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徐州猫源弓形虫株基因型及其毒力研究

徐州猫源弓形虫株基因型及其毒力研究

作者：朱长东安徽医科大学

学位级别：硕士

目的采集分离江苏徐州猫源弓形虫株,了解其基因型和毒力,分析基因型与毒力相关分子间的关系,为研究弓形虫致病机制奠定基础。方法自江苏徐州采集流浪猫40只,麻醉处死后取脑、舌、心等组织匀浆,消化过滤后制备成悬浆,腹腔注射接种昆明鼠... 详细信息

目的采集分离江苏徐州猫源弓形虫株,了解其基因型和毒力,分析基因型与毒力相关分子间的关系,为研究弓形虫致病机制奠定基础。方法自江苏徐州采集流浪猫40只,麻醉处死后取脑、舌、心等组织匀浆,消化过滤后制备成悬浆,腹腔注射接种昆明鼠,分离弓形虫;收集感染小鼠腹水,分离纯化出弓形虫速殖子,提取虫株基因组DNA,采用PCR-RFLP法对10个基因分型位点(SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1及Apico)进行PCR扩增,扩增产物用相应的限制性核酸内切酶水解后观察分析电泳图谱,与参考虫株对比,判定弓形虫株的基因型;将分离的虫株分离纯化的速殖子,按照1×103个/只小鼠的量,分别腹腔注射感染SPF级BALB/c小鼠和昆明鼠,每组10只小鼠,常规饲养并观察其存活时间,计算存活率,分析每个弓形虫株毒力的强弱;选取弓形虫致密颗粒蛋白GRAs家族和棒状体蛋白ROPs家族的毒力相关效应分子基因GRA15和ROP5、ROP16、ROP18,合成引物,PCR扩增出其基因序列,PCR产物测序后与基因库中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型对比分析,比较其多态性。结果本次实验从徐州40只流浪猫共分离出6株弓形虫株,按照实验室的命名方式和猫的编号,分别为TgCtxz9, TgCtxz34, TgCtxz37, TgCtxz38, TgCtxz39, TgCtxz40,均以速殖子的形式存在,不形成包囊。RFLP-PCR基因分型的电泳结果显示,2株为Chinese 1型(即ToxoDB#9型),4株为ToxoDB#205型。此6株分离弓形虫虫株取1×103速殖子经腹腔接种BALB/c小鼠和昆明小鼠后,均表现出较强的毒性,BALB/c小鼠第5天开始出现竖毛、腹水、抽搐等明显症状,至感染后5-7 d完全死亡,昆明小鼠存活时间略长,但在9-12d亦100%死亡。PCR扩增6株弓形虫的毒力相关分子GRA15和ROP5,ROP16,ROP18,产物测序后与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型比对后发现,Chinese 1型2个虫株的上述4个分子的基因分别为GRA15Ⅱ型和ROP5μ-2型、ROP16Ⅰ/Ⅲ型、ROP18Ⅱ型,ToxoDB#205型4个虫株显示为GRA15Ⅱ型和ROP5μ-1型、ROP 16Ⅱ型、ROP18Ⅱ型,表现出在GRA15和ROP18两个因子上的一致性以及在ROP5和ROP 16上的明显的差异性。结论成功分离出江苏徐州猫源性弓形虫虫株6株,经RFLP-PCR基因分型显示其中2株为Chinese 1型(即ToxoDB#9型),4株为ToxoDB#205型,表明徐州地区猫源弓形虫虫株具有有限遗传多态性。分离的虫株通过感染BALB/c小鼠和昆明小鼠后,计算小鼠生存时间发现,两种基因型的6个弓形虫虫株均能在较短的时间内引起小鼠全部死亡,证实6个虫株均为强毒株。分离的两种基因型的毒力相关分子GRA15,ROP5,ROP16和ROP18的基因序列扩增测序证实,流行于我国的优势基因型Chinese 1型虫株,以及ToxDB#205型虫株,在此4种毒力相关分子的基因序列上,不同于传统的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型虫株,提示有更多的因素参与作用,这一毒力相关基因的多态性与其毒力的关系尚待深入研究。

关键词：弓形虫基因型毒力 GRA15基因 ROP5基因 ROP16基因 ROP18基因

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基于遗传算法的无功优化软件包的设计与开发

中国农村水利水电 2007年第1期 121-123页

作者：胡冉朱长东王加庆张圆圆深圳市供电局广东深圳518000 武汉大学电气工程学院武汉430072

简要地阐述了基于遗传算法的地区电网无功优化的数学模型,重点介绍了一套新的低压配电网无功优化计算软件,该软件充分利用Visual C++可视化程序实现和Oracle数据库管理方面的优势。与SCADA数据库接口,利用SCADA的遥测,遥信数据和电网的... 详细信息

简要地阐述了基于遗传算法的地区电网无功优化的数学模型,重点介绍了一套新的低压配电网无功优化计算软件,该软件充分利用Visual C++可视化程序实现和Oracle数据库管理方面的优势。与SCADA数据库接口,利用SCADA的遥测,遥信数据和电网的参数,在线进行无功优化,在满足电压和无功出力的条件下,通过电容器组投切和变压器分接头的调整,使得全网有功网损最小。该软件具有良好的通用性和实用性,所开发的系统在某地区电网的实际应用产生较好的社会和经济效益。

关键词：遗传算法无功优化可视化有功网损

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SEL系列线路保护在宜昌主网中的首次应用

科技资讯 2015年第33期13卷 37-38页

作者：朱长东国网宜昌供电公司湖北宜昌443003

随着近年来中国经济迅速增长,电网建设也在飞速的发展,国外先进的电力系统继电技术也不断的应用到国内的电网中,各种继电保护装置也逐步开始应用于我国电网,该文阐述了美国SEL-311-7型保护首次在宜昌220 k V主网变电站应用情况,为解决22... 详细信息

随着近年来中国经济迅速增长,电网建设也在飞速的发展,国外先进的电力系统继电技术也不断的应用到国内的电网中,各种继电保护装置也逐步开始应用于我国电网,该文阐述了美国SEL-311-7型保护首次在宜昌220 k V主网变电站应用情况,为解决220 k V线路单相重合闸方式等技术问题,拿出了具体办法和措施,为以后同类产品引进、设计、调试积累了经验。

关键词：保护重合闸差动

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基于CA签章的可信电子病案无纸化建设

电子技术与软件工程 2018年第7期 189-190页

作者：朱长东安徽省庐江县人民医院安徽省合肥市231500

现如今,医院的业务逐渐发展,很多纸质病例会出现很多弊端,比如病例在打印、借阅等环节出现印刷效果不理想的状态。除此之外,还有库存紧张、丢失以及翻拍质量不佳等问题。众所周知,对于医院来说,病例是比较重要的医疗资料,其效力也相当... 详细信息

现如今,医院的业务逐渐发展,很多纸质病例会出现很多弊端,比如病例在打印、借阅等环节出现印刷效果不理想的状态。除此之外,还有库存紧张、丢失以及翻拍质量不佳等问题。众所周知,对于医院来说,病例是比较重要的医疗资料,其效力也相当于法律的文书。逐渐实现病例的无纸化形式是一种普遍的趋势,因此,数字证书认证签名技术(CA签章)应运而生。CA签章妥善地解决了医院纸质病例的归档问题。从多年的实践中可以看出,CA签章的病例归档具有安全性和高效性。

关键词： CA签章可信电子病案无纸化建设研究分析

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浅析智能变电站继电保护运行测试技术

企业技术开发 2015年第35期 102-102页

作者：朱长东华静国网宜昌供电公司国网宜都供电公司

随着社会的经济不断发展,我们国家智能电网的建设速度不断增快,现在我们国家已经进入到智能网全面的建设时期。并且智能变电站是我们国家智能电网里面非常重要的组成部分,当中维护技术和继电保护是确保智能电网的安全运行关键之处。目... 详细信息

随着社会的经济不断发展,我们国家智能电网的建设速度不断增快,现在我们国家已经进入到智能网全面的建设时期。并且智能变电站是我们国家智能电网里面非常重要的组成部分,当中维护技术和继电保护是确保智能电网的安全运行关键之处。目前我们国家智能变电站的继电保护维修和运行正处在摸索的阶段。怎样改进现在继电保护系统的维护技术是智能电网的建设过程中急需解决的一个问题。文章主要是介绍智能的变电站继电保护技术的要点与其主要的结构,着重研究对于智能变电站处于正常运行的时候与出现异常情况系统的维护,便于给智能变电站的继电保护运行和维护技术发展提供一定理论的指导,不断促进智能电网的发展。

关键词：智能变电站继电保护运行测试

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基于4G网络的无线医疗在医院的应用

信息与电脑 2018年第2期30卷 142-143页

作者：朱长东安徽省庐江县人民医院安徽合肥231500

笔者提出基于4G网络的无线医疗系统组网方案,并就无线医疗系统在医院医疗信息化系统中的具体应用展开了分析与研究,使所构建无线医疗系统具备传输速率高、性能稳定可靠、负荷水平高以及可扩展性好等一系列优势,成为医院无线网络建设的... 详细信息

笔者提出基于4G网络的无线医疗系统组网方案,并就无线医疗系统在医院医疗信息化系统中的具体应用展开了分析与研究,使所构建无线医疗系统具备传输速率高、性能稳定可靠、负荷水平高以及可扩展性好等一系列优势,成为医院无线网络建设的全新途径与方向。

关键词：无线医疗 4G网络医院

针刺加药物治疗对急性脑梗死患者血浆溶血磷脂酸的影响

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针刺研究 2014年第6期39卷 487-490,511页

作者：刘南海黄晓峰田克瑶李熳陈伟朱长东黄旭华冯李长彭文杰赣南医学院第一附属医院神经内科赣州341000 赣南医学院第二附属医院神经内科信丰341600 华中科技大学同济医学院神经生物学系武汉430030

目的:探讨针刺加中药对急性缺血性脑血管疾病的治疗效果及作用机制。方法:急性脑梗死患者随机分为针刺组、通心络组、针刺加通心络组和常规治疗组,各40例。针刺穴位以内关、三阴交、水沟为主,病灶对侧手足阳明经穴为配穴,每次30min,每... 详细信息

目的:探讨针刺加中药对急性缺血性脑血管疾病的治疗效果及作用机制。方法:急性脑梗死患者随机分为针刺组、通心络组、针刺加通心络组和常规治疗组,各40例。针刺穴位以内关、三阴交、水沟为主,病灶对侧手足阳明经穴为配穴,每次30min,每次选手足阳明经2对腧穴给予电针,每日1次,共治疗20d;通心络胶囊每次服4粒,3次/d,连续服20d;常规治疗包括抗血小板聚集及改善血液循环。以定磷法测定4组患者治疗前后血浆溶血磷脂酸(LPA)含量,以神经功能缺损评分为标准分别判定4组患者的疗效。结果:4组患者治疗后与治疗前比较,血浆LPA含量均明显降低(P<0.01);针刺加通心络组低于其它组(P<0.01);疗效比较,针刺加通心络组患者治愈+显著进步的百分率显著高于其它3组(P<0.01)。结论:针刺治疗能促进脑梗死患者缺损神经功能恢复,并有效降低脑梗死患者血浆LPA含量,且与通心络胶囊具有协同作用。

关键词：脑梗死针刺治疗通心络胶囊血浆溶血磷脂酸神经功能

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多发性硬化合并甲状旁腺功能减退一例

赣南医学院学报 2003年第3期23卷 316-317页

作者：朱长东赖燕蔚赣南医学院附属医院神经内科

1 病例摘要患者,女性,51岁,因左上肢反复麻木2年半,右上肢麻木1年,右肢体频繁痉挛2个月余,于2002年12月19日收住入院.2年前无明显诱因出现左上肢持续性麻木,活动后无缓解,无抽搐,颈椎MRI示'颈2-3水平脊髓轻度肿胀,有长T1、长T2异常信号... 详细信息

1 病例摘要患者,女性,51岁,因左上肢反复麻木2年半,右上肢麻木1年,右肢体频繁痉挛2个月余,于2002年12月19日收住入院.2年前无明显诱因出现左上肢持续性麻木,活动后无缓解,无抽搐,颈椎MRI示'颈2-3水平脊髓轻度肿胀,有长T1、长T2异常信号灶,边界欠清考虑为脱髓鞘性病变或炎性病灶'.

关键词：多发性硬化合并症甲状旁腺功能减退病例诊断治疗

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徐州猫源弓形虫株基因型及其毒力研究

安徽医科大学学报 2016年第10期51卷 1421-1425页

作者：朱长东程维晟罗庆礼沈继龙安徽医科大学病原生物学教研室、安徽病原生物学省级实验室、人兽共患病安徽省重点实验室合肥230032 安徽省庐江县人民医院检验科庐江231500

目的了解猫源弓形虫株基因型和毒力,为研究其致病机制奠定基础。方法自江苏徐州诱捕采集40只流浪家猫,昆明小鼠腹腔接种分离弓形虫;采用PCR-RFLP法对10个基因分型位点（SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1及Apico... 详细信息

目的了解猫源弓形虫株基因型和毒力,为研究其致病机制奠定基础。方法自江苏徐州诱捕采集40只流浪家猫,昆明小鼠腹腔接种分离弓形虫;采用PCR-RFLP法对10个基因分型位点（SAG1、SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1及Apico）进行PCR扩增,扩增产物用相应的限制性核酸内切酶水解后观察分析电泳图谱;将分离的虫株分别感染SPF级BALB/c小鼠和昆明鼠,观察其存活时间和存活率,分析毒力强弱。选取弓形虫的毒力相关效应分子ROP16和GRA15,PCR扩增出基因序列,比较其多态性。结果共获得6株猫源弓形虫虫株,基因分型结果显示,两株为Chinese 1型（即Toxo DB#9型）,4株为Toxo DB#205型;此6株弓形虫虫株对BALB/c小鼠和昆明鼠均有较强的毒性,两种小鼠分别在感染后5～7 d和9～12 d均100%死亡。毒力相关基因GRA15和ROP16的分析显示,Chinese 1型虫株为GRA15Ⅱ和ROP16Ⅰ/Ⅲ型,Toxo DB#205型虫株为GRA15Ⅱ和ROP16Ⅱ型。结论徐州地区猫源弓形虫虫株具有有限遗传多态性,且均为强毒的虫株。Toxo DB#205型虫株的主要毒力效应分子ROP16Ⅱ不同于Chinese 1型虫株,这一毒力相关基因的多态性与其毒力的关系尚待深入研究。

关键词：弓形虫基因型毒力 GRA15 ROP16