Lin28对肝癌HepG2细胞5-Fu敏感性的影响及其分子机制

作     者：陈少坚 林拥华 吴友谊 魏剑锋 廖政戎 CHEN Shaojian;LIN Yonghua;WU Youyi;WEI Jianfeng;Liao Zhengrong

作者机构：福建医科大学附属第二医院普外科福建泉州362000 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2020年第27卷第3期

页      面：261-266页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：福建省中青年教师教育科研资助项目(No.JA15193) 

主　　题：肝细胞癌 HepG2细胞 Lin28 5-氟尿嘧啶 化疗敏感性 肿瘤干细胞 凋亡 

摘      要：目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA(let-7a和let-7b)及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的mRNA表达水平。结果:与空载对照组(HepG2/Vector)相比,HepG2/Lin28组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P0.05或P0.01),过表达Lin28可显著抑制HepG2细胞对5-Fu作用的敏感性(IC50明显升高,P0.05)和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3表达明显降低(均P0.01)。与阴性对照组(si-control)相比,si-Lin28细胞中Lin28表达水平显著下降(P0.01);敲减Lin28可使细胞增殖活性及5-Fu的IC50显著降低(均P0.01),凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加(P0.01)。与HepG2/Vector组比较,HepG2/Lin28细胞中let-7a、let-7b及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的表达水平明显上调(均P0.01),而si-Lin28细胞中let-7a、let-7b及Oct4、Nanog、Sox2的表达水平较si-control组明显下调(均P0.01)。结论:Lin28可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段。