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从经验到创新发展的疫苗学

中国病毒病杂志 2024年第4期 326-337页

作者：马磊杨昭庆王佑春中国医学科学院医学生物学研究所

新发突发传染病的不断出现，严重危害人类健康。疫苗作为预防传染病的一个核心手段，在保护人类健康过程中发挥了巨大的作用。疫苗科学在经历了数百年的发展历程后，正逐渐从依赖经验和观察走向基于现代分子生物学、基因工程和生物信息... 详细信息

新发突发传染病的不断出现，严重危害人类健康。疫苗作为预防传染病的一个核心手段，在保护人类健康过程中发挥了巨大的作用。疫苗科学在经历了数百年的发展历程后，正逐渐从依赖经验和观察走向基于现代分子生物学、基因工程和生物信息学等新技术的创新发展阶段，而且疫苗学的理论也在不断地丰富和完善，为未来创新疫苗研发提供了更高效的手段和更广阔的前景。然而，创新疫苗的发展仍面临着诸多挑战，一方面，面对更多更复杂的新型病原体，特别是病原体的变异以及受试者个体的差异化，有效抗原选择和设计将面临更大挑战；另一方面，即便是已熟知的病原体，如何优化设计免疫原研发创新疫苗以提升其免疫效果依然存在重大挑战。本文梳理了疫苗学从经验到创新发展过程中的关键创新技术及理论，并展望了未来创新疫苗研发所面临的机遇与挑战，为创新疫苗研发提供思路和参考。

关键词：疫苗学创新技术细胞培养基因工程反向疫苗学技术分子生物学

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中国不同民族永生细胞库的建立和应用

中国科学：生命科学 2024年第6期54卷 987-1001页

作者：杨昭庆黄小琴孙浩边成林克勤褚嘉祐中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

人类遗传资源具有重要的生命科学和医学研究及应用价值,国际不同民族群体遗传多样性研究具有重要意义,中国不同民族在民族渊源、语言、地理环境、生活习俗乃至生理表型和疾病易感性等方面存在差异,为医学与健康研究提供丰富的遗传资源材... 详细信息

人类遗传资源具有重要的生命科学和医学研究及应用价值,国际不同民族群体遗传多样性研究具有重要意义,中国不同民族在民族渊源、语言、地理环境、生活习俗乃至生理表型和疾病易感性等方面存在差异,为医学与健康研究提供丰富的遗传资源材料.EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)转化的永生化B淋巴细胞为是保存人类遗传资源的一种主要方式“中国不同民族永生细胞库”历时二十多年,已经建成包括49个法定民族,90多个群体,6126人份的永生细胞株的样本库.作为重要的国家战略资源,中国不同民族永生细胞库及其来源的核酸为中国人群遗传结构特征、基因变异、表达和功能等研究和应用提供研究材料,展现在药物发现、疫苗、抗体和干细胞等领域的应用潜力,显著促进中国在人类遗传资源的国际交流与合作,并伴随着高通量测序和基因编辑等先进技术的发展,将为人类生命科学研究和临床转化应用提供更具广阔前景的工具和资源.

关键词：人类遗传资源中国不同民族遗传多样性永生细胞库疾病基因疫苗与药物

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重组SARS-CoV-2 Omicron变异株S1蛋白的表达及免疫原性评价

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医学研究杂志 2024年第8期53卷 126-131页

作者：卢慧敏王梓豪边成王晓辉李吉翠马绍辉褚嘉祐杨昭庆中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室昆明650118 昆明医科大学 650500

目的构建表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)Omicron BA.1变异株S1蛋白的真核表达载体,在CHO-K1细胞中进行表达,评价其免疫原性,并对佐剂和抗原剂量进行研究。方法构建重组质粒UCOE-Omi-S1,转染至CHO-K1工程细胞中进行表达和纯化,通过SDS-PAG... 详细信息

目的构建表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)Omicron BA.1变异株S1蛋白的真核表达载体,在CHO-K1细胞中进行表达,评价其免疫原性,并对佐剂和抗原剂量进行研究。方法构建重组质粒UCOE-Omi-S1,转染至CHO-K1工程细胞中进行表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blot法实验鉴定重组S1蛋白。将BALB/c小鼠随机分为12组,即PBS组,无佐剂组(高、中、低剂量组),铝盐佐剂对照组,MF59佐剂对照组,铝盐佐剂实验组(高、中、低剂量组),MF59佐剂实验组(高、中、低剂量组),将按照分组要求配比的溶液经小鼠肌内注射3次,间隔14天,每2周尾静脉采血,末次免疫30天后取血分离血清,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清抗体水平,并和SARS-CoV-2原型株的假病毒和SARS-CoV-2 Omicron BA.1变异株的假病毒进行假病毒中和实验。结果目的蛋白在CHO-K1工程细胞表达后可分泌到培养上清中,在相对分子质量约为70kDa处可见1条特异性蛋白表达条带,经Western blot法鉴定为Omi-S1蛋白。铝盐佐剂组和MF59佐剂组免疫诱导效果优于无佐剂组,铝盐佐剂组和MF59佐剂组免疫诱导效果相差不大,但MF59佐剂起效快;高、中、低剂量组的免疫诱导效果在第8周相差不大,但高剂量组起效快。假病毒中和实验表明,MF59佐剂实验组针对Omicron变异株的中和抗体水平高于铝盐佐剂组。结论本研究所构建的Omicron S1重组蛋白免疫原性良好,在小鼠体内产生了良好的体液免疫应答,并诱导高水平的对抗SARS-CoV-2假病毒的中和抗体,对佐剂和抗原剂量初步研究,结果显示,10μg以下抗原剂量搭配MF59佐剂可获得较好的免疫效果。本研究为SARS-CoV-2变异株的重组蛋白疫苗的研制提供了实验基础。

关键词： SARS-CoV-2 重组蛋白疫苗佐剂假病毒中和抗体

异常血红蛋白Hb Rush复合β0地中海贫血的一个重型地贫家系分析

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中国优生与遗传杂志 2024年第4期32卷 786-789页

作者：番云华葛世军罗赛丽禹崇飞易薇杨必清褚嘉祐杨昭庆德宏州人民医院检验科云南芒市678400 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室云南昆明650118

目的对同时携带有异常血红蛋白Hb Rush和β^(0)地中海贫血β^(CD71-72)突变的家系进行基因诊断,并探讨Hb Rush/β^(CD71-72)复合杂合子的临床血液学特征。方法采用血常规和血红蛋白电泳分析家系成员的血液学指标,采用PCR-流式杂交法和... 详细信息

目的对同时携带有异常血红蛋白Hb Rush和β^(0)地中海贫血β^(CD71-72)突变的家系进行基因诊断,并探讨Hb Rush/β^(CD71-72)复合杂合子的临床血液学特征。方法采用血常规和血红蛋白电泳分析家系成员的血液学指标,采用PCR-流式杂交法和基因测序方法进行基因诊断。结果该家系中先证者血液学表型为重度贫血,显著的小细胞低色素,血红蛋白电泳无HbA,出现异常的Z8区条带和明显增高的HbF。基因测序结果证实为不稳定异常血红蛋白Hb Rush复合β^(CD71-72)地中海贫血。家系中携带相同复合突变的成员临床血液表型与先证者相似,仅携带异常血红蛋白Hb Rush突变的无明显贫血,β^(CD71-72)杂合子的家庭成员表现为轻微的小细胞低色素表型。结论异常血红蛋白Hb Rush杂合子无明显贫血临床表型,但复合β^(0)地中海贫血时可表现出重型地中海贫血临床表型特征。本研究为异常血红蛋白病与地中海贫血的相互作用提供了新的基因型-表型关联性数据,为遗传性血液病的临床诊断和遗传咨询提供了更多参考依据。

关键词：异常血红蛋白 Hb Rush 地中海贫血基因突变基因诊断

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mRNA疫苗的研究进展

中国生物制品学杂志 2022年第6期35卷 734-739页

作者：袁军鸿杨昭庆(综述) 马绍辉(审校) 昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650031

近年来随着生物技术的发展,疫苗的研发策略不再仅限于传统的疫苗,曾经被认为有较多局限性的mRNA疫苗在通过一系列研究和改进后,表现出其优越性的一面,已经在肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病的防控和治疗等方面展示出了良好的应用前景... 详细信息

近年来随着生物技术的发展,疫苗的研发策略不再仅限于传统的疫苗,曾经被认为有较多局限性的mRNA疫苗在通过一系列研究和改进后,表现出其优越性的一面,已经在肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病的防控和治疗等方面展示出了良好的应用前景。本文对mRNA疫苗的结构设计和优化及传递系统和疾病防治应用方面取得的进展作一综述。

关键词： mRNA疫苗结构优化肿瘤治疗感染性疾病传递系统

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中国人类遗传多样性研究进展

遗传 2012年第11期34卷 1351-1364页

作者：杨昭庆禇嘉祐中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室昆明650118

人类遗传多样性表现为世界各种族、民族和个体间存在的基因组差异,是探讨人类进化与迁徙、环境与遗传背景相互作用、疾病与健康影响因素的主要资源和工具。中国具有世界1/5的人口,有56个民族和丰富的遗传多样性资源。经过几十年的努力,... 详细信息

人类遗传多样性表现为世界各种族、民族和个体间存在的基因组差异,是探讨人类进化与迁徙、环境与遗传背景相互作用、疾病与健康影响因素的主要资源和工具。中国具有世界1/5的人口,有56个民族和丰富的遗传多样性资源。经过几十年的努力,中国人类遗传多样性研究已积累了丰富的资料,部分成果已经达到国际先进水平。文章重点论述了近年来形态学标记、生化及免疫学标记、DNA遗传标记在我国人类遗传多样性研究中的应用,线粒体DNA、Y染色体DNA和HLA标记在中国不同民族源流和相互关系、东亚现代人起源和迁移等研究中的应用,以及我国在中华民族遗传资源保存和利用、疾病易感基因和环境适应相关基因的鉴定及全基因组关联分析和第二代测序技术的应用、中国人基因组结构研究等方面取得的重要成果和进展。

关键词：人类遗传多样性遗传标记基因组易感基因中华民族

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新冠病毒奥密克戎免疫逃逸及疫苗研究进展

中国食品药品监管 2023年第8期 24-31页

作者：马磊杨昭庆王佑春中国医学科学院医学生物学研究所

在新冠病毒奥密克戎(Omicron)依然不断变异的背景下,针对Omicron变异株免疫逃逸特点选择合适的疫苗研发策略,对于诱导有效的免疫保护至关重要。与新冠疫情发生初期的新冠病毒原始毒株(SARS-CoV-2)疫苗相比,Omicron疫苗的研发不论是在基... 详细信息

在新冠病毒奥密克戎(Omicron)依然不断变异的背景下,针对Omicron变异株免疫逃逸特点选择合适的疫苗研发策略,对于诱导有效的免疫保护至关重要。与新冠疫情发生初期的新冠病毒原始毒株(SARS-CoV-2)疫苗相比,Omicron疫苗的研发不论是在基础技术平台上还是在研发策略上都取得了一些进展。本文介绍了Omicron变异株免疫逃逸机制及特点,并对目前Omicron疫苗研发新策略进行综述,为疫苗研发工作提供参考。

关键词：新冠病毒奥密克戎免疫逃逸疫苗

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简单快速的DNA银染和胶保存方法

遗传 2002年第3期24卷 335-336页

作者：许绍斌陶玉芬杨昭庆褚嘉祐中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所遗传室昆明650118

本文介绍了一套简单快速的DNA银染以及胶保存的方法 ,整个过程仅需 10～ 15分钟 ,而且背景浅 ,条带清楚 ,灵敏度高 ,稳定性好。胶保存采用双层玻璃纸夹心法 ,可长久地保存胶显色时的原貌。以常规PAG胶检测和HLA的SSCP分型为例 ,利用该... 详细信息

本文介绍了一套简单快速的DNA银染以及胶保存的方法 ,整个过程仅需 10～ 15分钟 ,而且背景浅 ,条带清楚 ,灵敏度高 ,稳定性好。胶保存采用双层玻璃纸夹心法 ,可长久地保存胶显色时的原貌。以常规PAG胶检测和HLA的SSCP分型为例 ,利用该套方法进行了银染以及胶的保存 ,均得到了满意的结果。该方法具有推广价值。

关键词： DNA银染胶保存方法 PAG SSCP DNA样品

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云南籍G6PD缺乏症病例的基因型分析

中华医学遗传学杂志 2001年第4期18卷 259-263页

作者：杨昭庆褚嘉佑班贵宏黄小琴许绍斌李梅章中国医学科学院中国协和医科大学医学生物研究所遗传室昆明650118

目的　确定 2 3例云南籍 G6 PD缺乏症病例的基因突变类型 ,了解 G6 PD基因突变的分子遗传特性。方法　运用扩增阻滞突变系统、自然及错配引物 PCR/限制性酶切、PCR-单链构象多态分析及 DNA自动测序技术 ,检测分析了 2 3例云南 G6 PD缺... 详细信息

目的　确定 2 3例云南籍 G6 PD缺乏症病例的基因突变类型 ,了解 G6 PD基因突变的分子遗传特性。方法　运用扩增阻滞突变系统、自然及错配引物 PCR/限制性酶切、PCR-单链构象多态分析及 DNA自动测序技术 ,检测分析了 2 3例云南 G6 PD缺乏症病例第 2～ 12共 11个 G6 PD基因外显子和部分内含子的基因突变。结果　 2 3例中共发现 5种突变 ,形成了 5种突变基因型 :G487A10例 (7例汉族、3例傣族 )、IVS- 11T39C复合 C1311T7例、IVS- 5 6 36或 6 37T→del4例、G871A1例、G487A/ T93C/ C1311T1例。云南人群中存在 93C/ 1311T、487A/ 93C/ 1311T两种单体型。IVS- 11T93C突变产生的多态性 Nla 酶切位点与 1311T呈现紧密关联。首次报道了 IVS- 5 6 36或 6 37T→ del在中国人群中、G871A在中国大陆地区以及G487A在云南汉族的存在。结论　云南省 G6 PD缺乏症具有明显的异质性 ;G487A突变是该地区的常见G6 PD基因突变 ,并可能有不同的起源 ;IVS- 11T93C突变可能起源于非洲以外地区 ,并与 C1311T共同作用而导致 G6 PD活性降低。 G6 PD基因突变型研究对疾病防治。

关键词：聚合酶链反应单链构象多态基因型分析 G6PD缺乏症