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线粒体神经酰胺酶上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平(英文)

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中国实验血液学杂志 2004年第5期12卷 577-583页

作者：王福旭董作仁刘泽林潘崚罗建民张学军郝洪岭李晓玲杨敬慈姜玲玲河北医科大学第二医院血液科石家庄050000 河北医科大学生物化学教研室石家庄050000

最近 ,克隆了一种新的选择性定位于线粒体的神经酰胺酶 ,提示线粒体存在着神经酰胺代谢途径 ,可能对线粒体的功能 ,特别对凋亡产生影响。本研究将线粒体神经酰胺酶基因转染到K5 6 2细胞 ,以此了解线粒体神经酰胺酶的细胞生物学效应。以... 详细信息

最近 ,克隆了一种新的选择性定位于线粒体的神经酰胺酶 ,提示线粒体存在着神经酰胺代谢途径 ,可能对线粒体的功能 ,特别对凋亡产生影响。本研究将线粒体神经酰胺酶基因转染到K5 6 2细胞 ,以此了解线粒体神经酰胺酶的细胞生物学效应。以脂质体介导将含有线粒体神经酰胺酶cDNA的pcDNA3.1 His CDase质粒转染到K5 6 2细胞 ,G4 18筛选阳性克隆 ,建立稳定表达线粒体神经酰胺酶的K5 6 2TC细胞株。用MTT法、annexinⅤ PI法、FCM及Westernblot分别检测K5 6 2与K5 6 2TC细胞在细胞毒药物抗性、血清剥夺耐受性及Bcl 2蛋白表达水平方面的差异。结果表明 :虽然K5 6 2TC与K5 6 2细胞对阿霉素、足叶乙甙及亚砷酸的敏感性没有差异 ,但是K5 6 2TC细胞Bcl 2蛋白水平明显升高 ,抗血清剥夺能力明显增强。以硫代反义寡核苷酸特异性封闭K5 6 2TC细胞线粒体神经酰胺酶 ,下调Bcl 2蛋白表达水平 ;二甲基鞘氨醇 (鞘氨醇激酶抑制剂 ,降低细胞内 1 磷酸鞘氨醇水平 )同样下调K5 6 2TC细胞Bcl 2蛋白表达水平 ,而 1 磷酸鞘氨醇明显上调K5 6 2细胞Bcl 2表达水平。结论 :线粒体神经酰胺酶将线粒体神经酰胺代谢为鞘氨醇 ,进而在鞘氨醇激酶作用下生成 1 磷酸鞘氨醇 ,此代谢途径上调K5 6 2细胞Bcl 2蛋白表达水平。

关键词： K562细胞系 K562TC细胞系线粒体神经酰胺酶 2-磷酸鞘氨醇 Bcl-2蛋白血清剥夺

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纵隔肿物浆细胞增多

白血病．淋巴瘤 2011年第4期20卷 236-237页

作者：杨洪乐胡蕊李彦会姚丽杨敬慈杨丽妙朱芸河北医科大学第二医院检验科石家庄050000 血液内科实验室

1病历摘要患者，女，46岁。1994年1月查体发现纵隔肿物，在某省级医院行切除术后，病理结果示霍奇金淋巴瘤（HL）结节硬化型。术后以COAP方案化疗4个疗程，好转出院。患者自1994年手术后至2002年多次复发，以COPP、COMP、VP、APEC方案... 详细信息

1病历摘要患者，女，46岁。1994年1月查体发现纵隔肿物，在某省级医院行切除术后，病理结果示霍奇金淋巴瘤（HL）结节硬化型。术后以COAP方案化疗4个疗程，好转出院。患者自1994年手术后至2002年多次复发，以COPP、COMP、VP、APEC方案序贯治疗达完全缓解，间断以COTP、COTVm-26、COPP等方案强化治疗。因患者反复复发，常规化疗效果愈来愈差，

关键词：多发性骨髓瘤浆细胞纵隔肿物

慢性粒细胞性白血病中SHIP基因的表达变化及机制探讨

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慢性粒细胞性白血病中SHIP基因的表达变化及机制探讨

TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226黏附和凋亡的影响及其作用机制的初步探讨

第11次中国实验血液学会议

作者：刘小军罗建民杨琳温树鹏姚丽杜行严杨敬慈董作仁河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科河北医科大学第二医院血液科

＜正＞目的：人类 SHIP 基因位于染色体2q36- q37．1,属肌醇5磷酸酶家族,主要表达在造血细胞。其编码的145KD 的蛋白为一种含有 SH2结构的肌醇磷酸酶,能够选择性地从肌醇-1,3, 4,5-四磷酸和肌醇-3,4,5-三磷酸上去除5′ -磷酸,在免疫受...

＜正＞目的：人类 SHIP 基因位于染色体2q36- q37．1,属肌醇5磷酸酶家族,主要表达在造血细胞。其编码的145KD 的蛋白为一种含有 SH2结构的肌醇磷酸酶,能够选择性地从肌醇-1,3, 4,5-四磷酸和肌醇-3,4,5-三磷酸上去除5′ -磷酸,在免疫受体活化或生长因子的刺激下发生磷酸化。研究显示,SHIP 是调节造血细胞增

关键词：

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中国实验血液学杂志 2010年第1期18卷 96-102页

作者：王福旭赵芳潘崚张学军罗建民杨敬慈姚丽杜行严董作仁河北医科大学第二医院血液科河北石家庄050000 沧州市中心医院血液科河北沧州061001

本研究探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞系RMPI8226的生长抑制作用,对细胞黏附和凋亡的影响及其作用机制。用MTT法检测TRALL对RPMI8226黏附功能和生长的影响;用AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡;流式细胞学检测细胞... 详细信息

本研究探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞系RMPI8226的生长抑制作用,对细胞黏附和凋亡的影响及其作用机制。用MTT法检测TRALL对RPMI8226黏附功能和生长的影响;用AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡;流式细胞学检测细胞表面黏附分子的表达;RT-PCR法测定凋亡相关基因表达水平和Western blot法检测凋亡相关蛋白表达。结果表明:TRAIL抑制RPMI8226细胞生长;可诱导RPMI8226细胞凋亡,并伴有抗凋亡基因Mcl-1、XIAP、cFLIP、CARP1、CARP2和Bcl-2mRNA表达水平下降,促凋亡基因Bax mRNA表达水平升高;RPMI8226细胞内的凋亡执行蛋白caspase-3和NF-κB P65(RelA)表达水平随TRAIL浓度的增加而下降。此外,TRAIL明显上调了RPMI8226细胞表面黏附分子CXCR4的表达。结论TRAIL上调人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞表面的黏附分子CXCR4表达水平。TRAIL可诱导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡。在一定的浓度范围内,TRAIL对人骨髓瘤细胞株RPMI8226的生长抑制呈时间-剂量依赖性。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多发性骨髓瘤 RPMl8226 细胞凋亡黏附骨髓基质细胞

SHIP基因突变对白血病细胞系K562的迁移及侵袭的影响

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SHIP基因突变对白血病细胞系K562的迁移及侵袭的影响

磁性纳米四氧化三铁增强青蒿琥酯诱导的K562细胞凋亡及作用机制研究

第12届全国实验血液学会议

作者：罗建民杨琳刘小军温树鹏姚丽张静宇杨敬慈河北医科大学第二医院血液科河北省血液病重点实验室

＜正＞目的:人类磷脂酰肌醇磷酸酶SHIP（SH2 domaincontaining inositol 5,-phosphatase）基因是继PTEN之后发现的又一个肌醇5’磷酸酶,是造血细胞增殖和生存的重要负调控因子。最近研究表明,SHIP能与CRKL、DOK1和PI3K形成复合物而在抑... 详细信息

＜正＞目的:人类磷脂酰肌醇磷酸酶SHIP（SH2 domaincontaining inositol 5,-phosphatase）基因是继PTEN之后发现的又一个肌醇5’磷酸酶,是造血细胞增殖和生存的重要负调控因子。最近研究表明,SHIP能与CRKL、DOK1和PI3K形成复合物而在抑制白血病细胞的侵袭中发挥重要作用。

关键词：白血病 SHIP基因基因突变细胞迁移侵袭能力

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中国肿瘤临床 2011年第21期38卷 1310-1314页

作者：韩玉祥王颖杨营营杨敬慈郭晓楠张静楠姚丽尚银涛王兴哲王茜潘崚河北医科大学第二医院免疫风湿科石家庄市050000 河北医科大学第二医院血液内科石家庄市050000

目的:本研究旨在观察青蒿琥酯共聚磁性纳米四氧化三铁(MNPs-Fe_3O_4)后,对K562细胞的细胞毒性效应以及是否增加K562细胞的凋亡,了解MNPs-Fe_3O_4是否可以增强青蒿琥酯的活性,并进一步探讨其可能的机制。方法:采用Western印迹检测K562细... 详细信息

目的:本研究旨在观察青蒿琥酯共聚磁性纳米四氧化三铁(MNPs-Fe_3O_4)后,对K562细胞的细胞毒性效应以及是否增加K562细胞的凋亡,了解MNPs-Fe_3O_4是否可以增强青蒿琥酯的活性,并进一步探讨其可能的机制。方法:采用Western印迹检测K562细胞Bcl-2、Bax、Bcl-rambo,激活的Caspase-3和Survivin蛋白的表达,应用MTT法检测青蒿琥酯共聚MNPs-Fe_3O_4后对K562的细胞毒性,用流式细胞仪检测K562细胞的凋亡率。结果:青蒿琥酯可以抑制K562细胞的增殖,当青蒿琥酯共聚MNPs-Fe_3O_4后,对K562细胞的增殖抑制率显著高于单用青蒿琥酯组(P<0.05),同时检测细胞凋亡率也发现,与单用青蒿琥酯组相比,青蒿琥酯共聚MNPs-Fe_3O_4组的细胞凋亡率显著增加,结果提示MNPs-Fe_3O_4可以增强青蒿琥酯的活性。而当加入泛Cas-pase抑制剂Z-VAD-FMK以后,MNPs-Fe_3O_4增强青蒿琥酯诱导细胞死亡的效应则被减弱了。Western印迹显示,青蒿琥酯共聚MNPs-Fe_3O_4组与单用青蒿琥酯组相比,Bcl-2,Bax,Bcl-rambo和Caspase-3蛋白的表达上调,而Survivin蛋白的表达则是下调的。结论:磁性纳米四氧化三铁可以增强青蒿琥酯诱导的K562细胞凋亡,其机制可能与上调Bcl-rambo和下调Survivin蛋白有关。

关键词：青蒿琥酯磁性纳米四氧化三铁 K562细胞凋亡

重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡

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中国实验血液学杂志 2008年第5期16卷 1055-1059页

作者：王雅茹温树鹏王福旭温丽杨渤彦杨敬慈张学军杨世方河北医科大学第二医院血液科中国医学科学院肿瘤医院综合科北京100021 北京沙东生物技术有限公司北京100081

本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲本阿霉素敏感细胞株K562(mdr-1-)为对照,观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化,采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率;碘化丙锭染色的流式细胞术(FACSCalibur)定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub-G1峰占检测细胞的百分比(sub-G1%)。结果表明:rmhTRAIL联合As2O3对K562/AO2和K562增殖的抑制作用优于单药,采用国内金(正均)氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用;流式细胞术定量检测sub-G1%显示,rmhTRAIL2 000ng/ml与As2O32μmol/L单独作用下K562/AO2组与K562组凋亡率分别为(34.93±0.10)%、(10.53±0.16)%(p<0.01);(5.95±0.07)%、(3.50±0.01)%(p<0.05),联合作用下细胞凋亡率分别为(50.95±0.91)%、(20.75±0.95)%(p<0.05),K562/AO2组凋亡效应强于K562组。结论:rmhTRAIL可诱导K562、K562/AO2细胞凋亡;rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562/AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用;rmhTRAIL、As2O3对K562/AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞。

关键词：重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药基因-1 K562 cell K562/AO2 cell 三氧化二砷细胞凋亡

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铅黄铜的切削加工性试验

上海金属.有色分册 1986年第5期 19-26页

作者：陆剑中胡廉杨敬慈上海机械专科学校上海第一铜棒厂

本文在试验的基础上,提出采用刀具耐用度,加工表面粗糙度,切屑形态,切削力及切削温度五项指标来综合评定易切削铅黄铜的切削加工性能。该法较直观,也更易测定。

关键词：切削加工性切削加工性能切削力牌号铅黄铜

胞浆CD79a和其它B系相关抗原在急性白血病细胞表达的比较研究(英文)

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中国实验血液学杂志 2005年第6期13卷 954-958页

作者：张敬宇吕涛杨敬慈潘崚罗建民杨琳姚丽董作仁徐世荣河北医科大学第二医院血液科石家庄050000 河北省消化病研究所石家庄050000

为了比较胞浆CD79a(CyCD79a)与包括胞浆CD22(CyCD22)、CD19、CD20和CD10等其它4种常用B系相关抗原在各种急性白血病细胞上的表达情况并寻找针对急性前体B淋巴细胞白血病(pBALL)的最敏感和特异的免疫学标志,对采用流式细胞术方法检测的22... 详细信息

为了比较胞浆CD79a(CyCD79a)与包括胞浆CD22(CyCD22)、CD19、CD20和CD10等其它4种常用B系相关抗原在各种急性白血病细胞上的表达情况并寻找针对急性前体B淋巴细胞白血病(pBALL)的最敏感和特异的免疫学标志,对采用流式细胞术方法检测的221例成人和儿童急性白血病的免疫表型资料及常规细胞形态学和酶细胞化学染色资料进行了回顾性分析。另外,还对其中的45例急性早幼粒细胞白血病和13例怀疑存在AML1/ETO和CBFβ/MYH11等融合基因的急性髓细胞白血病(AML)进行了细胞遗传学和/或分子生物学检测。结果发现,对于pBALL来说,在这5种常用的B系抗原中,CyCD79a的敏感性最高,而CyCD22的特异性最好。CyCD79a在全部58例pBALL中的表达率为100%,而CyCD22在全部147例AML和15例急性前体T淋巴细胞白血病(pTALL)中则无1例表达,即在非pBALL的急性白血病中的表达率为0%。结论:联合检测CyCD79a和CyCD22是诊断pBALL的最合适的免疫学指标,能够准确地将pBALL与AML和pTALL相鉴别。

关键词：胞浆CD79a 胞浆CD22 CD19 CD20 CD10 急性白血病