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半胱氨酸蛋白酶在玉米Rp1-D21介导的超敏反应中的功能研究

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半胱氨酸蛋白酶在玉米Rp1-D21介导的超敏反应中的功能研究

作者：栾庆玲山东大学

学位级别：硕士

玉米是我国主要粮食作物之一,在国计民生中占据重要地位。但由于病虫害日趋严重,再加上抗病品种相对缺乏,导致玉米产量和品质严重下滑。因此,挖掘抗病相关基因及揭示其分子机理,对作物遗传改良具有重要意义。植物体内的抗病蛋白能特异... 详细信息

玉米是我国主要粮食作物之一,在国计民生中占据重要地位。但由于病虫害日趋严重,再加上抗病品种相对缺乏,导致玉米产量和品质严重下滑。因此,挖掘抗病相关基因及揭示其分子机理,对作物遗传改良具有重要意义。植物体内的抗病蛋白能特异性识别病原菌侵染植物时释放的无毒效应因子,在病原菌侵染部位产生快速的、局部细胞死亡现象被称为超敏反应（Hypersensitive response,HR）。玉米 Rp1-D21 是一个 NLR（NB-LRR,nucleotide binding-leucine rich repeat）类抗病蛋白,是由抗锈病蛋白Rp1-D和未知功能的Rp1-dp2经过重组产生的。含有Rp1-D21基因的玉米突变体能诱导自主免疫反应从而表现出类病斑表型。在烟草中异源瞬时表达Rp1-D21能诱导产生自主HR。Rp1-D21突变体的自主免疫表型受遗传背景影响。前期通过GWAS（Genome-wide association study）和RNA-seq分析发现了多个影响Rp1-D21介导HR的基因,并通过功能分析验证了多个基因的功能。因此,Rp1-D21可作为一种挖掘调控玉米抗病防卫反应基因和研究其分子机理的有效工具。半胱氨酸蛋白酶（Metacaspases,MCs）是一类参与调控细胞周期、生物个体衰老以及生物与非生物胁迫下诱导细胞死亡过程的一类重要蛋白酶,且在植物免疫防御反应中发挥重要作用。MCs主要包含两种类型:Ⅰ型和Ⅱ型,二者均含有P20结构域与P10结构域,其差异主要在于Ⅰ型MCs具有N端前结构域（Prodomain）,Ⅱ型MCs的P20与P10结构域之间具有140-160个氨基酸长度的连接结构,这在Ⅰ型MCs中是不存在的。本论文通过对不同植物物种的MCs做了系统进化分析和蛋白序列比对发现玉米中分别有8个Ⅰ型和3个Ⅱ型MCs编码基因。通过RNA-seq分析发现多个玉米ZmMCs在Rp1-D21突变体中显著差异表达,其中2个Ⅰ型ZmMCs（ZmMC1和ZmMC2）基因和一个Ⅱ型ZmMCs（ZmMC9）在Rp1-D21玉米突变体中是上调表达的。通过烟草异源瞬时表达系统证实ZmMC1和ZmMC2可以抑制Rp1-D21全长或其信号域CCD21介导的HR表型,而ZmMC9则没有此抑制功能。通过对MC推测的酶活保守位点突变实验发现,点突变后的ZmMC1依然抑制Rp1-D21介导的HR,说明酶活可能不会影响MC在抑制HR中的功能。进一步将MC进行截短实验,结果发现其N端Prodomain不是起决定作用的结构域,而其P20和P10对于其功能的发挥是至关重要的。通过Co-IP实验发现ZmMC 1和ZmMC2与CCD21有较强的互作,而ZmMC9与CCD21的互作较弱。亚细胞定位实验发现ZmMC1和ZmMC2主要定位于细胞的点状结构中,少量定位于细胞质和细胞核;而ZmMC9则主要定位于细胞质和细胞核,在点状结构中几乎没有定位。前期研究发现Rp1-D21和CCD21主要定位于细胞质和细胞核中,并且核质穿梭对发挥HR的功能是必须的。将3个ZmMCs与Rp1-D21或CCD21亚细胞共定位发现,当与ZmMC1或ZmMC2共表达时,Rp1-D21和CCD21更多的被转移到点状结构中;而与ZmMC9共表达时,Rp1-D21和CCD21的定位没有明显改变。因而,ZmMC1和ZmMC2可能通过改变Rp1-D21和CCD21的亚细胞定位来抑制HR表型。为了进一步确定ZmMCs的点状结构定位,我们将其与细胞自噬的标志蛋白AtATG8a进行了共定位,结果发现ZmMC1和ZmMC2的点状结构与AtATG8a有部分共定位,说明这些点状结构可能存在于自噬体中。因而我们推测ZmMC1和ZmMC2抑制Rp1-D21和CCD21介导的HR可能涉及到细胞自噬途径,其分子机制需要进一步研究。

关键词：抗病蛋白半胱氨酸蛋白酶玉米超敏防卫反应细胞自噬

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青年科研人员情感负荷影响因素模型构建

科学学研究 2021年第10期39卷 1821-1831页

作者：胡媛李美玉栾庆玲吴安东南昌大学管理学院江西南昌330031 南昌大学生命科学学院江西南昌330031

青年科研人员是科研创新活动的主体,是科研成果产出的重要力量。探讨青年科研人员情感负荷产生的影响因素,有利于为科研人员的情感服务提供参考。本文主要通过科研社交平台获取原始资料,并以半结构化访谈作为数据补充。使用NVivo工具对... 详细信息

青年科研人员是科研创新活动的主体,是科研成果产出的重要力量。探讨青年科研人员情感负荷产生的影响因素,有利于为科研人员的情感服务提供参考。本文主要通过科研社交平台获取原始资料,并以半结构化访谈作为数据补充。使用NVivo工具对原始资料进行编码,从用户、过程、环境和服务4个维度构建青年科研人员情感负荷影响因素分析框架。研究表明,青年科研人员情感负荷是在科研周期过程视域下,由外部环境层及服务层影响因素与内部用户层影响因素相互作用产生的结果。科研用户自身是情感负荷产生最直接的内驱动性因素;科研周期是循环作用的中介性因素;学科环境、工作环境、家庭环境和信息机构是间接作用的外驱动性因素。

关键词：青年科研人员情感负荷扎根理论影响因素模型

“双一流”建设背景下高校图书馆学科服务转型发展研究

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图书馆研究与工作 2021年第3期 77-80页

作者：栾庆玲胡媛南昌大学管理学院

"双一流"建设背景下,高校的学科发展和科学研究要求高校图书馆提供深层次、专业化知识服务,为高校学科发展提供智库保障作用。这就要求图书馆转变现有的服务模式,主动转型。文章采用文献调研和网络调查法分析了"双一流"建设背景下对高... 详细信息

"双一流"建设背景下,高校的学科发展和科学研究要求高校图书馆提供深层次、专业化知识服务,为高校学科发展提供智库保障作用。这就要求图书馆转变现有的服务模式,主动转型。文章采用文献调研和网络调查法分析了"双一流"建设背景下对高校图书馆提出的使命以及南昌大学图书馆学科服务开展现状,构建学科服务模式,从管理、空间、资源、馆员四大要素出发,进行学科服务创新,助力"双一流"建设。

关键词： “双一流”建设高校图书馆学科服务

公共卫生突发事件下高校图书馆微信学科服务现状与思考——基于43所“双一流”高校图书馆微信公众号的调研

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图书情报研究 2022年第1期15卷 75-82页

作者：栾庆玲李美玉胡媛南昌大学管理学院信息管理系南昌330031

[目的/意义]探索高校图书馆在公共卫生突发事件下的微信学科服务应用情况,有利于完善高校图书馆在重大突发事件下的应急服务响应预案,对于评估高校图书馆的知识服务体系和学科服务能力有着重要意义。[方法/过程]选择我国29个省、自治区... 详细信息

[目的/意义]探索高校图书馆在公共卫生突发事件下的微信学科服务应用情况,有利于完善高校图书馆在重大突发事件下的应急服务响应预案,对于评估高校图书馆的知识服务体系和学科服务能力有着重要意义。[方法/过程]选择我国29个省、自治区和直辖市的43所"双一流"高校图书馆作为研究对象,人工采集各高校图书馆在2019年12月份-2020年2月份三个月期间的微信公众号推文数量,并利用Nvivo软件分别对三个月的发文内容中有关学科服务的文章按照主题类别进行编码统计,对比分析43所高校图书馆在新冠肺炎疫情前期、中期的微信学科服务响应情况和应用情况。[结果/结论]研究结果表明,1月份微信学科服务响应速度由于多种因素影响整体较为迟缓,2月份微信学科服务应用更为广泛。针对新冠肺炎疫情期间高校图书馆微信学科服务现状,本文认为高校图书馆在今后的工作中,应深化忧患意识,提高公共危机事件应对能力,与社会信息服务机构合作,建立异质性图书馆联盟,同时对学科服务内容的服务更加深入化和动态化。

关键词：公共卫生突发事件微信公众号学科服务高校图书馆

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无菌检查法在医疗器械领域的应用

中国医疗器械信息 2018年第9期24卷 16-17,83页

作者：栾庆玲张文世高雅松隋馨孙长春吉林省医疗器械检验所生物性能检验室人事财务科吉林长春130000

目的:研究无菌检查法在医疗器械领域的应用。方法:分别选取已做灭菌处理的医用缝合针(21个)、医用纱布(10包)、注射针(21个)、外科手套(10副)以及未做灭菌处理的上述同数量同种类医疗器械为研究对象,并将医疗器械分成灭菌组与未灭菌组... 详细信息

目的:研究无菌检查法在医疗器械领域的应用。方法:分别选取已做灭菌处理的医用缝合针(21个)、医用纱布(10包)、注射针(21个)、外科手套(10副)以及未做灭菌处理的上述同数量同种类医疗器械为研究对象,并将医疗器械分成灭菌组与未灭菌组。通过采用无菌检查法中直接接种法对两组器械进行无菌检测,观察两组需-厌氧培养管及真菌-需氧培养管中菌的生长情况并对比。结果:阳性对照管菌液在经过培养后生长状况良好,阴性对照管培养14d后仍无菌生长。灭菌组所有医疗器械的需-厌氧培养管及真菌-需氧培养管在分别培养14d后无菌生长,未灭菌组所有医疗器械的需-厌氧培养管及真菌-需氧培养管在分别培养14d后有菌生长。结论:无菌检查法应用在医疗器械领域中可以有效地对各类医疗器械进行无菌检查,在用械安全上应用意义广泛。

关键词：无菌检查法医疗器械应用

基于动态CT扫描的非饱和颗粒材料水-力特性微观试验研究

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岩土工程学报 2025年

作者：栾纪元葛尚奇王冀鹏山东大学土建与水利学院

现有非饱和土力学主要聚焦于宏观或介观单元体尺度的研究，有关非饱和土的精准的微观试验研究仍然较为缺乏。针对非饱和土体微观水-力耦合试验的需求，研发适用微焦点CT(computed tomography)三维成像系统的微型非饱和三轴试验装置，开... 详细信息

现有非饱和土力学主要聚焦于宏观或介观单元体尺度的研究，有关非饱和土的精准的微观试验研究仍然较为缺乏。针对非饱和土体微观水-力耦合试验的需求，研发适用微焦点CT(computed tomography)三维成像系统的微型非饱和三轴试验装置，开展吸力控制条件下的三轴剪切-动态CT扫描试验，获得干燥与非饱和状态颗粒材料试样在三轴剪切试验过程中多个状态的微米级高分辨率三维CT图像，运用图像标记处理与代表体积单元（RVE）分析方法，探究了微观因素对非饱和颗粒材料整体水力-力学特性的影响规律。结果表明，非饱和颗粒材料三轴剪切排水过程中，试样内连续分布的大体积孔隙水团逐渐排出或分解为离散的小体积液相团簇，颗粒间接触位置及孔隙中喉道处的小体积水相团簇（液桥）的联结作用是影响非饱和试样整体强度提升的主要微观因素之一；气-液交界面表面积变化峰值出现在30%饱和度左右，在25%～35%的饱和度范围（轴向应变2%～5%）存在较多弯月面，增大的气-液交界面面积对整体强度提升存在增益效应，固-液交界面面积主要由饱和度决定，其变化对整体强度提升无明显影响；亚颗粒尺度的颗粒间接触配位数演化行为可以表征颗粒骨架结构的变化规律，非饱和状态试样剪切排水初期（轴向应变0～2%），样品湿润程度降低，颗粒间接触配位数略有增多，摩擦力增大，且颗粒间接触处形成的液桥可减缓颗粒材料的接触损失，两者均可提升应力增长阶段的整体强度。

关键词：非饱和颗粒材料微型三轴试验装置 X射线CT扫描微观力学特性

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溶血试验方法在医疗器械领域的应用

国际感染病学（电子版） 2020年第2期9卷 20-20页

作者：栾庆玲隋馨高雅松孙长春吉林省医疗器械检验所吉林长春130000

通过对GB/T 14233.2-2005《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分:生物学试验方法》和GB 15810-2001《一次性使用无菌注射器》标准中两种溶血试验方法的研究,以一次性使用输液器和一次性使用无菌注射器为例,进行溶血试验,为溶血试... 详细信息

通过对GB/T 14233.2-2005《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分:生物学试验方法》和GB 15810-2001《一次性使用无菌注射器》标准中两种溶血试验方法的研究,以一次性使用输液器和一次性使用无菌注射器为例,进行溶血试验,为溶血试验方法在医疗器械领域的应用提供参考。

关键词：溶血医疗器械试验方法

Maize metacaspase inhibits the hypersensitive response induced by autoactive NLR protein Rp1-D21

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Maize metacaspase inhibits the hypersensitive response induc...

副热带高压控制下一次极端暴雨成因分析及成功预警

中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：栾庆玲 Liu Mengjie Sun Yang Wang Mei Liu Xiaoying Zhu Yuxiu Mao Weichao 王官锋 The Key Laboratory of Plant Cell Engineering and Germplasm Innovation Ministry of EducationCollege of Life ScienceShandong University

Programmed cell death(PCD) plays important roles in plant innate *** disease resistance(R) genes encode nucleotide binding leucine-rich-repeat(NLR) proteins that trigger a rapid localized PCD termed the hypersensitive response(HR) upon pathogen *** maize NLR protein Rpl-D21 derives from an intragenic recombination between two NLRs,Rpl-D and Rpl-dp2,and confers an autoactive HR in the absence of pathogen ***(MC),the distant homolog of caspase in the caspase-like domain(CD) cysteine protease superfamily,is widely distributed in different species and plays important roles in *** maize,MC can be divided into two types,type Ⅰ and type Ⅱ.Phylogenetic analysis showed that eight genes encode type Ⅰ(ZmMC 1-8) and three genes encode type Ⅱ(ZmMC9-11).Both types of MC contain two conserved caspase-like catalytic domains,P20(20 kDa) and P10(10 kDa).Two types of MC differ in their N-terminal pro-domains and the length of the linker between P20 and *** our RNA-seq data,we found that several ZmMC genes are differentially expressed in Rp1-D21 mutant compared to wild *** transiently co-expressed ZmMC and Rpl-D21 in *** and found that type Ⅰ ZmMC1 and ZmMC2 suppress Rp1-D21-mediated HR,while type Ⅱ ZmMC9 has no obvious *** suppression function of ZmMC1 and ZmMC2 is independent of the putative catalytic residues and the N-terminal *** results suggest that two types of MC have different function in regulating NLR-mediated *** molecular mechanism will be further explored.

关键词： NLR Rp1-D21 Metacaspase Hypersensitive response

来源： cnki会议评论

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灾害学 2025年第1期40卷 92-101页

作者：郭萍段绍玲郑建萌张万诚陈静杨宏庆中国气象局横断山区(低纬高原)灾害性天气研究中心云南昆明650034 中国气象局大理山地气象野外科学试验基地云南大理671003 云南省气候中心云南昆明650034 云南省气象科学研究所云南昆明650034 云南省临沧市气象局云南临沧677099 中国气象局大理国家气候观象台云南大理671003

2022年10月8日,临沧市双江县忙懦乡遭遇历史性极端暴雨,最大小时雨量达到57.2 mm。该文通过高空、区域自动站雨量、ERA5再分析、FY-2G、多普勒天气雷达等资料综合分析,揭示此次暴雨的成因:①此过程的大尺度环流背景是在强盛的副高控制下... 详细信息

2022年10月8日,临沧市双江县忙懦乡遭遇历史性极端暴雨,最大小时雨量达到57.2 mm。该文通过高空、区域自动站雨量、ERA5再分析、FY-2G、多普勒天气雷达等资料综合分析,揭示此次暴雨的成因:①此过程的大尺度环流背景是在强盛的副高控制下,由中尺度系统触发产生的强降雨。②强降雨期间大气层结不稳定,存在暖湿底层与干冷高层,低抬升凝结高度和自由对流高度;强降雨发生与水汽输送和水汽辐合大值区相对应,低层辐合中高层辐散且与强垂直上升运动区配合。③两个强降雨时段对应不同的雷达回波特征,初时段无大范围的降雨回波,局地出现中-γ尺度对流回波;次时段降雨回波范围扩大,形成列车效应。④忙懦乡的地形和低层东偏南气流对中尺度对流系统的触发与维持起到关键作用。⑤“1262”服务模式提前发出警报,夜间强降雨得以有效预警,避免了人员伤亡,成为预警联动的成功案例。

关键词：极端暴雨副热带高压中尺度系统临沧市递进式气象服务