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厌氧菌Sunxiuqinia sp. SH-52的海藻酸降解与代谢途径的研究

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厌氧菌Sunxiuqinia sp. SH-52的海藻酸降解与代谢途径的研究

作者：李卫娜昆明理工大学

学位级别：硕士

随着人类对海洋生物资源的不断发掘,海藻酸寡糖的多种生理活性受到广泛的关注。海藻酸裂解酶,尤其是内切型海藻酸裂解酶,作为高效、环保的海藻酸降解和不同寡糖的制备工具得到了较多研究。近年来,海藻酸作为新一代生物乙醇的生产原料,... 详细信息

随着人类对海洋生物资源的不断发掘,海藻酸寡糖的多种生理活性受到广泛的关注。海藻酸裂解酶,尤其是内切型海藻酸裂解酶,作为高效、环保的海藻酸降解和不同寡糖的制备工具得到了较多研究。近年来,海藻酸作为新一代生物乙醇的生产原料,有关海藻酸分解菌的筛选、微生物的海藻酸代谢途径以及海藻酸乙醇发酵工程菌的构建等研究开始逐渐变多。但是,对海藻酸彻底降解为单糖,进而在海藻酸分解菌细胞内代谢途径的研究还不够深入,限制着对海藻酸乙醇转化工程菌的构建和应用。本文利用实验室分离的海藻酸分解菌***-52、已在大肠杆菌中异源表达的三种海藻酸裂解酶,采用海藻酸裂解酶的协同作用、基因组学、转录组学、不同碳源对Sunxiuqinia ***-52中海藻酸裂解酶诱导表达的影响和Sunxiiuqinia ***-52中海藻酸裂解酶SHA-I的原核表达等方法,对海藻酸降解机理、厌氧海藻酸分解菌的海藻酸代谢途径和海藻酸裂解酶SHA-I的特性进行了研究。获得如下结果:1.重组海藻酸裂解酶ZHO-Ⅱ、ZHO-Ⅲ和ZHO-Ⅳ海藻酸降解协同作用的研究本研究利用重组海藻酸裂解酶,内切型海藻酸裂解酶ZHO-Ⅱ、ZHO-Ⅲ和外切型海藻酸裂解酶ZHO-Ⅳ对海藻酸的协同降解进行研究。当以海藻酸为底物时,ZHO-Ⅱ和ZHO-Ⅲ有协同作用。当以聚甘露糖醛酸(PM)为底物时,ZHO-Ⅳ与ZHO-Ⅲ的协同作用比与ZHO-Ⅱ要强。当以聚古洛糖醛酸(PG)为底物时,ZHO-Ⅳ与ZHO-Ⅱ的协同作用比与ZHO-Ⅲ要强。结果表明,以PM和PG为底物时,三种酶协同作用较强,所以在制备单体时,可以先将海藻酸进行预处理,降解为PM和PG时,然后用海藻酸裂解酶进行水解效率会更高。*** ***-52全基因组测序及海藻酸代谢相关基因的分析测序结果表明,基因组长度为4593397bp,平均GC含量为46.56%,得到3904个ORFs,并且发现了 52个tRNA和3个rRNA。对全基因组测序中的五个海藻酸裂解酶进行系统进化分析。通过对***-52海藻酸裂解酶与相应家族海藻酸裂解酶氨基酸序列比对分析表明,SHA-Ⅰ和SHA-Ⅱ为PL7家族,SHA-Ⅲ、SHA-Ⅳ和SHA-Ⅴ属于PL6家族,并对其催化位点进行分析。3.厌氧海藻酸分解菌***-52海藻酸代谢途径的研究本研究通过抑制剂的添加对SH-52代谢的影响和转录组学方法对Sunxiuqini a ***-52海藻酸的代谢途径进行研究。分别以葡萄糖和海藻酸为底物培养SH-52,添加碘乙酸和氟化钠对SH-52生长都有抑制作用,但以葡萄糖为底物时的抑制作用更强,说明SH-52代谢利用海藻酸需要3-磷酸甘油醛脱氢酶和丙酮酸激酶,通过部分的糖酵解途径。转录组结果表明,多个周质运输蛋白、ABC-转运子和MSF转运子基因明显上调表达,说明海藻酸是在这些转运蛋白蛋白的作用下从胞外运输到胞内。五个海藻酸裂解酶基因、KdgK基因、KDPG aldolase基因明显上调表达式。通过序列比对初步确定了 short-chain dehydrogenase/reductase SDR 即为 DEH 还原酶,说明海藻酸在运输到胞内后,在海藻酸裂解酶的作用下降解为DEH单体,DEH还原酶将单体转变为KDG,然后在KDGK的作用下转变成KDPG,KDPG aldolase催化KDPG进入ED途径,丙酮酸代谢主要流向产乙酸途径。4.不同碳源对Sunxiuqinia ***-52海藻酸裂解酶的诱导表达以及特性分析SH-52的诱导源很窄,只有海藻酸、PM、PG能强烈的诱导海藻酸裂解酶的表达,半乳糖可以微弱的诱导。海藻酸、半乳糖、葡萄糖两两作用对海藻酸裂解酶诱导时,葡萄糖阻遏了海藻酸对海藻酸裂解酶的诱导,而对半乳糖诱导时影响不大;半乳糖与海藻酸共同作用时则减缓了海藻酸裂解酶的表达,在转录水平也进行分析。本研究对海藻酸裂解酶基因SHA-I进行原核表达,并进行特性分析。研究表明纯化前的总蛋白为162mg,纯化后剩余3.2mg。纯化后蛋白酶活达到13U/mg,而未纯化的粗蛋白酶活仅为2.6U/mg,纯化倍数为5倍。SHA-I是polyM特异性海藻酸裂解酶,最适温度为50℃,最适pH为7.0,可以在35℃以下保持稳定。

关键词：协同作用代谢途径诱导原核表达

基于Electrooculogram的眼动信息识别

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仪器仪表学报 2007年第8期28卷 1428-1433页

作者：李卫娜侯文生郑小林彭承琳重庆大学生物工程学院重庆400044

眼动电图(Electrooculogram,EOG)是无创记录眼球运动的一种有效方法,它能记录到眼球的任何微小动作,甚至闭眼状态下眼球的动作。为能自动识别其所包含的眼动信息,本文从时域分析出发,提出了幅度阈值法和微分法2种眼动信息识别方法,并重... 详细信息

眼动电图(Electrooculogram,EOG)是无创记录眼球运动的一种有效方法,它能记录到眼球的任何微小动作,甚至闭眼状态下眼球的动作。为能自动识别其所包含的眼动信息,本文从时域分析出发,提出了幅度阈值法和微分法2种眼动信息识别方法,并重点实现了微分算法。微分法识别眼动信息的基本思想是,对基线调整、平滑处理后的EOG信号进行求一阶微分的运算,然后对微分结果求极值,最后根据不同眼动模式下EOG波形的微分极值分布特征进行眼动信息的识别。通过该法对19个EOG样本中所包含的眼动信息的识别,最终得到了总误判率小于0.02的结果。最后,本文还给出了从眨眼EOG波形分析得来的眨眼时的眼球动作的现象。

关键词：眼动电图自动识别微分法 Savitzky-Golay平滑/微分滤波器

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IPv6节点地址的分配模式研究与管理实现

IPv6节点地址的分配模式研究与管理实现

作者：李卫娜北京交通大学

学位级别：硕士

随着互联网规模的持续发展与壮大,全球互联网IP地址管理机构IANA拥有的IPv4地址资源于2011年2月分配完毕,IPv4地址总库已经枯竭。而现有IPv4入网主机、入网用户还在爆炸式增长,PDA、智能手机、智能传感器等移动联网更是未来互联网的热... 详细信息

随着互联网规模的持续发展与壮大,全球互联网IP地址管理机构IANA拥有的IPv4地址资源于2011年2月分配完毕,IPv4地址总库已经枯竭。而现有IPv4入网主机、入网用户还在爆炸式增长,PDA、智能手机、智能传感器等移动联网更是未来互联网的热点应用之一,这些都对IP地址提出了需求,互联网未来发展将系于在全球范围内普及下一代互联网通信协议。作为下一代互联网的IPv6通信协议以其巨大的地址空间优势正在国内外迅速普及。目前,绝大部分IPv6网络采用了无状态或有状态地址自动配置方式来给节点分发地址,这种地址配置模式虽有即插即用、网络迁移方便等优点,但是对用户缺乏管理性,不能对IPv6用户的分布、变化趋势和流量进行统计,更不用说实现IPv6用户身份的识别、故障定位与诊断等功能。针对IPv6节点地址的分配管理问题,本文深入了研究IPv6节点的地址分配模式与特点,进而在管理上加以实现,将能够有效地提高IPv6网络的安全、可控和可管。本文首先深入研究了IPv6节点地址的有状态和无状态自动分配模式,以及IPv6节点地址的生成、更新和老化的特点,剖析了利用邻居发现协议控制报文的侦听,从而建立IPv6节点真实源地址绑定表项的工作机制;其次,从校园网络设备的既有条件出发,结合IPv6接入交换机、汇聚交换机与核心路由交换机三级层次化网络模型,在北京交通大学IPv4/IPv6校园网络的基础上,设计了采集服务器、管理服务器和WEB服务器等关键组件,实现对IPv6节点地址的分配管理;再次,提出了IPv6节点地址自动配置的管理框架,通过对校园网络上存在的接入交换机实时嗅探的IPv6地址及其相关信息表项的采集,获得活动用户的IPv6地址、MAC地址、VLAN、端口号等关联信息;最后,结合校园管理信息系统用户注册信息,实现对基于真实IPv6源地址的用户身份识别,并统计出活动IPv6用户的在线时间(互补累计分布函数CCDF)分布,活动用户在线时间(PDF)分布,用户数量与变化趋势,楼宇活动IPv6用户TopN分布等,并指导IPv6地址的规划与分配,进而实现对IPv6节点用户的定位与故障诊断。

关键词： IPv6 邻居发现 DHCPv6 地址自动配置 IPv6地址管理

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手指运动相关脑磁图信号的处理方法研究

手指运动相关脑磁图信号的处理方法研究

作者：李卫娜重庆大学

学位级别：硕士

手是人类通过长期进化形成的最灵巧的运动器官,从手在大脑皮层运动区的投射面积可知,大脑对手动的控制机制是非常复杂的。同时具有毫秒级时间分辨率和毫米级空间分辨率的脑磁图(MEG),作为一种无创性探测大脑电磁生理信号的脑功能检测技... 详细信息

手是人类通过长期进化形成的最灵巧的运动器官,从手在大脑皮层运动区的投射面积可知,大脑对手动的控制机制是非常复杂的。同时具有毫秒级时间分辨率和毫米级空间分辨率的脑磁图(MEG),作为一种无创性探测大脑电磁生理信号的脑功能检测技术,无疑是研究皮层对手动调控机理的很好的手段。探索大脑对手的控制机制不仅本身就是一件很有意义的事,其结果还可以应用到运动功能性疾病的临床诊断、康复治疗及康复评价,同时该机制在假肢控制、灵巧机械手控制等方面也有重要的应用价值。基于脑磁图探索大脑对手动控制机制的前提是能够对任务相关脑磁图信号的特征进行有效提取。因此本文以探索大脑对手指运动的控制机制为导向,以系统的研究手指运动相关MEG信号的处理方法和对手指运动相关皮层神经活动的特征进行初步认识为目的开展了以下研究。在MEG信号处理方法的研究方面,本文首先探讨了MEG信号预处理的方法,重点是MEG信号伪迹去除的方法。文中通过在ICA模型中加入分量筛选模块对传统ICA去伪迹法进行改进,从分量的统计特征和谱特征两个方面对各分量进行考察,以筛选出伪迹分量,最终实现MEG伪迹的自动去除。其次是MEG信号的时频功率谱特征分析。本文通过对信号时频功率谱表示(TFRs)理论的深入研究,实现了针对低频段信号的可变窗长单窗时频功率谱估计和针对高频段信号的可变窗长多窗时频功率谱估计,并特别的对手指按键相关MEG信号的mu节律、beta节律和low gamma节律的时频功率谱特征进行了分析。最后,本文将前面所获得的MEG信号的时频功率谱特征作为功能约束条件加入ICA的目标函数,实现了提取手指按键动作相关皮层神经活动源的功能源提取方法(FSS)。通过对一例正常人食指按键诱发MEG信号的时频功率谱分析,本文得到了以下一些结果:(1)手指按键相关MEG信号的能量分布主要集中在35Hz以下的低频段,40Hz到70Hz频段也有皮层神经活动显示,但能量较低频段微弱;(2)低频段节律波(mu节律和beta节律)在手指按键动作准备和执行期间均表现出功率抑制(ERD),beta节律在动作执行后瞬间功率突然大幅增强(ERS),持续时长1秒左右,而mu节律在动作执行后依然处于功率抑制状态;(3)高频段节律(特指low gamma频段节律)在按键动作准备和执行之前无明显活动,而在动作执行及执行后表现出了明显的功率增强;(4)对于各节律波活动的位置:mu节律在双侧中央区和顶区通道都有活动,对应皮层感觉运动区,对侧活动强于同侧;beta节律活动主要集中在对侧中央区和顶区通道,且按键后的活动区域较按键前的活动区域稍靠前,对应初级运动区;low gamma节律活动出现在双侧中央区通道,对侧活动强于同侧。从对各频段神经活动ERD和ERS的生理意义的讨论,可以推测:皮层感觉运动区的mu节律的ERD是大脑感觉运动皮质激活的标志;beta节律的ERD与ERS可以表征手指动作从准备、执行到运动后恢复整个过程;low gamma频段的ERS可能与多种信息的整合加工有关。通过计算本文所提取手指按键动作诱发MEG信号的功能源与CTF脑磁系统中SAM软件所提取磁源间的相关性,验证二者显著相关,从而证明所提取功能源有效。功能源活动主要集中在对侧中央区通道的后沿,大致对应中央沟的前侧,即中央前回皮质运动区。通过对功能源时域波形的分析,本文所设计的按键实验虽没有得到像感觉诱发磁场那样的特征波,但FSS法获取的时域信息为从大量样本中探索大脑对手指运动控制的时间演化机制及分析功能源的时频特征信息奠定基础。

关键词：脑磁图(MEG) 伪迹去除时频功率谱表示(TFRs) 事件相关同步/去同步(ERD/ERS) 功能源提取(FSS)

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熔融挤出扩链反应制备高粘度尼龙6

熔融挤出扩链反应制备高粘度尼龙6

作者：李卫娜中北大学

学位级别：硕士

尼龙6(PA6)是一种综合性能较好的工程塑料,但一般聚合得到的尼龙树脂分子量低,而作为工程塑料对其分子量的要求较高;另外由于尼龙具有优异的阻隔性而广泛用于制备中空容器,但一般聚合得到的PA熔体粘度低难以直接吹塑成型。本论文采用熔... 详细信息

尼龙6(PA6)是一种综合性能较好的工程塑料,但一般聚合得到的尼龙树脂分子量低,而作为工程塑料对其分子量的要求较高;另外由于尼龙具有优异的阻隔性而广泛用于制备中空容器,但一般聚合得到的PA熔体粘度低难以直接吹塑成型。本论文采用熔融扩链反应法制备出高粘度尼龙6,并利用乌式粘度计、熔融指数仪、毛细管流变仪、差示扫描量热仪(DSC)和偏光显微镜(POM)等对PA6及其扩链产物的特性粘度、端基含量、熔融指数、形态结构、力学性能、流变性能和结晶性能等方面进行了研究。特性粘度、端基含量、熔融指数和力学性能的研究结果表明,选用环氧树脂(EP)和二噁唑啉(BO)为扩链剂时,EP的扩链效果比较好,随着EP用量的增加,端基含量一直在降低,而PA6的特性粘度明显提高,2.5wt%的EP可使PA6的最大特性粘度达到1.35dL/g,其熔融指数为5.66 g/10min,当EP用量超过2.5wt%时,PA6的挤出困难;BO为扩链剂时,BO的用量存在最佳值,1.5wt%的BO可使PA6的最大特性粘度达到1.17dL/g,随着BO用量的增加,PA6的端氨基含量基本不变,端羧基含量一直在减少;经BO和EP扩链后的PA6,其力学性能都表现为缺口冲击强度明显提高,而拉伸强度变化不大。对PA6/EP共混体系的流变行为研究发现,PA6及其扩链产物均为假塑性流体,并表现出切力变稀现象。经EP扩链后的PA6熔体粘度明显提高,随着EP用量的增加,稠度(K)增大,非牛顿指数(n)逐渐减小,即熔体流动行为偏离牛顿型流体的程度增大。体系的粘流活化能随着EP含量的增加整体上呈现下降趋势,对温度的敏感性下降。采用差式扫描量热仪研究了PA6及PA6/EP共混体系的结晶动力学和熔融行为。等温结晶动力学研究结果表明:Avrami方程能很好地描述其等温结晶过程,EP的加入降低了PA6的结晶速率,阻碍了晶核的生长。用Hoffman-Weeks理论得出PA6/EP共混体系的平衡熔点低于纯PA6的平衡熔点,说明EP的加入降低了PA6的结晶完善程度。非等温结晶研究结果表明:经Jeziorny修正的Avrami方程和Mo法均适合处理PA6及PA6/EP共混体系的非等温结晶过程。在同一降温速率下,扩链后PA6的结晶速率常数Z c1与纯PA6相比有所降低,要想达到相同的结晶度,扩链后PA6的降温速率需大于纯PA6的降温速率,说明EP的加入降低了晶体的生长速率,阻碍了晶核的生长。

关键词：尼龙6 扩链特性粘度流变行为结晶行为

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手指活动相关脑磁图的时-频域特征分析

仪器仪表学报 2009年第10期30卷 2093-2098页

作者：侯文生李卫娜 Jiang Yingtao 郑小林吴国材重庆大学生物工程学院中国重庆400044 内华达大学拉斯维加斯分校计算机工程学院拉斯维加斯美国NV89154 第三军医大学附属西南医院神经外科中国重庆400038

对皮层神经电生理信号进行时频分析是准确描述其信号特征的方法。为了研究手指活动相关脑磁图的时-频域分布特征,通过计算多通道脑磁图数据的时频功率表示(time frequency representations of power,TFRs),得到各通道数据在时频面上的... 详细信息

对皮层神经电生理信号进行时频分析是准确描述其信号特征的方法。为了研究手指活动相关脑磁图的时-频域分布特征,通过计算多通道脑磁图数据的时频功率表示(time frequency representations of power,TFRs),得到各通道数据在时频面上的能量分布;同时设计了一个基于Visual Basic和MATLAB的离线脑磁图数据处理的可视化软件以规范时频特征分析处理的流程。对一癫痫患者右手食指运动时记录的脑磁图数据进行处理,结果显示,患者对侧中央区和顶区皮层被显著激活,同侧中央区也有少数通道被激活。并且发现,皮层活动的10~25 Hz频率成分首先在–0.5^+0.3 s时间段表现为功率抑制,接着有强烈的功率增强活动显示,最显著的功率增强集中在0.4~0.7 s区间。初步的实验结果得到了手指活动相关神经活动在时-频域的表现,同时也为研究皮层活动在时域、频域以及空间的分布特征提供了方法。

关键词：脑磁图时频功率谱表示初级运动区

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副干酪乳杆菌胞外多糖抗氧化活性分析

食品工业科技 2019年第24期40卷 34-39页

作者：李卫娜赵波柳陈坚杨恩西京学院医学院陕西西安710000 昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

为评价干酪乳杆菌生物合成胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)抗氧化活性,本文分离纯化高产胞外多糖的三株副干酪乳杆菌(3号、5号和7号)的胞外多糖,并对其DPPH·、·OH和O-2清除率分别进行测定,评价其体外抗氧化活性。通过分析EPS对H2O2... 详细信息

为评价干酪乳杆菌生物合成胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)抗氧化活性,本文分离纯化高产胞外多糖的三株副干酪乳杆菌(3号、5号和7号)的胞外多糖,并对其DPPH·、·OH和O-2清除率分别进行测定,评价其体外抗氧化活性。通过分析EPS对H2O2诱导氧化损伤293T细胞的保护作用,评价其胞内抗氧化活性。结果表明,当EPS浓度为400μg/mL时,其DPPH·、·OH和O-2的清除率最高,分别为8.87%(5号)、88.94%(7号)和34.55%(7号),其中对·OH清除能力高于抗坏血酸(65.87%),且三株菌株之间没有明显差异。3号副干酪乳杆菌所产EPS显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)活性并抑制了丙二醛(MDA)的生成(P<0.05),且与多糖浓度呈正相关。因此,3株副干酪乳杆菌胞外多糖具有良好的抗氧化活性,作为天然抗氧化剂具有良好的应用潜力。

关键词：副干酪乳杆菌胞外多糖抗氧化活性

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手指按键相关脑磁图信号的功能源提取

重庆大学学报（自然科学版） 2010年第6期33卷 101-105页

作者：侯文生李卫娜蒋应涛吴国材冯华重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室重庆400044 内华达大学拉斯维加斯分校电子与计算机工程系美国内华达州拉斯维加斯89154 第三军医大学附属西南医院神经外科重庆400038

独立分量分析(ICA)可用于分离多通道脑磁图信号(MEG)中的信号源。基于约束ICA的思想,通过在ICA模型中加入能够反映事件相关皮层神经活动特征的功能约束条件,实现了一种脑磁逆问题的解决方法,即功能源提取(FSS)方法。文中利用该方法对一... 详细信息

独立分量分析(ICA)可用于分离多通道脑磁图信号(MEG)中的信号源。基于约束ICA的思想,通过在ICA模型中加入能够反映事件相关皮层神经活动特征的功能约束条件,实现了一种脑磁逆问题的解决方法,即功能源提取(FSS)方法。文中利用该方法对一例手指按键诱发MEG信号进行功能源提取,结果表明功能源位置位于对侧中央前回皮质运动区,且通过验证功能源提取所得到的分离向量与SAM法计算得到的空间滤波器系数间的相关性,验证了所提取的功能源有效。同时,功能源提取方法所提供的神经活动源的时域与频域信息,为在大量样本中探索大脑对手指运动控制的时间演化机制奠定了基础。

关键词：脑磁图功能源提取约束ICA

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复杂产品制造业成本控制模型初探

江苏科技大学学报（自然科学版） 2006年第5期20卷 90-94页

作者：李卫娜潘燕华江苏科技大学经济管理学院江苏镇江212003

由于复杂产品结构复杂、生产周期长、重复性差,其成本控制相对其他制造业来讲,难度大、时效性强,只存在产品生产周期内的成本反馈控制,难以进行不同产品生产周期之间的成本反馈控制。因此,如何实现产品生命周期内的成本控制是复杂产品... 详细信息

由于复杂产品结构复杂、生产周期长、重复性差,其成本控制相对其他制造业来讲,难度大、时效性强,只存在产品生产周期内的成本反馈控制,难以进行不同产品生产周期之间的成本反馈控制。因此,如何实现产品生命周期内的成本控制是复杂产品制造企业重要的生存技能。本文从复杂产品制造业的特点出发,以目标成本管理思想为基础,结合价值工程、Kaizen成本制度和虚拟利润中心等成本控制的方法,建立了一套全过程的、动态的成本控制模型,为设计和生产阶段的成本控制提供了一种新的方法。

关键词：目标成本管理 Kaizen成本制度虚拟利润中心