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Lin28对肝癌HepG2细胞5-Fu敏感性的影响及其分子机制

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第3期27卷 261-266页

作者：陈少坚林拥华吴友谊魏剑锋廖政戎福建医科大学附属第二医院普外科福建泉州362000

目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化... 详细信息

目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA(let-7a和let-7b)及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的mRNA表达水平。结果:与空载对照组(HepG2/Vector)相比,HepG2/Lin28组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),过表达Lin28可显著抑制HepG2细胞对5-Fu作用的敏感性(IC50明显升高,P<0.05)和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3表达明显降低(均P<0.01)。与阴性对照组(si-control)相比,si-Lin28细胞中Lin28表达水平显著下降(P<0.01);敲减Lin28可使细胞增殖活性及5-Fu的IC50显著降低(均P<0.01),凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加(P<0.01)。与HepG2/Vector组比较,HepG2/Lin28细胞中let-7a、let-7b及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的表达水平明显上调(均P<0.01),而si-Lin28细胞中let-7a、let-7b及Oct4、Nanog、Sox2的表达水平较si-control组明显下调(均P<0.01)。结论:Lin28可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段。

关键词：肝细胞癌 HepG2细胞 Lin28 5-氟尿嘧啶化疗敏感性肿瘤干细胞凋亡

大鼠原位肝移植术后腹腔细菌感染对移植物免疫排斥反应的影响

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中华实验外科杂志 2023年第11期40卷 2245-2248页

作者：林拥华陈志超吴敏魏剑锋福建医科大学附属第二医院肝胆胰外科福建医科大学第二临床学院泉州362000

目的:探讨大鼠原位肝移植术后腹腔细菌感染对移植肝排斥反应的影响。方法:采用成年雄性DA、Lewis大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)为供受体建立大鼠原位肝移植模型,采用随机数字表分组法分成4组,G1为LEW到LEW,同基因对照组;G2为LEW... 详细信息

目的:探讨大鼠原位肝移植术后腹腔细菌感染对移植肝排斥反应的影响。方法:采用成年雄性DA、Lewis大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)为供受体建立大鼠原位肝移植模型,采用随机数字表分组法分成4组,G1为LEW到LEW,同基因对照组;G2为LEW到LEW,同基因腹腔感染组;G3为DA到LEW,异基因对照组;G4为DA到LEW,异基因腹腔感染组。每组于术后第2、4、6、8天4个时间点(每个时间点4只)收集标本,通过观察移植肝病理表现、细胞凋亡,评估移植肝排斥反应的不同表现。组间比较采用单因素方差分析,病理等级资料采用秩和检验。结果:苏木精-伊红(HE)显示,感染后第5天(术后第8天),G3组RAI高于G4组(8.0±0.8比6.5±1.3,χ^(2)=12.711,P<0.05)。感染后5 d(术后第8天)G4组移植肝实质及汇管区凋亡细胞指数(AI)高于G3组[(28.53±5.27)%比(17.33±4.99)%,F=32.298,P<0.05]。结论:大鼠肝移植术后腹腔细菌感染诱导移植肝汇管区及小叶中央静脉周围浸润淋巴细胞凋亡增多,导致移植肝排斥反应减轻。

关键词：肝移植大鼠急性排斥反应腹腔细菌感染细胞凋亡

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大鼠原位肝移植模型建立的学习曲线

中华实验外科杂志 2023年第6期40卷 1188-1191页

作者：林拥华陈志超吴敏魏剑锋福建医科大学附属第二医院肝胆胰外科、福建医科大学第二临床学院泉州362000

目的:探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的学习曲线。方法:采用成年雄性SD大鼠为供受体建立大鼠原位肝移植模型,手术方法以Kamada"二袖套法"为基础做适当改良。按时间顺序分成4个阶段:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。观察无肝期、手术成功率等,总结学... 详细信息

目的:探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的学习曲线。方法:采用成年雄性SD大鼠为供受体建立大鼠原位肝移植模型,手术方法以Kamada"二袖套法"为基础做适当改良。按时间顺序分成4个阶段:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。观察无肝期、手术成功率等,总结学习曲线。组间比较采用单因素方差分析,率的比较采用χ^(2)检验。结果:各阶段无肝期依次为(25.0±1.3)、(23.1±1.2)、(18.6±0.7)、(15.4±1.1)min,差异有统计学意义(F=471.005,P0.05);第Ⅳ阶段手术成功率100%,与前面3个阶段比较差异均有统计学意义(χ^(2)=36.274、22.259、4.043,P<0.05)。结论:建立稳定的大鼠原位肝移植模型过程中,操作者一般会经历快速提升期到平台期(50~100例),可能是操作者处于"技术疲劳"的状态,随即进入成熟期。

关键词：肝移植大鼠动物模型学习曲线

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黑斑息肉综合征诊治分析

国际医药卫生导报 2003年第12期9卷 44-45页

作者：林拥华孙淑明汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515041

目的　探讨黑斑息肉综合征的临床特征,胃肠道息肉癌变风险及治疗方法。方法　通过对5例黑斑息肉综合征的诊治作回顾性分析。结果　黑斑息肉综合征有3大临床特征,胃肠道息肉有部分癌变。结论　黑斑息肉综合征临床少见,但诊断容易,胃肠道... 详细信息

目的　探讨黑斑息肉综合征的临床特征,胃肠道息肉癌变风险及治疗方法。方法　通过对5例黑斑息肉综合征的诊治作回顾性分析。结果　黑斑息肉综合征有3大临床特征,胃肠道息肉有部分癌变。结论　黑斑息肉综合征临床少见,但诊断容易,胃肠道息肉有癌变,应主张早期彻底治疗。

关键词：黑斑息肉综合征诊断治疗癌变

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腹部外伤后急性阑尾炎8例

河北医学 2007年第1期13卷 103-104页

作者：林拥华李新丰福建省泉州市福建医科大学

腹部外伤后急性阑尾炎临床上少见,诊断较为困难,容易导致误诊和漏诊从而导致病情加重、处理困难、并发症出现,因此值得临床医生,特别是基层医院医生重视.本院2000年至2006年共收治此类病人8例,现就诊治过程的体会报告如下.

关键词：腹部外伤急性阑尾炎

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小切口化学性胆囊切除术治疗体会

山西医药杂志 2004年第4期33卷 282-284页

作者：林拥华孙淑明刘婉秀吴利标汕头大学医学院第一附属医院 515041

目的　探讨临床上行小切口化学性胆囊切除的可行性。方法　对 15例胆囊结石患者采用右上腹 3～ 5cm斜切口 ,充分显露胆囊三角 ,直视下寻找胆囊管 ,用钛夹夹闭胆囊管 ,取尽胆囊结石及胆汁并向胆囊腔灌注硬化剂无水酒精 (≥ 99 5 % ) ,反... 详细信息

目的　探讨临床上行小切口化学性胆囊切除的可行性。方法　对 15例胆囊结石患者采用右上腹 3～ 5cm斜切口 ,充分显露胆囊三角 ,直视下寻找胆囊管 ,用钛夹夹闭胆囊管 ,取尽胆囊结石及胆汁并向胆囊腔灌注硬化剂无水酒精 (≥ 99 5 % ) ,反复 3次 ,硬化剂共灌注 2 0min ,胆囊底开放 ,放置胆囊窝引注以管 ,手术结束前在胆囊三角用 2 %的利多卡因作局部封闭来预防术后腹痛及胆囊区疼痛的发生。结果　全部病人均在小切口下完成化学性胆囊切除 ,经 3次灌注硬化剂后未发现有胆囊窝或腹腔积液 ,13例在手术结束前用 2 %利多卡因行胆囊三角封闭 ,术后未发现有腹痛及胆囊区疼痛的发生。结论　小切口化学性胆囊切除是一种安全、可行的微创手术。

关键词：小切口胆囊切除术治疗胆囊疾病硬化溶液

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黄芩及其有效成分的肝脏保护作用研究进展

中国中医药信息杂志 2014年第12期21卷 129-133页

作者：章宝燕林拥华林志强福建医科大学附属泉州第一医院临床药学室福建泉州362000 福建医科大学附属第二医院肝胆外科福建泉州362000

黄芩作为传统中药在我国药用历史悠久,具有多种药理作用和重要临床应用价值。黄芩苷是从唇形科植物黄芩的干燥根中提取的单一有效成分,其主要作用为抗细菌、抗病毒、抗氧化、清除氧自由基、解热镇痛、抗炎、抗肿瘤等,对肝脏、心脑血管... 详细信息

黄芩作为传统中药在我国药用历史悠久,具有多种药理作用和重要临床应用价值。黄芩苷是从唇形科植物黄芩的干燥根中提取的单一有效成分,其主要作用为抗细菌、抗病毒、抗氧化、清除氧自由基、解热镇痛、抗炎、抗肿瘤等,对肝脏、心脑血管、免疫、神经等系统有保护作用。我国是肝脏疾病重灾区,开发和利用黄芩及其有效成分的保肝作用意义深远。本文从7个方面综述了近年来有关黄芩及其有效成分保肝作用及可能机制的研究进展,包括其对铁超载、镉中毒、脂多糖/半乳糖、四氯化碳、酒精、药物,以及缺血再灌注诱导肝损伤的保护作用。

关键词：黄芩黄芩苷保肝作用药理作用作用机制综述

脐带间充质干细胞介导TLR4/NF-κB炎症通路及氧化应激改善NAFLD大鼠肝脏损伤作用研究

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2018年第5期8卷 297-302页

作者：王文清易文城林拥华福建医科大学附属第二医院普通外科泉州362000

目的探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏损伤的作用及其与TLR4/NF-κB炎症通路和氧化应激的关系。方法 SD大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组)、模型对照组(MC组)和hUC-MSCs治疗组(MC+hUC-MSCs组)。每组大... 详细信息

目的探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏损伤的作用及其与TLR4/NF-κB炎症通路和氧化应激的关系。方法 SD大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组)、模型对照组(MC组)和hUC-MSCs治疗组(MC+hUC-MSCs组)。每组大鼠均为10只,分别喂食常规或高糖高脂饲料并给予相应治疗8周,其中MC+hUC-MSCs组每两周尾静脉注射含5×106个hUC-MSCs。检测各组肝指数、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。光镜和电镜观察大鼠肝脏组织病理改变,评估NAFLD活动度积分(NAS);Western Blot法检测大鼠肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB (NF-κB)蛋白表达。组间比较采用单因素方差分析。结果干预结束后,(1)NC组TG(0.96±0.29) mmol/L、TC(2.23±0.37)mmol/L、LDL(0.71±0.18)mmol/L、HDL(2.95±0.27)mmol/L,与MC组TG(5.79±0.68)mmol/L、TC(6.08±0.79)mmol/L、LDL(6.06±0.31)mmol/L、HDL(0.75±0.18) mmol/L比较差异具有统计学意义(均P <0.05);与MC组比较,MC+hUC-MSCs组上述指标差异具有统计学意义(均P <0.05)。(2)光镜下NC组肝细胞形态正常;MC组出现肝细胞脂肪变性、肝小叶排列不齐及炎症细胞浸润;而MC+hUC-MSCs组肝组织病理改变明显好转。与NC组比较,MC组肝组织NAS升高;与MC组比较,MC+hUC-MSCs组NAS降低[(0.36±0.16)分vs(8.72±0.35)分、(4.78±0.51)分,P <0.05]。电镜下亦观察到与MC组比较,MC+hUC-MSCs大鼠肝细胞脂肪变性、胞核变形、内质网和线粒体形态异常明显改善。(3)与NC组比较,MC组大鼠TNF-α、IL-6、8-OHdG、TLR4和NF-κB蛋白表达均增高(均P <0.05),SOD降低(P <0.05);与MC组比较,MC+hUC-MSCs组大鼠上述指标改善(P <0.05)。结论 hUC-MSCs通过抑制氧化应激和TLR4/NF-κB而保护NAFLD大鼠肝脏功能。

关键词：非酒精性脂肪肝 TLR4 NF-κB 氧化应激脐带间充质干细胞

急性超容性血液稀释对缺血／再灌注损伤在体兔心肌细胞凋亡的影响

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现代保健（医学创新研究） 2006年第11X期3卷 1-2页

作者：程明华方雄水林拥华杨普春汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515041

目的探讨急性超容性血液稀释（AHH）对缺血／再灌注（I／R）损伤在体兔心肌细胞凋亡的影响。方法 36只兔随机分为三组，每组12只，Ⅰ组为对照组；Ⅱ组为急性等容性血液稀释组（ANH）；Ⅲ组为AHH。观察心肌缺血45min及再灌注180min时SOD... 详细信息

目的探讨急性超容性血液稀释（AHH）对缺血／再灌注（I／R）损伤在体兔心肌细胞凋亡的影响。方法 36只兔随机分为三组，每组12只，Ⅰ组为对照组；Ⅱ组为急性等容性血液稀释组（ANH）；Ⅲ组为AHH。观察心肌缺血45min及再灌注180min时SOD、MDA含量变化、心肌超微结构改变、心肌细胞凋亡和Bcl-2及Bax表达。结果与Ⅰ组比较，Ⅱ、Ⅲ组再灌后SOD活性增加，凋亡指数和Bax含量减少，Bcl-2含量增加（P〈0.05）。心肌细胞超微结构表现为损伤减轻。Ⅱ、Ⅲ组间比较，各参数无明显差异。结论 AHH能通过抗氧化作用和调节Bcl-2及Bax表达来减轻I／R损伤后的心肌细胞凋亡。

关键词：急性超容性血液稀释 I/R 心肌凋亡兔