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肿瘤内科医师查房手册

变性凝胶电泳和自动DNA序列分析检测结直肠肝转移癌p53基因突变的研究

作者：李黎波

来源：南通市图书馆图书评论

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中华实验外科杂志 2001年第2期18卷 126-128页

作者：杨洋李黎波闻炳基袁玮第一军医大学南方医院肿瘤科实验室广州510515

目的　了解变性梯度凝胶电泳 (DGGE)和自动DNA序列分析方法检测肿瘤基因变异及 p5 3基因、p5 3蛋白在大肠癌发生、转移过程中的动态变化。方法　以DGGE及自动DNA序列分析法检测 41例大肠癌原发病灶和肝转移灶p5 3外显子 5～ 11的基因突... 详细信息

目的　了解变性梯度凝胶电泳 (DGGE)和自动DNA序列分析方法检测肿瘤基因变异及 p5 3基因、p5 3蛋白在大肠癌发生、转移过程中的动态变化。方法　以DGGE及自动DNA序列分析法检测 41例大肠癌原发病灶和肝转移灶p5 3外显子 5～ 11的基因突变。以免疫组织化学方法检测 p5 3蛋白表达。结果　 41例中 2 4例有 p5 3基因突变 (62 % ) ,其中 6例仅在肝转移灶发现p5 3基因突变 ,其余均为原发灶、转移灶有一致性的突变。另有 3例原发灶即有p5 3基因突变的病人 ,在转移灶除保留原有突变外 ,还出现新增加的突变。在原发、转移灶同时有突变的 16例中 ,14例呈现突变的 p5 3碱基峰和正常峰之比在肝转移灶明显高于大肠癌原发灶 (P <0 .0 0 1)。p5 3免疫组织化学染色结果和DGGE、DNA序列分析结果高度一致。但在基因分析呈无义突变的癌灶 ,免疫组织化学显示 p5 3蛋白的过度表达。结论　在大肠癌肝转移过程中 ,p5 3基因突变主要开始于肠癌原发灶 ,并被保持于转移至肝脏的癌细胞内 ,在转移灶其含量或含突变型 p5 3癌细胞量明显增加。p5 3基因突变与 p5 3蛋白过度表达呈正相关关系。DGGE和自动序列分析法只有在于免疫组织化学方法结合使用时。

关键词：变性梯度凝胶电泳基因突变自动DNA序列分析结直肠癌肝转移癌 p53基因肿瘤转移

腺相关病毒载体介导变异体DHFR和GFP融合基因入人外周血干/祖细胞...

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作者：李黎波第一军医大学

学位级别：硕士

目的：在以造血干细胞为靶细胞的基因治疗中，如何将外源基因导入静止状态的造血干细胞中是目前面临的最大障碍之一。人类造血干细胞中的二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达水平不足以对抗氨甲喋呤 (MTX)引起的造血功能抑制1]。以腺相关病... 详细信息

目的：在以造血干细胞为靶细胞的基因治疗中，如何将外源基因导入静止状态的造血干细胞中是目前面临的最大障碍之一。人类造血干细胞中的二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达水平不足以对抗氨甲喋呤 (MTX)引起的造血功能抑制1]。以腺相关病毒(AAV)为载体，将22和 31位置双突变的DHFR(mDHFR)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因导入外周血造血干细胞，达到保护机体造血功能的目的，同时建立一个简便、易行的检测目的基因的体系。方法：构建携带人mDHFR和GFP融合基因的重组腺相关病毒载体 (rAAV/mDHFR-GFP)，经293细胞包装成重组病毒;将重组病毒分别感染 NIH3T3细胞和人外周血来源的CD34细胞，经PCR检测，NIH3T3细胞中含有人mDHFR和GFP cDNA;RT-PCR证实转染后的CD34细胞中含有mDHFR 和GFPmRNA。用MTX加压培养，MTT法显示了人mDHFR在两种细胞中均有表达，转基因组与未转基因组耐药性有一定差异，经流式细胞仪和荧光显微镜观察基因转染率。结果：1．成功用甘氨酸LINKER连接mDHFR和GFP产生相应的融合基因，构建了rAAV/mDHFR-GFP重组载体，并成功表达。***证实腺相关病毒载体可将mDHFR-GFPcDNA导入外周血造血干祖细胞。***-PCR 证实病毒转染后的CD34细胞中有mDHFR和GFPmRNA的存在，表明导入的目的基因在靶细胞内的确切存在。***/mDHFR-GFP重组病毒分别感染NIH3T3细胞和外周血CD34细胞，感染率可高达25％，外周血CD34 细胞中可见绿色荧光蛋白表达。***法证实转基因细胞耐药性较未转基因细胞有一定提高。结论：甘氨酸LINKER将两个不同的基因片段连接成功，腺相关病毒载体可将mDHFR-GFP融合基因成功导入外周血干祖细胞，转入的目的基因在靶细胞中可有效表达，产生相应有功能的物质(包括蛋白质)，使经转染的外周血干祖细胞对MTX的耐药性增强，今后仍需进一步改善AAV 结构、包装系统和基因转染技术，以提高基因转导效率。

关键词：腺相关病毒,绿色荧光蛋白,变异体二氢叶酸还原酶, 基因转染,CD34+细胞,耐药,氨甲蝶呤

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大庆市T县小学教师培训现状的调查研究

大庆市T县小学教师培训现状的调查研究

作者：李黎波东北师范大学

学位级别：硕士

随着经济全球化和科技竞争的不断加剧,各个国家把竞争的焦点放到了人才的竞争上,人才的竞争归根结底是教育的竞争,教育的竞争成败在教师。因此,在世界范围内,教师专业发展和教师职业生涯规划成为一个热门的研究领域,而教师专业发展和教... 详细信息

随着经济全球化和科技竞争的不断加剧,各个国家把竞争的焦点放到了人才的竞争上,人才的竞争归根结底是教育的竞争,教育的竞争成败在教师。因此,在世界范围内,教师专业发展和教师职业生涯规划成为一个热门的研究领域,而教师专业发展和教师职业生涯规划都涉及一个重要的问题,那就是教师培训,传统的“自上而下”的教师培训,因为形式化,走过场,已经不能满足时代的要求,我们需要重新审视教师培训的实效性,切实提高教师的素质。中国现有中小学教师1400万,其中四分之三是农村教师,可以说农村教师是中国基础教育的生力军,农村教师素质如何直接决定着农村教育质量,农村教育质量左右着中国教育质量。教师培训是提高师资队伍质量的有效手段,教师培训低效或是无效,就可能导致教师专业发展缓慢或停滞;如果教师培训达到高效,就可能推动教师专业发展的步伐,本研究专门以农村小学教师为研究对象,采用“自下而上”的方式,以大庆市T县部分农村小学为研究个案,以农村小学教师为研究对象,调查农村小学教师培训现状,通过实证研究获取大庆地区农村小学教师培训真实的统计数据和质性资料,并对这些数据和资料进行细致分析,展现大庆地区农村小学教师培训现状,发现培训存在的不足分析成因,从而有针对性地提出增强大庆地区农村小学教师培训实效性的策略,为大庆地区农村小学教师培训、为后续教育决策,培训方案的制定和实施提供参考。

关键词：农村农村小学教师教师培训

癌性贫血患者血清促红细胞生成素的检测及临床意义

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第一军医大学学报 2003年第9期23卷 954-955页

作者：李黎波罗荣城第一军医大学南方医院肿瘤科广东广州510515

目的反复多次化疗的晚期肿瘤患者的癌性贫血是临床上治疗的难点,通过分析这些患者的血清促红细胞生成素(EPO)的水平,指导临床治疗以提高患者的生存质量。方法对38例癌性贫血患者用ELISA进行血浆EPO的检测。结果24例患者血浆EPO高于正常... 详细信息

目的反复多次化疗的晚期肿瘤患者的癌性贫血是临床上治疗的难点,通过分析这些患者的血清促红细胞生成素(EPO)的水平,指导临床治疗以提高患者的生存质量。方法对38例癌性贫血患者用ELISA进行血浆EPO的检测。结果24例患者血浆EPO高于正常值,仅1例低于正常值。讨论EPO是调节哺乳动物红细胞生成的主要因子,晚期癌性贫血患者的EPO血清水平正常或高于正常,说明机体的自身调整功能强大,对于临床治疗上EPO的应用有重要的指导意义。

关键词：癌性贫血促红细胞生成素检测临床意义治疗

鬼臼噻吩甙和环己亚硝脲对肺癌脑转移的预防作用

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中华肿瘤杂志 1995年第4期17卷 314-315页

作者：李金瀚李黎波康世均广州市第一军医大学南方医院肿瘤科

本研究观察了化疗药物对肺癌脑转移的预防作用。试验组３４例系经病理确诊尚无脑转移的肺癌患者，采用含有鬼臼噻吩甙和环已亚硝脲的联合化疗方案，每４周为一周期，４个周期为一个疗程。观察指标包括临床症状和体征，头颅ＣＴ或ＭＲＩ... 详细信息

本研究观察了化疗药物对肺癌脑转移的预防作用。试验组３４例系经病理确诊尚无脑转移的肺癌患者，采用含有鬼臼噻吩甙和环已亚硝脲的联合化疗方案，每４周为一周期，４个周期为一个疗程。观察指标包括临床症状和体征，头颅ＣＴ或ＭＲＩ检查。随访时间４～１２个月以上。对照组３４例，系经病理确诊尚无脑转移的肺癌患者，作随机抽样对照，所用的联合化疗方案不含鬼臼噻吩甙和环己亚硝脲，其用药周期、疗程、观察指标及随访期限均与试验组相同。结果表明，试验组与对照组脑转移的发生率分别为０．０％和２０．５％（Ｐ＜０．０５）。说明含有鬼臼噻吩甙和环己亚硝脲的联合化疗方案对肺癌脑转移有一定的预防作用。

关键词：肺肿瘤药物疗法脑肿瘤预防鬼臼噻吩甙 CCNU

重组变异体二氢叶酸还原酶和绿色荧光蛋白腺相关病毒载体的构建及外源基因表达

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中国实验血液学杂志 2002年第3期10卷 212-217页

作者：李黎波冯茹周淑芸第一军医大学南方医院肿瘤科广州510515 第一军医大学南方医院血液科广州510515

构建携带变异体二氢叶酸还原酶 (mDHFR)和绿色荧光蛋白 (GFP)融合基因的重组腺相关病毒 (AAV)载体 ,并使其在NIH3T3细胞中表达 ,观察NIH3T3细胞的耐药性变化。先分别扩增mDHFR和GFP基因片段 ,并用甘氨酸接头以PCR的方法将其连接在一起 ... 详细信息

构建携带变异体二氢叶酸还原酶 (mDHFR)和绿色荧光蛋白 (GFP)融合基因的重组腺相关病毒 (AAV)载体 ,并使其在NIH3T3细胞中表达 ,观察NIH3T3细胞的耐药性变化。先分别扩增mDHFR和GFP基因片段 ,并用甘氨酸接头以PCR的方法将其连接在一起 ,插入T载体 ,酶切后插入AAV载体 ,包装成病毒后感染NIH3T3细胞 ,通过PCR、荧光显微镜和流式细胞术对融合基因的表达进行观察。结果 :PCR检测到NIH3T3细胞DNA基因组中mDHFR和GFPcDNA ,荧光显微镜和流式细胞仪观察到绿色荧光蛋白表达的比率约为 2 5 % ,MTT法检测转基因组对MTX的耐药性增强。结论 :AAV载体可以将mDHFR和GFP融合基因导入NIH3T3细胞并成功表达 ,使其对MTX的耐药性增强。

关键词：异体二氢叶酸还原酶绿色荧光蛋白腺相关病毒载体构建基因表达化疗基因治疗

基于国家教师教育课程标准的教育学类课程改革探索

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教育探索 2014年第7期 35-36页

作者：李黎波耿碧雪大庆师范学院教育科学学院黑龙江大庆163712

国家教师教育课程标准的内容可以概括为一条主线,即教师的专业素养,三个理念,即儿童为本、实践取向、终身学习。基于国家教师教育课程标准的教育学类课程改革应确立"教—学—做—评"一体化的课程教学指导思想,重构"教—学—做—评"一体... 详细信息

国家教师教育课程标准的内容可以概括为一条主线,即教师的专业素养,三个理念,即儿童为本、实践取向、终身学习。基于国家教师教育课程标准的教育学类课程改革应确立"教—学—做—评"一体化的课程教学指导思想,重构"教—学—做—评"一体化的课程内容体系,构建"教—学—做—评"一体化的课程实践体系,构建"教—学—做—评"一体化的课程评价体系。

关键词：教师教育课程标准教育学类课程改革

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浅析教师职业生涯规划与教师专业发展

教育探索 2010年第8期 103-104页

作者：李黎波纪国和李国佳大庆师范学院教育科学学院

教师的职业生涯规划可划分为五个阶段。自我评估、环境分析、确定目标、制订计划和措施、学校政策保障是教师制订职业生涯规划的具体策略。教师的专业发展指教师的专业素质即专业知识、专业技能和专业态度的发展。教师职业生涯规划是教... 详细信息

教师的职业生涯规划可划分为五个阶段。自我评估、环境分析、确定目标、制订计划和措施、学校政策保障是教师制订职业生涯规划的具体策略。教师的专业发展指教师的专业素质即专业知识、专业技能和专业态度的发展。教师职业生涯规划是教师专业发展的基础,教师的专业发展要求教师进行职业生涯规划,二者是一种相对同化的过程。

关键词：教师职业生涯规划教师专业发展关系