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精子蛋白17单克隆抗体-多柔比星免疫偶联物体内外靶向抗卵巢癌活性研究

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中华肿瘤防治杂志 2012年第22期19卷 1685-1689页

作者：曹王丽宋佳希李芳秋贾煊史利宁南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所江苏南京210002

目的:将抗精子蛋白17(anti-Sp17)单克隆抗体(3C12)与多柔比星(DOX)偶联,并考察偶联物的体内外抗卵巢癌作用。方法:以二琥珀酰亚胺基酒石酸盐(DST)为交联剂制备3C12-DOX偶联物;免疫荧光法检测3C12-DOX的内化作用;MTT法测定3C12-DOX对Sp17... 详细信息

目的:将抗精子蛋白17(anti-Sp17)单克隆抗体(3C12)与多柔比星(DOX)偶联,并考察偶联物的体内外抗卵巢癌作用。方法:以二琥珀酰亚胺基酒石酸盐(DST)为交联剂制备3C12-DOX偶联物;免疫荧光法检测3C12-DOX的内化作用;MTT法测定3C12-DOX对Sp17+卵巢癌细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测细胞的凋亡率。建立高表达Sp17荷瘤裸鼠模型,分为5组给药,分别经尾静脉注入生理盐水、3C12、S2D11-DOX、3C12-DOX和DOX,定期测量肿瘤体积和裸鼠体质量;实验结束时检测血液AST、LDH和CK-MB,检测心肌组织MDA和SOD,比较3C12-DOX和DOX对心脏的毒性。各组肿瘤称取质量,并检测肿瘤组织中细胞的凋亡率。结果:Sp17单克隆抗体(3C12)与DOX成功偶联,形成的3C12-DOX偶联物能够与Sp17+的细胞结合,并内化至细胞内;MTT结果显示,3C12-DOX偶联物能明显杀伤SK-OV3和HO8910细胞,加速细胞凋亡。在体实验中,注射3C12-DOX偶联物组的肿瘤体积明显小于其他对照组(DOX组除外)。而与DOX组对比,3C12-DOX毒副作用明显降低。结论:3C12-DOX是潜在的靶向治疗卵巢癌的药物。

关键词：卵巢肿瘤精子蛋白17 多柔比星靶向治疗

抗精子蛋白17单克隆抗体对人卵巢癌细胞SKOV-3的抑制作用

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肿瘤防治研究 2012年第11期39卷 1297-1300页

作者：曹王丽宋佳希李芳秋贾瑄史利宁南京军区总医院解放军检验医学研究所南京210002

目的观察抗精子蛋白17单克隆抗体(anti-Sperm protein 17 monoclonal antibody,anti-Sp17mAb)对卵巢癌细胞系SKOV-3的体外抗肿瘤活性和机制。方法采用MTT法观察抗anti-Sp17 mAb对肿瘤细胞SKOV-3的细胞毒作用;以外周血单个核细胞PBMCs为... 详细信息

目的观察抗精子蛋白17单克隆抗体(anti-Sperm protein 17 monoclonal antibody,anti-Sp17mAb)对卵巢癌细胞系SKOV-3的体外抗肿瘤活性和机制。方法采用MTT法观察抗anti-Sp17 mAb对肿瘤细胞SKOV-3的细胞毒作用;以外周血单个核细胞PBMCs为效应细胞,SKOV-3为靶细胞,在效靶比分别为80∶1、40∶1和20∶1的条件下,观察anti-Sp17 mAb的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用;以SKOV-3为靶细胞,加入浓度为2.5%、5%、10%和20%的健康人新鲜血清作为补体,观察单抗的补体依赖性细胞毒性。结果 anti-Sp17 mAb对SKOV-3无明显细胞毒作用;与对照组相比,单抗对SKOV-3的ADCC作用呈剂量依赖关系,在效靶比为80∶1,孵育24 h后,细胞生长抑制率约为22%;补体的加入也可显著提高单抗对SKOV-3细胞生长的抑制率,在血清浓度为5%,单抗浓度为10μg/ml时抑制率达到了40%。结论 anti-Sp17 mAb对表达Sp17蛋白的卵巢癌细胞株SKOV-3具有明显的ADCC和CDC效应。

关键词：抗精子蛋白17单抗 SKOV-3 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用补体依赖的细胞毒作用生长抑制

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单克隆抗体靶向治疗卵巢癌研究进展

医学研究生学报 2013年第5期26卷 536-540页

作者：曹王丽宋佳希李芳秋南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所南京理学硕士研究生210002

卵巢癌(ovarian cancer,OC)是妇科生殖器官恶性肿瘤之一,死亡率占妇科肿瘤首位,主要原因在于其缺乏有效的早期诊断治疗措施、对常规化疗药物的耐药性和腹膜外转移。随着卵巢癌相关抗原被陆续发现,其特异性单克隆抗体以及抗体-抗肿瘤药... 详细信息

卵巢癌(ovarian cancer,OC)是妇科生殖器官恶性肿瘤之一,死亡率占妇科肿瘤首位,主要原因在于其缺乏有效的早期诊断治疗措施、对常规化疗药物的耐药性和腹膜外转移。随着卵巢癌相关抗原被陆续发现,其特异性单克隆抗体以及抗体-抗肿瘤药物偶联物已成为卵巢癌治疗的新手段。通过靶向肿瘤抗原(cancer antigen 125,CA125)、黏蛋白1(mucin 1,MUC1)、人类表皮生长因子受体2(human epidermal factor receptor-2,HER2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)等目标抗原,针对性地治疗卵巢癌,有些已经显示出一定的临床疗效,具有很好的应用前景。阿巴伏单抗、Oregovomab、人乳脂肪球1(human milk fat globule 1,HMFG1)和曲妥珠单抗等已进入Ⅲ期临床试验中。

关键词：卵巢癌单克隆抗体单抗偶联物靶向治疗

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白念珠菌烯醇化酶重组蛋白质的制备及鉴定

临床检验杂志 2010年第5期28卷 353-355页

作者：王仕钦曹王丽李芳秋孔小祥史利宁南京师范大学生命科学学院南京210097 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所南京210002

目的制备具有高免疫原性的白念珠菌重组烯醇化酶蛋白质。方法以白念珠菌C1标准株基因组DNA作为模板,用PCR法扩增烯醇化酶的全长DNA序列,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白质表达。用抗... 详细信息

目的制备具有高免疫原性的白念珠菌重组烯醇化酶蛋白质。方法以白念珠菌C1标准株基因组DNA作为模板,用PCR法扩增烯醇化酶的全长DNA序列,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白质表达。用抗his标签的单克隆抗体和白念珠菌抗体阳性的病人血清进行western blot鉴定,亲和层析柱纯化重组蛋白质。结果获得了含白念珠菌烯醇化酶全长基因的重组表达载体和相应工程菌株,经IPTG诱导后能高效表达重组融合蛋白质。经已含抗体的病人血清进行western blot鉴定,表明诱导的重组蛋白质有良好的免疫原性。结论成功克隆了白念珠菌烯醇化酶全长基因并在大肠埃希菌中获得高效表达;重组蛋白质具有良好的免疫原性。

关键词：白念珠菌烯醇化酶基因克隆原核表达

UPLC-MS/MS测定减肥食品中8种非法添加化学成分

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中国现代应用药学 2017年第10期34卷 1441-1446页

作者：裘一婧曹王丽方玲杭州市食品药品检验研究院杭州310052 浙江康恩贝制药股份有限公司杭州310052 浙江中药制药技术重点实验室杭州310052

目的建立一种简便有效检测减肥食品中非法添加化学成分的UPLC-MS/MS检测方法。方法采用UPLC-MS/MS法,以Eclipse Plus C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱分离,串联四级杆质谱仪检测,多反应监测模式进行定性定量分析,以流动相A(0.02 mol... 详细信息

目的建立一种简便有效检测减肥食品中非法添加化学成分的UPLC-MS/MS检测方法。方法采用UPLC-MS/MS法,以Eclipse Plus C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱分离,串联四级杆质谱仪检测,多反应监测模式进行定性定量分析,以流动相A(0.02 mol·L^(-1)乙酸铵水溶液)-B(甲醇)进行梯度洗脱;柱温:40℃;流速:0.3 mL·min^(-1),进样量2μL。样品以甲醇为溶剂超声提取,快速定性定量检测非法添加在减肥食品中的麻黄碱、咖啡因、呋塞米、芬氟拉明、酚酞、N-单去甲基西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、西布曲明8种化学成分。结果 8种减肥类化学成分质谱检测的线性范围宽,相关性R^2≥0.995;方法检测限为0.042~0.175μg·mL^(-1),定量限为0.126~0.525μg·mL^(-1),方法精密度RSD(n=6)为1.7%~4.7%;3个浓度水平的平均回收率为90.3%~105.1%。结论本方法专属性强、操作简单、方便快捷,可作为食品中非法添加减肥类化学成分的有效检测方法。

关键词： UPLC-MS/MS 减肥食品化学成分非法添加

精子蛋白17单克隆抗体与阿霉素免疫偶联物靶向抗卵巢癌研究

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精子蛋白17单克隆抗体与阿霉素免疫偶联物靶向抗卵巢癌研究

中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议

作者：宋佳希曹王丽李芳秋南京军区南京总医院临床中心实验科

目的将精子蛋白17单克隆抗体(3C12)与阿霉素(Doxorubicin,DOX)偶联形成免疫偶联物,并考察该偶联物的体内外抗卵巢癌作用。方法利用DOX和抗体结构中的氨基,以二琥珀酰亚胺基酒石酸盐(DST)为交联剂制备3C12-DOX偶联物,计算偶联率;细胞ELIS...

目的将精子蛋白17单克隆抗体(3C12)与阿霉素(Doxorubicin,DOX)偶联形成免疫偶联物,并考察该偶联物的体内外抗卵巢癌作用。方法利用DOX和抗体结构中的氨基,以二琥珀酰亚胺基酒石酸盐(DST)为交联剂制备3C12-DOX偶联物,计算偶联率;细胞ELISA方法考察偶联物对Sp17的人卵巢癌细胞株SKOV3和H08910的结合能力;免疫荧光法检测偶

关键词：

来源： cnki会议评论

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单域抗体的特性及其临床开发进展

中国新药杂志 2019年第21期28卷 2581-2587页

作者：陈哲浩李林鸿曹王丽金朱明方玲杨军王如伟尚云龙杭州贝罗康生物技术有限公司杭州310051 浙江康恩贝制药股份有限公司杭州310051 杭州师范大学医学院杭州310016 浙江省子宫恶性肿瘤诊治技术研究中心杭州310006

单域抗体是指一类在骆驼科动物体内发现的天然缺失抗体轻链和重链恒定区的重链抗体。通过免疫骆驼科动物或噬菌体展示技术,可以筛选得到针对特定抗原的特异性单域抗体。单域抗体不但具备常规单抗所具有的特异抗原识别能力,并且因其分子... 详细信息

单域抗体是指一类在骆驼科动物体内发现的天然缺失抗体轻链和重链恒定区的重链抗体。通过免疫骆驼科动物或噬菌体展示技术,可以筛选得到针对特定抗原的特异性单域抗体。单域抗体不但具备常规单抗所具有的特异抗原识别能力,并且因其分子尺度小、结构简单而具备很多独特的优点及用途,但也因此在体内易被快速清除,半衰期短。目前在研的治疗类单域抗体往往采用多特异性分子联结、结构修饰或者融合蛋白的设计策略来延长体内半衰期,拓展特异性。本文重点对治疗类单域抗体的结构特点、应用优势及其作为新型抗体药物在国内外临床开发进展进行综述,并对其应用开发前景进行展望。

关键词：单域抗体纳米抗体重链抗体重链可变区单域抗体偶联半衰期

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多柔比星免疫偶联物构建的研究进展

医学研究生学报 2011年第10期24卷 87-90页

作者：宋佳希曹王丽李芳秋南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所南京理学博士210002

近年来,由高效的毒性药物作为"弹头"与肿瘤靶向蛋白结合形成的免疫偶联物成为靶向治疗肿瘤的研究热点。多柔比星作为经典的化疗药物,抗肿瘤机制明确,但不良反应较强,已被许多研究者用于免疫偶联物的研究中。随着偶联方式(交联剂)的不断... 详细信息

近年来,由高效的毒性药物作为"弹头"与肿瘤靶向蛋白结合形成的免疫偶联物成为靶向治疗肿瘤的研究热点。多柔比星作为经典的化疗药物,抗肿瘤机制明确,但不良反应较强,已被许多研究者用于免疫偶联物的研究中。随着偶联方式(交联剂)的不断更新,多柔比星免疫偶联物的构建方法也不断改进,对靶向治疗肿瘤的研究也取得了一定的成果。文中就多柔比星免疫偶联物构建的研究进展作一综述。

关键词：多柔比星免疫偶联物交联剂抗肿瘤

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治疗性疫苗国内外研发现状与发展趋势

安徽农业科学 2013年第36期41卷 13917-13919,13939页

作者：曹王丽王如伟方玲胡江宁金朱明浙江康恩贝制药股份有限公司浙江杭州310052 浙江现代中药与天然药物研究院有限公司浙江杭州310052 浙江中药制药技术重点实验室浙江杭州310052

综述治疗性疫苗国外上市、研发情况及其国内的发展现状,提出治疗性疫苗可能的研发趋势。综合治疗性疫苗研发现状分析其应用前景。指出国外对于治疗性疫苗的开发走在前列,国内企业应该充分运用国家优惠政策,依据我国疾病发生的类型,寻求... 详细信息

综述治疗性疫苗国外上市、研发情况及其国内的发展现状,提出治疗性疫苗可能的研发趋势。综合治疗性疫苗研发现状分析其应用前景。指出国外对于治疗性疫苗的开发走在前列,国内企业应该充分运用国家优惠政策,依据我国疾病发生的类型,寻求突破,创新研制新药,开发新产品,增强市场竞争力。

关键词：治疗性疫苗上市肿瘤传染性疾病研发现状发展趋势