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作者：曹玉嫔广西师范大学

学位级别：硕士

元素形态分析是分析科学中一个极其重要的研究领域。元素的生物有效性或毒性并不是与简单的元素总量有关,更主要取决于元素存在的化学形态。因此,单纯的测量元素总量不能给出元素在环境中迁移、转化规律以及最终归宿等。许多分析方法已... 详细信息

元素形态分析是分析科学中一个极其重要的研究领域。元素的生物有效性或毒性并不是与简单的元素总量有关,更主要取决于元素存在的化学形态。因此,单纯的测量元素总量不能给出元素在环境中迁移、转化规律以及最终归宿等。许多分析方法已尝试用于形态分析研究,通过一系列持续的概念和技术上的发展,只有分离技术和元素或分子选择性的检测技术的联用才能提供可靠的形态分析。电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法具有灵敏度高、线性范围宽、多元素多同位素同时检测、干扰少等优点,广泛用于痕量元素测定。高效液相色谱(HPLC)具有多种不同分离模式,强大的分离能力和重现性好等优点,已广泛用于分离技术。把HPLC与ICP-MS联用,在灵敏度、准确度和分析速度等方面都有很大的改善。HPLC与ICP-MS联用技术的接口技术相对简单,所以HPLC-ICP-MS越来越广泛的应用于元素形态分析,是目前最有效和最具潜力的元素形态分析方法之一。痕量元素的环境行为、生态效应、生理作用,特别是对人体健康的影响,都与其存在形态密切相关。硒元素也不例外,硒作为人体必需的微量元素,具有防癌,清除体内自由基,抗衰老等作用。研究表明,克山病、大骨节病、糖尿病、艾滋病等40多种疾病与缺硒有关。然而,硒摄入量过高也会引起硒中毒。硒的缺乏或过量对人体都不利。本文选择玛卡、牛蒡,葛根和田七作为研究对象,用高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术对上述样品进行硒形态分析,论文主要内容和研究结果如下:1.建立了 HPLC-ICP-MS联用技术用于玛卡和牛蒡样品中硒代胱氨酸(SeCys2)、亚硒酸根(Se(Ⅳ))、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒酸根(Se(Ⅵ))新的分析方法。在80Se质量数下,利用CH4作为DRC反应气,可有效的消除了 40Ar40Ar+的干扰,提高了准确度。利用超声波辅助提取,研究了超纯水、蛋白酶K与脂肪酶对玛卡和牛蒡样品的提取效率,结果表明,超声波辅助复合酶提取方法提取效率最佳。测定SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)的检出限分别为 0.088、0.033、0.30 和 0.17 ng·mL-1,相对标准偏差(RSD,n=6)分别为 3.2%、2.5%、3.5%、2.9%,相关系数R2>0.9995。测定玛卡和牛蒡,两者均含有SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)四种硒形态,样品牛蒡中无机硒所占比例比较大。对样品玛卡和牛蒡中四种硒形态进行加标回收实验,回收率范围在95.4%～108.0%之间。该方法简便,快捷,流动相成分单一,配制简单,7min内可将四种硒形态良好分离。2.建立了 HPLC-ICP-MS联用技术测定田七中硒形态分析的新方法,并比较了超纯水、胃蛋白酶、蛋白酶K和脂肪酶对田七中SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)的提取率,结果表明,超声波辅助酶提取效果最佳。测定SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)的检出限分别为 0.075、0.043、0.375 和 0.25 ng·mL-1,相对标准偏差(RSD,n=6)分别为 3.5%、2.9%、3.0%、2.6%,相关系数 R2>0.9993。田七中 SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet 和 Se(Ⅵ)的含量分别为0.0284 μg·g-1、0.0856μg·g-1、0.0498μg·g-1、0.0244μ ·g-1;结果表明田七中无机硒形态占总硒的百分比为54.5%,田七中还存在其他未知硒形态。对田七中四种硒形态进行加标回收实验,得到回收率范围在95.0%～114.6%之间。3.建立了 5-磺基水杨酸功能化的磁纳米粒子富集结合HPLC-ICP-MS测定葛根样品中SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)等硒形态的新方法。通过自制Fe3O4磁纳米粒子,利用正硅酸乙酯在Fe304表面包裹Si02,然后接枝5-磺基水酸,得到磺酸基功能化的Fe304磁纳米粒子(SSMNPs)。该方法对 SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet 和 Se(Ⅵ)的检出限分别为 0.0065、0.005、0.023 和 0.018 ng·mL-1,相关系数 R2>0.9997,线性范围 0.0140-100 ng·mL-1,经 SSMNPs富集后四种硒形态检出限降低10倍以上,四种硒形态的RSD均小于3%。对样品中SeCys2、Se(Ⅳ)、SeMet和Se(Ⅵ)加标回收实验得到回收率范围在89.8%～101.9%之间。

关键词： HPLC-ICP-MS 联用技术硒形态形态分析

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ZnO量子点和SnO2量子点标记抗体结合磁免疫单颗粒电感耦合等离子体质谱法测定人血清中卵巢癌生物标志物CA125和HE4

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分析化学 2024年第10期52卷 1562-1572页

作者：曹玉嫔陈海平梁洁邓必阳广西中医药大学药学院广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西师范大学化学与药学学院省部共建药用资源化学与药物分子工程国家重点实验室

卵巢癌是致命的妇科恶性肿瘤之一，其生物标志物的含量是一个重要的临床诊断依据。联合检测人血清中糖类抗原125（Carbohydrate antigen 125, CA125）和人附睾分泌蛋白4（Human epididymis protein 4,HE4）可提高卵巢癌的临床诊断准确... 详细信息

卵巢癌是致命的妇科恶性肿瘤之一，其生物标志物的含量是一个重要的临床诊断依据。联合检测人血清中糖类抗原125（Carbohydrate antigen 125, CA125）和人附睾分泌蛋白4（Human epididymis protein 4,HE4）可提高卵巢癌的临床诊断准确率。本研究建立了一种氨基功能化的氧化锌量子点（ZnO QD）和二氧化锡量子点（SnO2QD）标记抗体结合磁免疫单颗粒电感耦合等离子体质谱法分析人血清中卵巢癌生物标志物CA125和HE4的新方法。本方法将氨基功能化的四氧化三铁磁性纳米粒子与CA125和HE4一抗结合，用于捕获CA125和HE4抗原；利用自行合成的ZnO QD和SnO2QD分别标记CA125和HE4二抗，通过ICP-MS测定Zn和Sn的信号频数从而实现对CA125和HE4的定量分析。在最佳实验条件下，CA125和HE4的线性范围分别为0.02～200 U/mL和0.02～100 ng/mL，检出限（3σ）分别为0.004 U/mL和0.006 ng/mL，相对标准偏差（RSD）分别为2.2%和3.5%（n=6）。本方法具有灵敏度高、选择性好和试剂消耗少等优点，已成功用于人血清中CA125和HE4含量的测定。

关键词：氧化锌量子点二氧化锡量子点糖类抗原125 人附睾分泌蛋白4 电感耦合等离子体质谱单颗粒分析

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超声辅助提取结合高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛蒡和三七中硒形态

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分析化学 2015年第9期43卷 1329-1334页

作者：曹玉嫔闫丽珍黄红丽邓必阳药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室广西师范大学化学与药学学院

用蛋白酶K和脂肪酶作为提取剂、用超声波辅助提取牛蒡和三七样品中的硒形态。建立了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛蒡和三七样品中硒代胱氨酸（Se Cys2）、亚硒酸盐[Se?]、硒代蛋氨酸（Se Met）和硒酸盐[Se?]的新方... 详细信息

用蛋白酶K和脂肪酶作为提取剂、用超声波辅助提取牛蒡和三七样品中的硒形态。建立了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛蒡和三七样品中硒代胱氨酸（Se Cys2）、亚硒酸盐[Se?]、硒代蛋氨酸（Se Met）和硒酸盐[Se?]的新方法。用8 mmol/L p H 5.0的柠檬酸作为流动相,在8 min内可分离4种硒形态。利用CH4作为DRC反应气体,可消除了40Ar40Ar+对80Se+的干扰,提高了准确度。Se Cys2、Se?、SeMet和Se?的检出限分别为0.088,0.033,0.30和0.17 ng/m L,相关系数（R2）均大于0.9995,加标回收率范围为95.1%;14.6%,RSD<3%。将本方法应用于牛蒡和三七中硒形态分析,结果令人满意。

关键词：硒高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱牛蒡三七超声提取

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磁免疫结合单颗粒模式ICP-MS同时测定乳腺癌病人血清中的CEA与CA15-3

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分析测试学报 2021年第6期40卷 965-972页

作者：何永昱曹玉嫔覃东庙邓必阳广西师范大学化学与药学学院省部共建药用资源化学与药物分子工程国家重点实验室广西桂林541004 广西中医药大学药学院广西南宁530200

该文合成了氨基修饰的磁性纳米颗粒并将其与癌胚抗原(CEA)一抗和糖类抗原15-3(CA15-3)一抗偶联用提取靶标生物标志物,羧基功能化上转换纳米颗粒(UCNPs)和氨基功能化二氧化铈-二氧化硅纳米颗粒(CeO2-SiO2NPs)用于标记抗体,由于174Yb和14... 详细信息

该文合成了氨基修饰的磁性纳米颗粒并将其与癌胚抗原(CEA)一抗和糖类抗原15-3(CA15-3)一抗偶联用提取靶标生物标志物,羧基功能化上转换纳米颗粒(UCNPs)和氨基功能化二氧化铈-二氧化硅纳米颗粒(CeO2-SiO2NPs)用于标记抗体,由于174Yb和140Ce的瞬态信号频率与UCNPs和CeO2-SiO2NPs浓度直接相关,可利用单颗粒ICP-MS产生的瞬态信号频率定量分析CEA和CA15-3,基于此建立了同时测定乳腺癌病人血清中CEA和CA15-3的单颗粒ICP-MS磁免疫分析方法。结果显示:在优化条件下,CEA和CA15-3分别在0.02~100 ng·mL^(-1)和0.05~50 U·mL^(-1)浓度范围内线性良好,相关系数(r2)分别为0.9940和0.9870;以3倍信噪比(S/N=3)计算得CEA和CA15-3的检出限(LOD)分别为0.0067 ng·mL^(-1)和0.0167 U·mL^(-1)。采用该方法在3名乳腺癌病人血清中均检出CEA和CA15-3,加标回收率分别为95.2%~98.9%和95.5%~97.2%,相对标准偏差(RSD)分别为3.0%~4.6%和3.4%~4.3%。实验结果与临床使用的化学发光免疫方法结果一致,方法可用于乳腺癌病人血清样品中CEA和CA15-3含量的测定。

关键词：电感耦合等离子体质谱(ICP-MS) 纳米粒子癌胚抗原(CEA) 糖类抗原15-3(CA15-3) 血清

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g-C3N4富集结合毛细管电泳与电感耦合等离子体质谱联用分析西瓜中硒形态

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色谱 2020年第10期38卷 1224-1231页

作者：冯金素曹玉嫔莫桂春唐莉福邓必阳药用资源化学与药物分子工程国家重点实验室广西师范大学化学与药学学院广西桂林541004

硒是人体所必需的微量元素之一,对人身体健康非常重要。该工作称取2.0 g三聚氰胺于反应釜中,在600℃下密闭加热2 h,冷却至室温,取0.5 g上述产物置于烧杯中在室温下超声10 h,静置30 min,取上层乳白色溶液于60℃下烘干,即得类石墨烯氮化碳... 详细信息

硒是人体所必需的微量元素之一,对人身体健康非常重要。该工作称取2.0 g三聚氰胺于反应釜中,在600℃下密闭加热2 h,冷却至室温,取0.5 g上述产物置于烧杯中在室温下超声10 h,静置30 min,取上层乳白色溶液于60℃下烘干,即得类石墨烯氮化碳(g-C3N4)。所制备的g-C3N4经傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、X射线粉末衍射(XRD)、场发射环境扫描电子显微镜(SEM)进行表征,证明g-C3N4已经成功合成。建立了毛细管电泳-电感耦合等离子体质谱(CE-ICP-MS)联用技术测定西瓜中硒形态的新方法。用胃蛋白酶作提取剂及超声波辅助提取西瓜中的硒形态,经g-C3N4富集、长100 cm内径100μm毛细管分离,电泳电压为22 kV,缓冲液为8 mmol/L NaH2PO4-12 mmol/L H3BO3-0.2 mmol/L十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)(pH 9.2),于11 min内完全分离6种硒形态。所建立的方法检测速度快、灵敏度高,采用CH4作动态反应气消除干扰。硒脲(SeUr)、硒代胱氨酸(SeCys2)、硒代蛋氨酸(SeMet)、亚硒酸钠(Se(Ⅳ))、硒酸钠(Se(Ⅵ))、硒代乙硫氨酸(SeEt)的线性范围(按Se计)分别为0.017~20μg/L、0.091~50μg/L、0.032~40μg/L、0.023~60μg/L、0.015~75μg/L、0.015~30μg/L。各硒形态的线性相关系数均大于0.9995,SeUr、SeCys2、SeMet、Se(Ⅳ)、Se(Ⅵ)、SeEt的检出限分别为6.2、30、11、8.2、48、5.5 ng/L,回收率为96.0%~106%,RSD<3%。将本方法应用于西瓜中硒形态分析,结果令人满意。

关键词：毛细管电泳电感耦合等离子体质谱硒形态分析西瓜

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ZnSe QDs标记结合磁免疫ICP-MS单颗粒模式测定人血清中的癌胚抗原

ZnSe QDs标记结合磁免疫ICP-MS单颗粒模式测定人血清中的癌胚抗原

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第三届全国质谱分析学术报告会

作者：曹玉嫔邓必阳广西师范大学化学与药学学院药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室

癌胚抗原（Carcinoembryonic antigen, CEA）是由人体肿瘤组织产生的一种糖蛋白。存在于95%的结肠癌中,与乳腺癌、肺癌等其他癌症也有密切关系。健康人体血清中CEA浓度低于5.0ng/mL。发展一种高精度高灵敏的检测CEA的方法在现代生物医... 详细信息

癌胚抗原（Carcinoembryonic antigen, CEA）是由人体肿瘤组织产生的一种糖蛋白。存在于95%的结肠癌中,与乳腺癌、肺癌等其他癌症也有密切关系。健康人体血清中CEA浓度低于5.0ng/mL。发展一种高精度高灵敏的检测CEA的方法在现代生物医学发展中是非常重要的。电感耦合等离子体质谱（Inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS）作为一种元素特异性检测器,由于其灵敏度高、同位素分析以及线性范围宽等优点,成为一种重要的定量分析方法。元素标记免疫分析ICP-MS在大量的生物测定中表现出巨大的潜力[1,2]。纳米粒子由于具有粒径小、表面容易修饰、生物兼容性好等特点越来越备受关注,在生物标记研究中呈现出良好的应用前景。目前,用于生物标记的纳米粒子有金属纳米粒子（Au NPs、Ag NPs）、量子点（CdSe、CdSe@ZnS、CdTe）、金属掺杂二氧化硅纳米粒子和上转换纳米粒子等。针对量子点来说,目前研究较多的是Ⅱ-Ⅵ族的量子点,以Cd Se为代表的CdE （E=S、Se、Te）系列的量子点的合成发展最为成熟,但是含Cd系列量子点的强毒性和对环境污染问题限制了其在生物学方面的应用。Zn Se QDs克服了常用的镉系量子点高毒性缺陷,而利用ZnSe QDs标记磁免疫结合ICP-MS用于生物标记检测较少报道。本实验中,我们提出了一种高灵敏的ZnSe QDs标记抗体结合磁免疫分析ICP-MS单颗粒模式的方法。在单颗粒模式中,量子点标记抗体经过等离子体离子化后得到的是瞬态信号。瞬态信号的频率直接相关于量子点标记抗体的浓度[3]。本实验通过合成氨基功能化的四氧化三铁磁纳米粒子（AMNPs）用于磁分离,ZnS e QDs标记CEA用于ICP-MS检测。CEA的定量通过单颗粒模式-ICP-MS分析ZnSe QDs标记二抗的Zn瞬态信号的频率。该方法检测CEA的线性范围为0.02-100 ng/mL,检出限为0.006ng/mL,方法相对标准偏差为4.4%。该方法具有灵敏度高、选择性好、试剂消耗少等优点。

关键词：磁免疫分析 ZnSe QDs 癌胚抗原 ICP-MS

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基于翻转课堂在药物分析实验教学改革的探讨

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广州化工 2019年第20期47卷 185-187页

作者：曹玉嫔梁洁广西中医药大学

药物分析是药学专业一门主干专业课程,通过药物分析实验教学可以让学生巩固药物分析理论知识和掌握相应的实验操作技能,从而能够胜任药品分析检验工作,并具备创新研究和解决药品质量问题的思维和能力.针对药物分析实验教学上存在的学生... 详细信息

药物分析是药学专业一门主干专业课程,通过药物分析实验教学可以让学生巩固药物分析理论知识和掌握相应的实验操作技能,从而能够胜任药品分析检验工作,并具备创新研究和解决药品质量问题的思维和能力.针对药物分析实验教学上存在的学生积极性不高和传统的教学模式存在的问题,设计翻转课堂,以研究问题为中心,通过开设综合性和设计性的实验激发学生自主学习的兴趣和创新能力,为培养应用型和综合性药学人才提供参考.

关键词：翻转课堂药物分析实验教学

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HPLC-ICP-MS测定雷公藤中砷形态

HPLC-ICP-MS测定雷公藤中砷形态

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第五届全国原子光谱及相关技术学术会议

作者：唐莉福曹玉嫔蒋小华邓必阳药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室广西师范大学化学与药学学院

在地壳中砷的平均浓度约为5μg/g,是一种微量元素,地壳中的相对丰度大约是54。砷可通过天然过程如风化、生物活性和火山喷发等及人类活动如化石燃料的燃烧、采矿、矿冶炼及钻井等引入到环境中。常见砷的形态有砷As(Ⅲ)、砷As(V)、一甲基... 详细信息

在地壳中砷的平均浓度约为5μg/g,是一种微量元素,地壳中的相对丰度大约是54。砷可通过天然过程如风化、生物活性和火山喷发等及人类活动如化石燃料的燃烧、采矿、矿冶炼及钻井等引入到环境中。常见砷的形态有砷As(Ⅲ)、砷As(V)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)、砷甜菜碱(AsB)等,其毒性逐渐减弱[2,3]。雷公藤,又名黄藤,属植物藤本灌木,主产于福建、浙江、安徽、广西等地。其性寒、味苦涩、大毒。目前研究雷公藤的药理性表明具有抗肿瘤、抗炎以及抑制免疫活性的作用。本文建立了高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术(HPLC-ICP-MS)用于雷公藤样品中砷形态分析的新方法。利用He作为KED碰撞气体,来消除40Ar35Cl的干扰,提高准确度。利用超声波辅助提取,研究了超纯水、胃蛋白酶、水-甲醇3种体系对雷公藤样品的提取率,结果表明,超声波辅助水-甲醇(v/v=1:1)提取方法提取率最佳。测得砷胆碱(AsC)、砷甜菜碱(AsB)、As(Ⅲ)、二甲基砷(DMA)、一甲基砷(MMA)和As(V)检出限分别为0.0426、0.0267、0.0759、0.0356、0.0554和0.0613 ***,相关系数R2>0.9993。测得雷公藤中As(V)为0.945μg.g及AsC和AsB分别为0.50μg.g和0.626μg.g,加标回收率为95.5%～102%,相对标准偏差(RSD)为1.5%～3.5%之间。该方法简便,快捷,9 min内可将六种砷形态很好的分离。

关键词：雷公藤砷形态分析高效液相色谱 ICP-MS

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CE-ICP-MS联用技术分析富硒食品中硒形态

CE-ICP-MS联用技术分析富硒食品中硒形态

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第三届全国质谱分析学术报告会

作者：冯金素曹玉嫔钟菊邓必阳广西师范大学化学与药学学院药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室

硒元素是促进植物生长的有益元素,也是人体和动物必需微量元素之一,具有增强机体免疫力、抗衰老、抑制毒性、减缓艾滋病的发展等功效。在环境中,硒元素主要是以无机硒和有机硒两种形式存在。高等植物体中的无机硒含量相对较少,大部分是... 详细信息

硒元素是促进植物生长的有益元素,也是人体和动物必需微量元素之一,具有增强机体免疫力、抗衰老、抑制毒性、减缓艾滋病的发展等功效。在环境中,硒元素主要是以无机硒和有机硒两种形式存在。高等植物体中的无机硒含量相对较少,大部分是以有机硒的形态存在;在生物体中的硒主要以硒蛋白等有机硒化物的形态存在。研究表明,许多疾病的发生与硒的摄入量偏低有关且摄入量过多时会引起硒中毒。硒元素在体内的适宜浓度范围很窄,而且硒的生物有效性以及毒性在很大程度上取决于硒的化学形态。人体获取硒直接或间接源于动植物,仅仅从日常食品摄入硒还不能完全满足人体的需要,但许多植物都有富硒的能力,富硒产品的开发有待进一步研究。目前,我国很多地区处于缺硒状态,富硒产品的开发具有广阔的前景。硒在实际样品中含量极低,因此对分析方法的灵敏度和精确度要求比较高。CE与具有元素选择性好、线性范围宽和检测限低等优点的ICP-MS联用,在灵敏度、准确度和分析速度等方面都有大的改善。本文建立了一种毛细管电泳-电感耦合等离子体质谱(CE-ICP-MS)联用技术用于富硒西瓜样品中SeUr、SeCys、Se(Ⅳ)、SeMet、Se(Ⅵ)和SeEt六种硒形态分析的新方法。在80Se质量数下,利用CH4作为DRC反应气,可有效的消除了ArAr的干扰,提高了准确度。直接对富硒西瓜汁样品进行检测,结果表明,富硒西瓜汁中含有SeEt、SeMet、SeCys、Se(Ⅳ)和Se(Ⅵ)五种硒形态。该方法简便、快捷、灵敏度高,配制简单,11 min内可将六种硒形态良好分离。

关键词： CE-ICP-MS 硒形态形态分析

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思政教育融入《药物分析学》实验教学中的探索

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广东化工 2024年第5期51卷 193-194页

作者：曹玉嫔潘小姣梁洁广西中医药大学广西南宁530200

全面推进课程思政建设是落实立德树人根本任务的战略举措。在实验课中融入课程思政是构建全员全程全方位育人的主要途径。本文结合广西中医药大学药学专业的具体情况,探讨了将思政教育融入《药物分析学》实验教学中的必要性,并挖掘《药... 详细信息

全面推进课程思政建设是落实立德树人根本任务的战略举措。在实验课中融入课程思政是构建全员全程全方位育人的主要途径。本文结合广西中医药大学药学专业的具体情况,探讨了将思政教育融入《药物分析学》实验教学中的必要性,并挖掘《药物分析学》实验课中典型的思政元素,结合具体内容将思政元素润物无声地融入到《药物分析学》实验教学中,以达到三全育人的效果。

关键词：药物分析学课程思政实验教学

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