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SMA模型小鼠骨髓间充质干细胞体外培养体系的建立

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中国实验动物学报 2022年第5期30卷 679-685页

作者：陈志衡吴刘成景谨朱顺星南通大学实验动物中心江苏南通226001 南通大学江苏省教育部神经再生重点实验室江苏南通226001

目的建立脊髓型肌萎缩症(SMA)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外培养体系,研究反义寡核苷酸(ASO)对其生物学特性的影响,为深入研究SMA发病机制及药物筛选提供可靠的体内模拟工具细胞。方法选取刚出生4 d的SMA小鼠,CO_(2)窒息法处死后,于... 详细信息

目的建立脊髓型肌萎缩症(SMA)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)体外培养体系,研究反义寡核苷酸(ASO)对其生物学特性的影响,为深入研究SMA发病机制及药物筛选提供可靠的体内模拟工具细胞。方法选取刚出生4 d的SMA小鼠,CO_(2)窒息法处死后,于75%乙醇中浸泡,分离、纯化骨髓细胞。细胞荧光检测细胞表面标志物;RT-PCR及Western Blot研究ASO对运动神经元存活基因2(SMN2)外显子(exon7)列入水平以及运动神经元存活(SMN)蛋白表达量;EDU法和TUNEL法检测细胞增殖和凋亡能力。结果体外分离培养的SMA模型小鼠BMMSC具有贴壁生长、可以传代等特点;对P3代BMMSC进行细胞免疫荧光鉴定结果显示:CD44、CD29高表达,CD34、CD45低表达;转染ASO后细胞SMN2 exon7列入率显著上升以及SMN蛋白表达量显著上调,并显著促进细胞增殖能力,同时核内Gemini bodies(gems)数量也有所增多。结论成功建立SMA小鼠BMMSC体外培养体系,通过阳性药物ASO验证可促进BMMSC SMN2 exon7列入及SMN蛋白表达,为SMN2相关调控机制及药物筛选提供一种新的工具细胞。

关键词： SMA小鼠骨髓间充质干细胞 ASO 运动神经元存活2基因细胞增殖

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高盐饮食对小鼠心肝肾的影响

现代预防医学 2010年第24期37卷 4653-4654页

作者：刘春李卫缪进朱顺星邵义祥南通大学实验动物中心

[目的]探讨高盐饮食对ICR小鼠心肝肾组织的影响。[方法]40只ICR小鼠随机分成正常对照组和高盐饮食组,正常对照组给予正常饲料和饮水,高盐饮食组给予均含2%Nacl的饲料和饮水,连续喂养14d后苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠心肝肾病理组... 详细信息

[目的]探讨高盐饮食对ICR小鼠心肝肾组织的影响。[方法]40只ICR小鼠随机分成正常对照组和高盐饮食组,正常对照组给予正常饲料和饮水,高盐饮食组给予均含2%Nacl的饲料和饮水,连续喂养14d后苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠心肝肾病理组织学改变,同时检测组织中SOD活性和MDA含量。[结果]与正常对照组相比,高盐饮食组小鼠心、肝、肾组织都发生一定程度的病理学改变,且组织中的SOD活力明显降低,MDA含量明显升高。[结论]高盐饮食可引起小鼠心、肝、肾组织病理形态的改变,使这些组织中的氧自由基增多。

关键词：高盐饮食心脏肝脏肾脏 SOD MDA

补康灵对Lewis肺癌小鼠癌性恶病质的改善作用研究

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中国药房 2011年第31期22卷 2884-2886页

作者：倪美鑫张锦林王庆华朱顺星南通大学附属肿瘤医院南通市226003 南通大学南通市226003

目的:研究补康灵对Lewis肺癌小鼠癌性恶病质的改善作用。方法:在小鼠腋后线第6肋间胸膜腔接种Lewis肺癌细胞悬液复制C57BL/6小鼠癌性恶病质模型,观察补康灵对恶病质小鼠的生存状况(体重、摄食量、饮水量、生存期)的影响;检测分析与癌性... 详细信息

目的:研究补康灵对Lewis肺癌小鼠癌性恶病质的改善作用。方法:在小鼠腋后线第6肋间胸膜腔接种Lewis肺癌细胞悬液复制C57BL/6小鼠癌性恶病质模型,观察补康灵对恶病质小鼠的生存状况(体重、摄食量、饮水量、生存期)的影响;检测分析与癌性恶病质相关的血清细胞因子(肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1、IL-6)的水平变化。结果:补康灵能显著增加癌性恶病质小鼠摄食量及饮水量,抑制其体重下降(P<0.01或P<0.05),显著降低TNF-α、IL-1、IL-6水平(P<0.05)。结论:补康灵对Lewis肺癌小鼠的癌性恶病质有明显的改善作用,其作用机制可能与其调节TNF-α、IL-1、IL-6等细胞因子有关。

关键词：补康灵癌症恶病质肿瘤坏死因子-α 白介素-1 白介素-6

动脉粥样硬化大鼠动脉组织中SSeCKS的表达

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江苏医药 2010年第8期36卷 921-923页

作者：朱顺星沈维东刘海鸥刘春黄晓冬南通大学实验动物中心 226001 南通大学附属医院泌尿外科 226001 南通大学医学院 226001 南通大学附属医院营养科 226001

目的研究动脉粥样硬化大鼠动脉组织中丝氨酸(Src)抑制的C激酶底物(SSeCKS)的表达。方法以高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射建立SD大鼠动脉粥样硬化模型(A),对照(B)组,每组8只给予基础饲料喂养。测定血清总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG);病理... 详细信息

目的研究动脉粥样硬化大鼠动脉组织中丝氨酸(Src)抑制的C激酶底物(SSeCKS)的表达。方法以高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射建立SD大鼠动脉粥样硬化模型(A),对照(B)组,每组8只给予基础饲料喂养。测定血清总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG);病理学观察HE染色的主动脉;用免疫组织化学法及免疫印迹法检测SSeCKS在动脉中的表达,免疫荧光双标法观察SSeCKS的细胞定位。结果12周时A组TC和TG较B组明显升高(P<0.05);A组形成纤维增生性动脉粥样硬化病变,SSeCKS表达显著增强,SSeCKS表达主要分布在动脉内膜、中膜,部分定位于内皮细胞。结论高脂饮食所致动脉粥样硬化大鼠主动脉SSeCKS表达增加,SSeCKS可能参与了血管重塑及细胞凋亡从而促进动脉粥样硬化的发展。

关键词：动脉硬化丝氨酸抑制蛋白激酶C底物(SSeCKS)

光化学法诱导建立兔脑梗死模型的效果及特征(英文)

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中国临床康复 2005年第29期9卷 186-188,i0002页

作者：邵义祥朱顺星丁莉朱向阳南通大学实验动物中心扬州大学比较医学中心江苏省扬州市225009 南通大学第二附属医院

背景:脑梗死动物模型是研究人的脑梗死疾病的前提和条件。传统的模型制作方式有两种,一种是采用开颅结扎或电凝血管方法阻断供血动脉;另一种是采用导管法引用栓子或水凝胶微球栓塞供血动脉。但这两种模型制作不易,结果不稳定,应用受到... 详细信息

背景:脑梗死动物模型是研究人的脑梗死疾病的前提和条件。传统的模型制作方式有两种,一种是采用开颅结扎或电凝血管方法阻断供血动脉;另一种是采用导管法引用栓子或水凝胶微球栓塞供血动脉。但这两种模型制作不易,结果不稳定,应用受到限制。光化学法诱导建立脑梗死动物模型是一种新方法。目的:应用光化学诱导法建立兔局灶性脑梗死模型。设计:单一样本实验。可行性及其特征,探索人类脑梗死疾病的新的实验研究手段。单位:南通大学实验动物中心。材料:实验于2003-05/11在南通大学实验动物中心(二级实验室)完成。随机选取1012月龄日本大耳兔63只,雌33只,雄30只,体质量1.7～3.3kg。方法:兔麻醉后,沿颅骨的中央与眼后角垂直交叉处纵行切开皮肤约2cm,暴露颅骨,刮离骨膜,在矢状缝左(或右)侧外0.5cm与冠状缝后0.5cm处,用钻头直径0.5cm的颅钻钻透颅骨,造成颅骨圆形洞窗,随即由耳缘静脉按1mL/kg一次性缓慢注入35g/L四氯四碘荧光素钠盐。约3min后用冷光源(波长540nm,功率140lx)对准颅骨洞窗,连续照射8min后,缝合皮肤切口。术后24h,进行神经缺失功能5分制评分(0分:无神经损伤症状;1分:对侧(左侧)后下肢肌张力降低,回缩反射减弱;2分:对侧肢体瘫痪明显,后肢外展;3分:行走明显向外侧拖行,躯体倾向对侧;4分:不能自发行走和意识丧失)。术后48h处死兔,测量梗死灶面积、体积,并制作病理切片观察损伤程度。主要观察指标:兔肢体功能状态,脑梗死灶面积和体积,病理损伤程度。结果:59只兔成功建立起梗死灶,模型成功率为98%。①神经功能缺失评分:56只兔为1或2分,有3只兔达到3分。②梗死灶平均面积为(0.465±0.012)cm2,平均体积(长×宽×高)为(0.268±0.009)cm3。③切片观察损伤程度:梗死灶呈典型的损伤、渗出和炎症反应病理过程。轻度22只(37%)。中度32只(54%)。重度5只(9%)。结论:①应用光化学法诱导兔脑梗死模型制作简单、快速、重复性好,短时间内即可制作较多的供各种研究目的使用的模型。②模型动物存活时间长,死亡率低,有利于慢性脑血管病的研究。③此方法避免了对脑血管和脑组织的机械损伤。④可根据需要选定皮质区域制作梗死灶,梗死灶大小恒定并可控制其大小和深度,为皮层定位研究提供方法。⑤该模型可造成血小板聚集及血管内皮细胞损伤,为抗血小板聚集药物及脑缺血保护疗法的研究提供可能性。⑥但此模型也有其局限性犤9犦:由于血栓阻塞发生于终末动脉,所以不利于侧支循环及再灌注损伤的研究;该模型更近似于人类微血管病变,而不能说明人类其他缺血性卒中的发生机制。

关键词：脑梗塞疾病模型动物兔光化学

健儿强身膏对卵蛋白致敏豚鼠外周血Th1/Th2免疫调控作用的影响

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江苏中医药 2008年第12期40卷 110-111页

作者：刘云朱顺星喻海忠明戈袁建芬鄂惠南通市中医院江苏南通226001 南通大学江苏南通226001

目的:研究健儿强身膏对卵蛋白致敏豚鼠外周血CD4+T细胞中Th1/Th2免疫调控作用的影响,为健儿强身膏防治哮喘提供理论和实验依据。方法:制备卵蛋白(OVA)致敏豚鼠哮喘模型,用ELISA检测各组豚鼠外周血IFN-γ、IL-4水平。结果:地塞米松和健... 详细信息

目的:研究健儿强身膏对卵蛋白致敏豚鼠外周血CD4+T细胞中Th1/Th2免疫调控作用的影响,为健儿强身膏防治哮喘提供理论和实验依据。方法:制备卵蛋白(OVA)致敏豚鼠哮喘模型,用ELISA检测各组豚鼠外周血IFN-γ、IL-4水平。结果:地塞米松和健儿强身膏高、中剂量均能显著上调下降的哮喘模型豚鼠血清IFN-γ水平,与哮喘模型组比较差异显著。地塞米松组和健儿强身膏高、中剂量组豚鼠外周血IL-4/IFN-γ比值亦有明显改善,与哮喘模型组比较差异有统计学意义。结论:健儿强身膏对哮喘豚鼠Th1/Th2细胞起调节作用,能上调Th1细胞分泌细胞因子IFN-γ,从而纠正致敏豚鼠Th1/Th2细胞失衡。

关键词：哮喘健儿强身膏 IFN-γ IL-4 豚鼠

B6-Co小鼠眼角膜组织观察及血管内皮生长因子的表达

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安徽农业科学 2010年第26期38卷 14443-14445页

作者：朱顺星刘春缪进朱蓉嵘邵义祥南通大学实验动物中心江苏南通226001 南通大学附属医院眼科中心江苏南通226001

[目的]观察血管内皮生长因子(VEGF)在遗传性角膜病小鼠(C57BL/6-cornea opacity,B6-Co)眼角膜组织中的表达情况,探讨B6-Co小鼠角膜混浊发病机制。[方法]观察比较B6-Co小鼠与正常B6小鼠在不同发育阶段(1、13、30、90d)的临床表现,并采用... 详细信息

[目的]观察血管内皮生长因子(VEGF)在遗传性角膜病小鼠(C57BL/6-cornea opacity,B6-Co)眼角膜组织中的表达情况,探讨B6-Co小鼠角膜混浊发病机制。[方法]观察比较B6-Co小鼠与正常B6小鼠在不同发育阶段(1、13、30、90d)的临床表现,并采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法检测VEGF在角膜中的表达情况。[结果]B6-Co小鼠随着年龄的增长出现明显的角膜混浊并有大量角膜新生血管生成;免疫组化显示VEGF在不同发育阶段B6小鼠的角膜很少表达,而在B6-Co小鼠出生初期表达较少,13日龄后表达明显增强;实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA表达上调,3月龄时与1月龄相比差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]VEGF在B6-Co小鼠角膜新生血管的形成过程中起重发作用,可能是导致角膜混浊的主要因素之一。

关键词：遗传性角膜病小鼠角膜新生血管血管内皮生长因子

小鼠脊髓重与颈膨大截面积QTL研究(英文)

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Acta Genetica Sinica 2004年第8期31卷 801-806页

作者：谭湘陵周艳蔡可夫绍义祥朱顺星 Lu L Williams R W 顾晓松南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通医学院实验动物中心南通226001 美国田纳西大学解剖与神经生物学系美国38163

应用近交系小鼠A/J和C5 7BL/ 6J以及其F2 代重组小鼠定位脊髓重与颈膨大截面积数量性状基因座(QuantitativeTraitLoci,QTL)。结果表明 13个QTL与脊髓重和截面积相关 ,这些QTL分别位于 2、4、8、14、15、17、18、19和X染色体上。其中 6个... 详细信息

应用近交系小鼠A/J和C5 7BL/ 6J以及其F2 代重组小鼠定位脊髓重与颈膨大截面积数量性状基因座(QuantitativeTraitLoci,QTL)。结果表明 13个QTL与脊髓重和截面积相关 ,这些QTL分别位于 2、4、8、14、15、17、18、19和X染色体上。其中 6个QTL与脊髓重相关 ;4个QTL与颈膨大截面积相关 ;3个QTL与二者均相关。在 13个QTL中 ,3个QTL (P <0 0 1)———SC1(位于D15Mit15 8附近 )、SC2 (DXMit14 0附近 )和SC3(DXMit6 4附近 )其表型变异的解释率分别为 2 4 %、19%和 15 % ;加性效应分别为 - 3 78、3 4 1和 2 0 6mg。其他QTL的P值在 0 0 1～ 0 0 5之间。在上述 3个QTL中。

关键词：小鼠脊髓重量颈膨大截面积 QTL

构建大鼠类似于人类帕金森病中晚期行为模型的实验研究

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中国临床康复 2004年第25期8卷 5262-5263,i001页

作者：王生存刘春张志军倪衡建黄志东朱顺星南通医学院实验动物教研室江苏省南通市226001 南通市第一人民医院神经内科江苏省南通市226001

目的:探讨建立帕金森病模型过程中的关键步骤,摸索提高模型成功率的方法。方法:选择SD大鼠作为实验动物,随机分组为模型组和空白对照组。使用特异性的神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤一侧的黑质纹状体纤维,建立帕金森病动物模型,损伤后... 详细信息

目的:探讨建立帕金森病模型过程中的关键步骤,摸索提高模型成功率的方法。方法:选择SD大鼠作为实验动物,随机分组为模型组和空白对照组。使用特异性的神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤一侧的黑质纹状体纤维,建立帕金森病动物模型,损伤后10d起,用阿朴吗啡可诱发大鼠向健侧旋转。结果:模型组诱发成功率达51%;病理学观察,损伤侧黑质致密部TH免疫阳性细胞、TH免疫阳性纤维严重缺失。空白对照组无旋转现象,病理学观察无异常现象。结论:用6-OHDA注射建立的大鼠帕金森病模型类似于人类帕金森病中晚期行为病理,制作方法科学、可靠、成功率高,可为医学研究提供依据。

关键词：大鼠帕金森病中晚期动物模型实验