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Nrf2、HO-1在糖尿病大鼠视网膜中的表达及tBHQ干预研究

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Nrf2、HO-1在糖尿病大鼠视网膜中的表达及tBHQ干预研究

作者：李晶艳四川医科大学

学位级别：硕士

目的糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病的一种常见微血管并发症,是一种神经血管性疾病,氧化应激学说是DR主要发病机制之一。高血糖或糖尿病(diabetes mellitus,DM)时氧化应激反应将增强并导致视网膜组织损伤。Nrf2/... 详细信息

目的糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病的一种常见微血管并发症,是一种神经血管性疾病,氧化应激学说是DR主要发病机制之一。高血糖或糖尿病(diabetes mellitus,DM)时氧化应激反应将增强并导致视网膜组织损伤。Nrf2/ARE信号通路是非常重要的内源性抗氧化应激通路,当活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)或亲电试剂刺激核因子EF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)时,Nrf2转移入核内,识别并结合抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE),启动血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)等下游抗氧化基因蛋白的转录,增强细胞抗氧化能力,减轻氧化应激损伤,从而保护视网膜。本实验通过采用高脂高糖饮食结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(strepptozotocin,STZ)的方法制备2型糖尿病大鼠模型,研究叔丁基对苯二酚(tert-butyl hydroquinone,t BHQ)对2型糖尿病大鼠视网膜不同时间节点Nrf2/ARE信号通路表达的影响,探讨t BHQ对视网膜是否具有保护作用及其机制,以期为DR防治提供理论依据。方法选取体重在18000g的4w龄SD雄性大鼠60只,适应性喂养1w后,随机分成正常对照组(NC组,n=20)和造模组(n=40),NC组给与基础饲料喂养,造模组给予高脂高糖饲料喂养,1月后待造模组大鼠空腹12h之后给与腹腔注射30mg/kg的小剂量stz建立2型糖尿病大鼠模型(7d后尾部采血测定空腹血糖浓度若大于16.7mmol/l说明建立模型成功),nc组予以相同体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液腹腔注射作为对照。造模成功者,随机分成糖尿病组(dm组)、药物干预组(tbhq组)。tbhq组于成模后1w使用添加1%tbhq的高脂高糖饲料喂养,而nc组、dm组饲养方法不变。tbhq干预的第4w、第12w末时,检测各组大鼠体重,心脏穿刺采血测定其血糖、血脂水平。取大鼠眼球,部分用于he染色观察视网膜组织结构的改变及免疫组化检测nrf-2、ho-1蛋白在视网膜组织中的分布,剩余眼球视网膜组织用于荧光定量pcr检测nrf-2、ho-1mrna在视网膜组织中的表达。结果1、35只大鼠成功建立了2型糖尿病大鼠模型,成模率为87.5%。2、一般情况:dm组、tbhq组大鼠逐渐出现体重减轻、精神萎靡、反应迟钝、多食、多尿、多饮等症状,tbhq组上述情况较dm组轻,接近于nc组。nc组大鼠体重正常、精神佳、饮食饮水正常。3、生化指标与nc组相比,4w与12wdm组血糖明显升高,差异有统计学意义(t=3.015,2.977,p=0.000,0.000,均p<0.01);与nc组相比,4w与12wtbhq组血糖明显升高,差异有统计学意义(t=5.915,5.018,p=0.000,0.000,均p<0.01);与12wdm组相比,12wtbhq组的血糖下降,差异有统计学意义(t=3.415,p=0.002,p<0.01);与nc组相比,4w与12wdm组总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl)升高,差异有统计学意义(ftc=65.641,ftg=63.415,fldl=61.241,p=0.01,0.01,0.01,均p<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(hdl)降低(fhdl=58.317,p=0.02,p<0.05)。与nc组相比,4w与12wtbhq组总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl)升高(ftc=48.810,ftg=51.443,fldl=53.127,p=0.03,0.02,0.02,均p<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(hdl)降低(f=49.312,p=0.03,p<0.05)。4、组织学变化:he染色显示,4wnc组大鼠视网膜组织结构清晰,未见明显病理改变;dm组大鼠视网膜细胞排列稍紊乱,内外核层稍融合,出现不同程度细胞水肿的现象;tbhq组大鼠视网膜细胞排列较整齐,个别细胞可见轻度水肿。12wnc组大鼠视网膜组织he染色显示视网膜各层结构基本正常,排列基本整齐,余未见明显病理变化;dm组大鼠视网膜组织结构排列疏松,内、外核层排列紊乱,细胞水肿现象明显;tbhq组大鼠视网膜组织结构较清晰,部分细胞水肿,余未见明显异常。5、免疫组织化学结果:与nc组比较,4wdm组大鼠视网膜组织中nrf2、ho-1蛋白表达增多(tnrf2=3.115,pnrf2=0.002,pnrf2<0.01;tho-1=3.485,pho-1=0.000,pho-1<0.01),4wtbhq组

关键词：糖尿病性视网膜病变氧化应激叔丁基对苯二酚核因子E2相关因子2 血红素氧和酶1

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试论新时代高校党课教学主体的多样化

国家通用语言文字教学与研究 2023年第8期 112-114页

作者：李晶艳山西国际商务职业学院思政部

高校党课教学是实施习近平新时代中国特色社会主义思想教育的重要平台,是培育和践行社会主义核心价值观的重要载体,是引导广大青年学生坚定理想信念、增强政治素养、担当历史使命的重要途径。新时代高校党课教学主体应包括思政课教师、... 详细信息

高校党课教学是实施习近平新时代中国特色社会主义思想教育的重要平台,是培育和践行社会主义核心价值观的重要载体,是引导广大青年学生坚定理想信念、增强政治素养、担当历史使命的重要途径。新时代高校党课教学主体应包括思政课教师、专兼职党务工作者、党员领导干部、优秀党员学生等多元主体,这有利于发挥各主体的优势,增强党课的吸引力和感染力,提升党课的针对性和实效性。对此,在分析新时代党课教学主体要求的基础上,探讨思政课教师、专兼职党务工作者、党员领导干部、优秀党员学生四大主体在高校党课教学中的地位和作用,以期不断发展壮大党课教师队伍建设。

关键词：新时代高校党课

金因肽加雷弗奴尔、庆大霉素治疗急性放射性皮炎的效果及护理

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医学文选 2003年第5期22卷 762-763页

作者：李晶艳广西壮族自治区人民医院输液室南宁530021

急性放射性皮炎是肿瘤放疗中最常见的皮肤损伤,传统治疗方法创面恢复较为缓慢.2001年1月～2002年5月我院采用金因肽加雷弗奴尔、庆大霉素治疗急性Ⅱ度放射性皮炎32例,并与同期用传统方法治疗13例进行比较,取得了满意的治疗效果,现介绍如下:

关键词：金因肽雷弗奴尔庆大霉素急性放射性皮炎护理肿瘤放疗

网络“圈层化”对高校思想政治教育的挑战与对策

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江西电力职业技术学院学报 2023年第12期36卷 103-105页

作者：李晶艳山西国际商务职业学院山西太原030031

网络“圈层化”现象在高校中日益显著,其定义和特征包括“信息孤岛”效应、思想多元化、网络舆论的影响。网络“圈层化”现象给高校思想政治教育带来了新的挑战,包括价值观分歧、认知固化和情感认同。基于此,概述了网络“圈层化”的概... 详细信息

网络“圈层化”现象在高校中日益显著,其定义和特征包括“信息孤岛”效应、思想多元化、网络舆论的影响。网络“圈层化”现象给高校思想政治教育带来了新的挑战,包括价值观分歧、认知固化和情感认同。基于此,概述了网络“圈层化”的概念与特征,分析了网络“圈层化”对高校思想政治教育的挑战,提出了网络“圈层化”下高校思想政治教育的策略,包括整合不同价值观以促进思想交流、提升信息素养以避免“信息孤岛”、培养批判性思维以抵御网络舆论影响、融合线上线下教育资源以拓宽教育渠道。

关键词：网络“圈层化” 思想政治教育网络舆论

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基于角色转变下的女研究生就业机制新探

学理论 2011年第6期 101-102页

作者：李晶艳杭州师范大学政治经济学院

随着现代社会不断发展,女性由传统角色向现代角色不断发生转变,社会将从更开放的视角看待女性。然而由于近年来研究生不断扩招,导致高校就业压力剧增,女研究生虽然拥有高学历,但各种原因使其就业成为"难上难"。本文将从女性角色转变的... 详细信息

随着现代社会不断发展,女性由传统角色向现代角色不断发生转变,社会将从更开放的视角看待女性。然而由于近年来研究生不断扩招,导致高校就业压力剧增,女研究生虽然拥有高学历,但各种原因使其就业成为"难上难"。本文将从女性角色转变的角度来探究女研究生就业机制,以求为广大女研究生提供借鉴。

关键词：角色转变女研究生就业机制

糖尿病早期视网膜神经元退行性病变最新研究进展

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眼科新进展 2015年第5期35卷 493-496页

作者：李晶艳周琦吕红彬泸州医学院附属医院眼科四川省泸州市646000

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)在早期被认为是一种微血管性疾病,多年来关于DR发病机制的研究主要集中在血管特征的改变上,包括血管渗透性的增加、新生血管的形成和黄斑水肿等。近年大量的视网膜电生理检查发现在糖尿病早... 详细信息

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)在早期被认为是一种微血管性疾病,多年来关于DR发病机制的研究主要集中在血管特征的改变上,包括血管渗透性的增加、新生血管的形成和黄斑水肿等。近年大量的视网膜电生理检查发现在糖尿病早期视网膜微血管发生损害前,视网膜神经元即发生一系列病理改变,提示DR是一种神经血管性疾病,这也可以解释DR患者很快发生的视功能减退。现将国内外关于糖尿病早期视网膜神经元退行性病变的最新研究进展作一综述,以期发现有效的视网膜神经元保护策略,从而减缓DR的进程。

关键词：糖尿病视网膜病变神经元退行性病变兴奋性毒性代谢产物氧化应激神经元保护

叔丁基对苯二酚对2型糖尿病大鼠视网膜细胞的保护作用及其机制

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中华实验眼科杂志 2016年第6期34卷 496-502页

作者：韩佩晏张思远李晶艳黄棋田敏吕红彬西南医科大学附属第一医院眼科泸州646000

背景细胞凋亡是糖尿病视网膜病变（DR）中的重要机制之一,氧化应激、高糖等可启动细胞凋亡通路,从而造成细胞损伤.叔丁基对苯二酚（tBHQ）是一种抗氧化应激药物,但其在DR的发生和发展过程中是否发挥视网膜细胞的保护作用尚不明确. 目的... 详细信息

背景细胞凋亡是糖尿病视网膜病变（DR）中的重要机制之一,氧化应激、高糖等可启动细胞凋亡通路,从而造成细胞损伤.叔丁基对苯二酚（tBHQ）是一种抗氧化应激药物,但其在DR的发生和发展过程中是否发挥视网膜细胞的保护作用尚不明确. 目的观察tBHQ对2型糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子（VEGF）及Bcl-2表达的影响,探讨tBHQ通过核因子-E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路对2型糖尿病大鼠视网膜可能的保护机制.方法选取50只清洁级健康雄性SD大鼠.应用随机数字表法随机选取其中10只大鼠为正常对照组,以正常饲料喂养;其余40只大鼠采用高脂高糖饲料喂养4周后空腹12h,然后大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病模型.造模成功大鼠均衡分组,模型对照组大鼠继续给予高脂高糖饮食,tBHQ干预组大鼠于造模后1周在高脂高糖饲料中添加质量分数1％ tBHQ进行干预,各组大鼠分别于造模后4周和12周收集大鼠心脏全血,检测各组大鼠空腹血糖（FPG）,血浆总胆固醇（TC）、总三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量;采用放射免疫分析法检测各组大鼠空腹血清胰岛素（FINs）含量.采用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜中VEGF、bcl-2蛋白的表达分布;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法定量检测各组大鼠视网膜中Bcl-2 mRNA和VEGF mRNA的相对表达量. 结果 35只大鼠成功建立2型糖尿病模型.各组大鼠造模后不同时间点FINs含量总体比较差异均有统计学意义（F分组=22.480,P=0.000;F时间=7.636,P=0.008）.各组间大鼠血浆FPG、TC、TG和LDL-C含量总体比较差异均有统计学意义（FPG：F分组=78.531,P=0.000;TC：F分组=28.049,P=0.000;TG：F分组=13.108,P=0.000;LDL-C：F分组=6.804,P＜0.05）.免疫组织化学检测显示,Bcl-2和VEGF蛋白主要表达于视网膜各层的血管、视网膜神经节细胞（RGCs）层、内核层和外核层.各组间大鼠视网膜中VEGF和bcl-2蛋白的相对表达量总体比较差异均有统计学意义（VEGF：F分组=11.805,P=0.000;bcl-2：F分组=22.943,P=0.000）;tBHQ干预组大鼠造模后12周视网膜中bcl-2蛋白的相对表达量明显高于造模后4周,差异有统计学意义（P＜0.05）.各组大鼠造模后不同时间点视网膜中VEGF和Bcl-2 mRNA相对表达量总体比较差异均有统计学意义（VEGF：F分组=79.220,P=0.000;F时间=6.090,P＜0.05;Bcl-2：F分组=105.000,P=0.000;F时间=13.170,P=0.001）.其中造模后4周和12周模型对照组和tBHQ干预组大鼠视网膜中VEGF和Bcl-2 mRNA相对表达量明显高于正常对照组,tBHQ干预组大鼠视网膜中Bcl-2 mRNA相对表达量明显高于模型对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;tBHQ干预组大鼠造模后12周视网膜中VEGF和Bcl-2 mRNA相对表达量明显高于造模后4周,差异均统计学意义（均P＜0.05）. 结论 tBHQ可通过下调视网膜中VEGF的表达和上调bcl-2的表达对DR发挥抗氧化损伤和抗凋亡作用.此外,tBHQ对糖尿病大鼠可能有降血糖、调节胰岛素、降血脂的作用.

关键词：糖尿病/并发症视网膜病变血管内皮生长因子 Bcl-2/代谢动物模型 SD大鼠叔丁基对苯二酚

tBHQ对2型糖尿病大鼠视网膜HO-1、VEGF表达及胰岛功能作用的研究

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中华眼科杂志 2016年第5期52卷 373-381页

作者：张思远田敏李晶艳韩佩晏黄棋吕红彬西南医科大学四川省泸州市646000

目的探讨叔丁基对苯二酚（tBHQ）对2型糖尿病大鼠视网膜血红素氧合酶1（HO-1）和VEGF表达及胰岛功能的作用。方法实验研究。通过高脂高糖饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射将40只清洁级雄性Sprague—Dawley大鼠诱导2型糖尿病模型。... 详细信息

目的探讨叔丁基对苯二酚（tBHQ）对2型糖尿病大鼠视网膜血红素氧合酶1（HO-1）和VEGF表达及胰岛功能的作用。方法实验研究。通过高脂高糖饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射将40只清洁级雄性Sprague—Dawley大鼠诱导2型糖尿病模型。建模成功后采用随机数字表分为糖尿病组和干预组。10只匹配正常大鼠为对照组。于tBHQ干预喂养4和12周后检测3个组大鼠血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL—c）和高密度脂蛋白（HDL-c）及空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS），通过公式计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）及胰岛素敏感指数（ISI）。免疫组织化学染色检测HO-1和VEGF在大鼠视网膜中表达，实时荧光定量PCR检测大鼠视网膜HO-1及VEGFmRNA相对表达量。三组间均数的差异比较采用单因素方差分析，均数间差异的多重比较采用LSD—t检验。结果32只大鼠成功建立2型糖尿病大鼠模型，成模率80％。糖尿病大鼠较正常对照组大鼠血脂TG、TC、LDL—C均明显升高，HDL-C明显降低。各组间大鼠血糖值比较差异有统计学意义（x2 4周=10．631，P4周=0．005；X2 12周=15．053，P 12周=0．001），12周时干预组大鼠血糖明显低于糖尿病组大鼠（P〈0．05）。与正常对照组相比，糖尿病大鼠FINS、HOMA—IR显著增加，ISI显著降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。干预组与糖尿病组相比，FBG、FINS、HOMA—IR均有下降，ISI增加，但差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组织化学检测结果显示，建模后4周正常对照组、糖尿病组、干预组HO-1蛋白表达量分别为0．0283±0．0036、0．0550±0．0051、0．0690±0．0041，VEGF蛋白表达量分别为0．0052±0．0005、0．0196±0．0012、0．0153±0．0007，差异均有统计学意义（F=689．535，1084．956；P〈0．05）；建模后12周正常对照组、糖尿病组、干预组HO-1蛋白表达量分别为0．0280±0．0040、0．0528±0．0040、0．1069±0．0218，VEGF蛋白表达量分别为0．0056±0．0004、0．0227±0．0023、0．0153±0．0005，差异均有统计学意义（F=287．988，1107．553；P〈0．05）荧光定量PCR结果屁示视网膜中HO-1mRNA相对表达量，糖尿病组（t4周=10．21，t 12周=9．95）及干预组（t 4周=14．01，t12周=25．64）均较正常对照组增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。干预组较糖尿病组（t4 周=6．04，t12周=19．00）增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。视网膜中VEGFmRNA相对表达量，糖尿病组（t4周=11．92，t12周=29．27）及干预组（t4周=12．50，t 12周=11．24）较正常对照组均增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。干预组较糖尿病组（t4周=-6．36，t12周=-20．22）降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论tBHQ干预可促进糖尿病大鼠胰岛素分泌增加，降低血糖；上调视网膜HO-1表达、下调VEGF表达，从而对糖尿病大鼠胰岛功能及视网膜发挥一定保护作用。

关键词：糖尿病视网膜病变糖尿病实验性氢醌类血红素加氧酶-1 血管内皮生长因子A

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在德育中孕育美育

美育学刊 2011年第6期2卷 18-22页

作者：余龙进李晶艳杭州师范大学人文社科处浙江杭州310036 杭州师范大学政经学院浙江杭州310036

中国是一个重视既育德又育人的国家。新时期德育在进行时代性变革的过程中,将美育作为其重要组成部分纳入育德、育人教育中,充分利用美育以情动人、形象生动、创造性、潜移默化等特征,形成学校、家庭、社会相互协调合作的联动体,使德育... 详细信息

中国是一个重视既育德又育人的国家。新时期德育在进行时代性变革的过程中,将美育作为其重要组成部分纳入育德、育人教育中,充分利用美育以情动人、形象生动、创造性、潜移默化等特征,形成学校、家庭、社会相互协调合作的联动体,使德育能够真正发挥陶冶性情、增强道德修养、提高素质、完善人格的作用,从而实现人的全面发展。

关键词：德育过程孕育美育