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心房颤动犬心外膜脂肪来源的外泌体对海马小胶质细胞的作用及其机制

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中国心脏起搏与心电生理杂志 2024年

作者：王学文柯元甲曹真付韫韬程燕妮刘弟世闻郭珂欣李雅佳杨媚赵庆彦武汉大学人民医院心内科武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室湖北医药学院第一临床学院湖北医药学院附属太和医院心血管疾病诊疗中心

目的探讨心房颤动(简称房颤)犬心外膜脂肪组织(EAT)来源的外泌体对海马小胶质细胞的作用及其机制。方法 18只成年雄性比格犬随机分为假手术组、起搏组和GW4869组(每组n=6),假手术组植入起搏器不起搏,起搏组和GW4869组植入起搏器后450次... 详细信息

目的探讨心房颤动(简称房颤)犬心外膜脂肪组织(EAT)来源的外泌体对海马小胶质细胞的作用及其机制。方法 18只成年雄性比格犬随机分为假手术组、起搏组和GW4869组(每组n=6),假手术组植入起搏器不起搏,起搏组和GW4869组植入起搏器后450次/分快速起搏心房2周建立房颤模型,GW4869组起搏的同时静脉注射GW4869(外泌体合成/释放抑制剂,0.3 mg/kg,每日1次)。各组犬左房游离壁EAT局部注射Ad-CD63-RFP示踪外泌体。超速离心法提取EAT的外泌体,通过RNA测序、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外泌体及海马组织的RNA,miRanda数据库预测及荧光素酶报告实验检验miRNA、mRNA之间的靶向关联;蛋白质免疫印迹检验EAT外泌体标志物(CD63、CD81、TSG101);免疫荧光检测EAT和海马组织中Ad-C D6 3-RFP,检测小胶质细胞激活标志物IBA-1。体外实验将小胶质细胞(BV2)分为对照组、模拟物NC组、模拟物组和抑制剂组,使用miRNA模拟物和抑制剂干预BV2,免疫荧光及qRT-PCR检测BV2细胞中的IBA-1及RNA。结果快速心房起搏增加房颤的易感性和EAT外泌体的释放,起搏组Ad-CD6 3-RFP转染EAT的病毒荧光高于假手术组和GW4869组(P<0.001),且GW4869组高于假手术组(P<0.05);蛋白质免疫印迹分析显示起搏组的EAT外泌体标志物(CD63、CD81、TSG101)高于假手术组(P<0.001);起搏组海马Ad-CD6 3-RFP和小胶质细胞激活标志物IBA-1的荧光强度高于假手术组(P<0.001),外泌体抑制剂逆转了外泌体分泌和小胶质细胞激活。RNA测序显示EAT外泌体的差异基因cfa-miR-22e明显上调,其靶基因IL33在海马组织下调。荧光素酶实验结果显示cfa-miR-22e-IL-33 WT组(0.41±0.07,n=5)293T细胞荧光素酶信号明显低于miRNA-NC-IL-33 WT组(1.05±0.10,n=5,P<0.001)和cfa-miR-22e-IL-33 MUT组(1.00±0.10,n=5,P<0.001),提示cfa-miR-22e与IL33存在靶向关系。qRT-PCR结果显示起搏组犬EAT外泌体和海马组织中cfa-miR-22e的水平高于假手术组和GW4869组(P<0.001),且GW4869组高于假手术组(P<0.001)。起搏组犬海马组织中IL-33的水平低于假手术组和GW4869组(P<0.001),GW4869组低于假手术组(P<0.001)。摸拟物组BV2细胞中cfa-miR-22e水平高于对照组、摸拟物NC组和抑制剂组;摸拟物组BV2细胞中IL33水平低于对照组、摸拟物NC组和抑制剂组。结论房颤犬EAT分泌包含cfa-miR-22e的外泌体在海马区分布,通过cfa-miR-22e/IL33信号通路激活海马小胶质细胞。

关键词：心血管病学心房颤动小胶质细胞外泌体心外膜脂肪

M1型巨噬细胞来源的外泌体微小RNA-16-5p对心房肌细胞电生理的影响

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临床内科杂志 2024年第1期41卷 51-55页

作者：程燕妮王学文曹真付韫韬柯元甲郭珂欣李雅佳龙晓建赵庆彦武汉大学人民医院心血管内科、武汉大学心血管病研究所、心血管病湖北省重点实验室武汉430060

目的探讨M1型巨噬细胞来源的外泌体微小RNA(miR)-16-5p对心房肌细胞电生理的影响及可能机制。方法将小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)分为脂多糖(LPS)组(LPS诱导刺激RAW264.7细胞24 h使其分化为M1型巨噬细胞)、miR-16-5p阴性对照(NC)组... 详细信息

目的探讨M1型巨噬细胞来源的外泌体微小RNA(miR)-16-5p对心房肌细胞电生理的影响及可能机制。方法将小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)分为脂多糖(LPS)组(LPS诱导刺激RAW264.7细胞24 h使其分化为M1型巨噬细胞)、miR-16-5p阴性对照(NC)组(将miR-16-5p NC转染RAW264.7细胞后诱导分化)、miR-16-5p模拟物(mimics)组(将miR-16-5p mimics转染RAW264.7细胞后诱导分化)、miR-16-5p抑制物(inhibitor)组(将miR-16-5p inhibitor转染RAW264.7细胞后诱导分化)及LPS+中性鞘磷脂酶抑制剂(GW4869)组(RAW264.7细胞经LPS诱导完成后加入10μM GW4869继续培养)。5组巨噬细胞培养48~72 h后收集上清液,采用超速离心法提取外泌体。采用实时荧光PCR(qRT-PCR)检测转染后巨噬细胞miR-16-5p相对表达水平。将心房肌细胞(HL-1细胞)暴露于快速电刺激(1.0 V/cm, 10 Hz)48 h构建快速起搏诱导的房颤细胞模型,与各组外泌体共培养,心房肌细胞分为A组(起搏HL-1细胞+LPS组外泌体)、B组(起搏HL-1细胞+miR-16-5p NC组外泌体)、C组(起搏HL-1细胞+miR-16-5p mimics组外泌体)、D组(起搏HL-1细胞+miR-16-5p inhibitor组外泌体)、E组(起搏HL-1细胞+LPS+GW4869组外泌体)。采用膜片钳检测各组心房肌细胞动作电位时限[复极化达50%和90%的动作电位时限(APD50、APD90)],采用蛋白质免疫印记法检测5组细胞中磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)表达水平。结果 miR-16-5p mimics组巨噬细胞miR-16-5p相对表达水平高于miR-16-5p NC组(P0.05);C组HL-1细胞APD50和APD90均短于A组(P0.05);C组HL-1细胞PI3K表达水平、p-AKT/AKT均低于A组(P<0.001);D组及E组HL-1细胞PI3K表达水平、p-AKT/AKT均高于A组(P<0.001)。结论 M1型巨噬细胞来源的外泌体miR-16-5p可缩短心房肌细胞动作电位时限,可能与抑制PI3K/AKT通路有关。

关键词：心房颤动巨噬细胞外泌体动作电位电重构

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嘉峪关市食品安全监管执行能力提升研究

嘉峪关市食品安全监管执行能力提升研究

作者：李雅佳兰州大学

学位级别：硕士

自古以来,食品安全始终关系到人民的生活和身心健康。目前,学者对食品安全监管的研究多集中在法学、经济学和公共管理学视角,但在执行力视角下对于食品安全监管进行的研究较少。在实践层面,随着机构改革和放管服的推行,中国市场监管领... 详细信息

自古以来,食品安全始终关系到人民的生活和身心健康。目前,学者对食品安全监管的研究多集中在法学、经济学和公共管理学视角,但在执行力视角下对于食品安全监管进行的研究较少。在实践层面,随着机构改革和放管服的推行,中国市场监管领域的监管机制进入了“双随机,一公开”阶段,其中食品安全监管的重点也从事前转向了事中和事后。在这个政策背景下,食品安全监管能力成为制约监管质量,保障人民生活健康的重中之重。本文以嘉峪关市食品安全监管执行能力为研究对象,在归纳和界定食品安全、食品安全监管、政府执行能力等相关的概念的基础上,使用公共政策执行力理论和组织理论,以界定公共政策执行力的主要影响因素为前提,结合食品安全监管实践和现状,从主体业务能力、资源管理能力、组织构建能力、关系整合能力四个分析维度分析了嘉峪关市食品安全监管执行能力存在的问题,分别是:主体业务能力方面存在指导办法不统一、监管执行人员业务能力不足的问题;执行资源管理能力方面存在人力资源不足、执行资源尚未有效整合的问题;组织建构能力方面存在部门责任界限模糊、基层市场监管所工作任务重的问题;关系整合能力方面存在部门之间信息整合存在壁垒、公众认识不到位的问题,同时分析了存在问题的原因。最后结合山东烟台、浙江桐乡和深圳的做法,探索提升食品安全监管执行能力的有效途径:通过提升协调能力和调整人员比例充实基层强化执行主体业务能力;通过强化专业人才培训工作和加大经费投入来高效使用监管执行资源;通过厘清职责分工和建立联动机制优化组织建构能力;通过整合打造互联网+智慧监管平台和推动共享共治增强关系整合能力。希望通过本文对食品安全监管执行能力的相关研究,能够为进一步提升食品安全监管能力提供一些思路。

关键词：食品安全监管监管执行能力政策执行力

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基于实物期权视角的无形资产价值评估研究

基于实物期权视角的无形资产价值评估研究

作者：李雅佳河北大学

学位级别：硕士

伴随着经济全球化与知识经济时代的加速到来，生产要素之间的比重以及对经济贡献的大小发生着显著而深刻的变化。其中，无形资产在企业或非企业性质组织团体中相对于其他类型的资产的比重有了巨大的提升。但是，由于无形资产本身的无形... 详细信息

伴随着经济全球化与知识经济时代的加速到来，生产要素之间的比重以及对经济贡献的大小发生着显著而深刻的变化。其中，无形资产在企业或非企业性质组织团体中相对于其他类型的资产的比重有了巨大的提升。但是，由于无形资产本身的无形性、成本弱对应性等特点，使得如何对无形资产价值做出科学合理的评估形成了一定难度。能否对无形资产价值做出可靠的评价，不仅关系到当事各方的自身利益，也会对整个社会经济的正常运行产生重大影响。在当前的评估界中，主要有三种评估方法，即成本法、市场法、收益法。这些方法应用于无形资产价值评估时存在一个共同的缺点，那就是忽视了无形资产在不确定性环境中所具有的灵活性与经营柔性，从而或多或少低估无形资产所具有的价值。实物期权作为一种较新的评估工具，可以使无形资产拥有者根据具体的市场行情、行业机会以及自身发展战略需要做出执行、扩大、收缩甚至放弃的选择性决策。这就为合理确定本身具有高度不确定性的无形资产价值提供了可能。本文从一个全新视角对无形资产价值的确定进行了研究，即基于实物期权视角的无形资产价值评估研究。首先，本文阐述了此课题研究的背景、目的及意义;其次，对无形资产的概念、特征、分类及传统评估方法的优点、缺点进行了分类阐述;然后介绍了实物期权定价理论，包括Black-Scholes定价模型和二叉树模型;随后是通过两个案例来展示期权定价模型在具体的无形资产评估项目上的应用价值;最后是对实物期权定价理论在无形资产评估应用上的总结归纳，并提出了在今后研究工作上的设想。

关键词：无形资产实物期权价值评估

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A保险公司运营管理部绩效考核优化研究

A保险公司运营管理部绩效考核优化研究

作者：李雅佳天津财经大学

学位级别：硕士

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武警部队组织开展资产清查工作 001

NaCl胁迫对黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响

人民武警报

作者：李善记李雅佳

本报讯李善记、李雅佳报道:近日，武警部队下发《关于组织开展资产清查工作的通知》，部署在全部队开展资产清查活动。清查工作贯彻军委、总部关于加强部队资产管理、保证资产安全完整的指示要求，以军队和武警部队有关政策法规为依据...

本报讯李善记、李雅佳报道:近日，武警部队下发《关于组织开展资产清查工作的通知》，部署在全部队开展资产清查活动。清查工作贯彻军委、总部关于加强部队资产管理、保证资产安全完整的指示要求，以军队和武警部队有关政策法规为依据，遵循全面彻底、完整准确、责任可溯的原则

关键词：

来源： cnki报纸评论

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甘肃农业大学学报 2004年第1期39卷 6-9,17页

作者：杨秀玲郁继华李雅佳李建建张韵甘肃农业大学园艺系甘肃兰州730070

NaCl胁迫对黄瓜种子萌发及幼苗生长影响的试验结果表明:NaCl溶液浓度低于50 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽率影响较小,而NaCl溶液浓度高于75 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽有不同程度的抑制作用;黄瓜种子α-淀粉酶活性、幼苗地上部和根部鲜重... 详细信息

NaCl胁迫对黄瓜种子萌发及幼苗生长影响的试验结果表明:NaCl溶液浓度低于50 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽率影响较小,而NaCl溶液浓度高于75 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽有不同程度的抑制作用;黄瓜种子α-淀粉酶活性、幼苗地上部和根部鲜重以及根冠比(R/T)随着NaCl溶液浓度的增高,均表现为下降。幼苗叶片的过氧化物酶(POD)活性呈现先升后降趋势;丙二醛(MDA)含量在低浓度下缓慢上升,而在高浓度下急剧上升;NaCl溶液浓度低于50 mmol/L时,幼苗根系活力急剧下降,而高于此浓度时缓慢下降。

关键词： NaCl胁迫黄瓜种子萌发幼苗生长

互联网审核员何以成为“幽灵劳动”？——一项关于平台审核员的劳动规训研究

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中国青年研究 2024年第2期 102-110+119页

作者：李雅莹北京外国语大学国际新闻与传播学院

审核员控制着互联网的信息流，在数字社会扮演着把关人的重要角色却不为人知，探究他们的劳动现状成为重要议题。本文通过参与式观察与深度访谈，对Y平台互联网审核员的劳动规训进行探究。沿着福柯的规训理论，研究发现平台通过监视、... 详细信息

审核员控制着互联网的信息流，在数字社会扮演着把关人的重要角色却不为人知，探究他们的劳动现状成为重要议题。本文通过参与式观察与深度访谈，对Y平台互联网审核员的劳动规训进行探究。沿着福柯的规训理论，研究发现平台通过监视、操练与检查仪式对审核员进行劳动规训，实现了真正意义上的全景监狱；“公平游戏”“大厂神话”实现了对审核员的软性规训；激烈竞争则迫使审核员被动接受规训。最后本文通过对审核员劳动的分析，回答了互联网审核员何以成为“幽灵劳动”这一问题。

关键词：审核员劳动规训平台 “幽灵劳动”

三维电子显微镜和单分子追踪技术揭示内质网和线粒体接触部位的动态变化

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Science Bulletin 2024年第11期69卷 1604-1606页

作者：李雅文佟超 MOE Key Laboratory for Biosystems Homeostasis&Protection and Innovation Center for Cell Signaling Network Life Sciences InstituteZhejiang UniversityHangzhou 310058China The Second Afﬁliated Hospital School of MedicineZhejiang UniversityHangzhou 310009China

Mammalian cells are highly compartmented. Different organelles fulfill diverse cellular functions at the same time coordinate with each other through the exchange of materials and information. Physical contacts play p... 详细信息

关键词：电子显微镜单分子追踪技术接触部位