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节杆菌产β-半乳糖苷酶分离纯化及动力学参数分析

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节杆菌产β-半乳糖苷酶分离纯化及动力学参数分析

作者：李珍爱江南大学

学位级别：硕士

β-半乳糖苷酶（EC3.***.1.23）是一种无毒无副作用的生物酶制剂,既能水解乳糖生成葡萄糖和半乳糖,解决在约占世界十分之一的人群中存在的乳糖不耐症问题;还能催化转移半乳糖苷反应,制备功能性低聚半乳糖和具有临床治疗功能的乳果糖。 ... 详细信息

β-半乳糖苷酶（EC3.***.1.23）是一种无毒无副作用的生物酶制剂,既能水解乳糖生成葡萄糖和半乳糖,解决在约占世界十分之一的人群中存在的乳糖不耐症问题;还能催化转移半乳糖苷反应,制备功能性低聚半乳糖和具有临床治疗功能的乳果糖。本实验室分离得到一株产p-半乳糖苷酶的节杆菌,该p-半乳糖苷酶同时具有水解与转苷活性,本研究以分离纯化该酶并研究其酶学性质为目的。以乳糖发酵培养基培养节杆菌,离心收集菌体,超声破碎细胞得到粗酶液;采用硫酸铵沉淀、Phenyl-Sepharose疏水、DEAE-Sepharose离子交换和p-aminobenzyl-l-thio-β-D-galactopyranoside（PABTG）亲和层析方法进行酶的分离纯化,纯化倍数达到31.4,经SDS-PAGE检测分子量为30kD。以邻硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷（ONPG）为底物,研究纯化后p-半乳糖苷酶的酶学性质,结果表明：该酶最适pH值为6.6,最适反应温度为37℃,pH在6.0-8.0范围内稳定性较好,相对酶活均在80%以上,温度低于30℃时,相对酶活在1h内保持在50%以上。Mg2+、Mn2+、Co2+、K+对酶有显著的激活作用,Cu2+、Ag+则有明显的抑制作用。添加金属离子可以提高酶的热稳定性,尤其是1 mmol/L的Mn2+,使酶在45℃时保持60 mmin酶活几乎没有损失。以ONPG为底物时测得β-半乳糖苷酶的米氏常数为4.64mmol/L,最大反应速率为0.919μmol/min。以乳糖为底物,研究纯化后p-半乳糖苷酶的水解能力,并通过高效液相色谱法（HPLC）分析产物中葡萄糖的含量,结果显示水解乳糖的最适条件：乳糖浓度为3%,反应温度为30℃,反应时间为6-8h,pH在6.5-7.0时反应速率达到最大。本文还研究了p-半乳糖苷酶的转半乳糖苷性质,以果糖为转苷受体,采用高效液相色谱法测定酶反应产物中乳果糖的含量,进而分析该酶的转苷活性,结果表明：转苷的最适温度为20℃,最适pH为6.0。

关键词：节杆菌 β-半乳糖苷酶分离纯化酶学性质乳糖乳果糖

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四氢嘧啶溶析结晶工艺的研究

现代化工 2022年第11期42卷 207-210页

作者：李珍爱李海军胡红涛张英华郑德强唐双焱山东福瑞达生物科技有限公司山东临沂276700 山东福瑞达医药集团有限公司山东济南250000 山东省药学科学院山东济南250000 中国科学院微生物研究所中国科学院微生物生理与代谢工程重点实验室北京100101

为提高四氢嘧啶的结晶收率,提出了有机试剂溶析结晶四氢嘧啶浓缩液方案,考察了溶析剂的选择、料液浓度、溶析剂的添加量及搅拌速率对收率的影响。结果表明,利用6倍料液体积的丙酮从300 g/L的四氢嘧啶浓缩液中溶析结晶出晶体,搅拌速率为3... 详细信息

为提高四氢嘧啶的结晶收率,提出了有机试剂溶析结晶四氢嘧啶浓缩液方案,考察了溶析剂的选择、料液浓度、溶析剂的添加量及搅拌速率对收率的影响。结果表明,利用6倍料液体积的丙酮从300 g/L的四氢嘧啶浓缩液中溶析结晶出晶体,搅拌速率为300 r/min,一次结晶收率可达到94%以上,相比降温结晶提高40%以上,且晶体经重结晶、干燥后纯度可达99%以上。

关键词：四氢嘧啶有机试剂丙酮结晶干燥

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加强医院人才管理

基层医学论坛 2002年第4期6卷 1-2页

作者：李珍爱 030001 山西省卫生厅职改办

我国医院正在缓慢而坚定地改变着某些原有的静态面貌,而向着一个亓放的体系迈进.医院人事部门要做到及时为医院的各项活动提供适合的人才,必须把岗位管理置于首要位置.一方面,严格把关,不让不合格人员进入医疗队伍;另一方面,依据医院当... 详细信息

我国医院正在缓慢而坚定地改变着某些原有的静态面貌,而向着一个亓放的体系迈进.医院人事部门要做到及时为医院的各项活动提供适合的人才,必须把岗位管理置于首要位置.一方面,严格把关,不让不合格人员进入医疗队伍;另一方面,依据医院当前和长远的发展目标,充分考虑社会大环境的发展趋势和医院自身的实际.从社会人群的需求、医学模式及疾病谱的转变出发,对每个岗位的工作进行分析和组织设计,找出关键岗位、朝阳岗位以及待开发岗位,根据组织设计和分析结果来引进,储备人才.

关键词：医院人事部门关键岗位组织设计设计和分析医学模式医疗队伍储备人才合格人员岗位管理发展趋势疾病谱大环境转变位置体系人群目标开发活动朝阳

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asnH过表达对乳酸链球菌素发酵的影响

食品工业 2023年第3期44卷 154-158页

作者：王超张英华张杰李珍爱李海军山东福瑞达生物科技有限公司临沂276700 山东福瑞达医药集团公司济南250101 山东省药学科学院济南250101

现代发酵制品工业的蓬勃发展,合成生物学技术在菌株改造过程中得到广泛的应用。从乳酸链球菌中克隆获得asnH基因,通过同源重组的方法构建重组质粒pMG36e-asnH并电转到乳酸链球菌中,经筛选得到1株阳性克隆,在摇瓶培养条件下,通过单因素... 详细信息

现代发酵制品工业的蓬勃发展,合成生物学技术在菌株改造过程中得到广泛的应用。从乳酸链球菌中克隆获得asnH基因,通过同源重组的方法构建重组质粒pMG36e-asnH并电转到乳酸链球菌中,经筛选得到1株阳性克隆,在摇瓶培养条件下,通过单因素研究和响应面法优化了重组菌的发酵培养基和培养条件。与原始菌株相比,重组的乳酸链球菌中asnH的过表达导致重组菌株在低pH (pH 4)时的存活能力增加了2.5倍,增强了乳酸链球菌发酵产生乳酸链球菌素的能力,发酵16 h效价达到7 216 IU/mL,比原始菌株提高了27.2%。强化asnH基因的表达能够提高乳酸链球菌的耐酸性以及提高乳酸链球菌素的产量。

关键词：乳酸链球菌素 asnH 克隆发酵优化

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干预主义与随附性

科学技术哲学研究 2024年第3期41卷 48-54页

作者：李珍中山大学马克思主义学院广州510275

部分学者认为,随附性会对因果关系的干预主义理论产生不可避免的多层次混淆问题,以至于我们必须在干预主义和随附性之间做出选择。针对这个问题,学界目前有四种解决方案:可固定性条件的豁免方案、因果图方案、应用范围的限定方案和合比... 详细信息

部分学者认为,随附性会对因果关系的干预主义理论产生不可避免的多层次混淆问题,以至于我们必须在干预主义和随附性之间做出选择。针对这个问题,学界目前有四种解决方案:可固定性条件的豁免方案、因果图方案、应用范围的限定方案和合比例性约束方案,其中,合比例性约束方案最为合理,其他方案都需要付出一定的理论成本。随附性是一种“表面”关系,不论在哲学还是科学上,它与因果关系都是难以区分的,因此,随附关系应与因果关系一样被视为可能的混杂因素,干预的可固定性条件无需豁免,混淆问题并不是一个真问题。

关键词：干预主义随附性因果关系可固定性多层次

在思想与行动之间:脑机接口行动及其心身之辩

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上海师范大学学报（哲学社会科学版） 2024年第3期53卷 33-40页

作者：李珍中山大学马克思主义学院广东广州510275

脑机接口的出现革新了人类的行动方式——以思行事,这为传统的行动理论带来了挑战。一种观点认为,脑机接口行动并非身体行动,而是具有外部结果的心理行动;另一种观点则认为,触发脑机接口行动的直接原因并非行动体的意向状态,而是其想象... 详细信息

脑机接口的出现革新了人类的行动方式——以思行事,这为传统的行动理论带来了挑战。一种观点认为,脑机接口行动并非身体行动,而是具有外部结果的心理行动;另一种观点则认为,触发脑机接口行动的直接原因并非行动体的意向状态,而是其想象力或注意力。这些观点均与标准的行动理论相悖,因此,行动理论亟待修正。实际上,这些矛盾源于对心身概念及其关系的误解,其后果是掉入二元论陷阱。将脑机接口行动视作身体行动相较于心理行动更为贴切,未来的脑机接口技术若能充分提升用户的感觉反馈,它便有望成为一种高度具身化的技术。人们无须构建全新的行动理论以适应脑机接口,只需对现有的行动理论进行合理阐释与拓展。

关键词：脑机接口行动因果理论具身性身体行动心理行动

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“劳动创造了人本身”新论

广东社会科学 2024年第1期 70-77页

作者：李珍中山大学马克思主义学院广州510275

自20世纪80年代以来,恩格斯“劳动创造了人本身”命题在学界引发了激烈而持久的争论。现代达尔文主义的相关理论表明,该命题从生物学、社会学、哲学等多学科角度揭示了劳动在人类产生过程中的作用,在一定程度上弥补了达尔文的生物进化... 详细信息

自20世纪80年代以来,恩格斯“劳动创造了人本身”命题在学界引发了激烈而持久的争论。现代达尔文主义的相关理论表明,该命题从生物学、社会学、哲学等多学科角度揭示了劳动在人类产生过程中的作用,在一定程度上弥补了达尔文的生物进化论仅从生物学角度解释人类起源的不足。恩格斯对劳动的工具规定性的论述强调了劳动主体的创造性和劳动本身的生产性特征,从而将人的劳动与一般动物的本能活动区分开,这一观点被当代古生物学和认知科学不断验证。此外,近年来表观遗传学的发展为获得性遗传学说提供了新的证据,也为作为该命题生物学基础的拉马克主义与达尔文主义之争提供了新的理论资源。

关键词：劳动人人类起源生物进化科学性

弱电网下并网变流器相位裕度的分频段补偿方法

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中国电机工程学报 2024年第4期44卷 1565-1575,I0026页

作者：唐欣何洋李珍李晓萌长沙理工大学电气与信息工程学院湖南省长沙市410114

在弱电网条件下,针对并网变流器各控制环节与电网阻抗之间交互作用,容易引发系统振荡而造成失稳问题,文中提出一种分频段相位补偿控制策略。首先,建立dq坐标下的并网变流器输出导纳矩阵模型,针对在低频段由锁相环引起的变流器输出导纳... 详细信息

在弱电网条件下,针对并网变流器各控制环节与电网阻抗之间交互作用,容易引发系统振荡而造成失稳问题,文中提出一种分频段相位补偿控制策略。首先,建立dq坐标下的并网变流器输出导纳矩阵模型,针对在低频段由锁相环引起的变流器输出导纳的负阻尼特性,不改变锁相环动态特性而通过分析锁相环对控制系统的影响路径,加入含积分元素的补偿矩阵抵消锁相环的负阻尼影响,同时简化导纳模型;进而,引入仅含常数元素的补偿矩阵实现超前校正,对电流环带宽外的负阻尼进行相位补偿,使导纳矩阵元素在全频段为正实部,为并网控制系统提供正阻尼,从而增强并网变流器的稳定性。最后,通过仿真和实验在不同短路比条件下对文中提出的补偿方案进行验证,证明所提方案的有效性。

关键词：并网变流器导纳矩阵模型锁相环相位补偿稳定性

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论大病保险回归基本医疗保险的历史必然性

社会保障评论 2024年第2期8卷 74-88页

作者：李珍武汉大学政治与公共管理学院

2009年内生于新农合的高额费用保障政策,于2012年演变为与基本医保分离的城乡居民大病保险制度(下称大病保险)。尽管目标和资金来源与基本医保相同,却交由商业保险公司承办,并最终将大病保险定位于与职工相互保险相对应的补充层次,形成... 详细信息

2009年内生于新农合的高额费用保障政策,于2012年演变为与基本医保分离的城乡居民大病保险制度(下称大病保险)。尽管目标和资金来源与基本医保相同,却交由商业保险公司承办,并最终将大病保险定位于与职工相互保险相对应的补充层次,形成了“同一筹资两个制度层次”的结构。本文分析了将居民基本医保一分为二的大病保险在理论逻辑和实践中不可解的困境,指出大病保险在公平和效率两方面都会产生损失,与社会保险的价值观及大病保险制度安排的愿望相悖。本文指出“有限政府、有效市场”在医疗保险领域的局限性,认为现阶段内生于基本医保制度的高额费用保障政策是必要的,但基于公平统一、高效医保的要求,大病保险回归基本医保制度是理论逻辑和历史的必然。

关键词：城乡居民基本医保大病保险大病医疗保障政策公平医保费率制以支定收