的形式存在。经Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定得到单一的条带。应用EnzChek磷分析试剂盒分别测定不同浓度MLCK对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性的影响。结果表明:MLCK对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明显激活作用,而且激活作用随着MLCK浓度的增加而增大,呈明显的量效关系。其中MLCK对磷酸化肌球蛋白ATP酶活性的影响表现为,当反应体系中加入肌动蛋白时,酶促反应动力学特征表现为:Vmax = 9.822±1.391(n=3), Km= 0.360±0.086(n=3);当反应体系中不加肌动蛋白时,酶促反应动力学特

关键词：平滑肌收缩 MLCK 肌球蛋白肌球蛋白ATP酶活性体外肌丝运动检测

益景汤对高糖环境中人脑微血管内皮细胞形态和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达的影响

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福建中医药 2023年第7期54卷 31-34页

作者：王丽梁明丽孟春刘光辉福建中医药大学附属人民医院福建福州350004 福州大学生物科学与工程学院福建福州350108

目的探讨益景汤对高糖环境中人脑微血管内皮细胞(HBMEC)形态及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达的影响。方法取对数生长期的HBMEC分为空白组、血清组、模型组、含药组,空白组采用无血清培养基,血清组采用血清培养基,模型组采用40 mmo... 详细信息

目的探讨益景汤对高糖环境中人脑微血管内皮细胞(HBMEC)形态及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达的影响。方法取对数生长期的HBMEC分为空白组、血清组、模型组、含药组,空白组采用无血清培养基,血清组采用血清培养基,模型组采用40 mmol/L葡萄糖血清培养基,含药组采用益景汤含药血清+40 mmol/L葡萄糖培养基,各培养48 h。采用光镜观察4组细胞形态变化,Western blot检测4组晚期糖基化终末产物特异性受体(RAGE)、转化生长因子β1(TGF-β1)、同源物4重组蛋白(Smad4)以及纤维连接蛋白(fibronectin)、紧密连接蛋白5(claudin-5)、Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)的蛋白表达量。结果空白组细胞稀疏,形态尚规则;血清组细胞形态规则,成簇生长,呈“铺路石”单层贴壁生长;模型组细胞不规则增大,细胞间隙增宽、数量变少,细胞碎片、悬浮死细胞增多;含药组细胞不规则形态减少、间隙变小、数量增多,细胞碎片、悬浮死细胞减少。与空白组及血清组比较,模型组claudin-5蛋白表达量均明显降低(P均0.05);与模型组比较,含药组claudin-5蛋白表达量明显升高(P0.05)。结论益景汤能提高高糖环境中HBMEC的增殖活力,保护细胞形态,明显上调HBMEC的claudin-5蛋白表达,对保护人脑微血管正常结构,维持人血脑屏障正常通透性有一定意义。

关键词：糖尿病益景汤人脑微血管内皮细胞 TGF-β1/Smads信号通路

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上市公司中期财务报告披露的现状研究

新西部 2018年第12期 70-70页

作者：梁明丽德州学院

本文对上市公司中期财务报告实际披露过程中的现实状况进行了分析,针对中期财务报告实际披露过程中存在的问题提出相关的改进措施:突出信息披露内容重点;重视对公司成长性披露;提高盈利信息披露内容的质量;重视网上披露;管理部门要严格... 详细信息

本文对上市公司中期财务报告实际披露过程中的现实状况进行了分析,针对中期财务报告实际披露过程中存在的问题提出相关的改进措施:突出信息披露内容重点;重视对公司成长性披露;提高盈利信息披露内容的质量;重视网上披露;管理部门要严格执法,加大惩处力度。

关键词：上市公司中期财务报告披露现状

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从“行业引导教学”谈财会学校课程

现代经济信息 2009年第15期 320-320页

作者：梁明丽广西玉林财经学校

随着新世纪的到来,会计科学体系不断完善创新,逐步构成一个完整且具有结构合理、内容严密、优势互补等特征的、以提高经济效益为中心的会计科学体系。笔者从"行业引导教学"出发,提出在教学中实施"学分制",对财会专业课的课程如何为学生... 详细信息

随着新世纪的到来,会计科学体系不断完善创新,逐步构成一个完整且具有结构合理、内容严密、优势互补等特征的、以提高经济效益为中心的会计科学体系。笔者从"行业引导教学"出发,提出在教学中实施"学分制",对财会专业课的课程如何为学生今后的持续发展打下基础进行了一些理论性的探讨和实践性偿试。

关键词：行业引导教学课程设置教学模式学分制

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行走在希望的田野上

农村财务会计 2006年第8期 46-47页

作者：梁明丽陕西洛南

今年开春,单位派我去上寺店下乡.汽车出城后,我的心情不由得好了起来,穿行在弯曲的山道上,新修的柏油路使旅途中少了一份颠簸,车窗外青山绿水,金灿灿的油菜花把山野装点得分外明媚,沟峁里一座座新盖的白瓷砖贴面的农舍,在几枝嫣红的桃... 详细信息

今年开春,单位派我去上寺店下乡.汽车出城后,我的心情不由得好了起来,穿行在弯曲的山道上,新修的柏油路使旅途中少了一份颠簸,车窗外青山绿水,金灿灿的油菜花把山野装点得分外明媚,沟峁里一座座新盖的白瓷砖贴面的农舍,在几枝嫣红的桃花映衬下格外惹眼,村民们忙着在碧绿的田间起垄覆膜,远远望去,好一派迷人的画卷.恍然间,我的思绪回到了1998年.

关键词：油菜花桃花田间

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