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基于二代和三代转录组测序揭示甘蔗重要亲本对黑穗病菌侵染的响应机制

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作物学报 2023年第9期49卷 2412-2432页

作者：胡鑫罗正英李纯佳吴转娣李旭娟刘新龙云南省农业科学院甘蔗研究所/云南甘蔗遗传改良重点试验室/农业农村部甘蔗生物学与遗传育种重点实验室(云南) 云南开远661699

黑穗病是甘蔗生产中的主要病害,严重影响甘蔗产量。解析甘蔗重要亲本与黑穗病菌相互作用的分子机制及筛选抗病基因对抗黑穗病优良品种的培育具有重要意义。本研究选用我国甘蔗育种中的重要亲本新台糖ROC25(抗黑穗病)及其姊妹系ROC22(感... 详细信息

黑穗病是甘蔗生产中的主要病害,严重影响甘蔗产量。解析甘蔗重要亲本与黑穗病菌相互作用的分子机制及筛选抗病基因对抗黑穗病优良品种的培育具有重要意义。本研究选用我国甘蔗育种中的重要亲本新台糖ROC25(抗黑穗病)及其姊妹系ROC22(感黑穗病)为研究对象,采用单分子实时测序技术(三代测序)和二代转录组测序技术分析和鉴定2个亲本感染黑穗病菌后的转录组谱及差异转录本。三代转录组测序分析共获得79,885条转录本序列,其中含60,115条完整开放阅读框、3692个可变剪接事件、1799个LncRNA、29,139个SSR和7794个转录因子,共有74,066个转录本得到注释,占总数的92.72%。通过对二代测序数据分析,在抗病亲本中筛选出9716个差异转录本,在感病亲本中筛选出2033个差异转录本。差异转录本的GO和KEGG富集分析结果表明抗病亲本中共富集到的GO条目和KEGG通路均要多于感病亲本,且植物MAPK信号通路、苯丙素生物合成、植物-病原互作、亚油酸代谢和蔗糖和淀粉代谢等代谢通路在抗感亲本中均被显著富集,为抗感亲本对黑穗病的共同抗病途径。进一步,对植物MAPK信号通路的分析表明,MAPK超家族基因成员在抗感亲本中呈现不同的表达方式,在抗病亲本中具有更多差异表达的MEKK1和MKK4的转录本,且MKK5、MPK10和MPK12基因仅在抗病品种中发生显著表达变化,推测其可能与亲本的抗病表型关联。此外,抗感亲本中众多WRKY、MYB、NAC和AP2/ERF-ERF等抗病相关转录因子响应了黑穗病菌胁迫,且主要表现为上调表达。与感病亲本相比,抗病亲本显示出更多的差异表达转录因子,推测这些抗病亲本特有的转录因子可能对防御黑穗病菌具有积极作用。本研究完善了新台糖亲本基因组注释信息,为解析新台糖优异亲本与黑穗病菌互作机制以及抗黑穗病基因资源的挖掘利用提供指导。

关键词：甘蔗黑穗病菌全长转录组 RNA-seq 新台糖

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新时代大学生集体归属感培养的价值诉求

安顺学院学报 2022年第2期24卷 48-53页

作者：李旭娟王永明齐齐哈尔大学马克思主义学院黑龙江齐齐哈尔161006

新时代大学生的思想行为呈现复杂性、个性化和多样化等特点,做好新时代大学生的思想和行为的引领,其集体归属感的培养尤为重要。可以说,集体归属感培养,是新时代大学生树立集体主义价值观的有效途径,是新时代大学生提升社会适应能力的... 详细信息

新时代大学生的思想行为呈现复杂性、个性化和多样化等特点,做好新时代大学生的思想和行为的引领,其集体归属感的培养尤为重要。可以说,集体归属感培养,是新时代大学生树立集体主义价值观的有效途径,是新时代大学生提升社会适应能力的应然之选,是新时代大学生承担社会责任的重要路径,更是新时代大学生塑造健全人格的内在要求。

关键词：新时代大学生集体归属感价值诉求集体主义

对新时代大学生集体归属感的调查及其培养研究

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北京城市学院学报 2023年第6期 92-98页

作者：王永明易洋李旭娟齐齐哈尔大学马克思主义学院黑龙江齐齐哈尔161006

通过对1282名新时代大学生的调查发现,新时代大学生集体归属感的主流是健康向上的。但部分新时代大学生在集体认同感方面表现出对集体价值理念的认同有待提升,集体荣誉感方面欠缺维护集体荣誉的行动力,集体责任感方面存在明显的利己主... 详细信息

通过对1282名新时代大学生的调查发现,新时代大学生集体归属感的主流是健康向上的。但部分新时代大学生在集体认同感方面表现出对集体价值理念的认同有待提升,集体荣誉感方面欠缺维护集体荣誉的行动力,集体责任感方面存在明显的利己主义倾向等问题。因此,学生个体、学校、家庭和社会各界应协同合作,生成强大的培养合力,切实提高新时代大学生的集体归属感。

关键词：新时代大学生集体归属感现状培养路径集体意识

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脑深部电极置入术治疗迟发性运动障碍1例

浙江医学 2023年第21期45卷 2326-2328页

作者：王林林李玉凤李旭娟树兰(杭州)医院精神卫生科 310022 青岛市市立医院临床心理科

报道树兰(杭州)医院2020年8月21日收治迟发性运动障碍1例,采用脑深部电极置入术(DBS)治疗。该患者术前自觉后背胀痛不适,伴右侧肢体麻木、步态不稳、不自主抖动,夜不能卧,伴有严重的焦虑、抑郁情绪和自杀倾向。DBS术后患者无头晕、头痛... 详细信息

报道树兰(杭州)医院2020年8月21日收治迟发性运动障碍1例,采用脑深部电极置入术(DBS)治疗。该患者术前自觉后背胀痛不适,伴右侧肢体麻木、步态不稳、不自主抖动,夜不能卧,伴有严重的焦虑、抑郁情绪和自杀倾向。DBS术后患者无头晕、头痛等不适,无明显发热和排异反应。后将脑深部电极更换为永久起搏器。术后2年随访,患者表示情绪较稳定,无明显肢体不适。

关键词：迟发性运动障碍抗精神病药脑深部电极置入术抑郁焦虑

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聚乳酸结晶的研究进展

中国塑料 2006年第10期20卷 6-12页

作者：李旭娟李忠明西南科技大学材料科学与工程学院四川绵阳621010

综述了自合成以来聚乳酸(PLA)结晶行为研究的主要成果,介绍了PLA的α、β、γ三种晶型结构参数及不同晶型晶体的形成条件,以及PLA球晶、单晶、孪晶、微纤晶和串晶等结晶形态及其形成条件。此外,还介绍了PLA在不同条件下的结晶行为,着重... 详细信息

综述了自合成以来聚乳酸(PLA)结晶行为研究的主要成果,介绍了PLA的α、β、γ三种晶型结构参数及不同晶型晶体的形成条件,以及PLA球晶、单晶、孪晶、微纤晶和串晶等结晶形态及其形成条件。此外,还介绍了PLA在不同条件下的结晶行为,着重阐述了分子结构、第二组分及温度场、应力场以及辐照等外部因素对其结晶行为的影响。

关键词：聚乳酸结晶行为结晶形态

东滩煤矿西风井地层沉降光纤Bragg光栅监测研究

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东滩煤矿西风井地层沉降光纤Bragg光栅监测研究

作者：李旭娟西安科技大学

学位级别：硕士

兖州矿区东滩矿邻近的鲍店、兴隆庄煤矿曾多次出现井壁破裂现象，至今唯有东滩煤矿井壁没有破裂。但资料显示，西风井井壁的竖直附加应力在逐年增大，并随着矿井开采强度和范围的逐年加大，同时第四系含水层水位亦有所下降，井壁变形持... 详细信息

兖州矿区东滩矿邻近的鲍店、兴隆庄煤矿曾多次出现井壁破裂现象，至今唯有东滩煤矿井壁没有破裂。但资料显示，西风井井壁的竖直附加应力在逐年增大，并随着矿井开采强度和范围的逐年加大，同时第四系含水层水位亦有所下降，井壁变形持续增加。采用光纤Bragg光栅监测系统预测井壁变形的方法，能够满足矿山远距离、分布式和长期性的技术要求，同时可以实现在线传输和实时分析。本文依据光纤Bragg光栅传感的基本原理，分析了钻孔埋入光纤Bragg光栅的应变传递理论和中间层水泥砂浆的弹性模量和泊松比对平均应变传递率的影响。采用松散地层失水沉降理论计算模型，建立了层位变形量与地表沉降量的关系。研究了适于东滩煤矿西风井地层沉降的光纤Bragg光栅监测系统方案，并借助3G网络无线传输，实现了数据的远距离分享。通过光纤Bragg光栅监测地层沉降应变传递影响参数实验和西风井地层沉降与光纤Bragg光栅波长漂移量对应关系的相似模拟，得出了光栅监测封孔用水泥砂浆最有利配比，地层沉降与光纤Bragg光栅波长漂移量的线性关系;得出了现场封孔砂浆配比的力学参数，并计算出了各封孔段的光纤光栅应变传递率，为现场施工和数据分析提供有力条件。基于理论研究，顺利完成了西风井地层沉降光纤Bragg光栅监测系统的安装，并对安装过程和后期的监测数据进行了分析。光纤Bragg光栅监测系统受第一次注浆影响较为明显，系统稳定后大部分光纤Bragg光栅传感器中心波长回落到接近初值状态。同时，光纤Bragg光栅监测系统也实现矿井抽水、注水试验的实时监测，缓解了松散地层失水沉降状态。依据长期的监测数据，对西风井的井壁变形做了初步预测。

关键词：光纤Bragg光栅地层沉降水泥砂浆试件应变传递注水治理实时监测变形预测

波形蛋白介导2型登革病毒感染的作用机制研究

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波形蛋白介导2型登革病毒感染的作用机制研究

作者：李旭娟南方医科大学

学位级别：硕士

一、背景:登革病毒(dengue virus,DENV)是黄病毒科黄病毒属的一种主要经蚊虫传播的单股正链RNA病毒,根据抗原表位的不同分为DENV1-4四种血清型,四种血清型都可以引起登革热(dengue fever,DF)和重症登革热(severe dengue,SD)。研究显示,... 详细信息

一、背景:登革病毒(dengue virus,DENV)是黄病毒科黄病毒属的一种主要经蚊虫传播的单股正链RNA病毒,根据抗原表位的不同分为DENV1-4四种血清型,四种血清型都可以引起登革热(dengue fever,DF)和重症登革热(severe dengue,SD)。研究显示,大约10%的登革热患者在感染期间或之后出现神经系统并发症,其致病机制可能为病毒通过直接侵袭感染神经组织诱导神经功能障碍,这些神经系统并发症包括脑炎、脑膜炎、脊髓炎、急性播散性脑脊髓炎(ADEM),格林-巴利综合征和视神经炎等。血脑屏障(BBB)的主要组成细胞人脑微血管内皮细胞(HBMEC)可以感染登革病毒,因此HBMEC可能成为登革病毒侵入神经组织的途径之一。波形蛋白是中间丝蛋白Ⅲ的结构蛋白之一,不仅参与多种细胞进程,还与病原体的入侵和感染有关,已有研究发现登革病毒的入侵可以引起波形蛋白的磷酸化反应并且引起波形蛋白重排,但波形蛋白在登革病毒感染细胞的过程中所起作用未见报道。本研究拟用体外实验研究波形蛋白在DENV-2感染HBMEC细胞过程中的磷酸化、溶解度、表达水平的动态变化,并利用体外实验和动物模型探索波形蛋白在DENV-2感染入侵宿主细胞过程中的作用。二、方法:1.富集病毒并验证DENV-2感染HBMEC致细胞病变效应将感染登革病毒的鼠脑组织研磨过滤后收集病毒液,在C6/36细胞上连续传代,用TCID50法与噬斑形成实验检测活病毒滴度。将DENV-2感染HBMEC、HBMEC(con)、HBMEC(vim-ko)细胞(MOI=5),连续5 日观察细胞CPE。2.波形蛋白在DENV-2感染HBMEC细胞过程中的作用机制研究免疫荧光法观察DENV-2感染HBMEC细胞(MOI=5)0、1、2、6、12、24h后波形蛋白的重排。DENV-2感染HBMEC细胞(MOI=5)0、1、2、6、12、24、36、48h后用western blot法检测波形蛋白的表达水平、磷酸化水平和溶解度变化。DENV-2感染HBMEC(con)、HBMEC(vim-ko)细胞(MOI=5)后,分别用实时无标记细胞功能分析仪实时监测两组细胞状态,用实时荧光定量PCR法(QPCR)检测感染后2h细胞内病毒载量。3.DENV-2感染乳鼠模型上探索波形蛋白在病毒感染中的作用SV129与SV129(vim-ko)一日龄乳鼠颅内注射DENV-2,感染后1-5日记录观察两组乳鼠体重、体征和症状,用QPCR法检测乳鼠第3、4、5日血清与脑组织中的病毒载量,摘取感染后第5日乳鼠脑组织制作病理切片。三、结果:1.DENV-2NGC株连续扩增后检测的活病毒滴度为2.6×106PFU/mL。2.波形蛋白在DENV-2感染后发生重排,并且其表达水平、磷酸化水平和溶解度随着感染时间的变化产生显著的动态变化。与对照组HBMEC(con)相比,DENV-2入侵HBMEC(vim-ko)时细胞生物学状态变化更明显,细胞内的病毒载量更多(P<0.05)。3.与SV129相比,SV129(vim-ko)一日龄乳鼠颅内注射DENV-2后症状更为严重,感染后第4日第5日颅内与血清中病毒载量显著更高(P<0.05)。四、结论:本研究证明HBMEC、HBMEC(con)、HBMEC(vim-ko)细胞均对DENV-2易感。HBMEC细胞感染DENV-2不同时间后其波形蛋白发生重排,感染过程调控波形蛋白的表达量、磷酸化水平和溶解度随之产生动态变化。波形蛋白可能抑制DENV-2在宿主细胞中的入侵,在动物水平上可能抑制病毒的感染、复制与释放。

关键词：登革病毒波形蛋白中枢神经系统 HBMEC

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乳酸乙酯合成菌株筛选及其发酵工艺研究

乳酸乙酯合成菌株筛选及其发酵工艺研究

作者：李旭娟华南农业大学

学位级别：硕士

由于豉香型白酒特殊的半固态发酵工艺决定了其酸、醛、酯等含量,比固态发酵工艺白酒低,导致豉香型白酒的酒质较单薄,市场竞争力不强。相关提高风味物质的研究较多地集中在乙酸乙酯上,针对乳酸乙酯含量的研究相对较少。本研究拟对分离筛... 详细信息

由于豉香型白酒特殊的半固态发酵工艺决定了其酸、醛、酯等含量,比固态发酵工艺白酒低,导致豉香型白酒的酒质较单薄,市场竞争力不强。相关提高风味物质的研究较多地集中在乙酸乙酯上,针对乳酸乙酯含量的研究相对较少。本研究拟对分离筛选于豉香型白酒酒饼的若干乳酸菌菌株的产酸能力进行比较,对若干产酯酵母的产酯能力进行筛选和优化,在此基础上,通过优选的乳酸菌和产酯酵母共培养混合发酵,以及产酯酵母对高浓度的乳酸发酵液的酯化,希望获得发酵来源的高乳酸乙酯含量的酯化液,为提高豉香型白酒中乳酸乙酯的含量提供更多的途径。具体实验结果如下:(1)高产乳酸的乳酸菌筛选通过鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌四种乳杆菌的pH变化和溶钙圈对比,并且结合四种乳杆菌的乳酸产量,筛选出了乳酸产量最高的鼠李糖乳杆菌,其乳酸产量为24.63g/L。(2)高产乳酸的乳酸菌产酸条件优化采用单因素和正交设计实验对鼠李糖乳杆菌产乳酸条件进行优化,结果表明其最佳产乳酸条件为大米糖化醪糖度为12°Bx,接种量为5%,发酵温度37℃,磷酸氢二钾含量0.3g/L,初始p H为7.0,静置培养3d,其乳酸产量为29.01g/L,比优化前提高了18%。(3)高产乳酸乙酯酵母的筛选通过对异常维克汉姆酵母、异常汉逊氏酵母、酿酒酵母、异常毕赤酵母、紫红曲霉和异常毕赤酵母等六种产酯菌株的酒精耐受性、乳酸耐受性和总酯产量等的研究,并结合气相色谱-质谱法(GC-MC)的分析,筛选出了乳酸乙酯和总酯产量最高的产酯菌株,即异常维克汉姆酵母,其乳酸乙酯和总酯产量分别为0.57g/L和1.07g/L。(4)高产乳酸乙酯酵母的产酯条件优化采用单因素和正交设计实验对异常维克汉姆酵母产酯条件进行优化,结果表明其最佳产酯条件为大米糖化醪糖度为12°Bx,接种量为4%,发酵温度28℃,培养基乳酸浓度36g/L,初始pH为4.0,静置培养3d。通过5L发酵罐验证,总酯产量1.75g/L,经气象色谱-质谱法(GC-MC)测定的乳酸乙酯产量为0.95g/L,比优化前提高了61%。

关键词：乳酸乙酯总酯豉香型白酒产酯酵母发酵条件

甘蔗HTD2基因的表达特征及基因多态性分析

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作物学报 2022年第7期48卷 1601-1613页

作者：李旭娟李纯佳吴转娣田春艳胡鑫丘立杭吴建明刘新龙云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室云南开远661699 广西农业科学院甘蔗研究所/广西甘蔗遗传改良重点实验室广西南宁530007

分蘖是无性繁殖经济作物-甘蔗最重要的农艺性状之一,挖掘分蘖关键基因用于甘蔗理想株型调控是增加品种产量的重要途径。本研究使用实时荧光定量PCR技术对前期从甘蔗中获得的与水稻分蘖关键基因HTD2高度同源的ScHTD2基因开展表达特征分析... 详细信息

分蘖是无性繁殖经济作物-甘蔗最重要的农艺性状之一,挖掘分蘖关键基因用于甘蔗理想株型调控是增加品种产量的重要途径。本研究使用实时荧光定量PCR技术对前期从甘蔗中获得的与水稻分蘖关键基因HTD2高度同源的ScHTD2基因开展表达特征分析,然后探讨其在甘蔗种质资源群体中的基因多态性情况,筛选与分蘖性状相关的变异位点。结果显示,该基因表达具有组织特异性,在叶中表达最高;腋芽萌动发育过程中,在休眠芽中表达量最高,随着蔗芽萌动,开始显著下调表达,负调控蔗芽的萌动发育;植物激动素、生长素和独脚金内酯都能显著诱导该基因在萌动蔗芽和蔗苗分蘖芽中的表达,结合激素处理的表型变化特征,预示生长素和独脚金内酯诱导该基因的高表达会抑制萌动蔗芽的继续发育和延迟蔗苗的分蘖,但植物激动素诱导的高表达并没有这种抑制效应。对从26份甘蔗种质资源中获得的520条HTD2基因组DNA克隆序列开展基因多态性分析表明,在基因组结构上,该基因具有2个外显子和1个内含子,其中内含子区域变异最为丰富。从群体基因多态性看,原始种亲本群体在外显子1和2区域表现出较高的核苷酸多样性,而主栽品种群体在内含子区域表现出较高的核苷酸多样性。从编码区单倍型多样性来看,原始种亲本群体间单倍型多样性最为丰富,其次为主栽品种群体。基因选择性测验中,原始种亲本群体受正向选择,选择压力较大,基因进化速度快,而骨干亲本群体和主栽品种群体受负向选择,向纯化方向发展。编码区单倍型演化分析表明,Hap3和Hap4处于单倍型演化的辐射中心,属于较为原始的类型。基因编码区变异位点与分蘖率相关性检测揭示该基因有23个SNP位点和5个InDel位点不同变异类型剂量与甘蔗种质资源分蘖率呈显著相关,变异类型剂量效应将是未来甘蔗分子辅助育种重要的关注点。研究为进一步深入解析甘蔗分蘖调控关键基因的功能作用和开发功能性标记奠定了重要基础。

关键词：甘蔗 HTD2 基因表达基因多态性变异位点