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作者：李俐涛河北医科大学

学位级别：硕士

目的:脑梗死后继发性脑损伤的病理生理机制复杂,其中过度炎症免疫反应存在于脑梗死后坏死及缺血区域,导致炎症损伤,此已成共识,因此减轻炎症损伤成为治疗急性脑梗死的主要途径之一。然而,在临床试验中抗炎治疗并没有取得预期的效果,或... 详细信息

目的:脑梗死后继发性脑损伤的病理生理机制复杂,其中过度炎症免疫反应存在于脑梗死后坏死及缺血区域,导致炎症损伤,此已成共识,因此减轻炎症损伤成为治疗急性脑梗死的主要途径之一。然而,在临床试验中抗炎治疗并没有取得预期的效果,或许这些药物抑制炎症通路的效果有限。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的发现促进了人们对炎症机制的理解,其中TLR4的结构及其参与促炎反应、促进免疫细胞成熟分化及调节免疫应答等方面研究的较为清楚。近年来,TLR4在非病原微生物性炎症损伤中的作用逐渐引起了人们的关注,发现其在脑梗死等非病原微生物性炎症损伤过程中具有重要的作用。氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)是从豆科槐属植物苦参(Sophora flavescens Ait)中提取的生物碱,具有四环的喹嗪啶类结构。OMT具有抗炎、抗氧化、抗病毒及免疫调节等多方面的药理作用,近几年对于OMT的研究很多,多集中在抗肝炎及抗肿瘤等方面,但关于氧化苦参碱对脑血管疾病的研究鲜有报道。本实验应用RT-PCR技术观察了不同剂量OMT对脑梗死大鼠脑组织TLR4 mRNA相对表达的影响,应用免疫组织化学方法观察OMT对脑梗死大鼠脑组织TLR4蛋白表达的影响,旨在从TLR4基因、蛋白水平探讨OMT抗炎作用机制。方法:80只健康雄性SD大鼠,体重250～300 g,随机分成4组:假手术组,生理盐水治疗组,大剂量OMT治疗组(120 mg/kg),小剂量OMT治疗组(80 mg/kg),每组根据不同的时间点又分为6 h、12 h、24 h、48 h四个亚组,每亚组均为5只大鼠。按照改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型。将OMT以蒸馏水制成相同浓度混悬液(40 mg/ml),大剂量OMT治疗组给予OMT 120 mg/kg,小剂量OMT治疗组给予OMT 80 mg/kg,生理盐水治疗组均给予1 ml生理盐水,各组均为腹腔注射给药,手术完毕后即刻给药一次,之后每天一次,直至相应时间点断头处死动物。假手术组,除不插线栓外其余操作同生理盐水治疗组。各实验组于相应时间点断头处死动物,无菌操作下取前囟前2 mm至前囟后3 mm脑组织,以前囟后0.5 mm为界分为前后两部分,前部分取梗死灶周围脑组织,快速称取100 mg,置冻存管中放入液氮保存待用,用于抽提总RNA,RT-PCR技术观察不同剂量OMT对脑梗死大鼠脑组织TLR4 mRNA相对表达的影响。后部分脑组织用4%多聚甲醛固定液固定24 h以上,但不能超过7 d,石蜡包埋,冠状切片,常规苏木精-伊红(Hemotoxylin-esion,HE)染色观察大鼠脑组织的病理改变,应用免疫组化法检测不同剂量OMT对脑梗死大鼠脑组织TLR4动态表达的影响。结果:1脑组织切片HE染色观察:假手术组无梗死灶,神经元结构、形态正常,无间质水肿。生理盐水治疗组、OMT小剂量治疗组可见缺血中心区组织疏松,形似海绵;神经元胞体缩小,变形、核固缩;间质水肿明显;随时间延长多形核白细胞(Polymorphonuclear leukocyte,PMN)浸润增多,其中PMN浸润在48 h最明显,OMT大剂量治疗组与生理盐水治疗组比较PMN浸润明显减轻。2各实验组脑组织TLR4 mRNA相对表达:各实验组各时间点TLR4 mRNA/β-actin mRNA灰度比值表明:各实验组各时间点TLR4 mRNA均有表达。假手术组与生理盐水治疗组、OMT小剂量治疗组及OMT大剂量治疗组比较,假手术6 h组为0.48±0.27,生理盐水6 h组为0.73±0.07,OMT小剂量6 h组为0.65±0.02,OMT大剂量6 h组为0.51±0.04,P0.05,无统计学意义,假手术6 h组与OMT大剂量6 h组比较,P>0.05,无统计学意义;假手术12 h组为0.50±0.01,生理盐水12 h组为0.91±0.07,OMT小剂量12 h组为0.81±0.09,OMT大剂量12 h组为0.68±0.10,P0.05,无统计学意义;假手术24 h组为0.50±0.00,生理盐水24 h组为1.09±0.10,OMT小剂量24 h组为0.99±0.11,OMT大剂量24 h组为0.77±0.01,P0.05,无统计学意义;假手术48 h组为0.49±0.03,生理盐水48 h组为1.14±0.18,OMT小剂量48 h组为1.01±0.04,OMT大剂量48 h组为

关键词：氧化苦参碱脑梗死大鼠 Toll样受体4 RT-PCR 免疫组织化学

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大鼠脑缺血后脑组织脑红蛋白mRNA的动态表达及保护机制研究

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第三军医大学学报 2008年第23期30卷 2247-2248页

作者：尹静张祥建李俐涛杨燚河北医科大学第二医院神经内科石家庄050000

脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)是2000年由Burmester等。首先发现的一种新的携氧球蛋白,广泛表达于神经组织,急性缺血的情况下表达上调,在脑的适应性保护中起重要作用。免疫共沉淀实验证明Ngb与钠钾ATP酶β2亚基存在相互作用。本研究拟采用... 详细信息

脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)是2000年由Burmester等。首先发现的一种新的携氧球蛋白,广泛表达于神经组织,急性缺血的情况下表达上调,在脑的适应性保护中起重要作用。免疫共沉淀实验证明Ngb与钠钾ATP酶β2亚基存在相互作用。本研究拟采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织中Ngb及钠钾ATP酶α亚基mRNA水平的变化进行观察,[第一段]

关键词：脑缺血脑红蛋白氯化血红素钠钾ATP酶

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脑红蛋白在脑缺血大鼠中的动态表达及脑保护作用

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第二军医大学学报 2008年第10期29卷 1176-1179页

作者：尹静张祥建李俐涛杨燚河北医科大学第二医院神经内科石家庄050000

目的:研究脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)在大鼠脑缺血模型中的动态表达及缺血缺氧后Ngb的脑保护作用。方法:将SD大鼠随机分为4组,即大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组、出血性脑梗死(HI)组、氯化血红素(Hemin)干预... 详细信息

目的:研究脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)在大鼠脑缺血模型中的动态表达及缺血缺氧后Ngb的脑保护作用。方法:将SD大鼠随机分为4组,即大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组、出血性脑梗死(HI)组、氯化血红素(Hemin)干预组和假手术组,以建模后3、6、12、24h为观察点,测定脑组织含水量、脑梗死体积,H-E染色观察组织病理学改变,免疫组化染色观察Ngb的表达。结果:Hemin处理组脑组织含水量、脑梗死体积较MCAO组和HI组有显著性差异(P<0.01);HI组脑水肿在12h显著升高;病理切片观察,Hemin处理组水肿程度及变性神经元数量较MCAO组和HI组减轻;免疫组化分析,Hemin处理组Ngb阳性神经元数量较MCAO组和HI组增多。结论:HI组脑水肿高峰提前可能导致原有病情的加重,应用Hemin诱导Ngb的表达,可减轻局灶性脑缺血时脑组织的损伤,从而达到脑保护作用。

关键词：大脑中动脉梗死出血性脑梗死氯化血红素脑红蛋白

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脑小血管病影像学标志物与认知功能障碍相关性研究进展

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中国神经精神疾病杂志 2024年第4期50卷 242-246页

作者：邢楠华素玉李俐涛华北理工大学研究生院唐山063210 河北省人民医院神经内六科

脑小血管疾病(cerebral small vessel disease,CSVD)的部分患者会出现认知功能下降并可能进展为痴呆,严重降低患者的生活质量。目前关于CSVD影像学标志物与认知功能障碍的相关性研究表明,脑白质高信号、血管周围间隙扩大、脑微出血、腔... 详细信息

脑小血管疾病(cerebral small vessel disease,CSVD)的部分患者会出现认知功能下降并可能进展为痴呆,严重降低患者的生活质量。目前关于CSVD影像学标志物与认知功能障碍的相关性研究表明,脑白质高信号、血管周围间隙扩大、脑微出血、腔隙性脑梗死的分布位置、严重程度对各认知域产生不同影响,CSVD导致的认知功能障碍可能与炎症因子间接影响和脑组织纤维束破坏等机制相关。但CSVD影像学标志物与认知功能的关系及其相关机制还需要更进一步研究加以验证。

关键词：脑小血管病影像学标志物脑白质高信号血管周围间隙扩大脑微出血腔隙性梗死认知功能

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出血性脑梗死大鼠脑损伤机制及三磷酸腺苷敏感性钾通道的作用

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第四军医大学学报 2008年第16期29卷 1482-1485页

作者：杨燚张祥建尹静李俐涛河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的:验证KATP通道是否参与出血性脑梗死的病理过程,探讨HI继发脑损伤的机制.方法:健康雄性Spra-gue-Dawley大鼠96只,随机分为出血性脑梗死(hemorrhagic infarction,HI)组、单纯脑梗死(cerebral infarction,CI)组、格列苯脲(Glibenclamide,Gli)干预(Gli+HI,GH)组和假手术(Sham)组.应用两步法建立HI大鼠模型.术后3,6,12,24h进行神经功能评分、脑组织含水量及脑组织三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase),琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH),丙二醛(malondialdehyde,MDA)测定.结果:HI组和CI组大鼠术后各时间点神经功能评分、脑组织含水量差别无统计学意义(P>0.05).HI组大鼠脑组织AT-Pase活性术后12,24h高于CI组(P<0.05),SDH活性术后24h高于CI组(P<0.05),MDA含量术后12h低于CI组(P<0.05);以上现象均可被Gli取消.结论:应用两步法制作的HI大鼠模型较为稳定、可行.CI后继发中等量出血后早期,脑组织对缺血缺氧耐受性增强,延缓了脑损伤,与KATP通道开放有关.

关键词：脑出血脑梗死疾病模型,动物三磷酸腺苷敏感性钾通道腺苷三磷酸酶琥珀酸脱氢酶丙二醛

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氧化苦参碱对局灶性脑缺血大鼠脑组织炎症信号TLR4表达的影响

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中成药 2009年第2期31卷 194-198页

作者：李俐涛张祥建尹静杨燚河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的:观察氧化苦参碱对局灶性脑缺血(Focal Cerebral ischemic,FCI)大鼠脑组织Toll样受体4基因、蛋白表达的作用。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、氧化苦... 详细信息

目的:观察氧化苦参碱对局灶性脑缺血(Focal Cerebral ischemic,FCI)大鼠脑组织Toll样受体4基因、蛋白表达的作用。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、氧化苦参碱低、高两个剂量组,分别采用RT-PCR法检测缺血灶周围脑组织TLR4基因、蛋白表达水平。结果:生理盐水组TLR4基因相对表达均明显高于假手术组(P<0.01);氧化苦参碱高剂量组TLR4相对表达量明显低于生理盐水组(P<0.01);TLR4蛋白表达类似于基因相对表达。结论:生理盐水组大鼠缺血灶周围脑组织TLR4基因高表达,氧化苦参碱对TLR4表达有抑制作用,这可能是其抗炎作用的机理之一。

关键词：氧化苦参碱脑梗死大鼠 Toll样受体4

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氧化苦参碱对局灶性脑缺血小鼠脑保护机制的研究

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中国全科医学 2012年第18期15卷 2059-2062页

作者：李俐涛孟笑梅尹昱李哲杨蕊王建华河北省人民医院神经内科河北省石家庄市050051 河北省人民医院图书馆河北省石家庄市050051

目的观察氧化苦参碱对局灶性脑缺血(focal cerebral ischemic,FCI)小鼠脑保护作用及核转录因子Nrf2的表达变化。方法参照线栓法制备C57小鼠局灶性大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将36只C57雄性小鼠随机分为假手术组、局灶性大脑中动脉缺血/... 详细信息

目的观察氧化苦参碱对局灶性脑缺血(focal cerebral ischemic,FCI)小鼠脑保护作用及核转录因子Nrf2的表达变化。方法参照线栓法制备C57小鼠局灶性大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将36只C57雄性小鼠随机分为假手术组、局灶性大脑中动脉缺血/再灌注模型组、氧化苦参碱组,分别采用行为学评分、TTC染色法观察氧化苦参碱的脑保护作用,采用激光共聚焦显微镜(Confocal)及Western blot方法探讨Nrf2在氧化苦参碱脑保护作用中的重要地位。结果与模型组相比氧化苦参碱组神经功能缺失明显减轻(P<0.05),梗死体积明显缩小(P<0.05);与模型组相比,氧化苦参组在形态学上Nrf2核转位明显增加,Nrf2的核蛋白表达上调(P<0.05)。结论模型组小鼠局灶性脑缺血后,神经功能缺失严重,脑梗死体积较大,Nrf2的核转位相对增加,而氧化苦参碱治疗组可降低局灶性脑缺血后小鼠的神经功能缺失程度,减小梗死体积,促进Nrf2的核转位,这可能是氧化苦参碱脑保护机制之一。

关键词：氧化苦参碱脑缺血脑梗死小鼠 Nrf2

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农村常见危急重症现场救治

农村常见危急重症现场救治

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丛书名：农民卫生保健丛书

2009年

作者：吕佩源董琦李俐涛马智崔力争苟萍副

本书内容包括心肺复苏术、常见急症院外急救、循环系统急症院外急救、呼吸系统急症院外急救、消化系统急症院外急救、泌尿系统急症院外急救、五官科急症救护等。

ISBN: (纸本)9787810975001

关键词：常见病急性病急救险症

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小胶质细胞与缺血性脑卒中研究进展

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脑与神经疾病杂志 2020年第1期28卷 45-47页

作者：潘赫男李俐涛华北理工大学研究生院唐山063000 河北省人民医院神经内科

缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke,CIS)发生后,小胶质细胞(microglia,MG)激活后的2种极化表型-经典激活型小胶质细胞(M1型)与替代激活型小胶质细胞(M2型)分别起着促炎与抑炎的作用,如何将小胶质细胞从促炎的M1表型转化为抗炎的M2... 详细信息

缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke,CIS)发生后,小胶质细胞(microglia,MG)激活后的2种极化表型-经典激活型小胶质细胞(M1型)与替代激活型小胶质细胞(M2型)分别起着促炎与抑炎的作用,如何将小胶质细胞从促炎的M1表型转化为抗炎的M2表型,逐渐成为CIS治疗的新途径。本文对小胶质细胞的特性及其分泌的细胞因子在CIS的双重作用进行综述。一.小胶质细胞的概述小胶质细胞胞体较小,呈分枝状,有伸向各个方向的突起,而在中枢神经系统受创伤、感染、发生免疫反应或其它疾病时会转变为圆形活化的小胶质细胞,迅速发生增值与活化,被激活的小胶质细胞可呈现出多种形态,如纺锤形、阿米巴形等,进而移动到病变区域,小胶质细胞的激活主要涉及Toll样受体、核转录因子等多条通路,其过程包括增殖、趋化、吞噬、分泌细胞因子等多个环节,并分泌大量的促炎因子、氧化应激相关因子及免疫分子等,既可以诱导炎性反应提高血-脑脊液屏障的通透性,又可以促进神经细胞的再生,在CIS后发挥神经修复作用[1]。

关键词：小胶质细胞病变区域缺血性脑卒中 Toll样受体中枢神经系统免疫分子免疫反应炎性反应

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实验性脑出血大鼠脑组织Toll样受体4的表达及意义

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第四军医大学学报 2008年第9期29卷 810-812页

作者：李俐涛张祥建尹静杨燚河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的:探讨TLR4在脑出血大鼠血肿周围脑组织中的表达变化及其作用.方法:采用自体尾动脉血注入法制作脑出血大鼠模型,将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组,造模完毕后按不同时间点(术后6,24,48,72h和7d)随机分为5个亚组,每组5只.各组于... 详细信息

目的:探讨TLR4在脑出血大鼠血肿周围脑组织中的表达变化及其作用.方法:采用自体尾动脉血注入法制作脑出血大鼠模型,将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组,造模完毕后按不同时间点(术后6,24,48,72h和7d)随机分为5个亚组,每组5只.各组于不同时间点取材,采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠脑组织TLR4mR-NA的相对表达.结果:各实验组各时间点TLR4mRNA均表达,假手术组TLR4mRNA的相对表达在各时间点无显著差异(P>0.05);模型组与假手术组相比TLR4mRNA相对表达显著升高(P<0.05),且在48h达高峰,持续到72h.模型组相同时间点TLR4mRNA的相对表达与假手术组比较均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).结论:脑出血大鼠模型TLR4表达增高,提示TLR4在脑出血炎症损伤中可能具有一定作用.

关键词：脑出血大鼠 Toll样受体

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