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猕猴桃水杨酸途径关键基因AcICS1的克隆与溃疡病抗性功能分析

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猕猴桃水杨酸途径关键基因AcICS1的克隆与溃疡病抗性功能分析

作者：李双荣安徽农业大学

学位级别：硕士

水杨酸(Salicylic acid,SA)是重要的植物激素,与抗病防御密切相关。异分支酸合成酶(Isochorismate synthase,ICS)是植物水杨酸合成途径的重要基因,包括ICS1和ICS2。其中ICS1起到主要的作用,负责将分支酸转化为异分支酸。ICS1基因在猕猴... 详细信息

水杨酸(Salicylic acid,SA)是重要的植物激素,与抗病防御密切相关。异分支酸合成酶(Isochorismate synthase,ICS)是植物水杨酸合成途径的重要基因,包括ICS1和ICS2。其中ICS1起到主要的作用,负责将分支酸转化为异分支酸。ICS1基因在猕猴桃中的功能还未报道过,也没有验证过。通过对猕猴桃转录组数据的分析,在猕猴桃溃疡病侵染的叶片中,ICS1基因上调表达,在研究前期通过液相色谱质谱联用技术(LC-MS)测定了‘红阳’(感病)与‘金魁’(抗病)的叶片中水杨酸的含量;并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了不同猕猴桃AcICS1基因的表达模式,发现两者存在表达差异,而水杨酸与植物抗病性息息相关。后期利用猕猴桃全基因组序列,对猕猴桃AcICS1基因进行了克隆和分析,通过载体构建及瞬时表达、原位杂交和转基因等方法来验证AcICS1基因的功能。主要研究结果如下:1猕猴桃叶片水杨酸的测定:‘红阳’和‘金魁’接种Psa菌液1 d后,猕猴桃叶片中SA的含量都有明显增加,其中红阳增加了 0.5倍,金魁增加了 0.8倍。金魁的SA的含量变化更明显。2猕猴桃AcICS1基因的表达:利用RT-qPCR,分别对实生美味组培材料和盆栽猕猴桃进行AcICS1基因的RT-qPCR分析,猕猴桃溃疡病菌液处理3小时后AcICS1基因在实生美味组培中显著上调表达。在3-6 h期间呈显著上升趋势,在6-48 h逐渐趋于稳定,达到最大值。未侵染的‘红阳’和‘金魁’的叶片AcICS1基因表达没有显著差异,侵染的叶片则有显著性差异,‘红阳’AcICS1基因下调表达,‘金魁’AcICS1基因上调表达。3AcICS1基因在猕猴桃组织间的表达:运用原位杂交(FISH)的方法,对‘红阳’猕猴桃不同组织间AcICS1基因的表达进行了检测。发现在根、茎、叶中都存在AcICS1的表达。注射过猕猴桃溃疡病菌液的猕猴桃的根、茎、叶的AcICS1基因的表达量要高于未接种的。说明猕猴桃溃疡病菌能诱导AcICS1基因的上调表达。4猕猴桃AcICS1基因的克隆与生物学分析:分别克隆了‘红阳’与‘金魁’的AcICS1基因的cDNA全长序列和启动子序列,编码区基因全长1710 bp,编码569个氨基酸,对氨基酸序列进行了简单的理化性质分析。AcICS1基因具有Chorismateind结构域,包含氨基酸256个(287-543)。分别构建了超表达载体、P1300重组载体。启动子序列上都有典型的真核基因启动子的核心元件TATA box和CAAT box,与光调控、逆境胁迫、植物激素相关的多种顺式元件。其中‘金魁’AcICS1基因的启动子上有响应水杨酸的元件TCA-element。5瞬时表达烟草叶片水杨酸的测定:LC-MS结果表明注射过AcICS1基因P1300重组载体菌液的本氏烟草叶片,SA含量比注射过P1300空载菌液叶片的增加了 1倍。与之相反,茉莉酸(JA)的含量减少了 0.25倍。过量表达AcICS1基因导致SA的上调表达,JA的下调表达。6植物遗传转化:建立了猕猴桃稳定的再生体系,对筛选培养基上的植株提取DNA进行PCR检测,得到‘金魁’AcICS1基因超表达的阳性植株3株。综上可知,在猕猴桃抗病中SA十分重要,AcICS1作为SA合成途径的关键基因,在抗溃疡病的研究中,起到重要的作用。为进一步分析猕猴桃AcICS1基因在水杨酸合成及抗病调控中的作用奠定了基础。

关键词：猕猴桃水杨酸异支分酸遗传转化启动子

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海纳百川风云际会湘潭县档案馆资源建设纪实

档案时空 2005年第8期 17-18页

作者：谭静江李双荣

2005年5月9日,亲民党主席宋楚瑜在曙光学校访问时,双手从母校校长手中接过的珍贵礼品,是一本用档案复制品制成的纪念册.当他翻到7岁在私立昭潭学校读小学二年一期的学生一览表时,惊喜万分,幽默地说道:'我确确实实是这里的学生,如假包换!... 详细信息

2005年5月9日,亲民党主席宋楚瑜在曙光学校访问时,双手从母校校长手中接过的珍贵礼品,是一本用档案复制品制成的纪念册.当他翻到7岁在私立昭潭学校读小学二年一期的学生一览表时,惊喜万分,幽默地说道:'我确确实实是这里的学生,如假包换!'周围的群众发出会心的微笑.

关键词：县档案馆湘潭县资源建设纪实 2005年 1949年宋楚瑜亲民党复制品

铺层参数对风力机叶片结构性能的耦合影响分析

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太阳能学报 2018年第6期39卷 1768-1774页

作者：张兰挺李双荣孙鹏文朱明新内蒙古工业大学机械学院呼和浩特010051 风能太阳能利用技术省部共建教育部重点实验室(内蒙古工业大学) 呼和浩特010051

依据二阶响应曲面设计原理,构建铺层参数各自不同水平方案。以整体结构性能最优为目标,铺层参数为自变量,叶片强度、刚度为响应变量,采用Design Expert中Box-Behnken试验设计方法进行试验设计,仿真分析叶片静强度和刚度;经多元线性回归... 详细信息

依据二阶响应曲面设计原理,构建铺层参数各自不同水平方案。以整体结构性能最优为目标,铺层参数为自变量,叶片强度、刚度为响应变量,采用Design Expert中Box-Behnken试验设计方法进行试验设计,仿真分析叶片静强度和刚度;经多元线性回归分别建立铺层参数与Tsai-wu失效因子、最大位移之间的二阶耦合映射关系,并对数学模型及回归系数进行显著性检验;分析单一铺层参数和两两交互作用对叶片结构性能的影响,获得性能优化的铺层参数取值,验证方法的正确性和有效性。

关键词：结构性能试验设计法铺层参数耦合影响风力机叶片

苏海图洗煤厂跳汰机自动排料控制系统的改造实践

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选煤技术 2005年第3期33卷 44-46页

作者：曹育洵张望李双荣苏海图洗煤厂内蒙古乌海016045

采用自动检测到的床层厚度信号控制排料机构工作,实现跳汰机的自动排料,稳定了床层,全面提升了跳汰机的工艺性能,为选煤厂创造了可观的经济效益。

关键词：自动控制系统液压闸板跳汰床层厚度经济效益

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苏海图洗煤厂配煤入洗的实践

选煤技术 2003年第5期31卷 35-37页

作者：李双荣赵瑞典张宝林神华集团乌达矿业公司苏海图洗煤厂内蒙古乌海016045

介绍了苏海图选煤厂因地制宜,合理配煤,调整产品结构,以提高经济效益的经验。

关键词：洗煤厂配煤产品结构经济效益分选密度

福建省文化创意产业发展思路转变研究——基于生活创意的视角

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长春理工大学学报（社会科学版） 2016年第2期29卷 79-83,88页

作者：李双荣阳光学院福建福州350015

台湾文化创意产业发展较为成熟,并呈现出"创意生活产业"发展迅猛的特点。从与创意生活产业密切相关的"生活创意"视角出发,福建省文化创意产业要突破发展瓶颈,需要实现发展思路的六大转变:由追求纯文化向追求生活化转变,由少数人创造向... 详细信息

台湾文化创意产业发展较为成熟,并呈现出"创意生活产业"发展迅猛的特点。从与创意生活产业密切相关的"生活创意"视角出发,福建省文化创意产业要突破发展瓶颈,需要实现发展思路的六大转变:由追求纯文化向追求生活化转变,由少数人创造向多数人参与转变,由工业式管理向文创式管理转变,由关注产品和服务向关注体验转变,由过于注重形式向统筹兼顾内容转变,由繁复管理向创新管理和服务转变。

关键词：福建文化创意产业发展思路转变生活创意视角

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谈如何有效进行小学低年级语文写话教学

中文科技期刊数据库（引文版）教育科学 2020年第12期 218-219页

作者：李双荣吉林省德惠市第二实验小学吉林德惠130300

在小学语文学科教学过程中,写作可以让学生运用文字进行表达和交流,也是学生语文素养的评判标准之一。在小学语文学科中,写作教学有着非常重要的地位,传统的小学语文学科教学,许多教师并不注重学生的写话教学。因此,很少要求低年级学生... 详细信息

在小学语文学科教学过程中,写作可以让学生运用文字进行表达和交流,也是学生语文素养的评判标准之一。在小学语文学科中,写作教学有着非常重要的地位,传统的小学语文学科教学,许多教师并不注重学生的写话教学。因此,很少要求低年级学生进行写话练习,这导致了许多学生写作基础较差。在写作过程中,用词不当优点出错的情况时有发生,不能为以后的作文学习奠定基础。本文就低年级学生语文写话教学策略进行探讨。

关键词：小学语文低年级写话教学

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低碳经济视阈下的市政工程施工研究

建材与装饰 2015年第45期 234-235页

作者：李双荣南昌市政工程开发集团有限公司

伴随社会经济的不断发展,以及国民生活水平的提升,使得我国对于节能环保的重视度也不断提升,低碳经济在现代社会经济发展中的地位随之不断提高。作为我国发展循环经济,促进节能减排政策顺利推行的重要前提,将其应用在市政工程建设施工... 详细信息

伴随社会经济的不断发展,以及国民生活水平的提升,使得我国对于节能环保的重视度也不断提升,低碳经济在现代社会经济发展中的地位随之不断提高。作为我国发展循环经济,促进节能减排政策顺利推行的重要前提,将其应用在市政工程建设施工过程中国,不仅可以有效的减少能源浪费,还可以降低工业废气的排放量。因此,本文以低碳经济作为研究视角,通过对其在我国市政工程项目施工过程中的应用情况进行研究,找出建设环保型市政项目的有效措施。

关键词：低碳经济市政工程施工研究

弘扬船政精神与培育社会主义核心价值观的协同推进研究

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海峡科学 2017年第10期 35-37页

作者：李双荣阳光学院

协同推进弘扬船政精神与培育社会主义核心价值观应积极开展理论研究,运用船政故事作为教学案例,开展"船政魂与社会主义核心价值观"系列宣传活动,以社会主义核心价值观指导船政文化项目建设等,并在建设21世纪海上丝绸之路过程中推动二者... 详细信息

协同推进弘扬船政精神与培育社会主义核心价值观应积极开展理论研究,运用船政故事作为教学案例,开展"船政魂与社会主义核心价值观"系列宣传活动,以社会主义核心价值观指导船政文化项目建设等,并在建设21世纪海上丝绸之路过程中推动二者的共生共荣。

关键词：船政精神社会主义核心价值观协同推进